Name: modeling stroke in mice: transient middle cerebral artery occlusion via the external carotid artery
Uploaded: 2021-05-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery at JoVE.com

우리는 제안과 토론을 위한 면역 스트로크 컨소시엄 (FOR 2879, 치기 복구에 면역 세포에서)의 우리의 모든 협력 파트너에게 감사드립니다. 이 작품은 독일 시스템 신경학을 위한 뮌헨 클러스터(EXC 2145 SyNergy - ID 390857198)의 틀 내에서 독일의 우수 전략에 따라 도이치 포르충스게마인샤프트(DFG, 독일 연구 재단)와 LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 및 LL-112-122/1의 보조금하에 지원되었다.

이 비디오에서 보고된 실험은 실험 동물의 사용에 대한 국가 지침에 따라 수행되었으며, 의정서는 독일 정부 위원회(독일 뮌헨의 레지에룽 폰 오버바이엔)에 의해 승인되었다. 10주 된 남성 C57Bl/6J 마우스는 12h 광암 사이클 기간과 펠릿 식품 및 물 광고 리비툼에 대한 액세스를 통해 제어 온도(22 ± 2°C)로 사용되고 보관되었습니다.
1. 재료 및 계측기의 준비
<ol><li>37°C에...

<ol>
	<li>Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke.">Stroke.</a> Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).</li><li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1,026+experimental+treatments+in+acute+stroke.">1,026 experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li><li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia:+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques.">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> Journal of Neuroscience Methods. 139 (2), 203-207 (2004).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rat+model+of+thrombotic+focal+cerebral+ischemia.">A new rat model of thrombotic focal cerebral ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 17 (2), 123-135 (1997).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2 (3), 396-409 (2005).</li><li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (47), e2423 (2011).</li><li>Dirnagl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+concerted+appeal+for+international+cooperation+in+preclinical+stroke+research.">A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research.</a> Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).</li><li>McNutt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Journals+unite+for+reproducibility.">Journals unite for reproducibility.</a> Science. 346 (6210), 679 (2014).</li><li>Llovera, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+a+preclinical+randomized+controlled+multicenter+trial+(pRCT):+Anti-CD49d+treatment+for+acute+brain+ischemia.">Results of a preclinical randomized controlled multicenter trial (pRCT): Anti-CD49d treatment for acute brain ischemia.</a> Science Translational Medicine. 7 (299), (2015).</li><li>Llovera, G., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+next+step+in+translational+research:+lessons+learned+from+the+first+preclinical+randomized+controlled+trial.">The next step in translational research: lessons learned from the first preclinical randomized controlled trial.</a> Journal of Neurochemistry. 139, 271-279 (2016).</li><li>Swanson, G. M., Satariano, E. R., Satariano, W. A., Threatt, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+differences+in+the+early+detection+of+breast+cancer+in+metropolitan+Detroit,+1978+to+1987.">Racial differences in the early detection of breast cancer in metropolitan Detroit, 1978 to 1987.</a> Cancer. 66 (6), 1297-1301 (1990).</li><li>Lourbopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inadequate+food+and+water+intake+determine+mortality+following+stroke+in+mice.">Inadequate food and water intake determine mortality following stroke in mice.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 37 (6), 2084-2097 (2017).</li><li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse.">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurological Research. 19 (6), 641-648 (1997).</li><li>Jackman, K., Kunz, A., Iadecola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+focal+cerebral+ischemia+in+vivo.">Modeling focal cerebral ischemia in vivo.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 195-209 (2011).</li><li>Kitano, H., Kirsch, J. R., Hurn, P. D., Murphy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhalational+anesthetics+as+neuroprotectants+or+chemical+preconditioning+agents+in+ischemic+brain.">Inhalational anesthetics as neuroprotectants or chemical preconditioning agents in ischemic brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 27 (6), 1108-1128 (2007).</li><li>Rousselet, E., Kriz, J., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+intraluminal+MCAO:+cerebral+infarct+evaluation+by+cresyl+violet+staining.">Mouse model of intraluminal MCAO: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (69), e4038 (2012).</li><li>Rha, J. H., Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+recanalization+on+ischemic+stroke+outcome:+a+meta-analysis.">The impact of recanalization on ischemic stroke outcome: a meta-analysis.</a> Stroke. 38 (3), 967-973 (2007).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+filament+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+rats:+does+the+reperfusion+method+matter+24+hours+after+perfusion.">Transient filament occlusion of the middle cerebral artery in rats: does the reperfusion method matter 24 hours after perfusion.</a> BMC Neuroscience. 13, 154 (2012).</li><li>Sommer, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+stroke:+experimental+models+and+reality.">Ischemic stroke: experimental models and reality.</a> Acta Neuropathologica. 133 (2), 245-261 (2017).</li><li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rotarod+suitable+for+quantitative+measurements+of+motor+incoordination+in+naive+mice.">A rotarod suitable for quantitative measurements of motor incoordination in naive mice.</a> Naunyn-Schmiedebergs Archiv f&#252;r Experimentelle Pathologie und Pharmakologie. 259 (2), 211 (1968).</li><li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adhesive+removal+test:+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice.">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4 (10), 1560-1564 (2009).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+test+for+detecting+long-term+sensorimotor+dysfunction+in+the+mouse+after+focal+cerebral+ischemia.">A test for detecting long-term sensorimotor dysfunction in the mouse after focal cerebral ischemia.</a> Journal of Neuroscience Methods. 117 (2), 207-214 (2002).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).</li><li>Roth, S., Yang, J., Cramer, J., Malik, R., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+cytokine-induced+sickness+behavior+after+ischemic+stroke+by+an+optimized+behavioral+assessment+battery.">Detection of cytokine-induced sickness behavior after ischemic stroke by an optimized behavioral assessment battery.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 91, 668-672 (2021).</li></ol>

본 프로토콜은 표준화된 일시적인 MCAo 모델을 확립하기 위해 독일 다중 센터 연구 컨소시엄("ImmunoStroke")의 합의에 기초한 실험스트로크 모델을 설명합니다. MCA의 기원에 ECA를 통해 실리콘 코팅 필라멘트를 도입하여 확립된 과도 MCAo 모델은 폐색 기간 후 동맥 재관전을 달성하기 위해 가장 널리 사용되는 스트로크 모델 중 하나입니다. 따라서 이 절차는 번역관련 스트로크 모델로 간주될 수 있습니?...

뇌졸중은 전 세계적으로 사망과 장애의 가장 흔한 원인 중 하나입니다. 뇌졸중, 허혈성 및 출혈의 두 가지 형태가 주로 있지만, 모든 뇌졸중 케이스의 80-85 %는 허혈성1입니다. 현재, 허혈성 뇌졸중 환자만 사용할 수 있습니다: 재조합 조직 플라스미노겐 활성제 (rtPA) 또는 기계 혈전 절제술을 가진 약리학적 치료. 그러나, 좁은 치료 시간 창 및 다중 배제 기준 때문에, 단지 선택된 수의 환자만이 이러한 특정 치료 옵션으로부터 혜택을 받을 수 있다. 지난 2 년 동안, 전임상 및 번역 뇌졸중 연구는 신경 보호 접근의 연구에 초점을 맞추고있다. 그러나, 임상 시험에 도달한 모든 화합물은 지금까지 환자에 대한 개선이 없음을 보여주었습니다2.
체외 모델은 뇌졸중의 모든 뇌 상호 작용 및 병리학 적 메커니즘을 정확하게 재현 할 수 없기 때문에 동물 모델은 전임상 뇌졸중 연구에 매우 중요합니다. 그러나, 단일 동물 모형에 있는 인간 허혈성 치기의 모든 양상을 모방하는 것은 허혈성 치기가 매우 복잡하고 이기종질병이기 때문에, 가능하지 않습니다. 이러한 이유로, 다른 허혈성 뇌졸중 모델은 다른 종에서 시간이 지남에 따라 개발되었습니다. 중대뇌동맥의 뇌동맥 또는 영구탈폐의 광혈전증(MCA)은 신피질3,4에서작고 국소적으로 정의된 병변을 유도하는 일반적으로 사용되는 모델이다. 그 외에, 가장 일반적으로 사용되는 스트로크 모델은 아마도 MCA의 일시적인 폐색이 달성되는 소위 "필라멘트 모델"입니다. 본 모델은 MCA의 기원에 봉합사 필라멘트의 일시적인 도입으로 구성되며, 이는 대뇌 혈류의 급격한 감소와 피코르피질 및 피질 뇌영역5의 후속 큰 경색으로 이어진다. 대부분의 스트로크 모델은 MCA 오클루전 6을모방하지만" "필라멘트 모델"은 허혈성 시간을 정확하게 제한할 수 있습니다. 필라멘트 제거에 의한 재관류는 자발적 또는 치료 후 대뇌 혈류 회복의 인간 임상 시나리오를 모방 (rtPA 또는 기계적 혈전 절제술) 응고 용해. 현재까지 이 "필라멘트 모델"의 다른 수정 사항이 설명되었습니다. 가장 일반적인 접근 방식에서, 먼저 Longa 외에의해 설명 . 1989년5년,실리콘 코팅 필라멘트는 MCA7의기원에 대한 일반적인 경동맥(CCA)을 통해 도입된다. 그것은 널리 사용되는 접근이지만, 이 모델은 CCA가 필라멘트를 제거 한 후 영구적으로 결찰되기 때문에 재관류 동안 혈류의 완전한 복원을 허용하지 않습니다.
지난 10 년 동안, 연구 그룹의 증가 수는이 "필라멘트 모델"을 사용하여 마우스에서 뇌졸중모델링에 관심이있다. 그러나, 이 모델의 상당한 가변성과 절차의 표준화의 부족은 지금까지 보고된 실험 결과 및 과학적 결과의 높은 가변성과 불량한 재현성에 대한 이유 중일부이며, 지금까지보고된 과학적 연구 결과는2,8이다. 연구 실험실 중 낮은 재현성을 지칭하는 현재의 "복제 위기"의 잠재적 원인은 동일한 실험 방법론9를사용하여 연구 그룹 간의 비교할 수 없는 스트로크 경부물이다. 실제로, 제1전 무작위대조멀티센터시험연구를수행한 후, 본 실험적 뇌졸중 모델과 후속 결과 파라미터의 충분한 표준화가 부족한 것이 독립적인 실험실 간의 전임상 연구에서 재현성이 실패한 주된 이유임을 확인할 수있었다(11) . 동일한 스트로크 모델을 사용했음에도 불구하고 이러한 급격한 차이는 검증 연구에 대한 위협뿐만 아니라 견고하고 재현 가능한 모델의 부족으로 인한 과학적 협업에 대한 위협을 정당하게 제기합니다.
이러한 과제에 비추어, 우리는 "면역 스트로크" 연구 컨소시엄(https://immunostroke.de/)의 공동 연구 노력에 사용되는 표준화된 일시적인 MCAo 모델의 절차를 개발하고 설명하는 것을 목표로 했습니다. 이 컨소시엄은 뇌졸중 회복의 기계론 적 원칙의 근간을 이해하는 것을 목표로합니다. 또한, 뇌졸중 결과 분석을 위한 조직학적 및 관련 기능적 방법이 제시된다. 모든 방법은 ImmunoStroke 컨소시엄의 모든 연구 실험실에서 사용되는 확립된 표준 운영 절차를 기반으로 합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>45&#176; ramp</td>
			<td>H&#38;S Kunststofftechnik</td>
			<td></td>
			<td>height: 18 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5/0 threat</td>
			<td>Pearsalls</td>
			<td>10C103000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Acid</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>695092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia system for isoflurane</td>
			<td>Drager</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen pomade</td>
			<td>Bayer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl/6J mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>000664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clamp</td>
			<td>FST</td>
			<td>12500-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotons</td>
			<td>NOBA Verbondmitel Danz</td>
			<td>974116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl violet</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Thermo Scientific CryoStarNX70</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 70%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>521005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 96%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>522078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 99%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>ETO-5000-99-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filaments</td>
			<td>Doccol</td>
			<td>602112PK5Re</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine 45 angled forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>14094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glue</td>
			<td>Orechseln</td>
			<td>BSI-112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardener Glue</td>
			<td>Drechseln &#38; Mehr</td>
			<td>BSI-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating blanket</td>
			<td>FHC DC Temperature Controller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbot</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopentane</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>59070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>PF 5010 LDPM, Periflux System 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler probe</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>91-00123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline pH: 7.4</td>
			<td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td>
			<td>P32799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recovery chamber</td>
			<td>Mediheat</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roti-Histokit mounting medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>6638.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution</td>
			<td>Braun</td>
			<td>131321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Feather</td>
			<td>02.001.30.011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated filaments</td>
			<td>Doccol</td>
			<td>602112PK5Re</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicropscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus Slides</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>J1800AMNZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylacine</td>
			<td>Albrecht</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling stroke in mice: transient middle cerebral artery occlusion via the external carotid artery

뇌졸중은 사망률의 세 번째 가장 흔한 원인과 선진국에서 성인 장애의 주요 원인입니다. 현재까지 치료 옵션은 뇌졸중 후 첫 번째 시간 이내에 뇌졸중 환자의 작은 비율로 제한됩니다. 새로운 치료 전략은 광범위하게 조사되고있다, 특히 치료 시간 기간을 연장하기 위해. 이러한 현재 조사는 뇌졸중 후 염증, 혈관 신생, 신경 가소성 및 재생과 같은 중요한 병리학적 경로에 대한 연구를 포함합니다. 지난 10 년 동안, 독립적 인 연구 그룹 중 실험 결과 및 과학적 결과의 가난한 재현성에 대한 우려가 증가하고있다. 소위 "복제 위기"를 극복하기 위해서는 모든 절차에 대한 상세한 표준화 모델이 절실히 필요합니다. "면역 스트로크" 연구 컨소시엄(https://immunostroke.de/) 내에서의 노력으로, 일시적인 중형 동맥 폐색(MCAo)의 표준화된 마우스 모델이 제안된다. 이 모델은 필라멘트를 제거하면 혈류를 완전히 복원하여 인간 뇌졸중의 큰 비율로 발생하는 치료 또는 자발적응고 리시스를 시뮬레이션할 수 있습니다. 이 "필라멘트" 뇌졸중 모델및 기능 분석을 위한 도구의 외과 적 절차는 함께 제공되는 비디오에서 입증됩니다.

여기서 설명된 모델은 일반적으로 사용되는 "필라멘트" 스트로크 모델의 변형으로, 이는 MCA의 기원을 일시적으로 차단하기 위해 ECA를 통해 실리콘 코팅 필라멘트를 도입하는 것으로 구성된다(도1). 필라멘트를 제거한 후, ECA의 혈류만 영구적으로 중단되어 CCA와 ICA의 완전한 재운하화를 허용합니다. 이것은 뇌의 적절한 재관전을 허용(도 2),인간 환자에?...

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Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

중간 대뇌 동맥 폐색의 다른 모델 (MCAo) 실험 적인 뇌졸중 연구에 사용 됩니다. 여기서, 외부 경동맥(ECA)을 통한 과도 MCAo의 실험적인 뇌졸중 모델이 기술되며, 이는 자발적인 혈전 용해 또는 치료로 인해 뇌혈관 혈전이 제거되는 인간의 뇌졸중을 모방하는 것을 목표로 한다.

마우스에서 뇌졸중 모델링: 외부 경동맥을 통한 일시적인 중간 뇌동맥 폐색

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

여기에 설명 된 필라멘트 모델에서, 혈류의 완전한 복원및 기록, 특히 번역 뇌졸중 연구에서 마우스 중 추론 가능한 유입을 보장하기 위한 요구 사항입니다. 이 모델은 이전에 설명된 다른 스트로크 모델에 비해 두 가지 주요 장점이 있습니다. 두개골 절제술이 필요하지 않으며 혈관의 완전한 재관류가 달성됩니다.필라멘트 모델은 다른 동맥의 프로세스 조작과 관련된 복잡한 외과 적 개입입니다. 이 모든 것의 시각화 및 설명은 작지만 중요한 단계이며 신경 외과 의사의 학습 기간을 가속화 할 수 있습니다. 열 담요를 연결하여 마취 시 작동 면적과 마우스 체온의 온도를 섭씨 37도에서 유지합니다.오토클레이브 가위와 집게, 70% 에탄올 용액 및 덱스파테놀 눈 연고를 준비하고, 여러 조각의 면과 5O 코팅 된 편조 폴리 에스테르 봉합사를 사용할 수 있습니다. 절개 부위를 수화하기 위해 바늘없이 1 밀리리터 주사기로 0.9 % 식염수 용액을 준비합니다. 10 마이크로리터 파이펫 팁의 끝을 절단하여 레이저 도플러 프로브에 대한 홀더를 준비합니다.마우스가 완전히 마취되면 작동 영역에서 경향이 있는 위치에 놓습니다. 직장 프로브를 부드럽게 삽입하여 수술 시술 전반에 걸쳐 온도를 모니터링합니다. 수술 부위를 소독한 후, 왼쪽 귀와 눈 사이에 이 두피를 잘라 두개골 뼈를 노출시하십시오.다음으로, 두개골 아래 여러 대뇌 동맥 또는 MCA를 시각화하기 위해 현세 근육을 잘라 내고 은퇴하십시오. 레이저 도플러 프로브 또는 섬유를 왼쪽 MCA 위에 접착제로 고정하고 피부가 접착되도록 피부를 닫습니다. 경화 접착제 2~3방울을 바르면 공정 속도를 높이게 됩니다.레이저 도플러 섬유가 접착되지 않고 언제든지 팁 홀더에서 쉽게 제거 할 수 있는지 확인하십시오. 마우스를 supine 위치로 돌린 다음 주전자를 마취 콘에 넣고 테이프로 발을 고정시하십시오. 가슴을 둘러싼 피부와 머리카락을 소독하고 목에 2센티미터 길이의 중간 선절을 만듭니다.집게를 사용하여 피부 하반신 과 흉골 근육을 분리합니다. 외과 필드를 노출하고 왼쪽 일반적인 경동맥 또는 CCA를 찾기 위해 re트랙터를 사용합니다. 혈관 신경을 해치지 않고 결합 조직과 주변 신경에서 CCA를 무료로 해부하고 분기 전에 일시적인 결찰을 수행합니다.외부 경동맥 또는 ECA를 해부하고 가장 단면가 보이는 부분에 영구 매듭을 묶는다. ECA 아래에 또 다른 봉합사를 놓고 분기에 가깝게 두은 다음 나중에 사용할 느슨한 매듭을 준비합니다. 내부 경동맥 또는 ICA를 해부하고 양면 위에 약 5밀리미터 의 미세 혈관 클립을 놓습니다.골갈 신경을 손상시키지 않도록 하십시오. 그런 다음 꽉 와 느슨한 결찰 사이에 ECA에 작은 구멍을 잘라, 전체 ECA를 잘라하지 않도록. 필라멘트를 소개하고 CCA쪽으로 진행하십시오.루멘 주위의 ECA의 느슨한 결찰을 조여 그 위치에서 필라멘트를 순간적으로 고정합니다. 미세 혈관 클립을 제거하고 출혈을 방지합니다. 마이크로혈관 클립을 제거한 후 MCA의 기원에 도달할 때까지 ICA를 통해 필라멘트를 삽입합니다.ECA 주변의 매듭을 더 조여이 위치에서 필라멘트를 수정합니다. 필라멘트 삽입 전후의 레이저 도플러 값을 기록합니다. 재반을 제거하고 상처를 봉합하기 전에 복종선에서 흉골 근육을 재배치하십시오.레이저 도플러 프로브를 제거하고 1 시간 동안 섭씨 37도에서 복구 챔버에 동물을 배치합니다. 마취 마스크에 주미와 수술 영역에 있는 경향이 있는 위치에 마우스를 놓고 테이프로 동물의 발을 고정합니다. 레이저 도플러 프로브를 프로브 홀더에 삽입합니다.상처 봉합사를 제거하고 집게를 사용하여 피부, 형선 및 흉골 근육을 분리합니다. 외과 필드를 노출하는 re트랙터를 사용합니다. 필라멘트를 조여주는 ECA 봉합사를 풀고 필라멘트를 부드럽게 당깁니다.제거 하는 동안 필라멘트의 실리콘 고무 코팅을 손상 하지 마십시오. 필라멘트 제거 전후에 레이저 도플러 값을 기록합니다. ECA 봉합사를 단단히 묶고 레이저 도플러 장치에서 대뇌 혈류의 증가를 확인합니다.완전한 혈류를 복원하기 위해 CCA에서 분기전에 일시적인 결찰을 엽니다. 재반을 제거하고 상처를 봉합하기 전에 복종선에서 흉골 근육을 재배치하십시오. 그런 다음 동물을 마취에서 회복하기 위해 섭씨 37도에서 회복실에 1시간 동안 놓습니다.회복 후 온도 조절실에서 마우스를 케이지로 돌려보내고 케이지 바닥에 작은 페트리 접시에 젖은 음식 펠릿과 하이드로겔을 첨가하여 동물을 돌보고 수술 후 3일째까지 12시간마다 진통증을 주입합니다. CCA의 혈류가 필라멘트를 제거한 후 회복되면 뇌의 완전한 재관류가 발생하며, 이는 인간 환자에서 성공적인 기계적 혈전 절제술 후 관찰된 상황과 유사합니다. 뇌졸중 동물은 합성 및 초점 신경 점수에 상당한 변화를 제시, 하지만 일반적인 신경 점수에 토끼 동물에 비해.경유량 회수는 뇌졸중 유도 후 24시간 동안 관상 동맥 연쇄 뇌 섹션의 크레솔 바이올렛 염색을 사용하여 수행되었다. 병변 영역은 striatum과 같은 소마토 감각 및 모터 피질뿐만 아니라 하위 피질 구조를 포함한다. 경피량 평균은 61~62밀리미터 정사각형으로, 영향을 받은 뇌반구의 48%를 나타낸다.인접한 조직, 특히 미주 신경에 손상을 일으키지 않고 CCA, ECA 및 RCA의 적절한 해부를 수행하여 모든 구조의 양호한 시각화를 하고, 맥아 기원을 삽입하고 폐색할 수 있어야 한다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

쥐 중간 대뇌 동맥의 폐색의 Endovascular 봉합사에 의해 초점 대뇌 국소 빈혈 모델

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

연구

신경과학

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

측면 만성 두개골 창 준비 활성화<em&gt; 생체</em&gt; 마우스의 말초 중간 대뇌 동맥 폐색에 따라 관측

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

마우스에서 중뇌동맥 폐색 유발 뇌졸중 후 뇌근육활막증 치료 모델

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

경두개 중뇌동맥 폐색 마우스 모델 구축

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

저자 스포트라이트: 뇌졸중 연구의 혁신적인 기법과 미래 방향 

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

중뇌동맥의 폐색에 의한 일과성 대뇌허혈의 모델

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

저자 스포트라이트: 중뇌동맥 폐색 모델을 통한 허혈성 뇌졸중 손상 평가 

뇌졸중의 일시적인 중뇌동맥 폐색 모델

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...

허혈성 뇌졸중 마우스 모델을 개발하기 위한 원위 중동맥의 폐색

Induction of Acute Ischemic Stroke in Mice Using the Distal Middle Artery Occlusion Technique

저자 스포트라이트: 뇌졸중 연구를 위해 마우스에서 신뢰할 수 있는 원위 MCA 폐색 모델 확립

원위 중동맥 폐색 기법을 사용한 마우스의 급성 허혈성 뇌졸중 유도

Ischemic stroke remains the predominant cause of mortality and functional impairment among the adult populations globally. Only a minority of ischemic ...