Name: an intact pericardium ischemic rodent model
Uploaded: 2021-09-02T14:00:00
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Para estos experimentos se utilizaron ratones machos y hembras C57BL / 6J entre 8-14 semanas de edad. Este protocolo ha recibido la aprobación ética del Comité de Cuidado de Animales de la Universidad de Calgary y sigue todas las pautas de cuidado de los animales.
1. Preparación y cirugía del ratón
<ol><li>Esterilice las herramientas quirúrgicas (a través del esterilizador de cuentas o autoclave).</li>
	<li>Pesar el peso prequirúrgico del ratón y la dosis analgésica.</li>
	<li>Col...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141, 139 (2020).</li><li>Iismaa, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+regenerative+mechanisms+across+different+mammalian+tissues.">Comparative regenerative mechanisms across different mammalian tissues.</a> NPJ Regenerative Medicine. 3 (6), (2018).</li><li>Bayat, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+heart+failure+after+myocardial+infarction+in+mice.">Progressive heart failure after myocardial infarction in mice.</a> Basic Research in Cardiology. 97 (3), 206-213 (2002).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. 52, 2581 (2011).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Borlaug, B. A., Reddy, Y. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+pericardium+in+heart+failure:+Implications+for+pathophysiology+and+treatment.">The role of the pericardium in heart failure: Implications for pathophysiology and treatment.</a> JACC Heart Failure. 7 (7), 574-585 (2019).</li><li>Pfaller, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+pericardium+for+cardiac+biomechanics:+from+physiology+to+computational+modeling.">The importance of the pericardium for cardiac biomechanics: from physiology to computational modeling.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 18 (2), 503-529 (2019).</li><li>Deniset, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata6(+)+Pericardial+Cavity+Macrophages+Relocate+to+the+Injured+Heart+and+Prevent+Cardiac+Fibrosis.">Gata6(+) Pericardial Cavity Macrophages Relocate to the Injured Heart and Prevent Cardiac Fibrosis.</a> Immunity. 51 (1), 131-140 (2019).</li><li>Weber, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+targeting+of+the+pleural+space+by+intercostal+approach.">Immune targeting of the pleural space by intercostal approach.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 14 (2015).</li><li>Nakatani, T., Shinohara, H., Fukuo, Y., Morisawa, S., Matsuda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pericardium+of+rodents:+pores+connect+the+pericardial+and+pleural+cavities.">Pericardium of rodents: pores connect the pericardial and pleural cavities.</a> The Anatomical Record. 220, 132-137 (1988).</li><li>Tyberg, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+pericardial+pressure+and+right+atrial+pressure:+an+intraoperative+study.">The relationship between pericardial pressure and right atrial pressure: an intraoperative study.</a> Circulation. 73, 428-432 (1986).</li><li>Hamilton, D. R., Sas, R., Semlacher, R. A., Kieser Prieur, T. M., Tyberg, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+left+and+right+pericardial+pressures+in+humans:+an+intraoperative+study.">The relationship between left and right pericardial pressures in humans: an intraoperative study.</a> The Canadian Journal of Cardiology. 27, 346-350 (2011).</li><li>Park, D. S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pericardial+proteoglycan+4+(lubricin):+Implications+for+postcardiotomy+intrathoracic+adhesion+formation.">Human pericardial proteoglycan 4 (lubricin): Implications for postcardiotomy intrathoracic adhesion formation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 156 (4), 1598-1608 (2018).</li></ol>

Inducir un IM en un pericardio cerrado en roedores es único y puede tener aplicaciones potencialmente significativas. El procedimiento depende en gran medida de la familiaridad del cirujano con el modelo de roedor y la anatomía cardíaca del roedor. El éxito también depende de la atención brindada durante tres pasos críticos: incisión del músculo intercostal y retracción de las costillas (Pasos 1.11-1.13), creación del infarto (Paso 1.17) y recuperación animal (Pasos 1.22-1.24).
La ...

Hasta el día de hoy, la enfermedad cardiovascular (ECV) es reconocida como la principal causa de muerte a nivel mundial, lo que resulta en una carga financiera significativa y una reducción en la calidad de vida del paciente1. La enfermedad arterial coronaria (EAC) es un subtipo de ECV y desempeña un papel esencial en el desarrollo del infarto de miocardio (IM), que es un contribuyente principal a la mortalidad. Por definición, el IM resulta de una lesión irreversible en el tejido miocárdico debido a condiciones prolongadas de isquemia e hipoxia. El tejido miocárdico carece de capacidad de regeneración, por lo que las lesiones son permanentes y resultan en el reemplazo del músculo cardíaco con una cicatriz fibrótica que puede ser inicialmente protectora, pero que finalmente contribuye a la remodelación cardíaca adversa y eventual insuficiencia cardíaca2.
Aunque el tratamiento de los pacientes con EAC ha mejorado drásticamente en las últimas décadas, la insuficiencia cardíaca crónica (ICC) secundaria a la isquemia afecta a muchos pacientes en todo el mundo. Para prevenir y manejar esta epidemia, es necesario comprender los mecanismos subyacentes más ampliamente y desarrollar nuevos enfoques terapéuticos. Además, los hallazgos anteriores destacan las limitaciones de la terapia sistémica y la necesidad de desarrollar alternativas precisas. Dado que la investigación de las secuelas moleculares del IM en humanos se ve afectada por la capacidad de acceder al tejido infartado, los modelos animales que recapitulan las características y el desarrollo del IM humano y la ICC relacionados con la ECV son indispensables.
Como los modelos animales ideales se parecen mucho a un trastorno humano por sus características estructurales y funcionales, la etiología de la enfermedad debe guiar su concepción. En la EAC, es la estenosis aterosclerótica crónica de las arterias coronarias u oclusión trombótica aguda. Se han desarrollado y aplicado diferentes métodos en varias especies de animales de laboratorio para inducir el estrechamiento u oclusión de la arteria coronaria. Tales estrategias se pueden clasificar ampliamente en dos grupos: (1) manipulación mecánica de una arteria coronaria para inducir un IM y (2) aterosclerosis acelerada para facilitar el estrechamiento coronario que conduce a un IM. La primera estrategia generalmente implica la ligadura de una arteria coronaria o la colocación de un stent dentro de la arteria. El segundo enfoque tiende a depender de la modificación de la dieta del animal para incluir alimentos altos en grasa / colesterol. Algunas de las limitaciones de este último enfoque incluyen la falta de control sobre el momento y el sitio de las oclusiones coronarias.
Por el contrario, la inducción quirúrgica de IM o isquemia en un modelo animal tiene varias ventajas, como la ubicación, el momento preciso y la extensión del evento coronario, lo que lleva a resultados más reproducibles. El método más utilizado es la ligadura quirúrgica de la arteria coronaria descendente anterior izquierda (LAD). Tales modelos recapitulan las respuestas humanas a la lesión isquémica aguda, así como la progresión a CHF3. Inicialmente desarrollada en animales más grandes, la cirugía LAD en animales pequeños como roedores se ha vuelto más factible con los avances en la tecnología4. Al establecer tales modelos, los ratones han sido favorecidos por varias razones, incluida su disponibilidad relativa, bajo costo en vivienda y su capacidad de manipulación genética.
Los modelos quirúrgicos contemporáneos de cardiopatía isquémica que utilizan la oclusión LAD requieren que el investigador abra el pericardio para ligar temporal o permanentemente la arteria5. Tales estrategias resultan en la interrupción del espacio pericárdico, que desempeña una función esencialmente mecánica y lubricante para garantizar una función cardíaca adecuada. Otra desventaja de abrir el pericardio es perder el líquido pericárdico nativo del animal con sus diversos componentes celulares y proteicos 6,7. En respuesta, desarrollamos un método para inducir IM mientras mantenemos intacto el pericardio. Además de minimizar la perturbación de este entorno homeostático, este enfoque permite etiquetar y rastrear células específicas después de causar un IM. Además, este enfoque representa mejor la lesión isquémica miocárdica en el entorno humano.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Steri-350 Bead Sterilizer</td>
			<td>Inotech</td>
			<td>NC9449759</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-949</td>
			<td>Falcon, 352340</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-952</td>
			<td>Falcon, 352350</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W Catheter Needle 24 G X 3/4&#34;</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (10% povidone-iodine topical solution)</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>104826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNP Ophthalmic Ointment</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>17909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22625101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCR103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase XI</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C7657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 taper needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>GL-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - PC-13 cutting needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>SL-1659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11009-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Mounting Medium</td>
			<td>Agilen</td>
			<td>CS70330-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 100%</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MFCD00003568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon 8-0 Ethilon Suture - BV-130-4 taper needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Inc.</td>
			<td>2815G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Optic Light</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2208502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite&#174; YG Carboxylate Microspheres 1.00 &#181;m</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>15702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td>Model 150-ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>H4272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-0951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane USP, 250 mL</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Fixator Retraction System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18200-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550D- 40 MHz probe</td>
			<td>Fujifilm- Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 Tubing</td>
			<td>Braintree Scienctific, Inc.</td>
			<td>PE10 50 FT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ-1B Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic (10 mL, 0.3mg/mL buprenorphine))</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>124918</td>
			<td>controlled drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100 Software</td>
			<td>Fujifilm-Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intact pericardium ischemic rodent model

Este protocolo ha demostrado que el pericardio y su contenido juegan un papel antifibrótico esencial en el modelo de roedor isquémico (ligadura coronaria para inducir lesión miocárdica). La mayoría de los modelos preclínicos de infarto de miocardio requieren la interrupción de la integridad pericárdica con pérdida del medio celular homeostático. Sin embargo, recientemente hemos desarrollado una metodología para inducir el infarto de miocardio, que minimiza el daño pericárdico y retiene la población de células inmunes residentes del corazón. Se ha observado una mejor recuperación funcional cardíaca en ratones con un espacio pericárdico intacto después de la ligadura coronaria. Este método proporciona una oportunidad para estudiar las respuestas inflamatorias en el espacio pericárdico después del infarto de miocardio. El desarrollo adicional de las técnicas de etiquetado se puede combinar con este modelo para comprender el destino y la función de las células inmunes pericárdicas en la regulación de los mecanismos inflamatorios que impulsan la remodelación en el corazón, incluida la fibrosis.

Este modelo de ligadura coronaria modificado ha sido optimizado para lograr la reproducibilidad y la supervivencia animal. Sin embargo, debido a la lesión significativa inducida en el corazón, se asocia cierta mortalidad intraoperatoria y postoperatoria esperada con el procedimiento. La mortalidad estándar es típicamente mayor en hombres (~ 25-35%) que en mujeres (~ 10-15%).
La inducción exitosa de un IM con la ligadura coronaria modificada debe ser evidente por cambios en los parámetros...

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An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

Este protocolo describe los pasos para inducir el infarto de miocardio en ratones mientras se preserva el pericardio y su contenido.

Un modelo de roedor isquémico de pericardio intacto

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

Este método nos permitirá evaluar el papel de la cavidad pericárdica que rodea el corazón y su contenido en la reparación cardíaca tras un infarto de miocardio. En comparación con los métodos convencionales de ligadura coronaria para modelar el infarto de miocardio, nuestro método mantiene intacta la cavidad pericárdica, lo que permite la determinación del contenido y rastrea sus funciones después de una lesión isquémica cardíaca. Comprender la contribución de la cavidad pericárdica y la respuesta a la lesión del corazón proporcionará información importante sobre las estrategias terapéuticas que se dirigen al pericardio para mejorar la curación del corazón.Para comenzar con la anestesia posterior, sujete las patas del ratón y colóquelo en la mesa quirúrgica. Después de preparar al ratón para la cirugía como se describe en el manuscrito, ventile el ratón con 2% de isoflurano y 100% de oxígeno como gas portador utilizando un ventilador comercial. Luego establezca una velocidad de 110 respiraciones por minuto, un volumen corriente de 250 microlitros y una presión espiratoria final positiva de cuatro milímetros de mercurio.Haga rodar el ratón 30% sobre su lado derecho para colocar el lado izquierdo del pecho para la cirugía. Luego haga una incisión lateral de dos a tres centímetros en la piel del pecho para visualizar los músculos pectorales en el lado izquierdo. Haga una incisión de un centímetro desde la línea media hacia afuera para cortar el pectoral mayor y menor.Evite el sangrado excesivo durante la cauterización de los vasos sangrantes. Visualiza los músculos intercostales entre la tercera y cuarta costilla. Haga una incisión de dos centímetros en el músculo intercostal izquierdo para introducir aire en la cavidad torácica y permitir que el corazón y los pulmones se desprendan de la incisión.Para incidir el intercostal sin sangrado, detenga temporalmente el ventilador y expanda la abertura con un dispositivo de cauterio. Usando retractores, retraiga las costillas para exponer el corazón. Luego observe el pericardio y el corazón subyacente bajo un microscopio estéreo.Coloque suavemente los fórceps en la superficie del pericardio para reducir el pericardio y el movimiento subyacente del corazón. Visualmente hito de la arteria coronaria LAD mediante el seguimiento de su aparición debajo del apéndice izquierdo. Usando el controlador de microagujas, guíe una sutura apropiada a través del pericardio debajo del LAD.Observe la sutura que emerge en el otro lado de la LAD y el pericardio. Representando el modelo de ligadura permanente, ate la sutura para restringir el flujo sanguíneo a través de la arteria coronaria, haciendo visible el escaldado de la porción anterior del ventrículo izquierdo. Luego recorte el exceso de sutura con la ayuda de tijeras.Proporcionar inyecciones de mantenimiento de analgésico por vía subcutánea cada 12 horas durante 72 horas después de la cirugía. Después de reducir el isoflurano al 1%, apague el isoflurano mientras mantiene la ventilación con oxígeno. Una vez que el animal muestre signos de respiración, retire el tubo traqueal de calibre 23 de la boca y coloque al ratón en una jaula de recuperación para controlar la reanudación de la respiración.Permita que el ratón se recupere en la jaula con una parte de la jaula colocada en una almohadilla de calentamiento para proporcionar una fuente de calor externa. Controle el estado de salud del ratón diariamente durante siete días evaluando las incisiones y las molestias de los animales. Si es necesario, administre antibióticos para una recuperación exitosa después de la cirugía invasiva.Después de mantener al ratón bajo anestesia general con oxígeno, coloque el ratón en posición supina en una plataforma de escenario calentada y conecte las patas a los cables del ECG. Luego roza el pecho. Adquiera imágenes de ECG utilizando sonda de transductor y gel de contacto y analícelas con el software apropiado.Después de la evaluación no invasiva del ECG, apague el isoflurano y devuelva el ratón a la jaula. Fijar el corazón en formalina al 10% durante al menos 24 horas. Corte la muestra con una cuchilla de afeitar recta a través del ventrículo derecho, el tabique interventricular y el ventrículo izquierdo, asegurándose de que la incisión pase por el centro de la zona del infarto.Y luego la parafina incrusta las muestras de tejido. Las secciones cortadas se colocan en un casete de montaje para una mayor incrustación de parafina y la posterior sección en secciones de cinco micrómetros de espesor. Después de la colocación de secciones de tejido en portaobjetos, desparafinar usando tolueno y lavados con alcohol graduado con agua desionizada.Luego rehidratar. A continuación, tiñe la sección con 0,1% de rojo sirio en ácido pícrico durante dos horas a temperatura ambiente. Lave la sección con ácido acético al 0,5% durante tres minutos, seguido de enjuague con etanol al 70% durante un minuto.Deshidratar la sección utilizando el orden inverso de los lavados con concentraciones de etanol crecientes y graduadas antes de montarlas para una evaluación microscópica. La inducción exitosa del infarto de miocardio con la ligadura coronaria modificada se evaluó mediante el examen de los parámetros funcionales del corazón y las características estructurales. Para la función, la disminución de la fracción de eyección del ventrículo izquierdo se evaluó mediante ecocardiografía dentro de las tres a cuatro semanas posteriores al infarto de miocardio.La tinción histológica demostró que los cambios funcionales se acompañaron de fibrosis significativa de la pared del ventrículo izquierdo, que se confirmaron aún más mediante la cuantificación de la fibrosis teñida de rojo picrosirius en las secciones transversales del corazón a las cuatro semanas después del infarto con los modelos de ligadura coronaria pericárdica interrumpida o intacta. La combinación del método de etiquetado de perlas fluorescentes con el análisis de citometría de flujo proporcionó un enfoque para rastrear los macrófagos pericárdicos positivos de Gata6 residentes. Es importante destacar que se detectó poco o ningún etiquetado en el corazón o la sangre.Después del infarto de miocardio, la reubicación de las células se puede rastrear mediante citometría de flujo e imágenes. Se muestra la cuantificación de las células mieloides pericárdicas marcadas con perlas fluorescentes con o sin infarto de miocardio. Se necesita cuidado para evitar interrumpir o desgarrar inadvertidamente el pericardio delgado durante el procedimiento.Este método se puede combinar con el rastreo del linaje celular o el bloqueo efector, lo que permitirá rastrear y determinar el impacto del componente pericárdico en la respuesta de curación en el corazón infartado. Hemos identificado que la cavidad pericárdica protege el corazón después de una lesión, que está parcialmente mediada por macrófagos pericárdicos residentes. Este enfoque abre una nueva área de investigación para la enfermedad cardiovascular.

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