Name: an intact pericardium ischemic rodent model
Uploaded: 2021-09-02T14:00:00
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कोई नहीं।

इन प्रयोगों के लिए 8-14 सप्ताह की उम्र के बीच नर और मादा C57BL / 6J चूहों का उपयोग किया गया था। इस प्रोटोकॉल को कैलगरी विश्वविद्यालय में पशु देखभाल समिति से नैतिक अनुमोदन प्राप्त हुआ है और सभी पशु देखभाल दिशानि?...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141, 139 (2020).</li><li>Iismaa, S. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. 52, 2581 (2011).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Borlaug, B. A., Reddy, Y. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+pericardium+in+heart+failure:+Implications+for+pathophysiology+and+treatment.">The role of the pericardium in heart failure: Implications for pathophysiology and treatment.</a> JACC Heart Failure. 7 (7), 574-585 (2019).</li><li>Pfaller, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+pericardium+for+cardiac+biomechanics:+from+physiology+to+computational+modeling.">The importance of the pericardium for cardiac biomechanics: from physiology to computational modeling.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 18 (2), 503-529 (2019).</li><li>Deniset, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata6(+)+Pericardial+Cavity+Macrophages+Relocate+to+the+Injured+Heart+and+Prevent+Cardiac+Fibrosis.">Gata6(+) Pericardial Cavity Macrophages Relocate to the Injured Heart and Prevent Cardiac Fibrosis.</a> Immunity. 51 (1), 131-140 (2019).</li><li>Weber, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+targeting+of+the+pleural+space+by+intercostal+approach.">Immune targeting of the pleural space by intercostal approach.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 14 (2015).</li><li>Nakatani, T., Shinohara, H., Fukuo, Y., Morisawa, S., Matsuda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pericardium+of+rodents:+pores+connect+the+pericardial+and+pleural+cavities.">Pericardium of rodents: pores connect the pericardial and pleural cavities.</a> The Anatomical Record. 220, 132-137 (1988).</li><li>Tyberg, J. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pericardial+proteoglycan+4+(lubricin):+Implications+for+postcardiotomy+intrathoracic+adhesion+formation.">Human pericardial proteoglycan 4 (lubricin): Implications for postcardiotomy intrathoracic adhesion formation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 156 (4), 1598-1608 (2018).</li></ol>

कृन्तकों में एक बंद पेरिकार्डियम में एमआई को प्रेरित करना अद्वितीय है और संभावित रूप से महत्वपूर्ण अनुप्रयोग हो सकते हैं। प्रक्रिया कृंतक मॉडल और कृंतक हृदय शरीर रचना विज्ञान के साथ सर्जन की परिचितत...

आज तक, कार्डियोवैस्कुलर बीमारी (सीवीडी) को विश्व स्तर पर मृत्यु के प्रमुख कारण के रूप में मान्यता प्राप्त है, जिसके परिणामस्वरूप एक महत्वपूर्ण वित्तीय बोझ और रोगी के जीवन की गुणवत्ता में कमीआई है। कोरोनरी धमनी रोग (सीएडी) सीवीडी का एक उप-प्रकार है और मायोकार्डियल रोधगलन (एमआई) के विकास में एक आवश्यक भूमिका निभाता है, जो मृत्यु दर में एक प्रमुख योगदानकर्ता है। परिभाषा के अनुसार, एमआई इस्किमिया और हाइपोक्सिया की लंबी स्थितियों के कारण मायोकार्डियल ऊतक को अपरिवर्तनीय चोट से उत्पन्न होता है। मायोकार्डियल ऊतक में पुनर्जनन क्षमता की कमी होती है, इसलिए चोटें स्थायी होती हैं और इसके परिणामस्वरूप हृदय की मांसपेशियों को फाइब्रोटिक निशान के साथ बदल दिया जाता है जो शुरू में सुरक्षात्मक हो सकता है लेकिन अंततः प्रतिकूल कार्डियक रीमॉडेलिंग और अंततः दिल की विफलता में योगदान देताहै।
हालांकि पिछले कुछ दशकों में सीएडी वाले रोगियों के प्रबंधन में नाटकीय रूप से सुधार हुआ है, इस्किमिया के लिए द्वितीयक क्रोनिक हार्ट फेल्योर (सीएचएफ) दुनिया भर में कई रोगियों को प्रभावित करता है। इस महामारी को रोकने और प्रबंधित करने के लिए, अंतर्निहित तंत्र को अधिक व्यापक रूप से समझना और नए चिकित्सीय दृष्टिकोण विकसित करना आवश्यक है। इसके अलावा, पिछले निष्कर्ष प्रणालीगत चिकित्सा की सीमाओं और सटीक विकल्पों को विकसित करने की आवश्यकता को उजागर करते हैं। मनुष्यों में एमआई के आणविक अनुक्रम की जांच को देखते हुए, इन्फ्रैक्टेड ऊतक तक पहुंचने की क्षमता से प्रभावित होता है, पशु मॉडल जो सीवीडी से संबंधित मानव एमआई और सीएचएफ की विशेषताओं और विकास को पुन: परिभाषित करते हैं, अपरिहार्य हैं।
चूंकि आदर्श पशु मॉडल संरचनात्मक और कार्यात्मक विशेषताओं के लिए एक मानव विकार से मिलते जुलते हैं, रोग एटियलजि को उनकी अवधारणा का मार्गदर्शन करना चाहिए। सीएडी में, यह कोरोनरी धमनियों या तीव्र थ्रोम्बोटिक रोड़ा का क्रोनिक एथेरोस्क्लेरोटिक स्टेनोसिस है। कोरोनरी धमनी संकीर्णता या रोड़ा को प्रेरित करने के लिए प्रयोगशाला जानवरों की विभिन्न प्रजातियों में विभिन्न तरीकों को विकसित और लागू किया गया है। इस तरह की रणनीतियों को मोटे तौर पर दो समूहों में वर्गीकृत किया जा सकता है: (1) एमआई को प्रेरित करने के लिए कोरोनरी धमनी का यांत्रिक हेरफेर और (2) कोरोनरी संकुचन की सुविधा के लिए एथेरोस्क्लेरोसिस में तेजी लाना। पहली रणनीति में आमतौर पर कोरोनरी धमनी का बंधाव या धमनी के भीतर स्टेंट लगाना शामिल होता है। दूसरा दृष्टिकोण उच्च वसा / कोलेस्ट्रॉल भोजन को शामिल करने के लिए पशु के आहार को संशोधित करने पर भरोसा करता है। इस बाद के दृष्टिकोण की कुछ सीमाओं में कोरोनरी रोड़ा के समय और साइट पर नियंत्रण की कमी शामिल है।
इसके विपरीत, एक पशु मॉडल में एमआई या इस्किमिया के सर्जिकल प्रेरण के कई फायदे हैं, जैसे कि स्थान, सटीक समय और कोरोनरी घटना की सीमा, जिससे अधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम होते हैं। सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि बाएं पूर्ववर्ती अवरोही कोरोनरी धमनी (एलएडी) का सर्जिकल बंधाव है। इस तरह के मॉडल तीव्र इस्केमिक चोट के साथ-साथ सीएचएफ3 की प्रगति के लिए मानव प्रतिक्रियाओं को पुन: उत्पन्न करते हैं। प्रारंभ में बड़े जानवरों में विकसित, कृन्तकों जैसे छोटे जानवरों पर एलएडी सर्जरीप्रौद्योगिकी में प्रगति के साथ अधिक संभव हो गई है। इस तरह के मॉडल स्थापित करने में, चूहों को विभिन्न कारणों से पसंद किया गया है, जिसमें उनकी सापेक्ष उपलब्धता, आवास में कम खर्च और आनुवंशिक हेरफेर के लिए उनकी क्षमता शामिल है।
एलएडी रोड़ा का उपयोग करके इस्केमिक हृदय रोग के समकालीन सर्जिकल मॉडल में शोधकर्ता को धमनी5 को अस्थायी रूप से या स्थायी रूप से हटाने के लिए पेरिकार्डियम खोलने की आवश्यकता होती है। इस तरह की रणनीतियों के परिणामस्वरूप पेरिकार्डियल स्पेस का विघटन होता है, जो उचित हृदय समारोह सुनिश्चित करने के लिए अनिवार्य रूप से यांत्रिक और स्नेहन कार्य निभाता है। पेरिकार्डियम खोलने का एक और नुकसान अपने विभिन्न सेलुलर और प्रोटीन घटकों 6,7 के साथ जानवर के मूल पेरिकार्डियल द्रव को खो रहा है। जवाब में, पेरिकार्डियम को बरकरार रखते हुए एमआई को प्रेरित करने की एक विधि हमारे द्वारा विकसित की गई थी। इस होमोस्टैटिक वातावरण के गड़बड़ी को कम करने के अलावा, यह दृष्टिकोण एमआई पैदा करने के बाद विशिष्ट कोशिकाओं को टैग करने और ट्रेस करने की अनुमति देता है। इसके अलावा, यह दृष्टिकोण मानव सेटिंग में मायोकार्डियल इस्केमिक चोट का बेहतर प्रतिनिधित्व करता है।

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	<tbody>
		<tr>
			<td>Steri-350 Bead Sterilizer</td>
			<td>Inotech</td>
			<td>NC9449759</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-949</td>
			<td>Falcon, 352340</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-952</td>
			<td>Falcon, 352350</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W Catheter Needle 24 G X 3/4&#34;</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (10% povidone-iodine topical solution)</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>104826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNP Ophthalmic Ointment</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>17909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22625101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCR103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase XI</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C7657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 taper needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>GL-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - PC-13 cutting needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>SL-1659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11009-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Mounting Medium</td>
			<td>Agilen</td>
			<td>CS70330-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 100%</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MFCD00003568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon 8-0 Ethilon Suture - BV-130-4 taper needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Inc.</td>
			<td>2815G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Optic Light</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2208502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite&#174; YG Carboxylate Microspheres 1.00 &#181;m</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>15702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td>Model 150-ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>H4272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-0951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane USP, 250 mL</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Fixator Retraction System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18200-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550D- 40 MHz probe</td>
			<td>Fujifilm- Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 Tubing</td>
			<td>Braintree Scienctific, Inc.</td>
			<td>PE10 50 FT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ-1B Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic (10 mL, 0.3mg/mL buprenorphine))</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>124918</td>
			<td>controlled drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100 Software</td>
			<td>Fujifilm-Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intact pericardium ischemic rodent model

इस प्रोटोकॉल से पता चला है कि पेरिकार्डियम और इसकी सामग्री इस्केमिक कृंतक मॉडल (मायोकार्डियल चोट को प्रेरित करने के लिए कोरोनरी लिगेशन) में एक आवश्यक एंटी-फाइब्रोटिक भूमिका निभाती है। प्री-क्लिनिकल मायोकार्डियल रोधगलन मॉडल के बहुमत को होमियोस्टेटिक सेलुलर परिवेश के नुकसान के साथ पेरिकार्डियल अखंडता के विघटन की आवश्यकता होती है। हालांकि, हाल ही में मायोकार्डियल रोधगलन को प्रेरित करने के लिए हमारे द्वारा एक पद्धति विकसित की गई है, जो पेरिकार्डियल क्षति को कम करती है और हृदय की निवासी प्रतिरक्षा कोशिका आबादी को बरकरार रखती है। कोरोनरी लिगेशन के बाद एक बरकरार पेरिकार्डियल स्पेस के साथ चूहों में एक बेहतर कार्डियक फंक्शनल रिकवरी देखी गई है। यह विधि मायोकार्डियल रोधगलन के बाद पेरिकार्डियल स्पेस में भड़काऊ प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने का अवसर प्रदान करती है। फाइब्रोसिस सहित हृदय में रीमॉडेलिंग को चलाने वाले भड़काऊ तंत्र को विनियमित करने में पेरिकार्डियल प्रतिरक्षा कोशिकाओं के भाग्य और कार्य को समझने के लिए लेबलिंग तकनीकों के आगे के विकास को इस मॉडल के साथ जोड़ा जा सकता है।

इस संशोधित कोरोनरी बंधाव मॉडल को प्रजनन क्षमता और पशु अस्तित्व प्राप्त करने के लिए अनुकूलित किया गया है। हालांकि, हृदय में प्रेरित महत्वपूर्ण चोट के कारण, कुछ अपेक्षित इंट्रा-ऑपरेटिव और पोस्ट-ऑपरेटि?...

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An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

यह प्रोटोकॉल पेरिकार्डियम और इसकी सामग्री को संरक्षित करते हुए चूहों में मायोकार्डियल रोधगलन को प्रेरित करने के चरणों को रेखांकित करता है।

एक बरकरार पेरिकार्डियम इस्केमिक कृंतक मॉडल

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

यह विधि हमें मायोकार्डियल रोधगलन के बाद हृदय की मरम्मत में हृदय और इसकी सामग्री को घेरने वाली पेरिकार्डियल गुहा की भूमिका का मूल्यांकन करने की अनुमति देगी। मायोकार्डियल रोधगलन मॉडलिंग के लिए पारंपरिक कोरोनरी लिगेशन विधियों की तुलना में, हमारी विधि एक बरकरार पेरिकार्डियल गुहा को बनाए रखती है, जिससे सामग्री का निर्धारण होता है और कार्डियक इस्केमिक चोट के बाद उनकी भूमिकाओं को ट्रैक किया जाता है। पेरिकार्डियल गुहा और हृदय की चोट की प्रतिक्रिया के योगदान को समझना चिकित्सीय रणनीतियों में महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि प्रदान करेगा जो हृदय चिकित्सा में सुधार के लिए पेरिकार्डियम को लक्षित करते हैं।पोस्ट एनेस्थेटाइजेशन से शुरू करने के लिए, माउस के पंजे को रोकें और इसे सर्जिकल टेबल पर रखें। पांडुलिपि में वर्णित सर्जरी के लिए माउस तैयार करने के बाद, एक वाणिज्यिक वेंटिलेटर का उपयोग करके वाहक गैस के रूप में 2% आइसोफ्लुरेन और 100% ऑक्सीजन के साथ माउस को हवादार करें। फिर प्रति मिनट 110 सांसों की दर निर्धारित करें, 250 माइक्रोलीटर की ज्वारीय मात्रा, और पारा के चार मिलीमीटर का सकारात्मक अंत समाप्ति दबाव।सर्जरी के लिए छाती के बाईं ओर की स्थिति के लिए माउस को इसके दाईं ओर 30% रोल करें। फिर बाईं ओर पेक्टोरलिस मांसपेशियों की कल्पना करने के लिए छाती की त्वचा में दो से तीन सेंटीमीटर पार्श्व चीरा लगाएं। पेक्टोरलिस को प्रमुख और मामूली काटने के लिए मध्य रेखा से बाहर की ओर एक सेंटीमीटर चीरा लगाएं।रक्तस्राव वाहिकाओं के पूरे प्रवाह के दौरान अत्यधिक रक्तस्राव से बचें। तीसरी और चौथी पसलियों के बीच इंटरकोस्टल मांसपेशियों की कल्पना करें। छाती गुहा में हवा का परिचय देने के लिए बाएं इंटरकोस्टल मांसपेशी में दो सेंटीमीटर चीरा लगाएं और हृदय और फेफड़ों को चीरा से दूर गिरने दें।रक्तस्राव के बिना इंटरकोस्टल को संक्रमित करने के लिए, अस्थायी रूप से वेंटिलेटर को रोकें और एक कॉट्री डिवाइस का उपयोग करके उद्घाटन का विस्तार करें। रिट्रैक्टर्स का उपयोग करके, दिल को उजागर करने के लिए पसलियों को वापस लें। फिर एक स्टीरियो माइक्रोस्कोप के तहत पेरिकार्डियम और अंतर्निहित हृदय का निरीक्षण करें।पेरिकार्डियम और अंतर्निहित हृदय आंदोलन को कम करने के लिए पेरिकार्डियम सतह पर धीरे से बल रखें। बाएं उपांग के नीचे इसके उद्भव का पता लगाकर एलएडी कोरोनरी धमनी को नेत्रहीन रूप से लैंडमार्क किया गया। माइक्रोनीडल ड्राइवर का उपयोग करके, एलएडी के तहत पेरिकार्डियम के माध्यम से एक उपयुक्त सीवन का मार्गदर्शन करें।एलएडी और पेरिकार्डियम के दूसरी तरफ उभरने वाले सीवन का निरीक्षण करें। स्थायी बंधाव मॉडल का प्रतिनिधित्व करते हुए, कोरोनरी धमनी के माध्यम से रक्त प्रवाह को प्रतिबंधित करने के लिए सीवन को बांधें, जिससे बाएं वेंट्रिकल के पूर्ववर्ती हिस्से की ब्लैंचिंग दिखाई देती है। फिर कैंची की मदद से अतिरिक्त सीवन को ट्रिम करें।सर्जरी के बाद 72 घंटे के लिए हर 12 घंटे में एनाल्जेसिक चमड़े के नीचे के रखरखाव इंजेक्शन प्रदान करें। आइसोफ्लुरेन को 1% तक कम करने के बाद ऑक्सीजन के साथ वेंटिलेशन बनाए रखते हुए आइसोफ्लुरेन को बंद कर दें। एक बार जब जानवर सांस लेने के लक्षण दिखाता है, तो मुंह से 23 गेज श्वासनली ट्यूब को हटा दें और सांस लेने की बहाली की निगरानी के लिए माउस को रिकवरी पिंजरे में रखें।बाहरी गर्मी स्रोत प्रदान करने के लिए वार्मिंग पैड पर रखे पिंजरे के एक हिस्से के साथ माउस को पिंजरे में ठीक होने दें। चीरों और जानवरों की असुविधा का मूल्यांकन करके सात दिनों के लिए रोजाना माउस की स्वास्थ्य स्थिति की निगरानी करें। यदि आवश्यक हो, तो इनवेसिव सर्जरी के बाद एक सफल वसूली के लिए एंटीबायोटिक दवाओं का प्रबंधन करें।ऑक्सीजन के साथ सामान्य संज्ञाहरण के तहत माउस को बनाए रखने के बाद, माउस को गर्म मंच मंच पर लापरवाह स्थिति में रखें और पंजे को ईसीजी लीड से संलग्न करें। फिर छाती को चाटें। ट्रांसड्यूसर जांच और संपर्क जेल का उपयोग करके ईसीजी छवियां प्राप्त करें और उपयुक्त सॉफ़्टवेयर के साथ विश्लेषण करें।नॉनइनवेसिव ईसीजी मूल्यांकन के बाद, आइसोफ्लुरेन को बंद करें और माउस को पिंजरे में वापस कर दें। कम से कम 24 घंटों के लिए दिल को 10% फॉर्मलिन में ठीक करें। दाहिने वेंट्रिकल, इंटरवेंट्रिकुलर सेप्टम और बाएं वेंट्रिकल के माध्यम से एक सीधे रेजर ब्लेड का उपयोग करके नमूने को काटें, यह सुनिश्चित करते हुए कि चीरा इन्फ्रैक्ट ज़ोन के केंद्र से गुजरता है।और फिर पैराफिन ऊतक के नमूनों को एम्बेड करता है। कटे हुए वर्गों को आगे पैराफिन एम्बेडिंग के लिए माउंटिंग कैसेट में रखा जाता है और बाद में पांच माइक्रोमीटर मोटे वर्गों में सेक्शन किया जाता है। स्लाइड्स पर ऊतक वर्गों के प्लेसमेंट के बाद, टोल्यूनि का उपयोग करके डीपैराफिनाइज करें और डीआयनीकृत पानी के साथ वर्गीकृत अल्कोहल धोएं।फिर रिहाइड्रेट करें। इसके बाद, कमरे के तापमान पर दो घंटे के लिए पिक्रिक एसिड में 0.1% सिरियस लाल के साथ अनुभाग को दाग दें। तीन मिनट के लिए 0.5% एसिटिक एसिड के साथ अनुभाग को धोएं और फिर एक मिनट के लिए 70% इथेनॉल से कुल्ला करें।सूक्ष्म मूल्यांकन के लिए बढ़ने से पहले बढ़ते और वर्गीकृत इथेनॉल सांद्रता के साथ वॉश के रिवर्स ऑर्डर का उपयोग करके अनुभाग को निर्जलित करें। संशोधित कोरोनरी बंधाव के साथ सफल मायोकार्डियल रोधगलन प्रेरण का मूल्यांकन हृदय के कार्यात्मक मापदंडों और संरचनात्मक विशेषताओं की जांच करके किया गया था। कार्य के लिए, मायोकार्डियल रोधगलन के तीन से चार सप्ताह के भीतर इकोकार्डियोग्राफी द्वारा बाएं वेंट्रिकल इजेक्शन अंश में कमी का आकलन किया गया था।हिस्टोलॉजिकल स्टेनिंग से पता चला कि कार्यात्मक परिवर्तन बाएं वेंट्रिकल दीवार के महत्वपूर्ण फाइब्रोसिस के साथ थे, जिसे बाधित या बरकरार पेरिकार्डियल कोरोनरी लिगेशन मॉडल के साथ चार सप्ताह बाद दिल के क्रॉस-सेक्शन में पिकरोसिरियस लाल दाग वाले फाइब्रोसिस की मात्रा का ठहराव करके पुष्टि की गई थी। फ्लो साइटोमेट्री विश्लेषण के साथ फ्लोरोसेंट बीड लेबलिंग विधि के संयोजन ने निवासी गाटा 6 पॉजिटिव पेरिकार्डियल मैक्रोफेज को ट्रैक करने के लिए एक दृष्टिकोण प्रदान किया। महत्वपूर्ण रूप से, हृदय या रक्त में कोई लेबलिंग नहीं पाई गई थी।मायोकार्डियल रोधगलन के बाद, कोशिकाओं के स्थानांतरण को प्रवाह साइटोमेट्री और इमेजिंग द्वारा ट्रैक किया जा सकता है। मायोकार्डियल रोधगलन के साथ या बिना पेरिकार्डियल माइलॉयड कोशिकाओं को लेबल करने वाले फ्लोरोसेंट बीड का परिमाणीकरण दिखाया गया है। प्रक्रिया के दौरान अनजाने में पतले पेरिकार्डियम को बाधित या फाड़ने से रोकने के लिए देखभाल की आवश्यकता होती है।इस विधि को वंश अनुरेखण सेलुलर या प्रभावक नाकाबंदी के साथ जोड़ा जा सकता है, जो रोधगलित हृदय में उपचार प्रतिक्रिया पर पेरिकार्डियल घटक के प्रभाव को ट्रैक करने और निर्धारित करने की अनुमति देगा। हमने पहचान की है कि पेरिकार्डियल गुहा चोट के बाद हृदय की रक्षा करती है, जो आंशिक रूप से निवासी पेरिकार्डियल मैक्रोफेज द्वारा मध्यस्थता की जाती है। यह दृष्टिकोण हृदय रोग के लिए एक नया शोध क्षेत्र खोलता है।

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Ischemic हृदय में विफलता के लिए एक preclinical मॉडल में जीन स्थानांतरण

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

एक Vivo में संकुचन - प्रेरित चोट और गैर इनवेसिव रिकवरी की निगरानी के कृंतक मॉडल

Muscle strains are one of the most  common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and  physical ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

Ischemic घाव मॉडल के निर्माण के लिए एक सरल तकनीक

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

मात्रात्मक वास्तविक समय पीसीआर का उपयोग करने के लिए एक प्रतियोगी murine अस्थि मज्जा प्रत्यारोपण के मॉडल में दाता कोशिका engraftment निर्धारित

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Photochemically प्रेरित पोस्टीरियर इस्कीमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी के चूहे मॉडल

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

नवजात hypoxic इस्कीमिक Encephalopathy की एक घेंटा मॉडल

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

चूहा इस्केमिक त्वचा घाव मॉडल का प्रदर्शन

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

Nonarteritic पूर्वकाल इस्केमिक ऑप्टिक न्यूरोपैथी के कृंतक मॉडल (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

माउस के Isometric सिकुड़ना माप Mesenteric धमनी का उपयोग तार Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

एक कुशल Sieving विधि वयस्क चूहे गुर्दे से बरकरार Glomeruli को अलग करने के लिए

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...