Name: an intact pericardium ischemic rodent model
Uploaded: 2021-09-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

Mannlige og kvinnelige C57BL / 6J-mus mellom 8-14 ukers alder ble brukt til disse forsøkene. Denne protokollen har mottatt etisk godkjenning fra Animal Care Committee ved University of Calgary og følger alle retningslinjer for dyrepleie.
1. Museforberedelse og kirurgi
<ol><li>Steriliser kirurgiske verktøy (via perlesterilisator eller autoklav).</li>
	<li>Vei musen for presurgical vekt og smertestillende dose.</li>
	<li>Plasser musen i en induksjonsboks med 4 % isofluran og 800 ml/min oksy...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141, 139 (2020).</li><li>Iismaa, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+regenerative+mechanisms+across+different+mammalian+tissues.">Comparative regenerative mechanisms across different mammalian tissues.</a> NPJ Regenerative Medicine. 3 (6), (2018).</li><li>Bayat, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+heart+failure+after+myocardial+infarction+in+mice.">Progressive heart failure after myocardial infarction in mice.</a> Basic Research in Cardiology. 97 (3), 206-213 (2002).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. 52, 2581 (2011).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Borlaug, B. A., Reddy, Y. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+pericardium+in+heart+failure:+Implications+for+pathophysiology+and+treatment.">The role of the pericardium in heart failure: Implications for pathophysiology and treatment.</a> JACC Heart Failure. 7 (7), 574-585 (2019).</li><li>Pfaller, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+pericardium+for+cardiac+biomechanics:+from+physiology+to+computational+modeling.">The importance of the pericardium for cardiac biomechanics: from physiology to computational modeling.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 18 (2), 503-529 (2019).</li><li>Deniset, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata6(+)+Pericardial+Cavity+Macrophages+Relocate+to+the+Injured+Heart+and+Prevent+Cardiac+Fibrosis.">Gata6(+) Pericardial Cavity Macrophages Relocate to the Injured Heart and Prevent Cardiac Fibrosis.</a> Immunity. 51 (1), 131-140 (2019).</li><li>Weber, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+targeting+of+the+pleural+space+by+intercostal+approach.">Immune targeting of the pleural space by intercostal approach.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 14 (2015).</li><li>Nakatani, T., Shinohara, H., Fukuo, Y., Morisawa, S., Matsuda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pericardium+of+rodents:+pores+connect+the+pericardial+and+pleural+cavities.">Pericardium of rodents: pores connect the pericardial and pleural cavities.</a> The Anatomical Record. 220, 132-137 (1988).</li><li>Tyberg, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+pericardial+pressure+and+right+atrial+pressure:+an+intraoperative+study.">The relationship between pericardial pressure and right atrial pressure: an intraoperative study.</a> Circulation. 73, 428-432 (1986).</li><li>Hamilton, D. R., Sas, R., Semlacher, R. A., Kieser Prieur, T. M., Tyberg, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+left+and+right+pericardial+pressures+in+humans:+an+intraoperative+study.">The relationship between left and right pericardial pressures in humans: an intraoperative study.</a> The Canadian Journal of Cardiology. 27, 346-350 (2011).</li><li>Park, D. S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pericardial+proteoglycan+4+(lubricin):+Implications+for+postcardiotomy+intrathoracic+adhesion+formation.">Human pericardial proteoglycan 4 (lubricin): Implications for postcardiotomy intrathoracic adhesion formation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 156 (4), 1598-1608 (2018).</li></ol>

Å indusere en MI i et lukket perikardium hos gnagere er unikt og kan ha potensielt betydelige anvendelser. Prosedyren er avhengig av kirurgens kjennskap til gnagermodellen og gnagerens hjerteanatomi. Suksess er også avhengig av omsorgen gitt i tre kritiske trinn: intercostal muskelinnsnitt og ribberetraksjon (trinn 1.11-1.13), skape infarkt (trinn 1.17) og dyregjenoppretting (trinn 1.22-1.24).
Toraktomien må gjøres flittig for å unngå punktering eller lacerating perikardiet. Det mest avg...

Den dag i dag er kardiovaskulær sykdom (CVD) anerkjent som den ledende dødsårsaken globalt, noe som resulterer i en betydelig økonomisk byrde og reduksjon i pasientens livskvalitet1. Koronarsykdom (CAD) er en sub-type CVD og spiller en viktig rolle i utviklingen av hjerteinfarkt (MI), som er en hovedbidragsyter til dødelighet. Per definisjon skyldes MI irreversibel skade på myokardvevet på grunn av langvarige tilstander av iskemi og hypoksi. Myokardvev mangler regenereringskapasitet, så skader er permanente og resulterer i erstatning av hjertemuskelen med et fibrotisk arr som i utgangspunktet kan være beskyttende, men til slutt bidrar til ugunstig hjerteoppussing og eventuell hjertesvikt2.
Selv om behandlingen av pasienter med CAD har blitt dramatisk forbedret de siste tiårene, påvirker kronisk hjertesvikt (CHF) sekundært til iskemi mange pasienter over hele verden. For å forebygge og håndtere denne epidemien er det nødvendig å forstå de underliggende mekanismene mer omfattende og utvikle nye terapeutiske tilnærminger. Videre fremhever tidligere funn begrensningene ved systemisk terapi og nødvendigheten av å utvikle presise alternativer. Gitt å undersøke molekylære følger av MI hos mennesker påvirkes av evnen til å få tilgang til infarkt vev, er dyremodeller som rekapitulerer egenskapene og utviklingen av human MI og CHF relatert til CVD uunnværlige.
Ettersom ideelle dyremodeller ligner en menneskelig lidelse for strukturelle og funksjonelle egenskaper, bør sykdomsetiologi veilede deres oppfatning. I CAD er det kronisk aterosklerotisk stenose av koronararterier eller akutt trombotisk okklusjon. Ulike metoder har blitt utviklet og anvendt i ulike arter av laboratoriedyr for å indusere koronararterie innsnevring eller okklusjon. Slike strategier kan grovt klassifiseres i to grupper: (1) mekanisk manipulering av en koronararterie for å indusere en MI og (2) fremskynde aterosklerose for å lette koronar innsnevring som fører til en MI. Den første strategien innebærer vanligvis enten ligering av en koronararterie eller plassering av en stent i arterien. Den andre tilnærmingen har en tendens til å stole på å endre dyrets diett for å inkludere høyt fett / kolesterol mat. Noen av begrensningene i denne sistnevnte tilnærmingen inkluderer mangel på kontroll på tidspunktet og stedet for koronar okklusjoner.
I motsetning til dette har kirurgisk induksjon av MI eller iskemi i en dyremodell flere fordeler, for eksempel plassering, presis timing og omfang av koronarhendelsen, noe som fører til mer reproduserbare resultater. Den mest brukte metoden er kirurgisk ligering av venstre fremre nedadgående koronararterie (LAD). Slike modeller rekapitulerer menneskelige responser på akutt iskemisk skade, samt progresjonen til CHF3. Opprinnelig utviklet i større dyr, har LAD-kirurgi på små dyr som gnagere blitt mer gjennomførbart med fremskritt innen teknologi4. Ved å etablere slike modeller har mus blitt favorisert av ulike årsaker, inkludert deres relative tilgjengelighet, lave utgifter i boliger og deres evne til genetisk manipulasjon.
Moderne kirurgiske modeller av iskemisk hjertesykdom ved bruk av LAD-okklusjon krever at forskeren åpner perikardiet for midlertidig eller permanent å ligere arterien5. Slike strategier resulterer i forstyrrelse av perikardialrommet, som spiller en i hovedsak mekanisk og smørende funksjon for å sikre riktig hjertefunksjon. En annen ulempe ved å åpne perikardiet er å miste dyrets opprinnelige perikardvæske med sine forskjellige cellulære og proteinkomponenter 6,7. Som svar ble en metode for å indusere MI mens perikardiet holdes intakt utviklet av oss. I tillegg til å minimere forstyrrelsen av dette homeostatiske miljøet, tillater denne tilnærmingen merking og sporing av bestemte celler etter å ha forårsaket en MI. I tillegg representerer denne tilnærmingen bedre myokardisk iskemisk skade i den menneskelige innstillingen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Steri-350 Bead Sterilizer</td>
			<td>Inotech</td>
			<td>NC9449759</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-949</td>
			<td>Falcon, 352340</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-952</td>
			<td>Falcon, 352350</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W Catheter Needle 24 G X 3/4&#34;</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (10% povidone-iodine topical solution)</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>104826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNP Ophthalmic Ointment</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>17909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22625101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCR103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase XI</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C7657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 taper needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>GL-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - PC-13 cutting needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>SL-1659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11009-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Mounting Medium</td>
			<td>Agilen</td>
			<td>CS70330-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 100%</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MFCD00003568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon 8-0 Ethilon Suture - BV-130-4 taper needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Inc.</td>
			<td>2815G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Optic Light</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2208502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite&#174; YG Carboxylate Microspheres 1.00 &#181;m</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>15702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td>Model 150-ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>H4272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-0951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane USP, 250 mL</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Fixator Retraction System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18200-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550D- 40 MHz probe</td>
			<td>Fujifilm- Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 Tubing</td>
			<td>Braintree Scienctific, Inc.</td>
			<td>PE10 50 FT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ-1B Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic (10 mL, 0.3mg/mL buprenorphine))</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>124918</td>
			<td>controlled drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100 Software</td>
			<td>Fujifilm-Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intact pericardium ischemic rodent model

Denne protokollen har vist at perikardiet og dets innhold spiller en viktig antifibrotisk rolle i den iskemiske gnagermodellen (koronar ligering for å indusere myokardskade). De fleste prekliniske myokardinfarktmodeller krever forstyrrelse av perikardintegritet med tap av det homeostatiske cellulære miljøet. Imidlertid har vi nylig utviklet en metodikk for å indusere hjerteinfarkt, noe som minimerer perikardskader og beholder hjertets bosatte immuncellepopulasjon. En forbedret hjertefunksjonell restitusjon hos mus med intakt perikardialrom etter koronar ligering er observert. Denne metoden gir en mulighet til å studere inflammatoriske responser i perikardialrommet etter hjerteinfarkt. Videreutvikling av merkingsteknikkene kan kombineres med denne modellen for å forstå skjebnen og funksjonen til perikardiale immunceller i regulering av de inflammatoriske mekanismene som driver ombygging i hjertet, inkludert fibrose.

Denne modifiserte koronar ligeringsmodellen er optimalisert for å oppnå reproduserbarhet og dyreoverlevelse. På grunn av den betydelige skaden indusert i hjertet, er imidlertid noen forventede intraoperative og postoperative mortaliteter forbundet med prosedyren. Standard dødelighet er vanligvis høyere hos menn (~ 25-35%) enn hos kvinner (~ 10-15%).
Vellykket induksjon av en MI med modifisert koronar ligering bør være tydelig ved endringer i hjertets funksjonelle parametere og strukture...

Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

Denne protokollen skisserer trinnene for å indusere hjerteinfarkt hos mus samtidig som perikardiet og innholdet opprettholdes.

En intakt perikardium iskemisk gnagermodell

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

Denne metoden vil tillate oss å evaluere rollen som perikardialhulen som omgir hjertet og dets innhold i hjertereparasjon etter hjerteinfarkt. Sammenlignet med konvensjonelle koronar ligeringsmetoder for modellering av hjerteinfarkt, opprettholder vår metode et intakt perikardhulrom, slik at innholdet kan bestemmes og sporer deres roller etter hjerteiskemisk skade. Å forstå bidraget fra perikardialhulen og hjertets skaderespons vil gi viktig innsikt i terapeutiske strategier som retter seg mot perikardiet for å forbedre hjertehelbredelsen.Til å begynne med postbedøvelse, hold musens poter og plasser den på operasjonsbordet. Etter klargjøring av musen for kirurgi som beskrevet i manuskriptet, ventiler musen med 2% isofluran og 100% oksygen som bærergass ved hjelp av en kommersiell ventilator. Sett deretter en hastighet på 110 pust per minutt, et tidevannsvolum på 250 mikroliter og et positivt endeekspiratorisk trykk på fire millimeter kvikksølv.Rull musen 30% på høyre side for å plassere brystets venstre side for kirurgi. Lag deretter et to til tre centimeter lateralt snitt i brysthuden for å visualisere pectoralis-musklene på venstre side. Gjør et snitt på en centimeter fra midtlinjen og utover for å kutte pectoralis major og minor.Unngå overdreven blødning gjennom cauterization av blødende kar. Visualiser intercostal muskler mellom tredje og fjerde ribbeina. Lag et to centimeter snitt i venstre interkostale muskel for å introdusere luft inn i brysthulen og la hjertet og lungene falle bort fra snittet.For å snitte intercostal uten blødning, stopp midlertidig ventilatoren og utvid åpningen ved hjelp av en cautery-enhet. Bruk retractors, trekk ribben tilbake for å eksponere hjertet. Deretter observere perikardiet og det underliggende hjertet under et stereomikroskop.Plasser tangen forsiktig på perikardoverflaten for å redusere perikard og underliggende hjertebevegelse. Visuelt landemerke LAD koronararterien ved å spore sin fremvekst under venstre appendage. Bruk mikronedledriveren, før en passende sutur gjennom perikardiet under LAD.Vær oppmerksom på suturen som kommer på den andre siden av LAD og perikardiet. Representerer den permanente ligeringsmodellen, knytter suturen for å begrense blodstrømmen gjennom koronararterien, noe som gjør blanchering av den fremre delen av venstre ventrikel synlig. Trim deretter overflødig sutur ved hjelp av saks.Gi vedlikeholdsinjeksjoner av smertestillende subkutant hver 12. time i 72 timer etter operasjonen. Etter at isofluranet er redusert til 1 %, slås isofluranet av samtidig som ventilasjonen med oksygen opprettholdes. Når dyret viser tegn på pust, fjern 23 gauge trakealrør fra munnen og plasser musen i et gjenopprettingsbur for å overvåke pustestarten.La musen komme seg i buret med en del av buret plassert på en varmepute for å gi en ekstern varmekilde. Overvåk musens helsestatus daglig i syv dager ved å evaluere snittene og ubehag hos dyr. Om nødvendig, administrer antibiotika for en vellykket gjenoppretting etter invasiv kirurgi.Etter å ha opprettholdt musen under generell anestesi med oksygen, plasser musen i en liggende stilling på en oppvarmet sceneplattform og fest potene til EKG-ledningene. Deretter gnager brystet. Skaff EKG-bilder ved hjelp av transdusersonde og kontaktgel og analyser med riktig programvare.Etter ikke-invasiv EKG-vurdering, slå av isofluranen og sett musen tilbake til buret. Fest hjertet i 10% formalin i minst 24 timer. Klipp prøven med et rett barberblad gjennom høyre ventrikel, interventrikulær septum og venstre ventrikel, slik at snittet går gjennom midten av infarktsonen.Og så legger parafin inn vevsprøvene. De kuttede seksjonene plasseres deretter i monteringskassett for videre parafininnbygging og påfølgende seksjonering i fem mikrometer tykke seksjoner. Etter plassering av vevsseksjoner på lysbilder, deparaffiniserer du ved hjelp av toluen og gradert alkoholvask med avionisert vann.Rehydrer deretter. Flekk deretter seksjonen med 0,1% sirius rød i pikrinsyre i to timer ved romtemperatur. Vask seksjonen med 0,5% eddiksyre i tre minutter etterfulgt av skylling med 70% etanol i ett minutt.Dehydrer seksjonen ved å bruke omvendt rekkefølge av vasker med økende og graderte etanolkonsentrasjoner før montering for mikroskopisk evaluering. Den vellykkede induksjonen av hjerteinfarkt med modifisert koronar ligering ble vurdert ved å undersøke hjertets funksjonsparametere og strukturelle egenskaper. For funksjon ble redusert venstre ventrikkels ejeksjonsfraksjon vurdert ved ekkokardiografi innen tre til fire uker etter posthjerteinfarkt.Den histologiske fargingen viste at de funksjonelle forandringene var ledsaget av signifikant fibrose i venstre ventrikkelvegg, som videre ble bekreftet ved kvantifisering av picrosirius rødfarget fibrose i hjertets tverrsnitt fire uker etter infarkt med de forstyrrede eller intakte perikardiale koronar ligeringsmodellene. Kombinasjonen av fluorescerende dråpemerkingsmetode med flowcytometrianalyse ga en tilnærming til å spore de bosatte Gata6-positive perikardiale makrofagene. Det er viktig at det ble påvist liten eller ingen merking i hjertet eller blodet.Etter hjerteinfarkt kan flytting av cellene spores ved flowcytometri og avbildning. Kvantifisering av fluorescerende perle merket perikardial myeloide celler med eller uten hjerteinfarkt er vist. Forsiktighet er nødvendig for å forhindre utilsiktet forstyrrelse eller rive det tynne perikardiet under prosedyren.Denne metoden kan kombineres med avstamningssporing av cellulær eller effektorblokkade, som vil tillate sporing og bestemmelse av perikardkomponentens innvirkning på helbredelsesresponsen i det infarkte hjertet. Vi har identifisert perikardialhulen beskytter hjertet etter skade, som delvis medieres av beboer perikardiale makrofager. Denne tilnærmingen åpner et nytt forskningsområde for hjerte- og karsykdommer.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

Muscle strains are one of the most  common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and  physical ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

En Forenklet teknikk for produksjon av en iskemisk sår modell

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Bruke kvantitativ real-time PCR fastslår Donor Cell engraftment i en konkurransedyktig Murine benmargstransplantasjon Model

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Rat Modell av fotokjemisk-Induced posterior iskemisk optikusnevropati

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

En Nasse Nøff Model of Neonatal hypoksisk-iskemisk encefalopati

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

Demonstrasjon av Rat iskemisk Skin Wound Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

Den gnager Model of Nonarteritic iskemisk fremre optikusnevropati (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk Contractility måling av musen hvem arterien bruker Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

Effektiv Sieving metode å isolere intakt Glomeruli fra voksen rotte nyre

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...