Name: implantation of a cranial window for repeated in vivo imaging in awake mice
Uploaded: 2021-06-22T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation of a Cranial Window for Repeated In Vivo Imaging in Awake Mice at JoVE.com

सभी पशु प्रयोगों को नेब्रास्का मेडिकल सेंटर विश्वविद्यालय में आईएसीयूसी द्वारा अनुमोदित दिशानिर्देशों के अनुसार किया गया था।
1. सर्जरी से पहले
<ol><li>वायरल इंजेक्शन के लिए पिपेट्स तैयार करे?...

<ol>
	<li>Cichon, J., Gan, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Branch-specific+dendritic+Ca2++spikes+cause+persistent+synaptic+plasticity.">Branch-specific dendritic Ca2+ spikes cause persistent synaptic plasticity.</a> Nature. 520 (7546), 180-185 (2015).</li><li>Goncalves, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circuit+level+defects+in+the+developing+neocortex+of+Fragile+X+mice.">Circuit level defects in the developing neocortex of Fragile X mice.</a> Nature Neuroscience. 16 (7), 903-909 (2013).</li><li>Padmashri, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+structural+and+functional+synaptic+plasticity+with+motor+skill+learning+in+a+mouse+model+of+fragile+X+syndrome.">Altered structural and functional synaptic plasticity with motor skill learning in a mouse model of fragile X syndrome.</a> Journal of Neuroscience. 33 (50), 19715-19723 (2013).</li><li>Peters, A. J., Chen, S. X., Komiyama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+of+reproducible+spatiotemporal+activity+during+motor+learning.">Emergence of reproducible spatiotemporal activity during motor learning.</a> Nature. 510 (7504), 263-267 (2014).</li><li>Poskanzer, K. E., Yuste, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytes+regulate+cortical+state+switching+in+vivo.">Astrocytes regulate cortical state switching in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (19), 2675-2684 (2016).</li><li>Srinivasan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ca2++signaling+in+astrocytes+from+Ip3r2(-/-)+mice+in+brain+slices+and+during+startle+responses+in+vivo.">Ca2+ signaling in astrocytes from Ip3r2(-/-) mice in brain slices and during startle responses in vivo.</a> Nature Neuroscience. 18 (5), 708-717 (2015).</li><li>Takata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocyte+calcium+signaling+transforms+cholinergic+modulation+to+cortical+plasticity+in+vivo.">Astrocyte calcium signaling transforms cholinergic modulation to cortical plasticity in vivo.</a> Journal of Neuroscience. 31 (49), 18155-18165 (2011).</li><li>Yang, G., Pan, F., Gan, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stably+maintained+dendritic+spines+are+associated+with+lifelong+memories.">Stably maintained dendritic spines are associated with lifelong memories.</a> Nature. 462 (7275), 920-924 (2009).</li><li>Zuo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+long-term+dendritic+spine+stability+in+diverse+regions+of+cerebral+cortex.">Development of long-term dendritic spine stability in diverse regions of cerebral cortex.</a> Neuron. 46 (2), 181-189 (2005).</li><li>Grutzendler, J., Gan, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+imaging+of+synaptic+plasticity+and+pathology+in+the+living+mouse+brain.">Two-photon imaging of synaptic plasticity and pathology in the living mouse brain.</a> NeuroRx. 3 (4), 489-496 (2006).</li><li>Isshiki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+synapse+remodelling+as+a+common+phenotype+in+mouse+models+of+autism.">Enhanced synapse remodelling as a common phenotype in mouse models of autism.</a> Nature Communications. 5, 4742 (2014).</li><li>Cruz-Martin, A., Crespo, M., Portera-Cailliau, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+stabilization+of+dendritic+spines+in+fragile+X+mice.">Delayed stabilization of dendritic spines in fragile X mice.</a> Journal of Neuroscience. 30 (23), 7793-7803 (2010).</li><li>Mostany, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+synaptic+dynamics+during+normal+brain+aging.">Altered synaptic dynamics during normal brain aging.</a> Journal of Neuroscience. 33 (9), 4094-4104 (2013).</li><li>Trachtenberg, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+in+vivo+imaging+of+experience-dependent+synaptic+plasticity+in+adult+cortex.">Long-term in vivo imaging of experience-dependent synaptic plasticity in adult cortex.</a> Nature. 420 (6917), 788-794 (2002).</li><li>Agarwal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+opening+of+the+mitochondrial+permeability+transition+pore+induces+microdomain+calcium+transients+in+astrocyte+processes.">Transient opening of the mitochondrial permeability transition pore induces microdomain calcium transients in astrocyte processes.</a> Neuron. 93 (3), 587-605 (2017).</li><li>Bindocci, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+Ca2++imaging+advances+understanding+of+astrocyte+biology.">Three-dimensional Ca2+ imaging advances understanding of astrocyte biology.</a> Science. 356 (6339), (2017).</li><li>Dana, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-performance+calcium+sensors+for+imaging+activity+in+neuronal+populations+and+microcompartments.">High-performance calcium sensors for imaging activity in neuronal populations and microcompartments.</a> Nature Methods. 16 (7), 649-657 (2019).</li><li>Han, S., Yang, W., Yuste, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-color+volumetric+imaging+of+neuronal+activity+of+cortical+columns.">Two-color volumetric imaging of neuronal activity of cortical columns.</a> Cell Reports. 27 (7), 2229-2240 (2019).</li><li>Nimmerjahn, A., Kirchhoff, F., Helmchen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resting+microglial+cells+are+highly+dynamic+surveillants+of+brain+parenchyma+in+vivo.">Resting microglial cells are highly dynamic surveillants of brain parenchyma in vivo.</a> Science. 308 (5726), 1314-1318 (2005).</li><li>Stowell, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noradrenergic+signaling+in+the+wakeful+state+inhibits+microglial+surveillance+and+synaptic+plasticity+in+the+mouse+visual+cortex.">Noradrenergic signaling in the wakeful state inhibits microglial surveillance and synaptic plasticity in the mouse visual cortex.</a> Nature Neuroscience. 22 (11), 1782-1792 (2019).</li><li>Madisen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+and+high-throughput+Cre+reporting+and+characterization+system+for+the+whole+mouse+brain.">A robust and high-throughput Cre reporting and characterization system for the whole mouse brain.</a> Nature Neuroscience. 13 (1), 133-140 (2010).</li><li>Chen, S. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subtype-specific+plasticity+of+inhibitory+circuits+in+motor+cortex+during+motor+learning.">Subtype-specific plasticity of inhibitory circuits in motor cortex during motor learning.</a> Nature Neuroscience. 18 (8), 1109-1115 (2015).</li><li>Stobart, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+circuit+activity+evokes+rapid+astrocyte+calcium+signals+on+a+similar+timescale+to+neurons.">Cortical circuit activity evokes rapid astrocyte calcium signals on a similar timescale to neurons.</a> Neuron. 98 (4), 726-735 (2018).</li><li>Matsui, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+in+utero+electroporation:+controlled+spatiotemporal+gene+transfection.">Mouse in utero electroporation: controlled spatiotemporal gene transfection.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (54), e3024 (2011).</li><li>Roth, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+synaptic+AMPA+receptor+plasticity+during+motor+learning.">Cortical synaptic AMPA receptor plasticity during motor learning.</a> Neuron. 105 (5), 895-908 (2020).</li><li>Stogsdill, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocytic+neuroligins+control+astrocyte+morphogenesis+and+synaptogenesis.">Astrocytic neuroligins control astrocyte morphogenesis and synaptogenesis.</a> Nature. 551 (7679), 192-197 (2017).</li><li>Suresh, A., Dunaevsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+synaptic+AMPAR+and+spine+dynamics:+impairments+in+the+FXS+mouse.">Relationship between synaptic AMPAR and spine dynamics: impairments in the FXS mouse.</a> Cerebral Cortex. 27 (8), 4244-4256 (2017).</li><li>Yang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcranial+two-photon+imaging+of+synaptic+structures+in+the+cortex+of+awake+head-restrained+mice.">Transcranial two-photon imaging of synaptic structures in the cortex of awake head-restrained mice.</a> Methods in Molecular Biology. 1010, 35-43 (2013).</li><li>Dombeck, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+large-scale+neural+activity+with+cellular+resolution+in+awake,+mobile+mice.">Imaging large-scale neural activity with cellular resolution in awake, mobile mice.</a> Neuron. 56 (1), 43-57 (2007).</li><li>Kislin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flat-floored+air-lifted+platform:+a+new+method+for+combining+behavior+with+microscopy+or+electrophysiology+on+awake+freely+moving+rodents.">Flat-floored air-lifted platform: a new method for combining behavior with microscopy or electrophysiology on awake freely moving rodents.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (88), e51869 (2014).</li><li>Holtmaat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=high-resolution+imaging+in+the+mouse+neocortex+through+a+chronic+cranial+window.">high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window.</a> Nature Protocols. 4 (8), 1128-1144 (2009).</li><li>Hauglund, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meningeal+lymphangiogenesis+and+enhanced+glymphatic+activity+in+mice+with+chronically+implanted+EEG+electrodes.">Meningeal lymphangiogenesis and enhanced glymphatic activity in mice with chronically implanted EEG electrodes.</a> Journal of Neuroscience. 40 (11), 2371-2380 (2020).</li><li>De Paola, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+type-specific+structural+plasticity+of+axonal+branches+and+boutons+in+the+adult+neocortex.">Cell type-specific structural plasticity of axonal branches and boutons in the adult neocortex.</a> Neuron. 49 (6), 861-875 (2006).</li><li>Cheng, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+two-photon+calcium+imaging+at+different+depths+with+spatiotemporal+multiplexing.">Simultaneous two-photon calcium imaging at different depths with spatiotemporal multiplexing.</a> Nature Methods. 8 (2), 139-142 (2011).</li><li>Yang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thinned-skull+cranial+window+technique+for+long-term+imaging+of+the+cortex+in+live+mice.">Thinned-skull cranial window technique for long-term imaging of the cortex in live mice.</a> Nature Protocols. 5 (2), 201-208 (2010).</li><li>Shih, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+polished+and+reinforced+thinned-skull+window+for+long-term+imaging+of+the+mouse+brain.">A polished and reinforced thinned-skull window for long-term imaging of the mouse brain.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (61), e3742 (2012).</li><li>Helm, P. J., Ottersen, O. P., Nase, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+optical+properties+of+the+mouse+cranium--implications+for+in+vivo+multi+photon+laser+scanning+microscopy.">Analysis of optical properties of the mouse cranium--implications for in vivo multi photon laser scanning microscopy.</a> Journal of Neuroscience Methods. 178 (2), 316-322 (2009).</li><li>Stobart, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+in+vivo+calcium+imaging+of+astrocytes+reveals+distinct+cellular+compartment+responses+to+sensory+stimulation.">Long-term in vivo calcium imaging of astrocytes reveals distinct cellular compartment responses to sensory stimulation.</a> Cerebral Cortex. 28 (1), 184-198 (2018).</li><li>Pryazhnikov, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+two-photon+imaging+in+somatosensory+cortex+of+behaving+mice+reveals+dendritic+spine+formation+enhancement+by+subchronic+administration+of+low-dose+ketamine.">Longitudinal two-photon imaging in somatosensory cortex of behaving mice reveals dendritic spine formation enhancement by subchronic administration of low-dose ketamine.</a> Scientific Reports. 8 (1), 6464 (2018).</li><li>Thrane, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+anesthesia+selectively+disrupts+astrocyte+calcium+signaling+in+the+awake+mouse+cortex.">General anesthesia selectively disrupts astrocyte calcium signaling in the awake mouse cortex.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (46), 18974-18979 (2012).</li><li>Paukert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Norepinephrine+controls+astroglial+responsiveness+to+local+circuit+activity.">Norepinephrine controls astroglial responsiveness to local circuit activity.</a> Neuron. 82 (6), 1263-1270 (2014).</li><li>Delekate, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabotropic+P2Y1+receptor+signalling+mediates+astrocytic+hyperactivity+in+vivo+in+an+Alzheimer's+disease+mouse+model.">Metabotropic P2Y1 receptor signalling mediates astrocytic hyperactivity in vivo in an Alzheimer's disease mouse model.</a> Nature Communications. 5, 5422 (2014).</li></ol>

यहां, हमने क्रोनिक कपाल खिड़कियों के आरोपण के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया है, जो जागने में कॉर्टिकल एस्ट्रोसाइट्स और न्यूरॉन्स के विवो इमेजिंग में, हवा से उठाए गए घर के पिंजरे पर सिर-संयमित चूहो?...

चूहों के प्रांतस्था में विवो मल्टीफोटॉन प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी में प्रदर्शन करने की क्षमता सेलुलर सिग्नलिंग और संरचना 1,2,3,4,5,6,7,8,9, रोग विकृति 10,11, और सेलुलर विकास 12,13 के अध्ययन के लिए सर्वोपरि है . क्रोनिक कपाल खिड़कियों के आरोपण के साथ, अनुदैर्ध्य इमेजिंग संभव है, जो जीवित जानवरों में दिनों, हफ्तों या महीनोंके लिए कॉर्टिकल क्षेत्रों की बार-बार इमेजिंग की अनुमति देता है। मल्टीफोटॉन माइक्रोस्कोपी विवो में के लिए आदर्श है, बेहतर गहराई की जांच के कारण बार-बार इमेजिंग और उपयोग किए जाने वाले अवरक्त लेजर से जुड़े कम फोटोडैमेज। यह विभिन्न कॉर्टिकल क्षेत्रों में विशिष्ट कोशिकाओं के आणविक और सेलुलर गतिशीलता के अध्ययन की अनुमति देता है।
मल्टीफोटॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग चूहों में न्यूरोनल और ग्लियाल कोशिकाओं के विवो इमेजिंग में15,16,17,18,19,20 के लिए किया गया है। विशेष सेल प्रकारों और रुचि के क्षेत्रों को लेबल करने के लिए विभिन्न रणनीतियों को लागू किया जा सकता है। एक आम दृष्टिकोण क्रे-लोक्स पुनर्संयोजन प्रणाली का उपयोग करके एक सेल-विशिष्ट तरीके से आनुवंशिक रूप से एन्कोडेड फ्लोरोसेंट प्रोटीन की अभिव्यक्ति को चलाना है। यह आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों के साथ किया जा सकता है, उदाहरण के लिए, tdTomato "floxed" माउस (Ai14) को पार करना एक माउस के साथ ब्याज21 के प्रमोटर के तहत क्रे-रिकॉम्बिनेज को व्यक्त करता है। वैकल्पिक रूप से, सेल- और साइट-विशिष्ट लेबलिंग को वायरल इंजेक्शन के साथ प्राप्त किया जा सकता है। यहां, एक वायरस एन्कोडिंग क्रे रीकॉम्बिनेज एक सेल-विशिष्ट प्रोमोटर के तहत और एक वायरस एन्कोडिंग ब्याज के एक floxed जीन को एक परिभाषित क्षेत्र में इंजेक्ट किया जाता है। दोनों वायरल वैक्टर प्राप्त करने वाले उपयुक्त सेल प्रकार तब वांछित जीन (ओं) को व्यक्त करेंगे। ये जीन संरचनात्मक मार्कर हो सकते हैं, जैसे कि टीडीटोमेटो, सेलुलर आकृति विज्ञान22 या आनुवंशिक रूप से एन्कोडेड कैल्शियम संकेतकों (जीईसीआई) में परिवर्तन को देखने के लिए, जैसे कि जीसीएएमपी और / या आरसीएएमपी, कैल्शियम गतिशीलता23 की जांच करने के लिए। आनुवांशिक पुनर्संयोजन के तरीकों को व्यक्तिगत रूप से या एक या अधिक सेल प्रकारों को लेबल करने के लिए संयोजन में लागू किया जा सकता है। एक तीसरा दृष्टिकोण, ट्रांसजेनिक चूहों या वायरल निर्माणों (जिसमें सीमित पैकेजिंग क्षमता है) की आवश्यकता नहीं है, डीएनए निर्माणों के गर्भाशय इलेक्ट्रोपोरेशन में है। इलेक्ट्रोपोरेशन के समय के आधार पर, विभिन्न सेलप्रकारों को 25,26,27 लक्षित किया जा सकता है।
मल्टीफोटॉन इमेजिंग करते समय, चूहों को जागते समय या एनेस्थेटिक करते समय चित्रित किया जा सकता है। जागृत चूहों की इमेजिंग एक संलग्न सिर प्लेट28 के माध्यम से माउस को सुरक्षित करके की जा सकती है। इस दृष्टिकोण को तरीकों का उपयोग करके जानवर के अपेक्षाकृत मुक्त आंदोलन की अनुमति देकर कम तनावपूर्ण बनाया जाता है, जैसे कि फ्री-फ्लोटिंग, एयर-समर्थित स्टायरोफोम बॉल्स29, फ्री-फ्लोटिंगट्रेडमिल्स 1, या एक एयर-लिफ्टेड होम केज सिस्टम जहां चूहों को एक संलग्न हेड प्लेट द्वारा बांधा जाता है और एक खुले कक्ष30 में स्थानांतरित करने की अनुमति दी जाती है। इन इमेजिंग स्थितियों में से प्रत्येक के लिए, पहले इमेजिंग सेटअप के लिए चूहों को आदत डालना आवश्यक होगा। यह पेपर हवा से उठाए गए घर के पिंजरे की प्रणाली का उपयोग करके आदत और इमेजिंग प्रक्रिया का वर्णन करता है।
यह प्रोटोकॉल कॉर्टेक्स में विवो इमेजिंग में अनुदैर्ध्य के लिए एक पुरानी कपाल खिड़की के आरोपण का वर्णन करता है। यहां, हम चूहों का उपयोग करेंगे जो कैल्शियम सिग्नलिंग गतिशीलता की निगरानी करने के लिए एस्ट्रोसाइट्स में GCaMP6f को सशर्त रूप से व्यक्त करते हैं। इसके अलावा, यह पेपर न्यूरॉन्स के लिए एक लेबल के रूप में टीडीटोमेटो का उपयोग करके वायरल इंजेक्शन के लिए प्रक्रिया का वर्णन करता है। यह न्यूरोनल सिनैप्टिक संरचना में परिवर्तन और / या एक संरचनात्मक मार्कर के रूप में उपलब्धता के निर्धारण की अनुमति देता है जो एक ही एस्ट्रोसाइट की बार-बार इमेजिंग को सक्षम बनाता है। प्रोटोकॉल के दौरान, मल्टीफोटॉन माइक्रोस्कोपी से प्राप्त छवियों की सर्वोत्तम संभव गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण चरणों पर प्रकाश डाला जाएगा।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15o Pointed Blade</td>
			<td>Surgistar</td>
			<td>6500</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>19 G Needles</td>
			<td>BD</td>
			<td>305186</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AAV1-CAG-FLEX-tdTomato</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>28306-AAV1</td>
			<td>Viral Vector</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AAV1-CaMKII-0-4-Cre</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>105558-AAV1</td>
			<td>Viral Vector</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acteone</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A16P4</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol Prep Pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Covidien 5750</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beveler</td>
			<td>Narishige</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosilicate Glass</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW100F-4</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbide Burs</td>
			<td>SS White Dental</td>
			<td>14717</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen (Rimadyl), 50 mg/mL</td>
			<td>Zoetis Mylan Institutional, LLC.</td>
			<td></td>
			<td>Drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compressed Air</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23-022-523</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Tip Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>836-WC NO BINDER</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover Glass, No. 1 thickness, 3 mm/5 mm</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0720, 64-0700</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dental Drill</td>
			<td>Aseptico</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone, 4 mg/mL</td>
			<td>Mylan Institutional, LLC.</td>
			<td></td>
			<td>Drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Duralay Liquid&#160; (dental cement liquid)</td>
			<td>Patterson Dental</td>
			<td>602-8518</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Duralay Powder&#160; (dental cement powder)</td>
			<td>Patterson Dental</td>
			<td>602-7932</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enrofloxacin, 2.27%</td>
			<td>Bayer</td>
			<td></td>
			<td>Drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber Lite High Intensity Illuminator</td>
			<td>Dolan-Jenner Industries</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (Large)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>14099</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (Small)</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501764</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GCaMP6f B6; 129S-Gt(ROSA)26Sortm95.1(CAGGCaMP6f)Hze/J</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>Stock No: 024105</td>
			<td>Mouse line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Germinator</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GLAST-CreER Tg(Slc1a3-cre/ERT) 1Nat/J</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>Stock No: 012586</td>
			<td>Mouse Line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Headplate</td>
			<td>Neurotar</td>
			<td>Model 1, Model 3</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501705</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Holder for 15o Pointed Blade</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501247</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Holder for Scalpel Blades</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500236</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine Prep Pads</td>
			<td>Avantor</td>
			<td>15648-926</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td></td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane table top system with Induction Box</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane Vaporizer</td>
			<td>SurgiVet</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Krazy Glue</td>
			<td>Office Depot</td>
			<td>KG517</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loctite 401</td>
			<td>Henkel</td>
			<td>40140</td>
			<td>fast-curing instant adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loctite 454</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9194415</td>
			<td>cyanoacrylate adhesive gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipette Puller</td>
			<td>Sutter Instruments</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiphoton Microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrogen</td>
			<td>Matheson</td>
			<td>NI M200</td>
			<td>Gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen</td>
			<td>Matheson</td>
			<td>OX M250</td>
			<td>Gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Picospritzer</td>
			<td>Parker</td>
			<td></td>
			<td>intracellular microinjection dispense system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Tips</td>
			<td>Rainin</td>
			<td>17014340</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Hair Trimmer</td>
			<td>Wahl</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (0.9% Sodium Chloride)</td>
			<td>Med Vet International</td>
			<td>RX0.9NACL-30BAC</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blades, Size 11</td>
			<td>Integra</td>
			<td>4-111</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>503667</td>
			<td>Surgery Tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic Instrument</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sugi Sponge Strips (sponge strips)</td>
			<td>Kettenbach Dental</td>
			<td>31002</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SURGIFOAM (gel foam)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>1972</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe with 26 G Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>309625</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T5648-1G</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ti:Sapphire Laser</td>
			<td>Coherent</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer Pipettes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-711-9AM</td>
			<td>Surgery Supply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Blanket</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylocaine MPF with Epinephrine (1:200,000), 10 mg/mL</td>
			<td>Fresenius Kabi USA</td>
			<td></td>
			<td>Drug</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation of a cranial window for repeated in vivo imaging in awake mice

जानवरों के व्यवहार में न्यूरॉन्स और ग्लिया के सेलुलर फिजियोलॉजी को पूरी तरह से समझने के लिए, उनकी आकृति विज्ञान की कल्पना करना और चूहों के व्यवहार में विवो में उनकी गतिविधि को रिकॉर्ड करना आवश्यक है। यह पेपर जागने, सिर-संयमित चूहों में मस्तिष्क कोशिकाओं के अनुदैर्ध्य इमेजिंग के लिए अनुमति देने के लिए एक पुरानी कपाल खिड़की के आरोपण के लिए एक विधि का वर्णन करता है। आनुवांशिक रणनीतियों और वायरल इंजेक्शन के साथ संयोजन में, संरचनात्मक या शारीरिक मार्करों के साथ विशिष्ट कोशिकाओं और रुचि के क्षेत्रों को लेबल करना संभव है। यह प्रोटोकॉल दर्शाता है कि एक कपाल खिड़की के माध्यम से दोनों कोशिकाओं की एक साथ इमेजिंग के लिए कॉर्टेक्स में GCaMP6-व्यक्त एस्ट्रोसाइट्स के आसपास के क्षेत्र में न्यूरॉन्स को लेबल करने के लिए वायरल इंजेक्शन को कैसे संयोजित किया जाए। एक ही कोशिकाओं की मल्टीफोटॉन इमेजिंग को जागने, जानवरों के व्यवहार में दिनों, हफ्तों या महीनों के लिए किया जा सकता है। यह दृष्टिकोण शोधकर्ताओं को वास्तविक समय में सेलुलर गतिशीलता को देखने के लिए एक विधि प्रदान करता है और तंत्रिका विज्ञान में कई सवालों के जवाब देने के लिए लागू किया जा सकता है।

कपाल खिड़की की गुणवत्ता का आकलन इस बात से किया जा सकता है कि न्यूरोनल संरचनाएं कितनी कुरकुरा दिखाई देती हैं। एक अच्छी खिड़की में, डेंड्राइटिक स्पाइन स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं (चित्रा 1)। स?...

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Implantation of a Cranial Window for Repeated In Vivo Imaging in Awake Mice

यहां प्रस्तुत किया गया है जागते हुए, सिर-संयमित चूहों में मस्तिष्क कोशिकाओं के अनुदैर्ध्य इमेजिंग के लिए एक पुरानी कपाल खिड़की के आरोपण के लिए एक प्रोटोकॉल है।

जागते चूहों में वीवो इमेजिंग में दोहराया के लिए एक कपाल खिड़की का आरोपण

To fully understand the cellular physiology of neurons and glia in behaving animals, it is necessary to visualize their morphology and record their ...

प्रोटोकॉल का वर्णन करता है कि वायरल इंजेक्शन कैसे करें और जागते हुए, सिर-संयमित चूहों में मस्तिष्क कोशिकाओं की इमेजिंग के लिए एक कपाल खिड़की कैसे प्रत्यारोपित करें। इस विधि का लाभ यह है कि न्यूरॉन्स और एस्ट्रोसाइट्स की संरचना और गतिविधि को कई सत्रों में बार-बार चित्रित किया जा सकता है। इस दृष्टिकोण का उपयोग यह निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है कि तंत्रिका कोशिकाओं को न्यूरोडेवलपमेंटल, या न्यूरोडीजेनेरेटिव विकारों के मॉडल में कैसे बदल दिया जाता है, या क्या अनुभव-निर्भर प्लास्टिसिटी बिगड़ा हुआ है।थूथन क्लैंप और कान सलाखों का उपयोग करके एक स्टीरियोटैक्सिक फ्रेम के लिए एक एनेस्थेटिक माउस को सुरक्षित करके शुरू करें। बाँझ सर्जिकल उपकरणों का उपयोग करते हुए, काटें और ललाट टांके पूर्वकाल से त्वचा को ब्रैग्मा तक लैम्ब्डा के पीछे ले जाएं। एक बाँझ आकार 11 कार्बन स्टील सर्जिकल ब्लेड का उपयोग करके, धीरे से खोपड़ी से सभी संयोजी ऊतक खुरचना।एक दंत ड्रिल की मदद से, धीरे-धीरे हड्डी के पतले होने की सुविधा के लिए संकेंद्रित हलकों में उद्घाटन की रूपरेखा के साथ खोपड़ी की हड्डी को ड्रिल करें। प्रत्येक संकेंद्रित पास के बाद, ड्रिल किए गए क्षेत्र में एक बूंद, या खारा के दो जोड़ें, और ड्रिलिंग को फिर से शुरू करने से पहले खारा को कम से कम 10 सेकंड तक बैठने की अनुमति दें। धीरे से ठीक संदंश के साथ खोपड़ी की हड्डी के केंद्रीय क्षेत्र पर धक्का यह जांचने के लिए कि खोपड़ी पर्याप्त रूप से पतली है और चलती है।सुनिश्चित करें कि अंतर्निहित वास्कुलचर जहां ड्रिलिंग हुई वह बरकरार है, और यह कि हड्डी टूट नहीं गई है। ध्यान से पतली हड्डी में एक लघु 15 डिग्री नुकीला ब्लेड डालें और कटौती करें और किसी भी रक्तस्राव को रोकने के लिए खारा में भिगोए गए जेल फोम का उपयोग करें। संदंश का उपयोग करना, सावधानीपूर्वक उठाना और हड्डी को हटाना, ड्यूरा मेटर को नुकसान न पहुंचाने का ख्याल रखना।इंजेक्शन के लिए, वायरस मिश्रण के साथ 20-माइक्रोमीटर टिप के साथ एक बाँझ बेवेल ग्लास पिपेट भरें। फिर मस्तिष्क की सतह को छूने के लिए पिपेट को कम करें, और परत 2/3 इंजेक्शन के लिए अतिरिक्त 200 से 300 माइक्रोमीटर के लिए कम करना जारी रखें। एक इंट्रासेल्युलर माइक्रोइंजेक्शन डिस्पेंस सिस्टम का उपयोग करके, दबाव दो मिनट में 12 से 15 बार सिस्टम को इंजेक्ट करता है।कपाल खिड़की आरोपण के लिए, कवर ग्लास को खोपड़ी में खोलने के ऊपर रखें। यह सुनिश्चित करने के लिए संदंश का उपयोग करें कि कांच उद्घाटन पर फ्लश है। खोपड़ी के लिए कांच की खिड़की के किनारों को सील करने के लिए, कांच की सतह की परिधि के चारों ओर साइनोएक्रिलेट चिपकने वाला जेल लागू करें।चिपकने वाले जेल पर, गोंद की एक परत लागू करें। फिर डेंटल सीमेंट लिक्विड की एक परत डालें। जब दंत सीमेंट सख्त हो जाता है, तो हेलीकाप्टर प्रकार की हेड प्लेट के केंद्रीय उद्घाटन के चारों ओर गोंद की एक पतली परत लागू करें, और कवर ग्लास पर उपयुक्त आकार की हेलीकॉप्टर प्रकार की हेड प्लेट रखें।गोंद को सूखने दें। 0.1 मिलीलीटर निशान तक एक 1.5-मिलीलीटर माइक्रोफ्यूज ट्यूब में दंत सीमेंट पाउडर जोड़ें। पाउडर में तेजी से इलाज तत्काल चिपकने की सात से आठ बूंदों को मिलाएं, और परिणामी मिश्रण को 19 गेज सुई के साथ एक मिलीलीटर सिरिंज में खींचें जिसे एक बड़ा उद्घाटन बनाने के लिए काटा गया है।हेलीकाप्टर बार के पार्श्व छेद के माध्यम से पाउडर मिश्रण इंजेक्ट करें जब तक कि यह दोनों तरफ से रिस न जाए। खोपड़ी के लिए सिर की प्लेट को जकड़ने के लिए उजागर खोपड़ी के बाकी हिस्सों में दंत सीमेंट चिपकने वाला मिश्रण लागू करें। माउस को कपड़े में लपेटें, और इसे अपने हेड प्लेट के माध्यम से एयरलिफ्ट किए गए घर के पिंजरे के सिर के निर्धारण हाथ में सुरक्षित करें, फिर घर के पिंजरे को प्रकाश के संपर्क में छोड़ दें।15 मिनट की आदत के समय के बाद, माउस को घर के पिंजरे से हटा दें। माइक्रोस्कोप के विस्तृत क्षेत्र मोड का उपयोग करते हुए, आसानी से पहचाने जाने योग्य वास्कुलचर के दो से तीन पदों का चयन करें। रक्त वाहिकाओं की छवियों को सहेजें, और मोटर नियंत्रक पर दिखाई देने वाले एक्स और वाई-निर्देशांक रिकॉर्ड करें।न्यूरॉन्स की सिनैप्टिक संरचनाओं की छवि, और एस्ट्रोसाइट्स में GCaMP6f गतिविधि। प्रतिनिधि विश्लेषण में, कपाल खिड़की की गुणवत्ता का मूल्यांकन डेंड्राइट्स और GCaMP6f-व्यक्त एस्ट्रोसाइट्स के दिनों में दोहराए गए इमेजिंग के साथ किया गया था। एक अच्छी खिड़की में, न्यूरोनल संरचनाएं स्पष्ट रूप से दिखाई देने वाली डेंड्राइटिक स्पाइन के साथ कुरकुरा दिखाई दीं।इमेजिंग के दूसरे दिन दो नए स्पाइन दिखाई दिए। केवल एक रीढ़ की हड्डी बनी रही और पांचवें दिन दिखाई दे रही थी। कैल्शियम गतिविधि का अध्ययन एस्ट्रोसाइट्स में विभिन्न समय बिंदुओं पर GCaMP6f को व्यक्त करने के लिए किया गया था।एक लोकोमोशन बाउट के दौरान पूरे सेल को शामिल करने वाली एक वैश्विक घटना देखी गई। इस प्रोटोकॉल के दो महत्वपूर्ण चरण यह हैं कि हड्डी को हटाने से पहले हड्डी को पर्याप्त रूप से पतला करने की आवश्यकता होती है, और उद्घाटन पर कवर ग्लास का उचित प्लेसमेंट होता है। इमेजिंग को व्यवहार विश्लेषण के साथ जोड़ा जा सकता है, या तो इमेजिंग के दौरान, या पोस्ट-बिहेवियर, जैसे कि एक नया मोटर कौशल सीखना, यह निर्धारित करने के लिए कि न्यूरोनल और एस्ट्रोसाइट संरचना और फ़ंक्शन को सीखने से कैसे संशोधित किया जाता है।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Implantation of a Cranial Window for Repeated In Vivo Imaging in Awake Mice

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

A Thin-skull Window Technique for Chronic Two-photon In vivo Imaging of Murine Microglia in Models of Neuroinflammation

जीर्ण दो photon के लिए एक पतली खोपड़ी विंडो तकनीक Vivo में Murine microglia Neuroinflammation के मॉडल में इमेजिंग

Traditionally in neuroscience, in vivo two photon imaging of the murine central nervous system has either involved the use of open-skull1,2 or ...

Multimodal Imaging of Stem Cell Implantation in the Central Nervous System of Mice

चूहे के केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में स्टेम सेल आरोपण के मल्टीमॉडल इमेजिंग

During the past decade, stem cell transplantation has gained increasing interest as primary or secondary therapeutic modality for a variety of diseases, ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

कार्यात्मक न्यूरोइमेजिंग अल्ट्रासोनिक रक्त मस्तिष्क बाधा विघटन और मैंगनीज बढ़ाकर एमआरआई का उपयोग

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Thinned-skull Cortical Window Technique for In Vivo Optical Coherence Tomography Imaging

Thinned-skull Cortical Window Technique for In Vivo Optical Coherence Tomography Imaging

Thinned खोपड़ी Cortical विंडो के लिए तकनीक<em&gt; Vivo में</em&gt; ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी इमेजिंग

Optical coherence tomography (OCT) is a biomedical imaging technique  with high spatial-temporal resolution. With its minimally invasive approach OCT  has ...

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

पार्श्व लगातार कपाल खिड़की तैयारी में सक्षम बनाता है<em&gt; Vivo</em&gt; चूहे में दूरस्थ मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा निम्नलिखित अवलोकन

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

Piezo High Accuracy Surgical Osteal Removal (PHASOR): A Technique for Improved Cranial Window Surgery in Mice

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पीजो उच्च सटीकता सर्जिकल Osteal हटाने (phaser): चूहों में सुधार कपाल खिड़की सर्जरी के लिए एक तकनीक

Multiphoton microscopy has been widely adapted for imaging neurons in vivo. Repeated imaging requires implantation of a cranial window or repeated ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

माउस में लेमिनेक्टॉमी और स्पाइनल कॉर्ड विंडो प्रत्यारोपण

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

वीवो में नवजात चूहों में Cortical न्यूरॉन्स की दो-फोटॉन इमेजिंग

Two-photon imaging is a powerful tool for the in vivo analysis of neuronal circuits in the mammalian brain. However, a limited number of in vivo imaging ...

In vivo Calcium Imaging in Mouse Inferior Olive

In vivo Calcium Imaging in Mouse Inferior Olive

वीवो में माउस अवर जैतून में कैल्शियम इमेजिंग

Inferior olive (IO), a nucleus in the ventral medulla, is the only source of climbing fibers that form one of the two input pathways entering the ...

Construction and Implementation of Carbon Fiber Microelectrode Arrays for Chronic and Acute In Vivo Recordings

Construction and Implementation of Carbon Fiber Microelectrode Arrays for Chronic and Acute In Vivo Recordings

वीवो रिकॉर्डिंग में क्रोनिक और एक्यूट के लिए कार्बन फाइबर माइक्रोइलेक्ट्रोड सरणी का निर्माण और कार्यान्वयन

Multichannel electrode arrays offer insight into the working brain and serve to elucidate neural processes at the single-cell and circuit levels. ...