Name: an intact pericardium ischemic rodent model
Uploaded: 2021-09-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

C57BL/6J-han- og hunmus mellem 8-14 uger blev anvendt til disse forsøg. Denne protokol har modtaget etisk godkendelse fra Animal Care Committee ved University of Calgary og følger alle retningslinjer for dyrepleje.
1. Klargøring og kirurgi med mus
<ol><li>Steriliser kirurgiske værktøjer (via perlesterilisator eller autoklave).</li>
	<li>Vej musen for prækirurgisk vægt og smertestillende dosis.</li>
	<li>Anbring musen i en induktionsboks med 4% isofluran og 800 ml/min ilt. Bekræft bed...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141, 139 (2020).</li><li>Iismaa, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+regenerative+mechanisms+across+different+mammalian+tissues.">Comparative regenerative mechanisms across different mammalian tissues.</a> NPJ Regenerative Medicine. 3 (6), (2018).</li><li>Bayat, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+heart+failure+after+myocardial+infarction+in+mice.">Progressive heart failure after myocardial infarction in mice.</a> Basic Research in Cardiology. 97 (3), 206-213 (2002).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. 52, 2581 (2011).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Borlaug, B. A., Reddy, Y. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+pericardium+in+heart+failure:+Implications+for+pathophysiology+and+treatment.">The role of the pericardium in heart failure: Implications for pathophysiology and treatment.</a> JACC Heart Failure. 7 (7), 574-585 (2019).</li><li>Pfaller, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+pericardium+for+cardiac+biomechanics:+from+physiology+to+computational+modeling.">The importance of the pericardium for cardiac biomechanics: from physiology to computational modeling.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 18 (2), 503-529 (2019).</li><li>Deniset, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata6(+)+Pericardial+Cavity+Macrophages+Relocate+to+the+Injured+Heart+and+Prevent+Cardiac+Fibrosis.">Gata6(+) Pericardial Cavity Macrophages Relocate to the Injured Heart and Prevent Cardiac Fibrosis.</a> Immunity. 51 (1), 131-140 (2019).</li><li>Weber, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+targeting+of+the+pleural+space+by+intercostal+approach.">Immune targeting of the pleural space by intercostal approach.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 14 (2015).</li><li>Nakatani, T., Shinohara, H., Fukuo, Y., Morisawa, S., Matsuda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pericardium+of+rodents:+pores+connect+the+pericardial+and+pleural+cavities.">Pericardium of rodents: pores connect the pericardial and pleural cavities.</a> The Anatomical Record. 220, 132-137 (1988).</li><li>Tyberg, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+pericardial+pressure+and+right+atrial+pressure:+an+intraoperative+study.">The relationship between pericardial pressure and right atrial pressure: an intraoperative study.</a> Circulation. 73, 428-432 (1986).</li><li>Hamilton, D. R., Sas, R., Semlacher, R. A., Kieser Prieur, T. M., Tyberg, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+left+and+right+pericardial+pressures+in+humans:+an+intraoperative+study.">The relationship between left and right pericardial pressures in humans: an intraoperative study.</a> The Canadian Journal of Cardiology. 27, 346-350 (2011).</li><li>Park, D. S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pericardial+proteoglycan+4+(lubricin):+Implications+for+postcardiotomy+intrathoracic+adhesion+formation.">Human pericardial proteoglycan 4 (lubricin): Implications for postcardiotomy intrathoracic adhesion formation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 156 (4), 1598-1608 (2018).</li></ol>

Inducering af et MI i et lukket perikardium hos gnavere er unikt og kan have potentielt betydelige anvendelser. Proceduren er stærkt afhængig af kirurgens fortrolighed med gnavermodellen og gnaverens hjerteanatomi. Succes afhænger også af den pleje, der gives i tre kritiske trin: interkostalt muskelsnit og ribbentilbagetrækning (trin 1.11-1.13), oprettelse af infarkt (trin 1.17 ) og dyregenopretning (trin 1.22-1.24).
Thoracotomi skal udføres flittigt for at undgå punktering eller lacera...

Den dag i dag anerkendes hjerte-kar-sygdomme (CVD) som den største dødsårsag globalt, hvilket resulterer i en betydelig økonomisk byrde og reduktion i patientens livskvalitet1. Koronararteriesygdom (CAD) er en undertype af CVD og spiller en væsentlig rolle i udviklingen af myokardieinfarkt (MI), som er en hovedbidragyder til dødeligheden. Per definition skyldes MI irreversibel skade på myokardievævet på grund af langvarige tilstande af iskæmi og hypoxi. Myokardievæv mangler regenereringskapacitet, så skader er permanente og resulterer i udskiftning af hjertemusklen med et fibrotisk ar, der oprindeligt kan være beskyttende, men i sidste ende bidrager til negativ hjerteombygning og eventuel hjertesvigt2.
Selvom behandlingen af patienter med CAD er dramatisk forbedret i løbet af de sidste par årtier, påvirker kronisk hjertesvigt (CHF) sekundært til iskæmi mange patienter over hele verden. For at forebygge og håndtere denne epidemi er det nødvendigt at forstå de underliggende mekanismer mere omfattende og udvikle nye terapeutiske tilgange. Desuden fremhæver tidligere resultater begrænsningerne ved systemisk terapi og nødvendigheden af at udvikle præcise alternativer. Da undersøgelse af de molekylære følgevirkninger af MI hos mennesker påvirkes af evnen til at få adgang til infarktvæv, er dyremodeller, der rekapitulerer karakteristika og udvikling af humant MI og CHF relateret til CVD, uundværlige.
Da ideelle dyremodeller ligner en menneskelig lidelse for strukturelle og funktionelle egenskaber, bør sygdomsætiologi styre deres opfattelse. I CAD er det den kroniske aterosklerotiske stenose af koronararterier eller akut trombotisk okklusion. Forskellige metoder er blevet udviklet og anvendt i forskellige arter af forsøgsdyr til at inducere koronararterieindsnævring eller okklusion. Sådanne strategier kan bredt klassificeres i to grupper: (1) mekanisk manipulation af en koronararterie for at inducere et MI og (2) fremskynde aterosklerose for at lette koronar indsnævring, der fører til et MI. Den første strategi involverer normalt enten ligering af en koronararterie eller placering af en stent i arterien. Den anden tilgang har tendens til at stole på at ændre dyrets kost til at omfatte højt fedtindhold / kolesterol mad. Nogle af begrænsningerne ved sidstnævnte tilgang omfatter manglen på kontrol på tidspunktet og stedet for koronar okklusioner.
I modsætning hertil har den kirurgiske induktion af MI eller iskæmi i en dyremodel flere fordele, såsom placering, præcis timing og omfang af koronar begivenhed, hvilket fører til mere reproducerbare resultater. Den mest anvendte metode er kirurgisk ligering af venstre forreste nedadgående koronararterie (LAD). Sådanne modeller rekapitulerer menneskelige reaktioner på akut iskæmisk skade såvel som progressionen til CHF3. Oprindeligt udviklet til større dyr, LAD kirurgi på små dyr som gnavere er blevet mere gennemførlig med fremskridt inden for teknologi4. Ved etablering af sådanne modeller er mus blevet begunstiget af forskellige årsager, herunder deres relative tilgængelighed, lave omkostninger i boliger og deres kapacitet til genetisk manipulation.
Moderne kirurgiske modeller af iskæmisk hjertesygdom ved hjælp af LAD-okklusion kræver, at forskeren åbner perikardiet for midlertidigt eller permanent at ligere arterien5. Sådanne strategier resulterer i forstyrrelse af perikardierummet, som spiller en i det væsentlige mekanisk og smørende funktion for at sikre korrekt hjertefunktion. En anden ulempe ved at åbne perikardiet er at miste dyrets oprindelige perikardievæske med dets forskellige cellulære og proteinkomponenter 6,7. Som svar blev en metode til at inducere MI, mens vi holdt perikardiet intakt, udviklet af os. Ud over at minimere forstyrrelsen af dette homeostatiske miljø giver denne tilgang mulighed for mærkning og sporing af specifikke celler efter at have forårsaget et MI. Desuden repræsenterer denne tilgang bedre myokardieiskæmisk skade i den menneskelige indstilling.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Steri-350 Bead Sterilizer</td>
			<td>Inotech</td>
			<td>NC9449759</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-949</td>
			<td>Falcon, 352340</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-952</td>
			<td>Falcon, 352350</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W Catheter Needle 24 G X 3/4&#34;</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (10% povidone-iodine topical solution)</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>104826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNP Ophthalmic Ointment</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>17909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22625101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCR103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase XI</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C7657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 taper needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>GL-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - PC-13 cutting needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>SL-1659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11009-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Mounting Medium</td>
			<td>Agilen</td>
			<td>CS70330-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 100%</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MFCD00003568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon 8-0 Ethilon Suture - BV-130-4 taper needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Inc.</td>
			<td>2815G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Optic Light</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2208502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite&#174; YG Carboxylate Microspheres 1.00 &#181;m</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>15702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td>Model 150-ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>H4272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-0951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane USP, 250 mL</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Fixator Retraction System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18200-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550D- 40 MHz probe</td>
			<td>Fujifilm- Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 Tubing</td>
			<td>Braintree Scienctific, Inc.</td>
			<td>PE10 50 FT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ-1B Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic (10 mL, 0.3mg/mL buprenorphine))</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>124918</td>
			<td>controlled drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100 Software</td>
			<td>Fujifilm-Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intact pericardium ischemic rodent model

Denne protokol har vist, at perikardiet og dets indhold spiller en væsentlig antifibrotisk rolle i den iskæmiske gnavermodel (koronar ligering for at fremkalde myokardieskade). De fleste prækliniske modeller af myokardieinfarkt kræver forstyrrelse af perikardial integritet med tab af det homeostatiske cellulære miljø. Men for nylig er der udviklet en metode af os til at fremkalde myokardieinfarkt, hvilket minimerer perikardieskader og bevarer hjertets bosiddende immuncellepopulation. En forbedret hjertefunktionel genopretning hos mus med et intakt perikardierum efter koronar ligering er blevet observeret. Denne metode giver mulighed for at studere inflammatoriske reaktioner i perikardierummet efter myokardieinfarkt. Yderligere udvikling af mærkningsteknikkerne kan kombineres med denne model for at forstå skæbnen og funktionen af perikardiale immunceller til regulering af de inflammatoriske mekanismer, der driver ombygning i hjertet, herunder fibrose.

Denne modificerede koronar ligeringsmodel er optimeret til at opnå reproducerbarhed og dyreoverlevelse. På grund af den betydelige skade, der induceres i hjertet, er nogle forventede intraoperative og postoperative dødelighed imidlertid forbundet med proceduren. Standarddødeligheden er typisk højere hos mænd (~25-35%) end hos kvinder (~ 10-15%).
Vellykket induktion af et MI med den modificerede koronar ligering bør være tydelig ved ændringer i hjertets funktionelle parametre og strukt...

Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

Denne protokol skitserer trinene til inducering af myokardieinfarkt hos mus, samtidig med at perikardiet og dets indhold bevares.

En intakt perikardium iskæmisk gnavermodel

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

Denne metode giver os mulighed for at evaluere rollen som perikardiehulen, der omgiver hjertet og dets indhold i hjertereparation efter myokardieinfarkt. Sammenlignet med konventionelle koronar ligeringsmetoder til modellering af myokardieinfarkt opretholder vores metode et intakt perikardiehulrum, hvilket muliggør bestemmelse af indhold og sporer deres roller efter hjerteiskæmisk skade. Forståelse af perikardiehulenes bidrag og hjertets skaderespons vil give vigtig indsigt i terapeutiske strategier, der er målrettet mod perikardiet for at forbedre hjertehelingen.Til at begynde med postbedøvelse skal du begrænse musens poter og placere den på operationsbordet. Efter klargøring af musen til operation som beskrevet i manuskriptet, ventileres musen med 2% isofluran og 100% oxygen som bæregas ved hjælp af en kommerciel ventilator. Indstil derefter en hastighed på 110 vejrtrækninger pr. Minut, et tidevandsvolumen på 250 mikroliter og et positivt slutekspiratorisk tryk på fire millimeter kviksølv.Rul musen 30% på højre side for at placere brystets venstre side til operation. Lav derefter et to til tre centimeter lateralt snit i brysthuden for at visualisere pectoralismusklerne på venstre side. Lav et snit på en centimeter fra midterlinjen udad for at skære pectoralis major og minor.Undgå overdreven blødning under cauterization af blødende kar. Visualiser de interkostale muskler mellem tredje og fjerde ribben. Lav et to centimeter snit i venstre interkostale muskel for at indføre luft i brysthulen og lad hjertet og lungerne falde væk fra snittet.For at skære interkostal uden blødning skal du midlertidigt stoppe ventilatoren og udvide åbningen ved hjælp af en cautery enhed. Brug retraktorer til at trække ribbenene tilbage for at udsætte hjertet. Derefter observeres perikardiet og det underliggende hjerte under et stereomikroskop.Placer forsigtigt tangen på perikardiets overflade for at reducere perikardiet og underliggende hjertebevægelse. Visuelt landemærke LAD koronararterien ved at spore dens fremkomst under venstre vedhæng. Brug mikronåledriveren til at føre en passende sutur gennem perikardiet under LAD.Overhold suturen, der kommer frem på den anden side af LAD og perikardiet. Som repræsentant for den permanente ligeringsmodel bindes suturen for at begrænse blodgennemstrømningen gennem koronararterien, hvilket gør blanchering af den forreste del af venstre ventrikel synlig. Trim derefter overskydende sutur ved hjælp af en saks.Giv vedligeholdelsesinjektioner af smertestillende subkutant hver 12. time i 72 timer efter operationen. Efter reduktion af isofluran til 1 % slukkes isofluranen, mens ventilationen opretholdes med ilt. Når dyret viser tegn på vejrtrækning, skal du fjerne 23 gauge trakealrøret fra munden og placere musen i et genopretningsbur for at overvåge vejrtrækningen.Lad musen komme sig i buret med en del af buret placeret på en varmepude for at give en ekstern varmekilde. Overvåg musens sundhedsstatus dagligt i syv dage ved at evaluere snittene og dyrets ubehag. Administrer om nødvendigt antibiotika for en vellykket genopretning efter den invasive operation.Efter at have opretholdt musen under generel anæstesi med ilt, skal du placere musen i liggende stilling på en opvarmet sceneplatform og fastgøre poterne til EKG-ledningerne. Derefter gnide brystet. Få EKG-billeder ved hjælp af transducersonde og kontaktgel, og analysér med den relevante software.Efter ikke-invasiv EKG-vurdering skal du slukke for isofluran og sætte musen tilbage i buret. Fastgør hjertet i 10% formalin i mindst 24 timer. Skær prøven ved hjælp af et lige barberblad gennem højre ventrikel, interventrikulær septum og venstre ventrikel, og sørg for, at snittet går gennem midten af infarktzonen.Og så indlejrer paraffin vævsprøverne. De udskårne sektioner placeres derefter i monteringskassette til yderligere paraffinindlejring og efterfølgende sektionering i fem mikrometer tykke sektioner. Efter placering af vævssektioner på dias afparaffiniseres ved hjælp af toluen og klassificeret alkoholvask med deioniseret vand.Derefter rehydrere. Plet derefter sektionen med 0,1% sirius rød i picrinsyre i to timer ved stuetemperatur. Vask sektionen med 0,5% eddikesyre i tre minutter efterfulgt af skylning med 70% ethanol i et minut.Dehydrering af sektionen ved hjælp af omvendt rækkefølge af vaske med stigende og klassificerede ethanolkoncentrationer inden montering til mikroskopisk evaluering. Den vellykkede myokardieinfarktinduktion med den modificerede koronar ligering blev vurderet ved at undersøge hjertets funktionelle parametre og strukturelle træk. For funktion blev nedsat uddrivningsfraktion i venstre ventrikel vurderet ved ekkokardiografi inden for tre til fire uger efter postmyokardieinfarkt.Den histologiske farvning viste, at de funktionelle ændringer var ledsaget af signifikant fibrose i venstre ventrikelvæg, som yderligere blev bekræftet ved kvantificering af picrosirius rødfarvet fibrose i hjertets tværsnit fire uger efter infarkt med de forstyrrede eller intakte perikardiale koronar ligeringsmodeller. Kombination af den fluorescerende perlemærkningsmetode med flowcytometrianalyse gav en tilgang til at spore de residente Gata6-positive perikardiale makrofager. Det er vigtigt, at der blev påvist lidt eller ingen mærkning i hjertet eller blodet.Efter myokardieinfarkt kan flytningen af cellerne spores ved flowcytometri og billeddannelse. Kvantificering af den fluorescerende perle mærket perikardiale myeloide celler med eller uden myokardieinfarkt er vist. Pas på at forhindre utilsigtet forstyrrelse eller rive det tynde perikardium under proceduren.Denne metode kan kombineres med afstamningssporing cellulær eller effektorblokade, som gør det muligt at spore og bestemme perikardiekomponentens indvirkning på helingsresponsen i det infarkterede hjerte. Vi har identificeret perikardiehulen beskytter hjertet efter skade, som delvist medieres af residente perikardiale makrofager. Denne tilgang åbner et nyt forskningsområde for hjerte-kar-sygdomme.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

Muscle strains are one of the most  common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and  physical ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

En forenklet teknik til at producere et iskæmisk sår model

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Brug af kvantitativ real-time PCR til Bestem donorcelle indpodning i en konkurrencepræget murin knoglemarvstransplantation Model

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Rotte model af fotokemisk-induceret posterior iskæmisk opticusneuropati

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

En Grisling Model for Neonatal Hypoksisk-iskæmisk encephalopati

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

Demonstration af Rat iskæmisk hudsår Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

Den gnaver Model of Nonarteritic anterior iskæmisk opticusneuropati (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet måling af musen mesenterica arterie ved hjælp af Wire blodkar

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

En effektiv Sieving metode til at isolere intakt Glomeruli fra voksen rotte nyre

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...