Name: modeling stroke in mice: transient middle cerebral artery occlusion via the external carotid artery
Uploaded: 2021-05-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery at JoVE.com

אנו מודים לכל שותפינו לשיתוף הפעולה של קונסורציום ImmunoStroke (עבור 2879, מתאי מערכת החיסון ועד לשחזור שבץ) על הצעות ודיונים. עבודה זו מומנה על ידי דויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG, קרן המחקר הגרמנית) במסגרת אשכול מינכן לנוירולוגיה של מערכות (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) ותחת המענקים LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 ו- LL-112/1-1.

הניסויים שדווחו בסרטון זה נערכו בעקבות ההנחיות הלאומיות לשימוש בבעלי חיים ניסיוניים, והפרוטוקולים אושרו על ידי הוועדות הממשלתיות הגרמניות (Regierung von Oberbayern, מינכן, גרמניה). עכברי C57Bl/6J זכרים בני עשרה שבועות שימשו ושוכנו בטמפרטורה מבוקרת (22 ± 2 מעלות צלזיוס), עם תקופת מחזור של 12 שעות בהירות-כהה ?...

<ol>
	<li>Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke.">Stroke.</a> Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).</li><li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1,026+experimental+treatments+in+acute+stroke.">1,026 experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li><li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia:+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques.">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> Journal of Neuroscience Methods. 139 (2), 203-207 (2004).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rat+model+of+thrombotic+focal+cerebral+ischemia.">A new rat model of thrombotic focal cerebral ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 17 (2), 123-135 (1997).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2 (3), 396-409 (2005).</li><li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (47), e2423 (2011).</li><li>Dirnagl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+concerted+appeal+for+international+cooperation+in+preclinical+stroke+research.">A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research.</a> Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).</li><li>McNutt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Journals+unite+for+reproducibility.">Journals unite for reproducibility.</a> Science. 346 (6210), 679 (2014).</li><li>Llovera, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+a+preclinical+randomized+controlled+multicenter+trial+(pRCT):+Anti-CD49d+treatment+for+acute+brain+ischemia.">Results of a preclinical randomized controlled multicenter trial (pRCT): Anti-CD49d treatment for acute brain ischemia.</a> Science Translational Medicine. 7 (299), (2015).</li><li>Llovera, G., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+next+step+in+translational+research:+lessons+learned+from+the+first+preclinical+randomized+controlled+trial.">The next step in translational research: lessons learned from the first preclinical randomized controlled trial.</a> Journal of Neurochemistry. 139, 271-279 (2016).</li><li>Swanson, G. M., Satariano, E. R., Satariano, W. A., Threatt, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+differences+in+the+early+detection+of+breast+cancer+in+metropolitan+Detroit,+1978+to+1987.">Racial differences in the early detection of breast cancer in metropolitan Detroit, 1978 to 1987.</a> Cancer. 66 (6), 1297-1301 (1990).</li><li>Lourbopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inadequate+food+and+water+intake+determine+mortality+following+stroke+in+mice.">Inadequate food and water intake determine mortality following stroke in mice.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 37 (6), 2084-2097 (2017).</li><li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse.">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurological Research. 19 (6), 641-648 (1997).</li><li>Jackman, K., Kunz, A., Iadecola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+focal+cerebral+ischemia+in+vivo.">Modeling focal cerebral ischemia in vivo.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 195-209 (2011).</li><li>Kitano, H., Kirsch, J. R., Hurn, P. D., Murphy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhalational+anesthetics+as+neuroprotectants+or+chemical+preconditioning+agents+in+ischemic+brain.">Inhalational anesthetics as neuroprotectants or chemical preconditioning agents in ischemic brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 27 (6), 1108-1128 (2007).</li><li>Rousselet, E., Kriz, J., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+intraluminal+MCAO:+cerebral+infarct+evaluation+by+cresyl+violet+staining.">Mouse model of intraluminal MCAO: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (69), e4038 (2012).</li><li>Rha, J. H., Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+recanalization+on+ischemic+stroke+outcome:+a+meta-analysis.">The impact of recanalization on ischemic stroke outcome: a meta-analysis.</a> Stroke. 38 (3), 967-973 (2007).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+filament+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+rats:+does+the+reperfusion+method+matter+24+hours+after+perfusion.">Transient filament occlusion of the middle cerebral artery in rats: does the reperfusion method matter 24 hours after perfusion.</a> BMC Neuroscience. 13, 154 (2012).</li><li>Sommer, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+stroke:+experimental+models+and+reality.">Ischemic stroke: experimental models and reality.</a> Acta Neuropathologica. 133 (2), 245-261 (2017).</li><li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rotarod+suitable+for+quantitative+measurements+of+motor+incoordination+in+naive+mice.">A rotarod suitable for quantitative measurements of motor incoordination in naive mice.</a> Naunyn-Schmiedebergs Archiv f&#252;r Experimentelle Pathologie und Pharmakologie. 259 (2), 211 (1968).</li><li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adhesive+removal+test:+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice.">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4 (10), 1560-1564 (2009).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+test+for+detecting+long-term+sensorimotor+dysfunction+in+the+mouse+after+focal+cerebral+ischemia.">A test for detecting long-term sensorimotor dysfunction in the mouse after focal cerebral ischemia.</a> Journal of Neuroscience Methods. 117 (2), 207-214 (2002).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).</li><li>Roth, S., Yang, J., Cramer, J., Malik, R., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+cytokine-induced+sickness+behavior+after+ischemic+stroke+by+an+optimized+behavioral+assessment+battery.">Detection of cytokine-induced sickness behavior after ischemic stroke by an optimized behavioral assessment battery.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 91, 668-672 (2021).</li></ol>

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מודל שבץ ניסיוני המבוסס על הסכם הקונצנזוס של קונסורציום מחקר רב מרכזי גרמני ("ImmunoStroke") כדי להקים מודל MCAo ארעי סטנדרטי. מודל MCAo החולף שהוקם על ידי החדרת חוט מצופה סיליקון דרך ECA למקור ה- MCA הוא אחד מדגמי השבץ הנפוצים ביותר להשגת רפרופוזיה עורקית לאחר תקופת חסימה מופרדת. ל...

שבץ מוחי הוא אחד הגורמים השכיחים ביותר למוות ונכות ברחבי העולם. למרות שיש בעיקר שתי צורות שונות של שבץ, איסכמי ודימומי, 80-85% מכלל מקרי השבץ הם איסכמיים1. נכון לעכשיו, רק שני טיפולים זמינים עבור חולים עם שבץ איסכמי: טיפול תרופתי עם מפעיל פלסמינוגן רקמה רקומביננטי (rtPA) או פקקת מכנית. עם זאת, בשל חלון הזמן הטיפולי הצר וקריטריוני אי הכללה מרובים, רק מספר נבחר של חולים יכולים ליהנות מאפשרויות טיפול ספציפיות אלה. במהלך שני העשורים האחרונים, מחקר שבץ פרה-אקליני ותרגום התמקד בחקר גישות נוירו-הגנתיות. עם זאת, כל התרכובות שהגיעו לניסויים קליניים לא הראו עד כה שיפורים עבור המטופל2.
מכיוון שמודלים במבחנה אינם יכולים לשחזר במדויק את כל האינטראקציות במוח ומנגנונים פתולוגיים של שבץ, מודלים של בעלי חיים חיוניים למחקר שבץ פרה-אקליני. עם זאת, חיקוי כל ההיבטים של שבץ איסכמי אנושי במודל של חיה אחת אינו ריאלי, שכן שבץ איסכמי הוא מחלה מורכבת והטרוגנית מאוד. מסיבה זו, מודלים שונים של שבץ איסכמי פותחו לאורך זמן במינים שונים. פוטוטרומבוזיס של עורקים מוחיים או חסם דיסטלי קבוע של העורק המוחי האמצעי (MCA) הם מודלים נפוצים הגורמים נגעים קטנים ומוגדרים באופן מקומי בנאוקורטקס3,4. מלבד אלה, מודל השבץ הנפוץ ביותר הוא כנראה מה שנקרא "מודל חוט", שבו מושגת אוסם חולף של MCA. מודל זה מורכב מהקדמה חולפת של חוט תפירה למקור ה- MCA, מה שמוביל לירידה פתאומית של זרימת הדם במוח ולאוטם הגדול הבא של אזורי מוח תת-קורטיקליים וקליפתיים5. למרות שרוב דגמי השבץ מחקים את החסימות של MCA 6, "מודל הסיב" מאפשר תיחום מדויק של הזמן האיסכמי. רפרפוזיה על ידי הסרת חוט מחקה את התרחיש הקליני האנושי של שחזור זרימת הדם המוחי לאחר ספונטני או טיפולי (rtPA או פקקת מכנית) תמיסת קריש. עד כה תוארו שינויים שונים של "מודל חוט" זה. בגישה הנפוצה ביותר, שתואר לראשונה על ידי לונגה ואח'. בשנת 19895,חוט מצופה סיליקון מוצג דרך העורק הראשי המשותף (CCA) למקורו של MCA7. למרות שזו גישה נפוצה, מודל זה אינו מאפשר שיקום מלא של זרימת הדם במהלך reperfusion, כמו CCA הוא קשור לצמיתות לאחר הסרת חוט.
בעשור האחרון, מספר גדל והולך של קבוצות מחקר התעניינו בדוגמנות שבץ בעכברים באמצעות "מודל חוט" זה. עם זאת, השונות ניכרת של מודל זה וחוסר התקינה של ההליכים הם חלק מהסיבות לשונות גבוהה ולשחזור לקוי של תוצאות הניסוי והממצאים המדעיים שדווחו עד כה2,8. גורם פוטנציאלי ל"משבר השכפול" הנוכחי, בהתייחסו להתרבות הנמוכה בקרב מעבדות המחקר, הוא נפחי אוטם השבץ הלא-דומים בין קבוצות מחקר המשתמשות באותה מתודולוגיה ניסיונית9. למעשה, לאחר ביצוע הראשון אקראי אקראי מבוקר ניסוי מחקרmulticenter 10, הצלחנו לאשר כי חוסר סטנדרטיזציה מספקת של מודל שבץ ניסיוני זה ואת הפרמטרים התוצאה הבאים היו הסיבות העיקריות לכישלון רבייה במחקרים פרה קליניים בין מעבדות עצמאיות11 . הבדלים דרסטיים אלה בגדלים האוטם הנובעים מכך, למרות השימוש באותו מודל שבץ, מהווים בצדק לא רק איום על מחקר מאשר, אלא גם על שיתופי פעולה מדעיים בשל היעדר מודלים חזקים וניתן לשחזור.
לאור אתגרים אלה, אנו שואפים לפתח ולתאר בפירוט את ההליך למודל MCAo ארעי סטנדרטי המשמש למאמצי המחקר השיתופיים בתוך קונסורציום המחקר "ImmunoStroke" (https://immunostroke.de/). קונסורציום זה נועד להבין את האינטראקציות בין המוח לחיסון שבבסיס העקרונות המכניסטיים של התאוששות שבץ. בנוסף, מוצגות שיטות היסתולוגיות ופונקציונליות הקשורות לניתוח תוצאות שבץ. כל השיטות מבוססות על נהלי הפעלה סטנדרטיים שנקבעו המשמשים בכל מעבדות המחקר של קונסורציום ImmunoStroke.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>45&#176; ramp</td>
			<td>H&#38;S Kunststofftechnik</td>
			<td></td>
			<td>height: 18 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5/0 threat</td>
			<td>Pearsalls</td>
			<td>10C103000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Acid</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>695092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia system for isoflurane</td>
			<td>Drager</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen pomade</td>
			<td>Bayer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl/6J mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>000664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clamp</td>
			<td>FST</td>
			<td>12500-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotons</td>
			<td>NOBA Verbondmitel Danz</td>
			<td>974116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl violet</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Thermo Scientific CryoStarNX70</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 70%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>521005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 96%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>522078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 99%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>ETO-5000-99-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filaments</td>
			<td>Doccol</td>
			<td>602112PK5Re</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine 45 angled forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>14094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glue</td>
			<td>Orechseln</td>
			<td>BSI-112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardener Glue</td>
			<td>Drechseln &#38; Mehr</td>
			<td>BSI-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating blanket</td>
			<td>FHC DC Temperature Controller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbot</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopentane</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>59070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>PF 5010 LDPM, Periflux System 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler probe</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>91-00123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline pH: 7.4</td>
			<td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td>
			<td>P32799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recovery chamber</td>
			<td>Mediheat</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roti-Histokit mounting medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>6638.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution</td>
			<td>Braun</td>
			<td>131321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Feather</td>
			<td>02.001.30.011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated filaments</td>
			<td>Doccol</td>
			<td>602112PK5Re</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicropscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus Slides</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>J1800AMNZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylacine</td>
			<td>Albrecht</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling stroke in mice: transient middle cerebral artery occlusion via the external carotid artery

שבץ מוחי הוא הגורם השלישי בשכיחותו לתמותה והגורם המוביל לנכות בוגרת שנרכשה במדינות המפותחות. עד כה, אפשרויות טיפוליות מוגבלות לחלק קטן של חולי שבץ בשעות הראשונות לאחר השבץ. אסטרטגיות טיפוליות חדשניות נחקרות בהרחבה, במיוחד כדי להאריך את חלון הזמן הטיפולי. חקירות נוכחיות אלה כוללות את המחקר של מסלולים פתופיציולוגיים חשובים לאחר שבץ, כגון דלקת לאחר שבץ, אנגיוגנזה, פלסטיות עצבית, והתחדשות. בעשור האחרון גובר החשש מפני שכפול לקוי של תוצאות ניסוי וממצאים מדעיים בקרב קבוצות מחקר עצמאיות. כדי להתגבר על מה שמכונה "משבר השכפול", יש צורך דחוף במודלים סטנדרטיים מפורטים לכל ההליכים. כמאמץ בתוך קונסורציום המחקר "ImmunoStroke" (https://immunostroke.de/), מוצע מודל עכבר סטנדרטי של נעילת עורק המוח האמצעי החולף (MCAo). מודל זה מאפשר שחזור מלא של זרימת הדם עם הסרת חוט, המדמה את תמוגת קריש הדם הטיפולית או הספונטנית המתרחשת בחלק גדול של שבץ אנושי. ההליך הכירורגי של מודל שבץ "חוט" זה וכלים לניתוח הפונקציונלי שלו מוצגים בסרטון המצורף.

המודל המתואר כאן הוא שינוי של מודל שבץ "חוט" נפוץ, אשר מורכב החדרת חוט מצופה סיליקון דרך ECA כדי לחסום באופן חולף את מקורו של MCA (איור 1). לאחר הסרת חוט, רק זרימת הדם ב- ECA נפסקת לצמיתות, ומאפשרת recanalization מלא של CCA ו- ICA. זה מאפשר reperfusion נאות של המוח (איור 2), בדומה למצב ש?...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery at JoVE.com

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

מודלים שונים של אומת עורק המוח האמצעי (MCAo) משמשים במחקר שבץ ניסיוני. כאן, מודל שבץ ניסיוני של MCAo חולף דרך העורק הראשי החיצוני (ECA) מתואר, שמטרתו לחקות שבץ אנושי, שבו פקקת המוח מוסרת עקב תמוגה קריש ספונטני או טיפול.

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

במודל הסיב המתואר כאן, שיקום מלא של זרימת הדם וההקלטה שלו, הן דרישות כדי להבטיח זרם ניתן לייצור בקרב עכברים, במיוחד במחקרי שבץ תרגומי. למודל זה יש שני יתרונות עיקריים בהשוואה למודלים אחרים שתוארו בעבר. אין צורך בגולגולת, וזיהוי מלא של כלי הדם מושג.מודל הסיב הוא התערבות כירורגית מורכבת המערבת מניפולציה בתהליך של עורקים שונים. ההדמיה וההסבר של כל אלה הם צעדים קטנים אך חשובים, עשויים להאיץ את תקופת הלמידה של נוירוכירורגים. חבר את שמיכת החום כדי לשמור על הטמפרטורה של אזור הניתוח ואת טמפרטורת גוף העכבר במהלך הרדמה ב 37 מעלות צלזיוס.הכינו מספריים ומלקחיים אוטומטיים, תמיסת אתנול 70% ומשחת עיניים של דקספנטנול, ושמרו על כמה חתיכות כותנה ותפר פוליאסטר קלוע בציפוי Five O, מוכנים לשימוש. הכן תמיסת תמיסת מלח 0.9% במזרק מיליליטר אחד ללא מחט כדי לשמור על אתר החתכים hydrated. הכן מחזיק לבדיקת דופלר הלייזר על ידי חיתוך הקצה של קצה פיפטה 10 מיקרוליטר.לאחר שהעכבר הוא מרדים לחלוטין, למקם אותו במצב נוטה באזור הפעולה. הכנס בעדינות את הבדיקה רקטלית כדי לפקח על הטמפרטורה לאורך כל ההליכים הכירורגיים. לאחר חיטוי האתר הכירורגי, לחתוך את הקרקפת בין האוזן השמאלית לעין כדי לחשוף את עצם הגולגולת.לאחר מכן, לחתוך ולפרוש את שריר הזמן כדי לדמיין את העורקים המוחיים מרובים או MCA מתחת לגולגולת. תקן את החלק החיצוני של הקצה מחזיק את הגשושית דופלר לייזר או סיבים על גבי MCA השמאלי עם דבק ולסגור את העור, כך העור מודבק גם כן. יש למרוח שתיים עד שלוש טיפות של דבק מתקשה כדי להאיץ את התהליך.ודא כי סיבי דופלר לייזר אינו מודבק וניתן להסיר בקלות מבעל הקצה בכל עת. סובבו את העכבר לתנוחת העל-פסי, ואז הכניסו את החוטם לקונוס ההרדמה ותקן את כפות הרגליים עם סרט הדבקה. לחטא את העור והשיער המקיפים את החזה ולעשות שרף קו האמצע באורך שני ס"מ בצוואר.השתמש במלקחיים כדי למשוך את בלוטת תת-האדם בעור ואת שריר סטרנוםוסטואיד לגזרים. השתמש במפסקים כדי לחשוף את השדה הכירורגי ולמצוא את העורק הראשי המשותף השמאלי או CCA. לנתח את CCA ללא רקמת חיבור והעצבים שמסביב מבלי לפגוע בעצב vagal ולבצע קשירה ארעית לפני bifurcation.לנתח את העורק הראשי החיצוני או ECA ולקשור קשר קבוע בחלק הנראה ביותר דיסטלי. מניחים תפר נוסף מתחת ל- ECA וקרוב לביפורציה, ולאחר מכן הכינו קשר רופף לשימוש מאוחר יותר. לנתח את העורק הראשי הפנימי או ICA ולהניח קליפ מיקרו וסקולרי על זה כחמישה מילימטרים מעל bifurcation.הקפד לא לפגוע בעצב הוואגל. ואז לחתוך חור קטן לתוך ECA בין קשירה הדוקה ורופפת, להבטיח לא לחתוך את ECA כולו. הציגו את חוט ההסתה וקדמותו לכיוון ה- CCA.הדק את הקשירה הרופפת ב- ECA סביב הלומן כדי להבטיח לרגע את חוט התנוחה במצב זה. הסרת קליפ מיקרווסקולרי ולמנוע דימום. לאחר הסרת קליפ microvascular, להכניס את חוט דרך ICA עד המקור של MCA הוא הגיע.תקן את חוט במצב זה על ידי הידוק נוסף של הקשר סביב ECA. הקלט ערכי דופלר לייזר לפני ואחרי הכנסת חוט. הסר את המפסק ולהעביר את שריר sternomastoid בבלוטה submandibular לפני תפירת הפצע.הסר את גשושית דופלר לייזר ומניחים את החיה בתא התאוששות ב 37 מעלות צלזיוס במשך כמה שעה. מניחים את העכבר במצב נוטה באזור הפעולה עם חוטמו במסכת ההרדמה, ולאחר מכן לתקן את כפותיו של החיה עם סרט הדבקה. הכנס את גשושית דופלר הלייזר למחזיק הגשוש.הסר את התפר הפצע ולהשתמש במלקחיים כדי למשוך את העור, את בלוטת submandibular ואת השריר sternomastoid לגזרים. השתמש במפסקים כדי לחשוף את התחום הכירורגי. שחררו את תיל ה-ECA המהדק את הסיב ומושכים בעדינות את חוט ההנעה.הימנע מפגיעה בציפוי גומי הסיליקון של חוט במהלך ההסרה. הקלט את ערכי דופלר הלייזר לפני ואחרי הסרת חוט. קשרו היטב את תפר ECA ואשרו את העלייה בזרימת הדם במוח במכשיר הלייזר דופלר.פתח את קשירת ארעי לפני bifurcation מן CCA כדי לשחזר את זרימת הדם המלאה. הסר את המפסק ולהעביר את שריר sternomastoid בבלוטה submandibular לפני תפירת הפצע. לאחר מכן, למקם את החיה בתא התאוששות ב 37 מעלות צלזיוס במשך שעה אחת להתאושש מהרדמה.לאחר ההחלמה להחזיר את העכברים לכלובים שלהם בחדר מבוקר טמפרטורה ולטפל בבעלי החיים על ידי הוספת כדורי מזון רטוב הידרוג'ל בצלחות פטרי קטנות על רצפת הכלוב ולהזריק משכך כל 12 שעות עד היום השלישי לאחר הניתוח. לאחר זרימת הדם ב CCA משוחזר לאחר הסרת חוט, זלוף מלא של המוח מתרחשת, אשר דומה למצב שנצפו לאחר פקקת מכנית מוצלחת בחולים אנושיים. חיות שבץ הציגו שינוי משמעותי בציון הנוירולוגי המורכב והמוקד, אך לא בציון הנוירו הכללי בהשוואה לחיות מזויפות.נפח אוטם שאוחזר בוצע גם באמצעות כתמים סגול קרסול של מקטעי מוח סדרתיים קורונל 24 שעות לאחר אינדוקציה שבץ. אזור הנגע כולל את קליפת המוח הסומטו-סנסורית ומוטורית, כמו גם מבנים תת-קליפתיים, כגון הסטריאטום. ממוצע נפח האוטם היה 61 עד 62 מילימטרים רבועים, המייצגים 48% מחצי הכדור המוחי שהושפע.חשוב לבצע ניתוח נאות של CCA, ECA ו- RCA מבלי לגרום נזק לרקמה הסמוכה, במיוחד עצב הוואגוס, כדי לקבל הדמיה טובה של כל המבנים, ולהיות מסוגל להכניס את חוט ולחנוק את מקור MCA.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

דגם מרחק איסכמיה מוחית על ידי ספיגה תפר Endovascular של עורק המוח התיכון עכברוש

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

הכנת חלון גולגולת כרוני לרוחב מאפשרת<em&gt; In vivo</em&gt; תצפית בעקבות העורקים התיכון ספיגה מוחין דיסטלי של עכברים

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

מודל לטיפול באנצפלומיוסיננגיוזיס לאחר שבץ מוחי הנגרם על ידי חסימת עורקים מוחיים באמצע בעכברים

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

הקמת מודל עכברי חסימת עורק מוחי אמצעי תוך גולגולתי

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

מחבר זרקור: טכניקות חדשניות וכיוונים עתידיים בחקר שבץ מוחי 

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

מודל של איסכמיה מוחית חולפת על ידי חסימה של עורק מוחי אמצעי

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

מחבר זרקור: הערכת נזק איסכמי לשבץ מוחי באמצעות מודל חסימת עורק המוח התיכון 

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...

חסימה של עורק אמצעי דיסטלי לפיתוח מודל עכבר שבץ איסכמי

Induction of Acute Ischemic Stroke in Mice Using the Distal Middle Artery Occlusion Technique

זרקור על המחבר: ביסוס מודל חסימה דיסטלי אמין של MCA בעכברים לחקר שבץ מוחי

השראת שבץ איסכמי חריף בעכברים באמצעות טכניקת חסימת העורק האמצעי הדיסטלי

Ischemic stroke remains the predominant cause of mortality and functional impairment among the adult populations globally. Only a minority of ischemic ...