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•
06:52 min
October 11th, 2022
DOI :
10.3791/62629-v
Chapters
0:04
Introduction
0:46
Generation of Human Retinoblastoma
4:39
Results: In Vitro Reconstruction of Human Retinoblastoma
6:23
Conclusion
Transcript
人视网膜母细胞瘤是儿童期最常见的眼内癌类型。临床样本难以获得,小鼠模型不能形成视网膜母细胞瘤。因此,体外视网膜母细胞瘤的产生对于观察视网膜母细胞瘤的发生、增殖和生长以及开发新型治疗药物至关重要。
该方案的效率可以达到约100%,尽管视网膜母细胞瘤生成的持续时间从第45天到第120天是可变的。为了维持视网膜母细胞瘤一或RB一敲除人胚胎干细胞,将基因编辑的H九细胞培养在涂有生长因子还原基底膜基质的六孔板中,并每天更换培养基。要传代细胞,请将它们在37摄氏度下在EDTA缓冲液中孵育3
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Summary
我们描述了一种通过在人胚胎干细胞(hESC)中引入双等位基因RB1突变来产生人视网膜母细胞瘤(RB)的方法。RB细胞系也可以在培养皿中使用分离的RB成功培养。
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