Name: partial heterotopic hindlimb transplantation model in rats
Uploaded: 2021-06-09T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door het Bureau van de Assistent-minister van Defensie voor Gezondheidszaken via het Congressionally Directed Medical Research Program onder Award No. W81XWH-17-1-0680. Meningen, interpretaties, conclusies en aanbevelingen zijn die van de auteurs en worden niet noodzakelijkerwijs onderschreven door het ministerie van Defensie.

Alle dieren kregen humane zorg in overeenstemming met de NIH-gids voor de verzorging en het gebruik van proefdieren. De Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC-protocol 2017N000184) en Animal Care and Use Review Office (ACURO) hebben alle dierprotocollen goedgekeurd. Inteelt mannelijke Lewisratten (250-400 g) werden gebruikt voor alle experimenten.
1. Chirurgie
<ol><li>Verdoof de Lewis-ratten met behulp van isofluraaninhalatie. Induceer anesthesie met 5% isofluraan in de inductiek...

<ol>
	<li>Lanteiri, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Feasibility,+reproducibility,+risks+and+benefits+of+face+transplantation:+a+prospective+study+of+outcomes.">Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes.</a> American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).</li><li>Park, S. H., Eun, S. C., Kwon, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand+transplantation:+current+status+and+immunologic+obstacles.">Hand transplantation: current status and immunologic obstacles.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 17 (1), 97-104 (2019).</li><li>Cetrulo, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Penis+transplantation:+first+US+experience.">Penis transplantation: first US experience.</a> Annals of Surgery. 267 (5), 983-988 (2018).</li><li>Grajek, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+complex+allotransplantation+of+neck+organs:+larynx,+trachea,+pharynx,+esophagus,+thyroid,+parathyroid+glands,+and+anterior+cervical+wall:+a+case+report.">First complex allotransplantation of neck organs: larynx, trachea, pharynx, esophagus, thyroid, parathyroid glands, and anterior cervical wall: a case report.</a> Annals of Surgery. 266 (2), 19-24 (2017).</li><li>Pribaz, J. J., Caterson, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+and+limitations+of+conventional+autologous+reconstruction+of+the+head+and+neck.">Evolution and limitations of conventional autologous reconstruction of the head and neck.</a> Journal of Craniofacial Surgery. 24 (1), 99-107 (2013).</li><li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+I.+Results+with+syngeneic+grafts.">Vascularized limb transplantation in the rat. I. Results with syngeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 293-299 (1983).</li><li>Lipson, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascularized+limb+transplantation+in+the+rat.+II.+Results+with+allogeneic+grafts.">Vascularized limb transplantation in the rat. II. Results with allogeneic grafts.</a> Transplantation. 35 (4), 300-304 (1983).</li><li>Adamson, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+model+of+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+for+the+study+of+tolerance+to+composite+tissue+allografts.">A modified model of hindlimb osteomyocutaneous flap for the study of tolerance to composite tissue allografts.</a> Microsurgery. 27 (7), 630-636 (2007).</li><li>Arav, A., Friedman, O., Natan, Y., Gur, E., Shani, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+hindlimb+cryopreservation+and+transplantation:+a+step+toward+"organ+banking".">Rat hindlimb cryopreservation and transplantation: a step toward "organ banking".</a> American Journal of Transplantation. 17 (11), 2820-2828 (2017).</li><li>Gok, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+ex-situ+limb+perfusion+system+for+a+rodent+model.">Development of an ex-situ limb perfusion system for a rodent model.</a> ASAIO Journal. 65 (2), 167-172 (2019).</li><li>Gok, E., Rojas-Pena, A., Bartlett, R. H., Ozer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+skeletal+muscle+metabolomic+changes+associated+with+static+cold+storage.">Rodent skeletal muscle metabolomic changes associated with static cold storage.</a> Transplantation Proceedings. 51 (3), 979-986 (2019).</li><li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation.">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Research. Part C, Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li><li>Fleissig, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+heterotopic+hindlimb+osteomyocutaneous+flap+model+in+the+rat+for+translational+vascularized+composite+allotransplantation+research.">Modified heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap model in the rat for translational vascularized composite allotransplantation research.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (146), e59458 (2019).</li><li>Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+hindlimb+allotransplantation+in+rats:+an+alternative+model+for+immunological+research+in+composite-tissue+allotransplantation.">Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation.</a> Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).</li><li>Jang, Y., Park, Y. E., Yun, C. W., Kim, D. H., Chung, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vest-collar+as+a+rodent+collar+to+prevent+licking+and+scratching+during+experiments.">The vest-collar as a rodent collar to prevent licking and scratching during experiments.</a> Lab Anim. 50 (4), 296-304 (2016).</li><li>Kern, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+rodent+orthotopic+forelimb+transplantation+model+that+allows+for+reliable+assessment+of+functional+recovery+resulting+from+nerve+regeneration.">A novel rodent orthotopic forelimb transplantation model that allows for reliable assessment of functional recovery resulting from nerve regeneration.</a> American Journal of Transplantation. 17 (3), 622-634 (2017).</li><li>Perez-Abadia, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+immunosuppression+in+a+rat+hind-limb+transplantation+model.">Low-dose immunosuppression in a rat hind-limb transplantation model.</a> Transplant International. 16 (12), 835-842 (2003).</li><li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+hind-limb+transplantation+in+rats.">Orthotopic hind-limb transplantation in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (41), e2022 (2010).</li><li>Fleissig, Y. Y., Beare, J. E., LeBlanc, A. J., Kaufman, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+the+rat+hind+limb+transplant+as+an+experimental+model+of+vascularized+composite+allotransplantation:+Approaches+and+advantages.">Evolution of the rat hind limb transplant as an experimental model of vascularized composite allotransplantation: Approaches and advantages.</a> SAGE Open Medicine. 8, 2050312120968721 (2020).</li><li>Lindboe, C. F., Presthus, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+denervation,+immobilization+and+cachexia+on+fibre+size+in+the+anterior+tibial+muscle+of+the+rat.">Effects of denervation, immobilization and cachexia on fibre size in the anterior tibial muscle of the rat.</a> Acta Neuropathologica. 66 (1), 42-51 (1985).</li><li>Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+limb+allotransplantation+model+to+study+skin+rejection+in+the+rat.">Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat.</a> Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).</li></ol>

Orthotopische ledemaattransplantatiemodellen bij knaagdieren zijn beschreven in de literatuur15,16,17; ze vereisen echter een zenuwherstel, spierherbevestiging en een perfecte osteosynthese van het dijbeen, wat een zeer moeilijke stap kan zijn. Deze modellen zijn ook geassocieerd met een hogere morbiditeit en mortaliteit bij knaagdieren14, vooral in de follow-up op korte termijn, omdat het herstel van een...

In de afgelopen twee decennia is VCA geëvolueerd als een revolutionaire behandeling voor patiënten die lijden aan ernstige misvorming, waaronder gezicht1,amputaties van de bovenste ledematen2,penis3en andere complexe weefseldefecten4,5. De gevolgen van levenslange immunosuppressie belemmeren echter nog steeds een bredere toepassing van deze complexe reconstructieve operaties. Fundamenteel onderzoek is cruciaal om anti-afwijzingsstrategieën te verbeteren. Het verhogen van de VCA-conserveringstijd is ook essentieel om de transplantatielogistiek te verbeteren en de donorpool te vergroten (omdat VCA-donoren aan meer criteria moeten voldoen dan solide orgaandonoren, waaronder huidskleur, anatomische grootte, geslacht). In deze context worden transplantaties van ledematen van ratten veel gebruikt in studies naar de immuunafstoting van allografts6,7,nieuwe tolerantie-inductieprotocollen8en conserveringsstudies9,10,11. Daarom zijn deze VCA-modellen een belangrijk element om te beheersen voor VCA translationeel onderzoek.
Osteomyocutane flappen zijn in de literatuur beschreven als betrouwbare modellen om VCA te bestuderen bij ratten8,12,13,14. Hoewel orthotopische transplantaties van alle ledematen langdurige evaluatie van de transplantaatfunctie mogelijk maken, is het een tijdrovende procedure die gepaard gaat met hogere postoperatieve morbiditeit en mortaliteitscijfers14. Heterotope ledemaattransplantatiemodellen zijn daarentegen niet-functioneel, maar maken reproduceerbare studies op VCA mogelijk. Postoperatieve uitkomsten kunnen betrouwbaar worden verwacht vóór de start van een VCA-transplantatiestudie bij ratten. Deze studie rapporteert een partieel heterotopisch osteomyocutaan flaptransplantatiemodel bij de rat met frequente mogelijke uitkomsten en complicaties die intraoperatief en postoperatief kunnen optreden tijdens een follow-upperiode van drie weken.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>24 GA angiocatheter</td>
			<td>BD Insyte Autoguard</td>
			<td>381412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture Black monofilament non absorbable suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>1667</td>
			<td>Used to suture the E-collar to the back of the neck</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 suture Coated Vicryl Plus Antibacterial</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>VCP496</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Tissue Forceps, 11 cm, 1 x 2 Teeth with Tying Platform</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.ATK26426</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cords</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>228000C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black Polyamide Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8c</td>
			<td>AROSurgical</td>
			<td>T04A10N07-13</td>
			<td>Used to perform the microvascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine HCl</td>
			<td>Pharmaceutical, Inc</td>
			<td>42023-179-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dilating Forceps</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>18131-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Scissors 15 cm, Round Handle 8 mm diameter, Straight Slender Tapered Blade 7 mm, Lipshultz Pattern</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.SAS15RVL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double Micro Clamps 5.5 x 1.5 mm</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>18040-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elizabethan collar</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>EC-R1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps 13.5 cm long, Flat Handle, 9 mm wide Straight Tips 0.1 mm diameter (x2)</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.JFL31</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Micro Needle Holder</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>12500-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 units/mL</td>
			<td>BD PosiFlush</td>
			<td>306424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>14043-704-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jewelers Bipolar Forceps Non Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.BPNS11223</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lone Star Elastic Stays</td>
			<td>CooperSurgical</td>
			<td>3314-8G</td>
			<td>Used to retract the inguinal ligament for femoral vessels dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lone Star Self-Retaining Retractors</td>
			<td>CooperSurgical</td>
			<td>3301G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Mosquito Hemostats</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>13010-12</td>
			<td>Used to retract the inguinal fat pad distally</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holder, 15 cm Round Handle, 8 mm diameter, Superfine Curved Jaw 0.2 mm tip diameter, without lock</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ASSI.B1582</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Suture Black Monolfilament 8-0, 6.5 mm 3/8c</td>
			<td>Ethilon</td>
			<td>2808G</td>
			<td>Used to ligate collateral branches on the femoral vessels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Offset Bone Nippers</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>16101-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vascular Clamps 5.5 x 1.5 mm</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>00398-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Walton scissors</td>
			<td>Fine science tools (FST)</td>
			<td>14077-09</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

partial heterotopic hindlimb transplantation model in rats

Gevasculariseerde composiet allotransplantaties (VCA) vormen de meest geavanceerde reconstructieoptie voor patiënten zonder autologe chirurgische mogelijkheden na een complex weefseldefect. Gezichts- en handtransplantaties hebben het leven van misvormde patiënten veranderd, waardoor ze een nieuw esthetisch en functioneel sociaal orgaan hebben. Ondanks veelbelovende resultaten presteert VCA nog steeds ondermaats als gevolg van levenslange immunosuppressiecomorbiditeiten en infectieuze complicaties. De rat is een ideaal diermodel voor in vivo studies naar immunologische routes en afstotingsmechanismen van transplantaten. Ratten worden ook veel gebruikt in nieuwe conserveringstechnieken voor samengesteld weefseltransplantaten, waaronder perfusie- en cryopreservatiestudies. Modellen die worden gebruikt voor VCA bij ratten moeten reproduceerbaar, betrouwbaar en efficiënt zijn met een lage postoperatieve morbiditeit en mortaliteit. Heterotope ledemaattransplantatieprocedures voldoen aan deze criteria en zijn gemakkelijker uit te voeren dan orthotopische ledemaattransplantaties. Het beheersen van microchirurgische modellen van knaagdieren vereist solide ervaring in microchirurgie en dierverzorging. Hierin wordt een betrouwbaar en reproduceerbaar model van partiële heterotope osteomyocutane flaptransplantatie bij ratten, de postoperatieve uitkomsten en de middelen om mogelijke complicaties te voorkomen gerapporteerd.

In deze single-operator studie werden 30 syngenegene heterotope partiële ledemaattransplantaties uitgevoerd. Succes werd op postoperatieve dag 21 gedefinieerd als de afwezigheid van VCA-falen of complicaties die euthanasie vereisen. De normale evolutie van het transplantaat is weergegeven in figuur 3. De gemiddelde duur voor gedeeltelijke ledemaatverwerving en transplantaatinstel bij de ontvanger was respectievelijk 35 en 105 min; de gemiddelde ischemietijd was 105 min. Tijdens de follow-up...

Watch this Scientific Journal Video about Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats at JoVE.com

Partial Heterotopic Hindlimb Transplantation Model in Rats

Dit artikel presenteert een partieel heterotopisch osteomyocutaan flaptransplantatieprotocol bij ratten en de mogelijke uitkomsten ervan in de follow-up op middellange termijn.

Partieel heterotopisch hindlimbtransplantatiemodel bij ratten

Vascularized composite allotransplantations (VCA) represent the most advanced reconstruction option for patients without autologous surgical possibilities ...

We presenteren een betrouwbaar en reproduceerbaar chirurgisch model van heterotope achterpoottransplantatie bij ratten. Deze techniek is ideaal voor kortlopende studies naar conservering of immuunafstoting bij VCA. De stapsgewijze beschrijving stelt cursisten in staat om de operatie snel onder de knie te krijgen.Maak om te beginnen een omtrekkende incisie op de huid boven de enkel bij het distale derde deel van het been. Skeletoniseer en cauteriseer de sapheneuze slagader en de terminale tak van de popliteale slagader met behulp van een bipolaire tang. Cauteriseer en snijd de gastrocnemius, soleus, tibialis anterior en biceps femoris spieren totdat het tibiale bot is blootgesteld.Maak een incisie van 2,5 centimeter aan de rechter inguinale plooi en ontleed het inguinale vetkussen. Gebruik een vishaak retractor om het liesband vast te pakken. Houd het inguinale vetkussen distaal vast met een klemtang en trek het vetkussen in om de dijbeenvaten bloot te leggen.Ontleed de femorale vaten, individualiseer de Murphy-takken en ligaat met 8/0 nylon banden. Hepariniseer de donorrat door de heparine in de dorsale ader van de penis te injecteren met behulp van een naald van 27,5 gauge. Voltooi de huidincisie rond de heup.Gebruik de bipolaire tang om de biceps femoris en gluteus superficialis spieren dicht te maken, cauteriseer vervolgens en snijd de heupzenuw op de lengte van het midden van het dijbeen. Stel het dijbeen proximaal bloot ter hoogte van de achterste femurkuif en ligaat de femorale vaten met nylon banden ter hoogte van het inguinale ligament. Voer een arteriotomie uit op de dijbeenslagader net onder de ligatuur en verwijd om de 24 gauge angiocatheter in te brengen.Cauteriseer en snijd de resterende spier onder de pedikel om de voorste kant van het dijbeen bloot te leggen. Gebruik de botsnijder om het scheenbeen proximaal door te snijden en het dijbeen zo distisch mogelijk te snijden. Spoel de gedeeltelijke achterpoot met twee milliliter heparine zoutoplossing om een duidelijke veneuze uitstroom te verkrijgen.Plaats de achterpoot op ijs in een steriel gaasje tot de microvasculaire overdracht. Ontleed het inguinale vetkussen en leun het inguinale vetkussen distaal om de femorale vaten bloot te leggen. Gebruik een haak om het liesband in te trekken en klemtang om het inguinale vetkussen distisch vast te houden.Ontleed de femorale vaten, individualiseer de Murphy-takken en ligaat met nylon banden zoals aangetoond. Ligate beide vaten boven de epigastrische vaten met behulp van nylon banden. Plaats de approximatorklemmen proximaal, verwijd de vaatlens en spoel af met heparine zoutoplossing.Maak een incisie op de linkerflank boven de heup en maak een onderhuidse pocket met een onderhuidse tunnel naar de liesplooi. Plaats het proximale deel van de gedeeltelijke ledemaat en het inguinale vetkussen door de onderhuidse tunnel voor microvasculaire overdracht. Voer de veneuze en arteriële anastomosen uit met behulp van nylon hechtingen.Verwijder beide approximatorklemmen en observeer de revascularisatie van de ledemaat. Voer een melktest uit op beide vaten om de doorgankelijkheid van elke anastomose te beoordelen. Maak een longitudinale huidincisie aan de mediale kant van de getransplanteerde ledemaat en breng het transplantaat in.Verwijder de overtollige huid van het transplantaat en sluit de wond met afzonderlijke hechtingen en een lopende hechting met absorbeerbare 4/0 hechtingen. Hecht de inguinale vetkussens van de getransplanteerde ledemaat en de ontvanger aan elkaar met behulp van twee afzonderlijke absorbeerbare hechtingen en sluit de inguinale plooi na de laatste controle van de microvasculaire anastomose. De evolutie van het heterotope hindlimbmodel werd gevolgd tot het einde van de studie.De haargroei werd waargenomen tijdens de eerste postoperatieve week en de cutane terugtrekking verscheen na twee weken. Gevasculariseerde composiet allotransplantatie falen kan optreden tijdens de eerste postoperatieve week als gevolg van microvasculaire trombose. Veneuze trombose was in 20% van de gevallen de oorzaak van vroege euthanasie, die allemaal plaatsvonden vóór postoperatieve dag vijf.De huid leek blauw en werd elke dag donkerder. Zelfverminking is een ernstige zorg bij ongevoelige grafts en komt vaak voor tussen postoperatieve dag twee en zeven. Indien beperkt tot minder dan een derde van het transplantaatoppervlak en alleen betrekking heeft op de huid, kunnen chirurgische debridement en hechtingen met behulp van niet-absorbeerbare hechtingen worden besproken met de dierenarts van het personeel.Preventie van zelfverminking is afhankelijk van het gebruik van een e-halsband die tot postoperatieve dag zeven in de nek is gehecht en het reinigen van bloed of korst op de chirurgische wonden van het dier. Ernstige autofagie van meerdere lagen van het transplantaat leidt tot euthanasie van het dier. Dermale cysten verschenen na postoperatieve dag 14, soms met een cutaan necrotisch centrum vóór de fistel.Het is van cruciaal belang om ervoor te zorgen dat de plaatsing van het transplantaat niet voorkomt dat het dier ambulant wordt en dat de pedikel niet geknikt of strak is tijdens de inzet van het transplantaat. Ons team voerde conserveringsstudies uit in de verkregen ledematen vóór transplantatie. De effecten van verschillende duur van statische koude opslag zijn geëvalueerd, evenals verschillende ledemaatperfusieprotocollen.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

Muizenmodel van CD40-activatie van B-cellen

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

Orthotope Hind-Limb Transplantatie bij ratten

Composite tissue allotransplantation (CTA) now represents a valid therapeutic option after the loss of a hand, forearm or digits and has become a novel ...

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo Imaging Method to Distinguish Acute and Chronic Inflammation

In vivo beeldvorming methode om acute en chronische ontsteking Onderscheid

Inflammation is a fundamental aspect of many human diseases. In this video report, we demonstrate non-invasive bioluminescence imaging techniques that ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronische<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; Luchtweginfectie in Muizen

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

In Vitro en In Vivo beoordeling van T-, B- en myeloïde cellen onderdrukkende activiteit en humorale reacties van transplantatie ontvangers

The main concern in transplantation is to achieve specific tolerance through induction of regulatory cells. The understanding of tolerance mechanisms ...

A Recovery Cardiopulmonary Bypass Model Without Transfusion or Inotropic Agents in Rats

Een cardiopulmonale Bypass herstelmodel zonder transfusie of inotrope agenten bij ratten

Cardiopulmonary bypass (CPB) is indispensable in cardiovascular surgery. Despite the dramatic refinement of CPB technique and devices, multi-organ ...

An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats

Een immunologisch model voor heterotopische hart- en hartspierceltransplantatie bij ratten

Heterotopic heart transplantation in rats has been a commonly used model for diverse immunological studies for more than 50 years. Several modifications ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

Optimalisatie van de Cuff Techniek voor Murine Heart Transplantation

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

Bone Marrow Transplantation Procedures in Mice to Study Clonal Hematopoiesis

Beenmergtransplantatieprocedures bij muizen om clonal hematopoiese te bestuderen

Clonal hematopoiesis is a prevalent age-associated condition that results from the accumulation of somatic mutations in hematopoietic stem and progenitor ...

Purification and Expansion of Mouse Invariant Natural Killer T Cells for in vitro and in vivo Studies

Zuivering en uitbreiding van muisinvariante Natural Killer T-cellen voor in vitro en in vivo studies

Invariant Natural Killer T (iNKT) cells are innate-like T Lymphocytes expressing a conserved semi-invariant T cell receptor (TCR) specific for self or ...