Name: an intact pericardium ischemic rodent model
Uploaded: 2021-09-02T14:00:00
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Camundongos C57BL/6J machos e fêmeas entre 8-14 semanas de idade foram usados para esses experimentos. Este protocolo recebeu aprovação ética do Comitê de Cuidados com Animais da Universidade de Calgary e segue todas as diretrizes de cuidados com animais.
1. Preparação e cirurgia do rato
<ol><li>Esterilizar ferramentas cirúrgicas (via esterilizador de contas ou autoclave).</li>
	<li>Pesar o rato quanto ao peso pré-cirúrgico e à dose de analgésicos.</li>
	<li>Coloque o rato numa c...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141, 139 (2020).</li><li>Iismaa, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+regenerative+mechanisms+across+different+mammalian+tissues.">Comparative regenerative mechanisms across different mammalian tissues.</a> NPJ Regenerative Medicine. 3 (6), (2018).</li><li>Bayat, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+heart+failure+after+myocardial+infarction+in+mice.">Progressive heart failure after myocardial infarction in mice.</a> Basic Research in Cardiology. 97 (3), 206-213 (2002).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. 52, 2581 (2011).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Borlaug, B. A., Reddy, Y. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+pericardium+in+heart+failure:+Implications+for+pathophysiology+and+treatment.">The role of the pericardium in heart failure: Implications for pathophysiology and treatment.</a> JACC Heart Failure. 7 (7), 574-585 (2019).</li><li>Pfaller, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+pericardium+for+cardiac+biomechanics:+from+physiology+to+computational+modeling.">The importance of the pericardium for cardiac biomechanics: from physiology to computational modeling.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 18 (2), 503-529 (2019).</li><li>Deniset, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata6(+)+Pericardial+Cavity+Macrophages+Relocate+to+the+Injured+Heart+and+Prevent+Cardiac+Fibrosis.">Gata6(+) Pericardial Cavity Macrophages Relocate to the Injured Heart and Prevent Cardiac Fibrosis.</a> Immunity. 51 (1), 131-140 (2019).</li><li>Weber, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+targeting+of+the+pleural+space+by+intercostal+approach.">Immune targeting of the pleural space by intercostal approach.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 14 (2015).</li><li>Nakatani, T., Shinohara, H., Fukuo, Y., Morisawa, S., Matsuda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pericardium+of+rodents:+pores+connect+the+pericardial+and+pleural+cavities.">Pericardium of rodents: pores connect the pericardial and pleural cavities.</a> The Anatomical Record. 220, 132-137 (1988).</li><li>Tyberg, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+pericardial+pressure+and+right+atrial+pressure:+an+intraoperative+study.">The relationship between pericardial pressure and right atrial pressure: an intraoperative study.</a> Circulation. 73, 428-432 (1986).</li><li>Hamilton, D. R., Sas, R., Semlacher, R. A., Kieser Prieur, T. M., Tyberg, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+left+and+right+pericardial+pressures+in+humans:+an+intraoperative+study.">The relationship between left and right pericardial pressures in humans: an intraoperative study.</a> The Canadian Journal of Cardiology. 27, 346-350 (2011).</li><li>Park, D. S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pericardial+proteoglycan+4+(lubricin):+Implications+for+postcardiotomy+intrathoracic+adhesion+formation.">Human pericardial proteoglycan 4 (lubricin): Implications for postcardiotomy intrathoracic adhesion formation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 156 (4), 1598-1608 (2018).</li></ol>

Induzir um IAM em um pericárdio fechado em roedores é único e pode ter aplicações potencialmente significativas. O procedimento depende muito da familiaridade do cirurgião com o modelo de roedores e a anatomia cardíaca do roedor. O sucesso também depende dos cuidados dispensados durante três etapas críticas: incisão muscular intercostal e retração da costela (Passos 1.11-1.13), criação do infarto (Passo 1.17) e recuperação animal (Passos 1.22-1.24).
A toracotomia deve ser feit...

Até hoje, a doença cardiovascular (DCV) é reconhecida como a principal causa de morte em todo o mundo, resultando em uma significativa carga financeira e redução na qualidade de vida do paciente1. A doença arterial coronariana (DAC) é um subtipo de DCV e desempenha um papel essencial no desenvolvimento do infarto do miocárdio (IM), que é um dos principais contribuintes para a mortalidade. Por definição, o IAM resulta de lesão irreversível do tecido miocárdico devido a condições prolongadas de isquemia e hipóxia. O tecido miocárdico carece de capacidade de regeneração, de modo que as lesões são permanentes e resultam na substituição do músculo cardíaco por uma cicatriz fibrótica que pode ser inicialmente protetora, mas acaba contribuindo para o remodelamento cardíaco adverso e eventual insuficiência cardíaca2.
Embora o manejo de pacientes com DAC tenha melhorado drasticamente nas últimas décadas, a insuficiência cardíaca crônica (ICC) secundária à isquemia afeta muitos pacientes em todo o mundo. Para prevenir e gerenciar essa epidemia, é necessário entender os mecanismos subjacentes mais extensivamente e desenvolver novas abordagens terapêuticas. Além disso, achados passados destacam as limitações da terapia sistêmica e a necessidade de desenvolver alternativas precisas. Dado que a investigação das sequelas moleculares do IAM em humanos é afetada pela capacidade de acessar o tecido infartado, modelos animais que recapitulam as características e o desenvolvimento do IAM humano e da ICC relacionados às DCV são indispensáveis.
Como os modelos animais ideais se assemelham muito a um distúrbio humano por características estruturais e funcionais, a etiologia da doença deve orientar sua concepção. Na DAC, é a estenose aterosclerótica crônica das artérias coronárias ou oclusão trombótica aguda. Diferentes métodos têm sido desenvolvidos e aplicados em várias espécies de animais de laboratório para induzir o estreitamento ou oclusão da artéria coronária. Tais estratégias podem ser amplamente classificadas em dois grupos: (1) manipulação mecânica de uma artéria coronária para induzir um IAM e (2) aterosclerose acelerada para facilitar o estreitamento coronariano levando a um IAM. A primeira estratégia geralmente envolve a ligadura de uma artéria coronária ou a colocação de um stent dentro da artéria. A segunda abordagem tende a depender da modificação da dieta do animal para incluir alimentos ricos em gordura / colesterol. Algumas das limitações desta última abordagem incluem a falta de controle sobre o momento e o local das oclusões coronarianas.
Em contraste, a indução cirúrgica de IAM ou isquemia em um modelo animal tem várias vantagens, como localização, tempo preciso e extensão do evento coronariano, levando a resultados mais reprodutíveis. O método mais utilizado é a ligadura cirúrgica da artéria coronária descendente anterior esquerda (DAE). Tais modelos recapitulam as respostas humanas à lesão isquêmica aguda, bem como a progressão para ICC3. Inicialmente desenvolvida em animais de maior porte, a cirurgia de LAD em pequenos animais, como roedores, tornou-se mais viável com os avanços da tecnologia4. Ao estabelecer tais modelos, os ratos têm sido favorecidos por várias razões, incluindo sua disponibilidade relativa, baixo gasto em habitação e sua capacidade de manipulação genética.
Modelos cirúrgicos contemporâneos de cardiopatia isquêmica utilizando oclusão LAD requerem que o pesquisador abra o pericárdio para ligar temporária ou permanentemente a artéria5. Tais estratégias resultam na ruptura do espaço pericárdico, que desempenha uma função essencialmente mecânica e lubrificante para garantir a função cardíaca adequada. Outra desvantagem da abertura do pericárdio é a perda do líquido pericárdico nativo do animal com seus diversos componentes celulares e proteicos 6,7. Em resposta, um método para induzir o IAM, mantendo o pericárdio intacto, foi desenvolvido por nós. Além de minimizar a perturbação desse ambiente homeostático, essa abordagem permite marcar e rastrear células específicas depois de causar um infarto do miocárdio. Além disso, essa abordagem representa melhor a lesão isquêmica miocárdica no ambiente humano.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Steri-350 Bead Sterilizer</td>
			<td>Inotech</td>
			<td>NC9449759</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-949</td>
			<td>Falcon, 352340</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-952</td>
			<td>Falcon, 352350</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W Catheter Needle 24 G X 3/4&#34;</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (10% povidone-iodine topical solution)</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>104826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNP Ophthalmic Ointment</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>17909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22625101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCR103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase XI</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C7657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 taper needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>GL-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - PC-13 cutting needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>SL-1659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11009-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Mounting Medium</td>
			<td>Agilen</td>
			<td>CS70330-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 100%</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MFCD00003568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon 8-0 Ethilon Suture - BV-130-4 taper needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Inc.</td>
			<td>2815G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Optic Light</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2208502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite&#174; YG Carboxylate Microspheres 1.00 &#181;m</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>15702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td>Model 150-ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>H4272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-0951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane USP, 250 mL</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Fixator Retraction System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18200-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550D- 40 MHz probe</td>
			<td>Fujifilm- Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 Tubing</td>
			<td>Braintree Scienctific, Inc.</td>
			<td>PE10 50 FT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ-1B Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic (10 mL, 0.3mg/mL buprenorphine))</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>124918</td>
			<td>controlled drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100 Software</td>
			<td>Fujifilm-Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intact pericardium ischemic rodent model

Este protocolo mostrou que o pericárdio e seu conteúdo desempenham um papel antifibrótico essencial no modelo isquêmico de roedores (ligadura coronariana para induzir lesão miocárdica). A maioria dos modelos pré-clínicos de infarto do miocárdio requer a ruptura da integridade pericárdica com perda do meio celular homeostático. No entanto, recentemente uma metodologia foi desenvolvida por nós para induzir o infarto do miocárdio, o que minimiza os danos pericárdicos e retém a população de células imunes residentes do coração. Foi observada uma melhora da recuperação funcional cardíaca em camundongos com um espaço pericárdico intacto após a ligadura coronariana. Este método oferece uma oportunidade para estudar as respostas inflamatórias no espaço pericárdico após o infarto do miocárdio. O desenvolvimento adicional das técnicas de marcação pode ser combinado com este modelo para entender o destino e a função das células imunes pericárdicas na regulação dos mecanismos inflamatórios que impulsionam o remodelamento no coração, incluindo a fibrose.

Este modelo de ligadura coronária modificado foi otimizado para alcançar a reprodutibilidade e a sobrevivência animal. No entanto, devido à lesão significativa induzida no coração, algumas mortalidades esperadas intraoperatórias e pós-operatórias estão associadas ao procedimento. A mortalidade padrão é tipicamente maior em homens (~ 25-35%) do que em mulheres (~ 10-15%).
A indução bem-sucedida de um IAM com a ligadura coronariana modificada deve ser evidente por alterações nos...

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An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

Este protocolo descreve as etapas para induzir o infarto do miocárdio em camundongos, preservando o pericárdio e seu conteúdo.

Um modelo de roedor isquêmico de pericárdio intacto

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

Este método nos permitirá avaliar o papel da cavidade pericárdica que envolve o coração e seu conteúdo no reparo cardíaco após o infarto do miocárdio. Em comparação com os métodos convencionais de ligadura coronariana para modelagem do infarto do miocárdio, nosso método mantém uma cavidade pericárdica intacta, permitindo a determinação do conteúdo e rastreia seus papéis após a lesão isquêmica cardíaca. Compreender a contribuição da cavidade pericárdica e a resposta à lesão do coração fornecerá informações importantes sobre estratégias terapêuticas que visam o pericárdio para melhorar a cicatrização do coração.Para começar com a pós-anestesia, restrinja as patas do rato e posicione-o sobre a mesa cirúrgica. Depois de preparar o rato para a cirurgia, conforme descrito no manuscrito, ventilar o rato com 2%isoflurano e 100% de oxigénio como gás transportador utilizando um ventilador comercial. Em seguida, defina uma taxa de 110 respirações por minuto, um volume corrente de 250 microlitros e uma pressão expiratória final positiva de quatro milímetros de mercúrio.Role o mouse 30% em seu lado direito para posicionar o lado esquerdo do peito para a cirurgia. Em seguida, faça uma incisão lateral de dois a três centímetros na pele do peito para visualizar os músculos peitorais do lado esquerdo. Faça uma incisão de um centímetro da linha média para fora para cortar o peitoral maior e menor.Evite sangramento excessivo durante toda a cauterização dos vasos sangrando. Visualize os músculos intercostais entre a terceira e a quarta costelas. Faça uma incisão de dois centímetros no músculo intercostal esquerdo para introduzir ar na cavidade torácica e permitir que o coração e os pulmões caiam para longe da incisão.Para incidir o intercostal sem sangramento, pare temporariamente o ventilador e expanda a abertura usando um dispositivo de cauterização. Usando afastadores, retraia as costelas para expor o coração. Em seguida, observe o pericárdio e o coração subjacente sob um microscópio estéreo.Coloque suavemente a pinça na superfície do pericárdio para reduzir o pericárdio e o movimento cardíaco subjacente. Marcar visualmente a artéria coronária LAD traçando sua emergência sob o apêndice esquerdo. Usando o driver de microagulha, guie uma sutura apropriada através do pericárdio sob o LAD.Observe a sutura emergindo do outro lado do LAD e do pericárdio. Representando o modelo de ligadura permanente, amarre a sutura para restringir o fluxo sanguíneo através da artéria coronária, tornando visível o branqueamento da porção anterior do ventrículo esquerdo. Em seguida, corte o excesso de sutura com a ajuda de uma tesoura.Fornecer injeções de manutenção de analgésico por via subcutânea a cada 12 horas por 72 horas após a cirurgia. Depois de reduzir o isoflurano para 1%, desligue o isoflurano, mantendo a ventilação com oxigênio. Uma vez que o animal mostre sinais de respiração, remova o tubo traqueal de calibre 23 da boca e coloque o rato em uma gaiola de recuperação para monitorar a retomada da respiração.Permita que o rato recupere na gaiola com uma parte da gaiola colocada numa almofada de aquecimento para fornecer uma fonte de calor externa. Monitore o estado de saúde do rato diariamente durante sete dias, avaliando as incisões e o desconforto animal. Se necessário, administrar antibióticos para uma recuperação bem-sucedida após a cirurgia invasiva.Depois de manter o rato sob anestesia geral com oxigênio, coloque-o em decúbito dorsal em uma plataforma de palco aquecida e prenda as patas aos eletrodos de ECG. Em seguida, rasgue o peito. Adquira imagens de ECG usando sonda transdutora e gel de contato e analise com o software apropriado.Após a avaliação não invasiva do ECG, desligue o isoflurano e devolva o rato à gaiola. Fixe o coração em formalina a 10% por pelo menos 24 horas. Corte a amostra usando uma lâmina de barbear reta através do ventrículo direito, septo interventricular e ventrículo esquerdo, garantindo que a incisão passe pelo centro da zona do infarto.E, em seguida, a parafina incorpora as amostras de tecido. As seções cortadas são então colocadas em de montagem para posterior incorporação de parafina e subsequente seccionamento em seções de cinco micrômetros de espessura. Após a colocação de seções de tecido em lâminas, desparafinizar usando tolueno e lavagens de álcool graduadas com água deionizada.Em seguida, reidrate. Em seguida, marque a seção com 0,1% de vermelho sirius em ácido pícrico por duas horas à temperatura ambiente. Lavar a secção com ácido acético a 0,5% durante três minutos, seguido de enxaguar com etanol a 70% durante um minuto.Desidratar a seção usando a ordem inversa das lavagens com concentrações crescentes e graduadas de etanol antes da montagem para avaliação microscópica. A indução bem-sucedida do infarto do miocárdio com a ligadura coronariana modificada foi avaliada examinando-se os parâmetros funcionais e as características estruturais do coração. Para a função, a fração de ejeção diminuída do ventrículo esquerdo foi avaliada por ecocardiografia dentro de três a quatro semanas após o infarto do miocárdio.A coloração histológica demonstrou que as alterações funcionais foram acompanhadas de fibrose significativa da parede do ventrículo esquerdo, o que foi confirmado pela quantificação da fibrose corada em vermelho picrosirius nos cortes transversais do coração quatro semanas após o infarto com os modelos de ligadura coronariana pericárdica interrompida ou intacta. A combinação do método de marcação de esferas fluorescentes com a análise de citometria de fluxo forneceu uma abordagem para rastrear os macrófagos pericárdicos positivos para Gata6 residentes. É importante ressaltar que pouca ou nenhuma rotulagem foi detectada no coração ou no sangue.Após o infarto do miocárdio, a realocação das células pode ser rastreada por citometria de fluxo e imagem. A quantificação das células mieloides pericárdicas marcadas com esferas fluorescentes com ou sem infarto do miocárdio é mostrada. É necessário cuidado para evitar inadvertidamente interromper ou rasgar o pericárdio fino durante o procedimento.Este método pode ser combinado com o rastreamento de linhagem do bloqueio celular ou efetor, o que permitirá rastrear e determinar o impacto do componente pericárdico na resposta de cicatrização no coração infartado. Identificamos que a cavidade pericárdica protege o coração após a lesão, que é parcialmente mediada por macrófagos pericárdicos residentes. Esta abordagem abre uma nova área de pesquisa para doenças cardiovasculares.

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Medicine

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