Name: an intact pericardium ischemic rodent model
Uploaded: 2021-09-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

تم استخدام ذكور وإناث الفئران C57BL / 6J بين 8-14 أسبوعا من العمر لهذه التجارب. حصل هذا البروتوكول على موافقة أخلاقية من لجنة رعاية الحيوان في جامعة كالجاري ويتبع جميع إرشادات رعاية الحيوان.
1. إعداد الماوس والجراحة
<ol><li>تعقيم الأدوات الجراحية (عن طريق معقم الخرز أو الأوتوكلاف).</li...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141, 139 (2020).</li><li>Iismaa, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+regenerative+mechanisms+across+different+mammalian+tissues.">Comparative regenerative mechanisms across different mammalian tissues.</a> NPJ Regenerative Medicine. 3 (6), (2018).</li><li>Bayat, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+heart+failure+after+myocardial+infarction+in+mice.">Progressive heart failure after myocardial infarction in mice.</a> Basic Research in Cardiology. 97 (3), 206-213 (2002).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. 52, 2581 (2011).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Borlaug, B. A., Reddy, Y. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+pericardium+in+heart+failure:+Implications+for+pathophysiology+and+treatment.">The role of the pericardium in heart failure: Implications for pathophysiology and treatment.</a> JACC Heart Failure. 7 (7), 574-585 (2019).</li><li>Pfaller, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+pericardium+for+cardiac+biomechanics:+from+physiology+to+computational+modeling.">The importance of the pericardium for cardiac biomechanics: from physiology to computational modeling.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 18 (2), 503-529 (2019).</li><li>Deniset, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata6(+)+Pericardial+Cavity+Macrophages+Relocate+to+the+Injured+Heart+and+Prevent+Cardiac+Fibrosis.">Gata6(+) Pericardial Cavity Macrophages Relocate to the Injured Heart and Prevent Cardiac Fibrosis.</a> Immunity. 51 (1), 131-140 (2019).</li><li>Weber, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+targeting+of+the+pleural+space+by+intercostal+approach.">Immune targeting of the pleural space by intercostal approach.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 14 (2015).</li><li>Nakatani, T., Shinohara, H., Fukuo, Y., Morisawa, S., Matsuda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pericardium+of+rodents:+pores+connect+the+pericardial+and+pleural+cavities.">Pericardium of rodents: pores connect the pericardial and pleural cavities.</a> The Anatomical Record. 220, 132-137 (1988).</li><li>Tyberg, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+pericardial+pressure+and+right+atrial+pressure:+an+intraoperative+study.">The relationship between pericardial pressure and right atrial pressure: an intraoperative study.</a> Circulation. 73, 428-432 (1986).</li><li>Hamilton, D. R., Sas, R., Semlacher, R. A., Kieser Prieur, T. M., Tyberg, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+left+and+right+pericardial+pressures+in+humans:+an+intraoperative+study.">The relationship between left and right pericardial pressures in humans: an intraoperative study.</a> The Canadian Journal of Cardiology. 27, 346-350 (2011).</li><li>Park, D. S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pericardial+proteoglycan+4+(lubricin):+Implications+for+postcardiotomy+intrathoracic+adhesion+formation.">Human pericardial proteoglycan 4 (lubricin): Implications for postcardiotomy intrathoracic adhesion formation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 156 (4), 1598-1608 (2018).</li></ol>

يعد تحريض MI في التامور المغلق في القوارض فريدا ويمكن أن يكون له تطبيقات مهمة محتملة. يعتمد الإجراء بشكل كبير على معرفة الجراح بنموذج القوارض وتشريح قلب القوارض. يعتمد النجاح أيضا على الرعاية المقدمة خلال ثلاث خطوات حاسمة: شق العضلات الوربية وتراجع الضلع (الخطوات 1.11-1.13) ، وإنشاء الاحتشاء (ا?...

حتى يومنا هذا ، يتم التعرف على أمراض القلب والأوعية الدموية (CVD) باعتبارها السبب الرئيسي للوفاة على مستوى العالم ، مما يؤدي إلى عبء مالي كبير وانخفاض في نوعية حياة المريض1. مرض الشريان التاجي (CAD) هو نوع فرعي من الأمراض القلبية الوعائية ويلعب دورا أساسيا في تطور احتشاء عضلة القلب (MI) ، وهو مساهم رئيسي في الوفيات. بحكم التعريف ، ينتج MI عن إصابة لا رجعة فيها لأنسجة عضلة القلب بسبب الظروف المطولة لنقص التروية ونقص الأكسجة. تفتقر أنسجة عضلة القلب إلى القدرة على التجديد ، لذا فإن الإصابات دائمة وتؤدي إلى استبدال عضلة القلب بندبة ليفية يمكن أن تكون وقائية في البداية ولكنها تساهم في النهاية في إعادة تشكيل القلب الضار وفشل القلب في نهاية المطاف2.
على الرغم من أن إدارة المرضى الذين يعانون من CAD قد تحسنت بشكل كبير خلال العقود القليلة الماضية ، إلا أن قصور القلب المزمن (CHF) الثانوي لنقص التروية يؤثر على العديد من المرضى في جميع أنحاء العالم. للوقاية من هذا الوباء وإدارته ، من الضروري فهم الآليات الأساسية على نطاق أوسع وتطوير مناهج علاجية جديدة. علاوة على ذلك ، تسلط النتائج السابقة الضوء على قيود العلاج الجهازي وضرورة تطوير بدائل دقيقة. بالنظر إلى أن التحقيق في العواقب الجزيئية ل MI في البشر يتأثر بالقدرة على الوصول إلى الأنسجة المحتشدة ، فإن النماذج الحيوانية التي تلخص خصائص وتطور MI البشري و CHF المتعلقة بالأمراض القلبية الوعائية لا غنى عنها.
نظرا لأن النماذج الحيوانية المثالية تشبه إلى حد كبير الاضطراب البشري للخصائص الهيكلية والوظيفية ، يجب أن توجه مسببات المرض تصورها. في CAD ، هو تضيق تصلب الشرايين المزمن للشرايين التاجية أو انسداد الخثار الحاد. تم تطوير طرق مختلفة وتطبيقها في أنواع مختلفة من المختبر للحث على تضييق الشريان التاجي أو انسداده. يمكن تصنيف هذه الاستراتيجيات على نطاق واسع إلى مجموعتين: (1) التلاعب الميكانيكي للشريان التاجي للحث على MI و (2) تسريع تصلب الشرايين لتسهيل تضييق الشريان التاجي مما يؤدي إلى MI. تتضمن الاستراتيجية الأولى عادة إما ربط الشريان التاجي أو وضع دعامة داخل الشريان. يميل النهج الثاني إلى الاعتماد على تعديل النظام الغذائي للحيوان ليشمل الأطعمة الغنية بالدهون / الكوليسترول. بعض القيود على هذا النهج الأخير تشمل عدم السيطرة على توقيت وموقع انسداد الشريان التاجي.
في المقابل ، فإن الحث الجراحي ل MI أو نقص التروية في نموذج حيواني له العديد من المزايا ، مثل الموقع والتوقيت الدقيق ومدى الحدث التاجي ، مما يؤدي إلى نتائج أكثر قابلية للتكرار. الطريقة الأكثر استخداما هي الربط الجراحي للشريان التاجي النازل الأمامي الأيسر (LAD). تلخص هذه النماذج الاستجابات البشرية للإصابة الإقفارية الحادة ، بالإضافة إلى التقدم إلىCHF 3. تم تطوير جراحة LAD على الحيوانات الصغيرة مثل القوارض في البداية في الحيوانات الكبيرة ، وأصبحت أكثر جدوى مع التقدم التكنولوجي4. في إنشاء مثل هذه النماذج ، تم تفضيل الفئران لأسباب مختلفة ، بما في ذلك توافرها النسبي ، وانخفاض النفقات في السكن ، وقدرتها على التلاعب الجيني.
تتطلب النماذج الجراحية المعاصرة لأمراض القلب الإقفارية باستخدام انسداد LAD من الباحث فتح التامور لربط الشريان بشكل مؤقت أو دائم5. تؤدي هذه الاستراتيجيات إلى تعطيل مساحة التامور ، والتي تلعب وظيفة ميكانيكية وتزليق بشكل أساسي لضمان وظيفة القلب المناسبة. عيب آخر لفتح التامور هو فقدان سائل التامور الأصلي للحيوان بمكوناته الخلوية والبروتينية المختلفة 6,7. ردا على ذلك ، تم تطوير طريقة للحث على MI مع الحفاظ على التامور سليمة من قبلنا. بالإضافة إلى تقليل اضطراب هذه البيئة المتجانسة ، يسمح هذا النهج بوضع علامات على خلايا معينة وتتبعها بعد التسبب في MI. بالإضافة إلى ذلك ، يمثل هذا النهج بشكل أفضل إصابة نقص تروية عضلة القلب في البيئة البشرية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Steri-350 Bead Sterilizer</td>
			<td>Inotech</td>
			<td>NC9449759</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-949</td>
			<td>Falcon, 352340</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-952</td>
			<td>Falcon, 352350</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W Catheter Needle 24 G X 3/4&#34;</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (10% povidone-iodine topical solution)</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>104826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNP Ophthalmic Ointment</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>17909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22625101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCR103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase XI</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C7657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 taper needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>GL-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - PC-13 cutting needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>SL-1659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11009-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Mounting Medium</td>
			<td>Agilen</td>
			<td>CS70330-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 100%</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MFCD00003568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon 8-0 Ethilon Suture - BV-130-4 taper needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Inc.</td>
			<td>2815G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Optic Light</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2208502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite&#174; YG Carboxylate Microspheres 1.00 &#181;m</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>15702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td>Model 150-ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>H4272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-0951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane USP, 250 mL</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Fixator Retraction System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18200-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550D- 40 MHz probe</td>
			<td>Fujifilm- Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 Tubing</td>
			<td>Braintree Scienctific, Inc.</td>
			<td>PE10 50 FT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ-1B Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic (10 mL, 0.3mg/mL buprenorphine))</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>124918</td>
			<td>controlled drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100 Software</td>
			<td>Fujifilm-Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intact pericardium ischemic rodent model

أظهر هذا البروتوكول أن التامور ومحتوياته يلعبان دورا أساسيا مضادا للتليف في نموذج القوارض الإقفارية (ربط الشريان التاجي للحث على إصابة عضلة القلب). تتطلب غالبية نماذج احتشاء عضلة القلب قبل السريرية تعطيل سلامة التامور مع فقدان البيئة الخلوية المتجانسة. ومع ذلك ، فقد تم تطوير منهجية مؤخرا من قبلنا للحث على احتشاء عضلة القلب ، مما يقلل من تلف التامور ويحتفظ بعدد الخلايا المناعية المقيمة في القلب. وقد لوحظ تحسن في الانتعاش الوظيفي للقلب في الفئران ذات مساحة التامور السليمة بعد ربط الشريان التاجي. توفر هذه الطريقة فرصة لدراسة الاستجابات الالتهابية في الفضاء التاموري بعد احتشاء عضلة القلب. يمكن الجمع بين التطوير الإضافي لتقنيات وضع العلامات مع هذا النموذج لفهم مصير ووظيفة الخلايا المناعية التامورية في تنظيم الآليات الالتهابية التي تدفع إعادة تشكيل القلب ، بما في ذلك التليف.

تم تحسين نموذج ربط الشريان التاجي المعدل هذا لتحقيق قابلية التكاثر وبقاء الحيوان. ومع ذلك ، نظرا للإصابة الكبيرة التي تحدث في القلب ، ترتبط بعض الوفيات المتوقعة أثناء الجراحة وبعدها بالإجراء. عادة ما يكون معدل الوفيات القياسي أعلى في الذكور (~ 25-35٪) منه في الإناث (~ 10-15٪).
يجب أ...

Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

يحدد هذا البروتوكول خطوات إحداث احتشاء عضلة القلب في الفئران مع الحفاظ على التامور ومحتوياته.

نموذج القوارض الإقفارية التامور سليمة

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

ستسمح لنا هذه الطريقة بتقييم دور تجويف التامور الذي يحيط بالقلب ومحتوياته في إصلاح القلب بعد احتشاء عضلة القلب. بالمقارنة مع طرق ربط الشريان التاجي التقليدية لنمذجة احتشاء عضلة القلب ، تحافظ طريقتنا على تجويف التامور سليما ، مما يسمح بتحديد المحتويات وتتبع أدوارها بعد إصابة نقص تروية القلب. سيوفر فهم مساهمة تجويف التامور واستجابة إصابة القلب رؤى مهمة حول الاستراتيجيات العلاجية التي تستهدف التأمور لتحسين شفاء القلب.لتبدأ بالتخدير اللاحق ، قم بتقييد مخالب الفأر ووضعها على طاولة الجراحة. بعد تحضير الفأر للجراحة كما هو موضح في المخطوطة ، قم بتهوية الفأر بنسبة 2٪ إيزوفلوران و 100٪ أكسجين كغاز حامل باستخدام جهاز تهوية تجاري. ثم اضبط معدل 110 نفسا في الدقيقة ، وحجم المد والجزر 250 ميكرولتر ، وضغط الزفير النهائي الإيجابي لأربعة ملليمترات من الزئبق.لف الماوس بنسبة 30٪ على جانبه الأيمن لوضع الجانب الأيسر من الصدر لإجراء الجراحة. ثم قم بعمل شق جانبي من 2 إلى 3 سنتيمترات في جلد الصدر لتصور عضلات الصدر على الجانب الأيسر. قم بعمل شق سنتيمتر واحد من خط الوسط إلى الخارج لقطع الصدر الكبير والثانوي.تجنب النزيف المفرط في جميع أنحاء الكي من الأوعية النزيف. تصور العضلات الوربية بين الضلعين الثالث والرابع. قم بعمل شق بطول سنتيمترين في العضلة الوربية اليسرى لإدخال الهواء في تجويف الصدر والسماح للقلب والرئتين بالسقوط بعيدا عن الشق.لشق الوربي دون نزيف ، أوقف جهاز التنفس الصناعي مؤقتا وقم بتوسيع الفتحة باستخدام جهاز الكي. باستخدام المبعدات ، اسحب الأضلاع لفضح القلب. ثم راقب التامور والقلب الأساسي تحت مجهر ستيريو.ضع الملقط برفق على سطح التأمور لتقليل التأمور وحركة القلب الكامنة. معلم بصريا الشريان التاجي LAD من خلال تتبع ظهوره تحت الزائدة اليسرى. باستخدام محرك الإبرة الدقيقة ، قم بتوجيه خياطة مناسبة من خلال التامور تحت LAD.راقب الخيط الناشئ على الجانب الآخر من LAD والتامور. يمثل نموذج الربط الدائم ، اربط الخيط لتقييد تدفق الدم عبر الشريان التاجي ، مما يجعل ابيضاض الجزء الأمامي من البطين الأيسر مرئيا. ثم تقليم خياطة الزائدة بمساعدة مقص.توفير حقن الصيانة من مسكن تحت الجلد كل 12 ساعة لمدة 72 ساعة بعد الجراحة. بعد تقليل الأيزوفلوران إلى 1٪ ، قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران مع الحفاظ على التهوية بالأكسجين. بمجرد أن يظهر الحيوان علامات التنفس ، قم بإزالة أنبوب القصبة الهوائية قياس 23 من الفم ووضع الفأر في قفص الاسترداد لمراقبة استئناف التنفس.اسمح للماوس بالتعافي في القفص مع وضع جزء من القفص على وسادة تدفئة لتوفير مصدر حرارة خارجي. راقب الحالة الصحية للفأر يوميا لمدة سبعة أيام من خلال تقييم الشقوق وعدم ارتياح الحيوان. إذا لزم الأمر ، قم بتطبيق المضادات الحيوية للتعافي الناجح بعد الجراحة الغازية.بعد الحفاظ على الماوس تحت التخدير العام بالأكسجين ، ضع الماوس في وضع ضعيف على منصة مرحلة ساخنة وإرفاق الكفوف بأسلاك تخطيط القلب. ثم غضب الصدر. الحصول على صور ECG باستخدام مسبار محول الطاقة وهلام الاتصال وتحليلها باستخدام البرنامج المناسب.بعد تقييم تخطيط القلب غير الباضع ، قم بإيقاف تشغيل الأيزوفلوران وأعد الماوس إلى القفص. إصلاح القلب في 10 ٪ الفورمالين لمدة 24 ساعة على الأقل. قطع العينة باستخدام شفرة حلاقة مستقيمة من خلال البطين الأيمن والحاجز بين البطينين والبطين الأيسر ، مما يضمن مرور الشق عبر مركز منطقة الاحتشاء.ثم يقوم البارافين بتضمين عينات الأنسجة. ثم يتم وضع المقاطع المقطوعة في كاسيت متصاعد لمزيد من تضمين البارافين والتقسيم اللاحق إلى أقسام بسمك خمسة ميكرومتر. بعد وضع أقسام الأنسجة على الشرائح ، قم بإزالة البارافين باستخدام التولوين وغسول الكحول المتدرج بالماء منزوع الأيونات.ثم إعادة ترطيب. بعد ذلك ، قم بتلطيخ القسم ب 0.1٪ أحمر سيريوس في حمض البكريك لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. اغسل القسم بحمض الخليك 0.5٪ لمدة ثلاث دقائق متبوعا بالشطف بنسبة 70٪ إيثانول لمدة دقيقة واحدة.قم بتجفيف القسم باستخدام الترتيب العكسي للغسيل بتركيزات الإيثانول المتزايدة والمتدرجة قبل التركيب للتقييم المجهري. تم تقييم تحريض احتشاء عضلة القلب الناجح مع ربط الشريان التاجي المعدل من خلال فحص المعلمات الوظيفية للقلب والسمات الهيكلية. بالنسبة للوظيفة ، تم تقييم انخفاض جزء طرد البطين الأيسر عن طريق تخطيط صدى القلب في غضون ثلاثة إلى أربعة أسابيع من احتشاء عضلة القلب بعد ذلك.أظهر التلوين النسيجي أن التغيرات الوظيفية كانت مصحوبة بتليف كبير في جدار البطين الأيسر ، والذي تم تأكيده بشكل أكبر من خلال القياس الكمي للتليف الملون باللون الأحمر picrosirius في المقاطع العرضية للقلب في أربعة أسابيع بعد الاحتشاء مع نماذج ربط التامور التاجية المضطربة أو السليمة. قدم الجمع بين طريقة وضع العلامات على حبة الفلورسنت مع تحليل قياس التدفق الخلوي نهجا لتتبع الضامة التامورية الإيجابية Gata6 المقيمة. الأهم من ذلك ، تم الكشف عن القليل من العلامات أو عدم وجود علامات في القلب أو الدم.بعد احتشاء عضلة القلب ، يمكن تتبع نقل الخلايا عن طريق قياس التدفق الخلوي والتصوير. يظهر القياس الكمي للخرزة الفلورية المسماة خلايا التامور النخاعية مع أو بدون احتشاء عضلة القلب. يجب توخي الحذر لمنع تعطيل أو تمزق التامور الرقيق عن غير قصد أثناء العملية.يمكن دمج هذه الطريقة مع تتبع النسب الخلوي أو الحصار المستجيب ، مما سيسمح بتتبع وتحديد تأثير مكون التامور على استجابة الشفاء في القلب المحتشى. لقد حددنا أن تجويف التامور يحمي القلب بعد الإصابة ، والذي يتم بوساطة جزئية بواسطة بلاعم التامور المقيمة. يفتح هذا النهج مجالا بحثيا جديدا لأمراض القلب والأوعية الدموية.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

نقل الجينات لقصور القلب الدماغية في نموذج ما قبل السريرية

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

و في الجسم الحي النموذجي القوارض من الإصابات الناجمة عن انكماش ، وغير الغازية ورصد الانتعاش

Muscle strains are one of the most  common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and  physical ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

أسلوب مبسط لإنتاج نموذج الجرح الدماغية

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

باستخدام الكمي في الوقت الحقيقي PCR لتحديد الجهات المانحة Engraftment خلية في التنافسية نموذج الفئران زرع نخاع العظم

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

الفئران نموذج الضوئية التي يسببها الخلفي الإقفارية العصبي البصري

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

A الخنزير الصغير نموذج من الأطفال حديثي الولادة نقص الأوكسجين، اعتلال الدماغ الإقفاري

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

مظاهرة في الجرذان الدماغية الجلد الجرح نموذج

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

نموذج القوارض من Nonarteritic الإقفارية العصبي البصري الأمامي (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

طريقة سيفينج فعالة لعزل Glomeruli سليمة من الفئران الكبار الكلي

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...