Name: modeling stroke in mice: transient middle cerebral artery occlusion via the external carotid artery
Uploaded: 2021-05-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery at JoVE.com

ImmunoStroke Konsorsiyumu'nun (FOR 2879, For immune cells to stroke recovery) tüm işbirliği ortaklarımıza öneriler ve tartışmalar için teşekkür ederiz. Bu çalışma Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, Alman Araştırma Vakfı), Münih Sistem Nörolojisi Kümesi (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) çerçevesinde ve LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 ve LL-112/1-1 hibeleri kapsamında Almanya'nın Mükemmellik Stratejisi kapsamındadır.

Bu videoda bildirilen deneyler, deney hayvanlarının kullanımına ilişkin ulusal yönergeleri izleyerek yapıldı ve protokoller Alman hükümet komiteleri (Regierung von Oberbayern, Münih, Almanya) tarafından onaylandı. On haftalık erkek C57Bl/6J fareler kullanıldı ve kontrollü sıcaklık (22 ± 2 °C) altında, 12 saat açık-karanlık döngü süresi ve peletlenmiş yiyecek ve su reklam libitum erişimi ile yerleştirildi.
1. Malzeme ve aletlerin hazırlanması
<ol><li>...

<ol>
	<li>Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke.">Stroke.</a> Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).</li><li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=1,026+experimental+treatments+in+acute+stroke.">1,026 experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li><li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia:+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques.">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> Journal of Neuroscience Methods. 139 (2), 203-207 (2004).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rat+model+of+thrombotic+focal+cerebral+ischemia.">A new rat model of thrombotic focal cerebral ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 17 (2), 123-135 (1997).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li><li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+of+focal+stroke:+size,+mechanism,+and+purpose.">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2 (3), 396-409 (2005).</li><li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model.">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (47), e2423 (2011).</li><li>Dirnagl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+concerted+appeal+for+international+cooperation+in+preclinical+stroke+research.">A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research.</a> Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).</li><li>McNutt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Journals+unite+for+reproducibility.">Journals unite for reproducibility.</a> Science. 346 (6210), 679 (2014).</li><li>Llovera, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+a+preclinical+randomized+controlled+multicenter+trial+(pRCT):+Anti-CD49d+treatment+for+acute+brain+ischemia.">Results of a preclinical randomized controlled multicenter trial (pRCT): Anti-CD49d treatment for acute brain ischemia.</a> Science Translational Medicine. 7 (299), (2015).</li><li>Llovera, G., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+next+step+in+translational+research:+lessons+learned+from+the+first+preclinical+randomized+controlled+trial.">The next step in translational research: lessons learned from the first preclinical randomized controlled trial.</a> Journal of Neurochemistry. 139, 271-279 (2016).</li><li>Swanson, G. M., Satariano, E. R., Satariano, W. A., Threatt, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+differences+in+the+early+detection+of+breast+cancer+in+metropolitan+Detroit,+1978+to+1987.">Racial differences in the early detection of breast cancer in metropolitan Detroit, 1978 to 1987.</a> Cancer. 66 (6), 1297-1301 (1990).</li><li>Lourbopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inadequate+food+and+water+intake+determine+mortality+following+stroke+in+mice.">Inadequate food and water intake determine mortality following stroke in mice.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 37 (6), 2084-2097 (2017).</li><li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse.">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurological Research. 19 (6), 641-648 (1997).</li><li>Jackman, K., Kunz, A., Iadecola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+focal+cerebral+ischemia+in+vivo.">Modeling focal cerebral ischemia in vivo.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 195-209 (2011).</li><li>Kitano, H., Kirsch, J. R., Hurn, P. D., Murphy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhalational+anesthetics+as+neuroprotectants+or+chemical+preconditioning+agents+in+ischemic+brain.">Inhalational anesthetics as neuroprotectants or chemical preconditioning agents in ischemic brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 27 (6), 1108-1128 (2007).</li><li>Rousselet, E., Kriz, J., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+intraluminal+MCAO:+cerebral+infarct+evaluation+by+cresyl+violet+staining.">Mouse model of intraluminal MCAO: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (69), e4038 (2012).</li><li>Rha, J. H., Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+recanalization+on+ischemic+stroke+outcome:+a+meta-analysis.">The impact of recanalization on ischemic stroke outcome: a meta-analysis.</a> Stroke. 38 (3), 967-973 (2007).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+filament+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+rats:+does+the+reperfusion+method+matter+24+hours+after+perfusion.">Transient filament occlusion of the middle cerebral artery in rats: does the reperfusion method matter 24 hours after perfusion.</a> BMC Neuroscience. 13, 154 (2012).</li><li>Sommer, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+stroke:+experimental+models+and+reality.">Ischemic stroke: experimental models and reality.</a> Acta Neuropathologica. 133 (2), 245-261 (2017).</li><li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rotarod+suitable+for+quantitative+measurements+of+motor+incoordination+in+naive+mice.">A rotarod suitable for quantitative measurements of motor incoordination in naive mice.</a> Naunyn-Schmiedebergs Archiv f&#252;r Experimentelle Pathologie und Pharmakologie. 259 (2), 211 (1968).</li><li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adhesive+removal+test:+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice.">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4 (10), 1560-1564 (2009).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+test+for+detecting+long-term+sensorimotor+dysfunction+in+the+mouse+after+focal+cerebral+ischemia.">A test for detecting long-term sensorimotor dysfunction in the mouse after focal cerebral ischemia.</a> Journal of Neuroscience Methods. 117 (2), 207-214 (2002).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).</li><li>Roth, S., Yang, J., Cramer, J., Malik, R., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+cytokine-induced+sickness+behavior+after+ischemic+stroke+by+an+optimized+behavioral+assessment+battery.">Detection of cytokine-induced sickness behavior after ischemic stroke by an optimized behavioral assessment battery.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 91, 668-672 (2021).</li></ol>

Mevcut protokol, standartlaştırılmış geçici bir MCAo modeli oluşturmak için bir Alman çok merkezli araştırma konsorsiyumunun ("ImmunoStroke") konsensüs anlaşmasına dayanan deneysel bir inme modelini tanımlamaktadır. MCA'nın kökenine ECA üzerinden silikon kaplı bir filament getirilerek kurulan geçici MCAo modeli, sınırlandırılmış bir tıkanıklık döneminden sonra arteriyel reperfüzyon elde etmek için en yaygın kullanılan inme modellerinden biridir. Bu nedenle, bu yordam çeviriyle ilgili b...

İnme, dünya çapında en sık görülen ölüm ve sakatlık nedenlerinden biridir. Esas olarak iskemik ve hemorajik olmak üzere iki farklı inme şekli olmasına rağmen, tüm inme vakalarının% 80-85'i iskemik1' dir. Şu anda, iskemik inme hastaları için sadece iki tedavi mevcuttur: rekombinant doku plazminojen aktivatörü (rtPA) veya mekanik trombektomi ile farmakolojik tedavi. Ancak terapötik zaman penceresinin dar ve çoklu dışlama kriterleri nedeniyle bu özel tedavi seçeneklerinden sadece belirli sayıda hasta yararlanabiliyor. Son yirmi yılda preklinik ve çevirisel inme araştırmaları nöroprotektif yaklaşımların incelenmesine odaklanmıştır. Bununla birlikte, klinik çalışmalara ulaşan tüm bileşikler şimdiye kadar hasta için hiçbir iyileşme göstermedi2.
İn vitro modeller inmenin tüm beyin etkileşimlerini ve patofizyolojik mekanizmalarını doğru bir şekilde üretemediğinden, hayvan modelleri preklinik inme araştırmaları için çok önemlidir. Bununla birlikte, tek bir hayvan modelinde insan iskemik inmenin tüm yönlerini taklit etmek mümkün değildir, çünkü iskemik inme son derece karmaşık ve heterojen bir hastalıktır. Bu nedenle farklı türlerde zamanla farklı iskemik inme modelleri geliştirilmiştir. Serebral arterioles fototombozu veya orta serebral arterin (MCA) kalıcı distal tıkanıklığı, neokortekste küçük ve lokal olarak tanımlanmış lezyonlara neden olan yaygın olarak kullanılan modellerdir3,4. Bunların yanı sıra, en sık kullanılan inme modeli muhtemelen MCA'nın geçici bir tıkanıklığının elde edildiği "filament modeli" olarak adlandırılır. Bu model, MCA'nın kökenine geçici bir dikiş filamentinin girişinden oluşur, bu da serebral kan akışının aniden azalmasına ve ardından subkortikal ve kortikal beyin bölgelerinin büyük enfarktürüne yol5. Çoğu kontur modeli MCA oklüzyonlarını taklit etse de 6, "filament modeli" iskemik zamanın hassas bir şekilde sınırlandırılmasına izin verir. Filament giderme ile reperfüzyon, spontan veya terapötik (rtPA veya mekanik trombektomi) pıhtı lizizi sonrası beyin kan akışı restorasyonunun insan klinik senaryosunu taklit eder. Bugüne kadar, bu "filament modelinin" farklı modifikasyonları tanımlanmıştır. En yaygın yaklaşımda, ilk olarak Longa ve ark. 19895yılında, MCA7'ninkökenine ortak karotis arter (CCA) aracılığıyla silikon kaplı bir filament tanıtılır. Yaygın olarak kullanılan bir yaklaşım olmasına rağmen, bu model reperfüzyon sırasında kan akışının tamamen geri yüklenmesine izin vermez, çünkü CCA filamentin çıkarılmasından sonra kalıcı olarak bağlanır.
Son on yılda, giderek artan sayıda araştırma grubu, bu "filament modelini" kullanarak farelerde inme modellemeye ilgi duyuyor. Bununla birlikte, bu modelin önemli değişkenliği ve prosedürlerin standardizasyonunun olmaması, şimdiye kadar bildirilen deneysel sonuçların ve bilimsel bulguların yüksek değişkenliğinin ve zayıf tekrarlanabilirliğinin nedenlerinden bazılarıdır2,8. Araştırma laboratuvarları arasındaki düşük tekrarlanabilirlik oranına atıfta bulunan mevcut "çoğaltma krizinin" potansiyel bir nedeni, aynı deneysel metodolojiyi kullanan araştırma grupları arasındaki karşılaştırılamaz inme enfarktüs hacimleridir9. Aslında, ilk preklinik randomize kontrollü çok merkezli deneme çalışmasını yaptıktan sonra10, bu deneysel inme modelinin yeterli standardizasyonunun olmamasının ve sonraki sonuç parametrelerinin bağımsız laboratuvarlar arasındaki preklinik çalışmalarda tekrarlanabilirliğin başarısızlığının ana nedenleri olduğunu doğrulayabildik11 . Ortaya çıkan enfarktüs boyutlarındaki bu şiddetli farklılıklar, aynı inme modelini kullanmasına rağmen, sadece doğrulayıcı araştırmalar için değil, aynı zamanda sağlam ve tekrarlanabilir modellerin eksikliği nedeniyle bilimsel işbirlikleri için de haklı bir tehdit oluşturmaktadır.
Bu zorluklar ışığında, "ImmunoStroke" araştırma konsorsiyumu (https://immunostroke.de/) içindeki işbirlikçi araştırma çalışmalarında kullanılan standartlaştırılmış geçici BIR MCAo modeli prosedürünü ayrıntılı olarak geliştirmeyi ve tanımlamayı amaçladık. Bu konsorsiyum, inme iyileşmesinin mekanistik ilkelerinin altında kalan beyin-bağışıklık etkileşimlerini anlamayı amaçlamaktadır. Ayrıca inme sonuç analizi için histolojik ve ilgili fonksiyonel yöntemler sunulmaktadır. Tüm yöntemler, ImmunoStroke konsorsiyumunun tüm araştırma laboratuvarlarında kullanılan yerleşik standart işletim prosedürlerine dayanmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>45&#176; ramp</td>
			<td>H&#38;S Kunststofftechnik</td>
			<td></td>
			<td>height: 18 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5/0 threat</td>
			<td>Pearsalls</td>
			<td>10C103000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL Syringe</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic Acid</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>695092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia system for isoflurane</td>
			<td>Drager</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen pomade</td>
			<td>Bayer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57Bl/6J mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>000664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clamp</td>
			<td>FST</td>
			<td>12500-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip holder</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotons</td>
			<td>NOBA Verbondmitel Danz</td>
			<td>974116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cresyl violet</td>
			<td>Sigma Life Science</td>
			<td>C5042-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Thermo Scientific CryoStarNX70</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 70%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>521005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 96%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>522078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 99%</td>
			<td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td>
			<td>ETO-5000-99-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filaments</td>
			<td>Doccol</td>
			<td>602112PK5Re</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine 45 angled forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>14094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glue</td>
			<td>Orechseln</td>
			<td>BSI-112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hardener Glue</td>
			<td>Drechseln &#38; Mehr</td>
			<td>BSI-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating blanket</td>
			<td>FHC DC Temperature Controller</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbot</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopentane</td>
			<td>Fluka</td>
			<td>59070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Inresa Arzneimittel GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>PF 5010 LDPM, Periflux System 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser Doppler probe</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>91-00123</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline pH: 7.4</td>
			<td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td>
			<td>P32799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recovery chamber</td>
			<td>Mediheat</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roti-Histokit mounting medium</td>
			<td>Roth</td>
			<td>6638.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution</td>
			<td>Braun</td>
			<td>131321</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>Feather</td>
			<td>02.001.30.011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated filaments</td>
			<td>Doccol</td>
			<td>602112PK5Re</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicropscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus Slides</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>J1800AMNZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylacine</td>
			<td>Albrecht</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling stroke in mice: transient middle cerebral artery occlusion via the external carotid artery

İnme, gelişmiş ülkelerde üçüncü en sık mortalite nedeni ve edinilmiş erişkin sakatlığının önde gelen nedenidir. Bugüne kadar terapötik seçenekler inmeden sonraki ilk saatlerde inme hastalarının küçük bir oranı ile sınırlıdır. Özellikle terapötik zaman penceresini uzatmak için yeni terapötik stratejiler kapsamlı bir şekilde araştırılmaktadır. Bu güncel araştırmalar, inme sonrası inme sonrası inflamasyon, anjiogenez, nöronal plastisite ve rejenerasyon gibi önemli patofizyolojik yolların incelenmesini içerir. Son on yılda, bağımsız araştırma grupları arasında deneysel sonuçların ve bilimsel bulguların zayıf tekrarlanabilirliği konusunda artan bir endişe vardır. "Çoğaltma krizi" olarak adlandırılan krizin üstesinden gelmek için, tüm prosedürler için ayrıntılı standartlaştırılmış modellere acilen ihtiyaç vardır. "ImmunoStroke" araştırma konsorsiyumu (https://immunostroke.de/) içinde bir çaba olarak, geçici orta serebral arter tıkanıklığının (MCAo) standartlaştırılmış bir fare modeli önerildi. Bu model, filamentin çıkarılmasından sonra kan akışının tamamen restorasyonuna izin verir, insan felçlerinin büyük bir kısmında meydana gelen terapötik veya spontan pıhtı lizizini simüle eder. Bu "filament" inme modelinin cerrahi prosedürü ve fonksiyonel analizi için araçlar eşlik eden videoda gösterilmiştir.

Burada açıklanan model, MCA'nın kökenini geçici olarak engellemek için ECA aracılığıyla silikon kaplı bir filamentin tanıtılmasından oluşan yaygın olarak kullanılan "filament" inme modelinin bir modifikasyonudur (Şekil 1). Filament çıkarıldıktan sonra, sadece ECA'daki kan akışı kalıcı olarak durdurulur ve CCA ve ICA'nın tamamen yeniden dengelenmesine izin verir. Bu, insan hastalarında başarılı farmakolojik tromboliz veya mekanik trombektomi sonrası gözlenen ...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery at JoVE.com

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Deneysel inme araştırmalarında orta serebral arter tıkanma (MCAo) farklı modelleri kullanılmaktadır. Burada, serebrovasküler trombüsin spontan pıhtı lizisi veya tedavisi nedeniyle çıkarıldığı insan inmesini taklit etmeyi amaçlayan dış karotis arter (ECA) yoluyla geçici MCAo'nun deneysel bir inme modeli tanımlanmıştır.

Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

Burada açıklanan filament modelinde, kan akışının tamamen restorasyonu ve kayıtta olması, özellikle çevirisel inme çalışmalarında fareler arasında üretilebilir bir akını sağlamak için gerekliliklerdir. Bu model, daha önce açıklanan diğer kontur modellerine kıyasla iki ana avantaja sahiptir. Kraniyotomi gerekmez ve kan damarının tamamen yeniden perfüzyonu elde edilir.Filament modeli, farklı arterlerin proses manipülasyonu içeren karmaşık bir cerrahi müdahaledir. Tüm bunların görselleştirilmesi ve açıklanması küçük ama önemli adımlardır, beyin cerrahlarının öğrenme süresini hızlandırabilir. Operasyon bölgesinin sıcaklığını ve anestezi sırasında fare gövdesi sıcaklığını 37 santigrat derecede korumak için ısı battaniyesini bağlayın.Otoklav makası ve forseps, %70 etanol çözeltisi ve dekpanthenol göz merhemini hazırlayın ve birkaç parça pamuk ve Beş O kaplamalı örgülü polyester dikişi kullanıma hazır tutun. Kesi bölgesini nemli tutmak için iğnesiz bir mililitre şırıngada% 0,9 tuzlu su çözeltisi hazırlayın. 10 mikroliter pipet ucunun ucunu keserek lazer Doppler probu için bir tutucu hazırlayın.Fare tamamen uyuşturuldıktan sonra, çalışma alanında eğilimli bir konuma yerleştirin. Cerrahi prosedürler boyunca sıcaklığı izlemek için rektal probu hafifçe yerleştirin. Cerrahi bölgeyi dezenfekte ettikten sonra, kafatası kemiğini ortaya çıkarmak için bu kafa derisini sol kulak ve göz arasında kesin.Daha sonra, kafatasının altındaki çoklu serebral arterleri veya MCA'yı görselleştirmek için zamansal kası kesin ve emekli edin. Lazer Doppler probunu veya lifini sol MCA'nın üstünde tutkalla tutarak ucun dış kısmını sabitlayın ve cildi de yapıştıracak şekilde kapatın. İşlemi hızlandırmak için iki ila üç damla sertleştirici tutkal uygulayın.Lazer Doppler lifinin yapıştırılmadığını ve uç tutucudan herhangi bir zamanda kolayca çıkarılabildiğinden emin olun. Fareyi sırtüstü konumuna getirin, ardından somurtma anestezi konisine koyun ve pençeleri bantla sabitleyin. Göğsü çevreleyen cildi ve saçları dezenfekte edin ve boyunda iki santimetre uzunluğunda bir orta çizgi kesiği yapın.Deri submandibular bezi ve sternomastoid kası ayırmak için tokalar kullanın. Cerrahi alanı açığa çıkarmak ve sol ortak karotis arteri veya CCA'yı bulmak için retraktörleri kullanın. CCA'yı vagal sinire zarar vermeden bağ dokusundan ve çevresindeki sinirlerden arındırın ve çatallanmadan önce geçici bir ligasyon gerçekleştirin.Dış şahdamarını veya ECA'yı parçalara ayırın ve en distal görünür kısımda kalıcı bir düğüm bağlayın. ECA'nın altına ve çatallamaya yakın başka bir dikiş yerleştirin, daha sonra kullanılacak gevşek bir düğüm hazırlayın. İç şahdamarını veya ICA'yı parçalara ayırın ve çatallanmanın üzerine yaklaşık beş milimetrelik bir mikrovasküler klips yerleştirin.Vagal sinirine zarar vermediklerden emin olun. Daha sonra sıkı ve gevşek ligasyonlar arasında ECA'ya küçük bir delik açın ve tüm ECA'yı kesmemeyi sağlayın. Filamenti tanıtın ve CCA'ya doğru ilerletin.Filamenti bu konumda bir an için sabitlemek için lümen etrafındaki ECA'daki gevşek ligasyonu sıkın. Mikrovasküler klips çıkarılır ve kanamayı önler. Mikrovasküler klipsi çıkardıktan sonra, MCA'nın kaynağına ulaşılana kadar filamenti ICA'dan geçirin.ECA etrafındaki düğümü daha da sıkılaştırarak filamenti bu konumda sabitlayın. Filament eklemeden önce ve sonra lazer Doppler değerlerini kaydedin. Yarayı dikmeden önce retraktörü çıkarın ve sternomastoid kası submandibular bezinde yeniden konumlandırın.Lazer Doppler probını çıkarın ve hayvanı bir saat boyunca 37 santigrat derecede bir kurtarma odasına yerleştirin. Fareyi anestezi maskesinde snout ile operasyon bölgesinde eğilimli bir konuma yerleştirin, ardından hayvanın pençelerini bantla sabitleyin. Lazer Doppler probını prob tutucusuna yerleştirin.Yara dikişini çıkarın ve cildi, submandibular bezi ve sternomastoid kası ayırmak için tokalar kullanın. Cerrahi alanı açığa çıkarmak için retraktörleri kullanın. Filamenti sıkılaştıran ECA dikişini gevşetin ve filamenti hafifçe çekin.Çıkarma sırasında filamentin silikon kauçuk kaplamasına zarar vermekten kaçının. Filament çıkarılmasından önce ve sonra lazer Doppler değerlerini kaydedin. ECA dikişini sıkıca bağlayın ve lazer Doppler cihazındaki serebral kan akışındaki artışı onaylayın.Tam kan akışını geri yüklemek için CCA'dan çatallanmadan önce geçici ligasyonu açın. Yarayı dikmeden önce retraktörü çıkarın ve sternomastoid kası submandibular bezinde yeniden konumlandırın. Daha sonra, hayvanı anesteziden kurtulmak için bir saat boyunca 37 santigrat derecede bir iyileşme odasına yerleştirin.İyileştikten sonra fareleri sıcaklık kontrollü bir odada kafeslerine geri koyun ve kafes zemindeki küçük Petri kaplarına ıslak yiyecek topakları ve hidrojel ekleyerek hayvanlarla ilgilenin ve ameliyattan sonraki üçüncü güne kadar her 12 saatte bir analjezi enjekte edin. Filament çıkarıldıktan sonra CCA'daki kan akışı geri geldikten sonra, insan hastalarında başarılı mekanik trombektomi sonrası gözlenen duruma benzer şekilde beynin tamamen yeniden perfüzyonu meydana gelir. İnme hayvanları kompozit ve fokal nöro skorda önemli bir değişiklik gösterdi, ancak sham hayvanlarla karşılaştırıldığında genel nöro skorda değil.Alınan enfarktüs hacmi de inme indüksiyondan 24 saat sonra koronal seri beyin bölümlerinin cresol violet boyanma kullanılarak gerçekleştirildi. Lezyon alanı somatosensör ve motor korteksin yanı sıra striatum gibi sub-kortikal yapıları içerir. Enfarktüs hacmi ortalaması 61 ila 62 milimetre kareydi ve etkilenen beyin yarımküresinin% 48'ini temsil ediyordu.Tüm yapıların iyi bir görselleştirilmesine sahip olmak ve FILAMENT'i takabilmek ve MCA kökenini tıkayabilmek için bitişik dokuya, özellikle vagus sinirine zarar vermeden CCA, ECA ve RCA'nın yeterli bir diseksiyonunun yapılması önemlidir.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Endovasküler Dikiş Rat Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fokal Serebral İskemi Model

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

Nörobilim

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Yanal Kronik Kranial Pencere Hazırlık sağlar<em&gt; İn Vivo</em&gt; Farelerde Distal Orta Serebral Arter Tıkanıklığı takiben Gözlem

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

Farelerde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Kaynaklı İnme Sonrası Ensefalomiyosinanjiyoz Tedavisi İçin Bir Model

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Fareleri Modelinin Kurulması

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

Yazar Spotlight: İnme Araştırmalarında Yenilikçi Teknikler ve Gelecekteki Yönelimler 

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Orta serebral arter tıkanıklığı ile geçici serebral iskemi modeli

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Yazar Spotlight: Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli ile İskemik İnme Hasarının Değerlendirilmesi 

İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...

İskemik İnme Fare Modeli Geliştirmek için Distal Orta Arter Oklüzyonu

Induction of Acute Ischemic Stroke in Mice Using the Distal Middle Artery Occlusion Technique

Yazar Spotlight: İnme Araştırmaları için Farelerde Güvenilir Bir Distal MCA Oklüzyon Modeli Oluşturma

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu

Ischemic stroke remains the predominant cause of mortality and functional impairment among the adult populations globally. Only a minority of ischemic ...