Name: an intact pericardium ischemic rodent model
Uploaded: 2021-09-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

Manliga och kvinnliga C57BL / 6J-möss mellan 8-14 veckors ålder användes för dessa experiment. Detta protokoll har fått etiskt godkännande från djurvårdskommittén vid University of Calgary och följer alla riktlinjer för djurvård.
1. Musförberedelse och kirurgi
<ol><li>Sterilisera kirurgiska verktyg (via pärlsterilisator eller autoklav).</li>
	<li>Väg musen för prekirurgisk vikt och smärtstillande dos.</li>
	<li>Placera musen i en induktionslåda med 4% isofluran och 800 ml/m...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2020+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 141, 139 (2020).</li><li>Iismaa, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+regenerative+mechanisms+across+different+mammalian+tissues.">Comparative regenerative mechanisms across different mammalian tissues.</a> NPJ Regenerative Medicine. 3 (6), (2018).</li><li>Bayat, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+heart+failure+after+myocardial+infarction+in+mice.">Progressive heart failure after myocardial infarction in mice.</a> Basic Research in Cardiology. 97 (3), 206-213 (2002).</li><li>Virag, J. A., Lust, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+artery+ligation+and+intramyocardial+injection+in+a+murine+model+of+infarction.">Coronary artery ligation and intramyocardial injection in a murine model of infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. 52, 2581 (2011).</li><li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+myocardial+infarction:+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion.">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 13 (11), (2020).</li><li>Borlaug, B. A., Reddy, Y. N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+pericardium+in+heart+failure:+Implications+for+pathophysiology+and+treatment.">The role of the pericardium in heart failure: Implications for pathophysiology and treatment.</a> JACC Heart Failure. 7 (7), 574-585 (2019).</li><li>Pfaller, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+pericardium+for+cardiac+biomechanics:+from+physiology+to+computational+modeling.">The importance of the pericardium for cardiac biomechanics: from physiology to computational modeling.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 18 (2), 503-529 (2019).</li><li>Deniset, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata6(+)+Pericardial+Cavity+Macrophages+Relocate+to+the+Injured+Heart+and+Prevent+Cardiac+Fibrosis.">Gata6(+) Pericardial Cavity Macrophages Relocate to the Injured Heart and Prevent Cardiac Fibrosis.</a> Immunity. 51 (1), 131-140 (2019).</li><li>Weber, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+targeting+of+the+pleural+space+by+intercostal+approach.">Immune targeting of the pleural space by intercostal approach.</a> BMC Pulmonary Medicine. 15, 14 (2015).</li><li>Nakatani, T., Shinohara, H., Fukuo, Y., Morisawa, S., Matsuda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pericardium+of+rodents:+pores+connect+the+pericardial+and+pleural+cavities.">Pericardium of rodents: pores connect the pericardial and pleural cavities.</a> The Anatomical Record. 220, 132-137 (1988).</li><li>Tyberg, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+pericardial+pressure+and+right+atrial+pressure:+an+intraoperative+study.">The relationship between pericardial pressure and right atrial pressure: an intraoperative study.</a> Circulation. 73, 428-432 (1986).</li><li>Hamilton, D. R., Sas, R., Semlacher, R. A., Kieser Prieur, T. M., Tyberg, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+left+and+right+pericardial+pressures+in+humans:+an+intraoperative+study.">The relationship between left and right pericardial pressures in humans: an intraoperative study.</a> The Canadian Journal of Cardiology. 27, 346-350 (2011).</li><li>Park, D. S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+pericardial+proteoglycan+4+(lubricin):+Implications+for+postcardiotomy+intrathoracic+adhesion+formation.">Human pericardial proteoglycan 4 (lubricin): Implications for postcardiotomy intrathoracic adhesion formation.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 156 (4), 1598-1608 (2018).</li></ol>

Att inducera en MI i ett slutet perikardium hos gnagare är unikt och kan ha potentiellt betydande tillämpningar. Förfarandet är starkt beroende av kirurgens förtrogenhet med gnagarmodellen och gnagarens hjärtanatomi. Framgång är också beroende av den vård som ges under tre kritiska steg: interkostalt muskelsnitt och revbensindragning (steg 1.11-1.13), skapande av infarkt (steg 1.17 ) och djuråterhämtning (steg 1.22-1.24).
Torakotomin måste göras flitigt för att undvika punkterin...

Till denna dag erkänns hjärt-kärlsjukdom (CVD) som den ledande dödsorsaken globalt, vilket resulterar i en betydande ekonomisk börda och minskning av patientens livskvalitet1. Kranskärlssjukdom (CAD) är en subtyp av CVD och spelar en viktig roll i utvecklingen av hjärtinfarkt (MI), som är en viktig bidragsgivare till dödligheten. Per definition är MI resultatet av irreversibel skada på myokardvävnaden på grund av långvariga tillstånd av ischemi och hypoxi. Myokardvävnad saknar regenereringskapacitet, så skador är permanenta och resulterar i att hjärtmuskeln ersätts med ett fibrotiskt ärr som initialt kan vara skyddande men i slutändan bidrar till negativ hjärtombyggnad och eventuell hjärtsvikt2.
Även om hanteringen av patienter med CAD har förbättrats dramatiskt under de senaste decennierna, påverkar kronisk hjärtsvikt (CHF) sekundärt till ischemi många patienter över hela världen. För att förebygga och hantera denna epidemi är det nödvändigt att förstå de underliggande mekanismerna mer omfattande och utveckla nya terapeutiska tillvägagångssätt. Dessutom belyser tidigare resultat begränsningarna för systemisk terapi och nödvändigheten av att utveckla exakta alternativ. Med tanke på att undersöka de molekylära följdsjukdomarna av MI hos människor påverkas av förmågan att komma åt infarkterad vävnad, är djurmodeller som rekapitulerar egenskaperna och utvecklingen av human MI och CHF relaterade till CVD oumbärliga.
Eftersom ideala djurmodeller liknar en mänsklig störning för strukturella och funktionella egenskaper, bör sjukdomsetiologi vägleda deras uppfattning. I CAD är det den kroniska aterosklerotiska stenosen i kranskärlen eller akut trombotisk ocklusion. Olika metoder har utvecklats och tillämpats hos olika arter av försöksdjur för att inducera kranskärlsförträngning eller ocklusion. Sådana strategier kan i stort sett klassificeras i två grupper: (1) mekanisk manipulation av en kranskärl för att inducera en MI och (2) påskynda åderförkalkning för att underlätta koronar förträngning som leder till en MI. Den första strategin involverar vanligtvis antingen ligering av en kranskärl eller placering av en stent i artären. Det andra tillvägagångssättet tenderar att förlita sig på att modifiera djurets kost för att inkludera mat med högt fett/ kolesterol. Några av begränsningarna i detta senare tillvägagångssätt inkluderar bristen på kontroll på tidpunkten och platsen för koronar occlusions.
Däremot har den kirurgiska induktionen av MI eller ischemi i en djurmodell flera fördelar, såsom plats, exakt tidpunkt och omfattning av kranskärlshändelsen, vilket leder till mer reproducerbara resultat. Den mest använda metoden är kirurgisk ligering av vänster främre fallande kranskärl (LAD). Sådana modeller rekapitulerar mänskliga svar på akut ischemisk skada, liksom progressionen till CHF3. LAD-kirurgi på små djur som gnagare utvecklades ursprungligen hos större djur och har blivit mer genomförbart med framsteg inom teknik4. Vid upprättandet av sådana modeller har möss gynnats av olika skäl, inklusive deras relativa tillgänglighet, låga kostnader i bostäder och deras kapacitet för genetisk manipulation.
Samtida kirurgiska modeller av ischemisk hjärtsjukdom med LAD-ocklusion kräver att forskaren öppnar perikardiet för att tillfälligt eller permanent ligera artären5. Sådana strategier resulterar i störningar i perikardialutrymmet, vilket spelar en väsentligen mekanisk och smörjande funktion för att säkerställa korrekt hjärtfunktion. En annan nackdel med att öppna perikardiet är att förlora djurets ursprungliga perikardiella vätska med dess olika cellulära och proteinkomponenter 6,7. Som svar utvecklades en metod för att inducera MI samtidigt som perikardiet hölls intakt av oss. Förutom att minimera störningen av denna homeostatiska miljö, möjliggör detta tillvägagångssätt märkning och spårning av specifika celler efter att ha orsakat en MI. Dessutom representerar detta tillvägagångssätt bättre myokardiell ischemisk skada i den mänskliga miljön.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Steri-350 Bead Sterilizer</td>
			<td>Inotech</td>
			<td>NC9449759</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-949</td>
			<td>Falcon, 352340</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 &#181;m Cell strainer</td>
			<td>VWR</td>
			<td>CA21008-952</td>
			<td>Falcon, 352350</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A1049201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W Catheter Needle 24 G X 3/4&#34;</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine (10% povidone-iodine topical solution)</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>104826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11000-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BNP Ophthalmic Ointment</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>17909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge 5810R</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22625101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>SCR103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase XI</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>C7657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - CV-11 taper needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>GL-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Covidien 5-0 Polysorb Suture - PC-13 cutting needle</td>
			<td>Medtronic Canada</td>
			<td>SL-1659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Blunt Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11009-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Mounting Medium</td>
			<td>Agilen</td>
			<td>CS70330-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, 100%</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>MFCD00003568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethicon 8-0 Ethilon Suture - BV-130-4 taper needle</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Inc.</td>
			<td>2815G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Optic Light</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>2208502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresbrite&#174; YG Carboxylate Microspheres 1.00 &#181;m</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>15702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geiger Thermal Cautery Unit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501293</td>
			<td>Model 150-ST</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>H4272</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>75-0951</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane USP, 250 mL</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>108737</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic Fixator Retraction System</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>18200-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MX550D- 40 MHz probe</td>
			<td>Fujifilm- Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Driver</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 Tubing</td>
			<td>Braintree Scienctific, Inc.</td>
			<td>PE10 50 FT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>FST 14184-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ-1B Stereo Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ1-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VentElite Small Animal Ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetergesic (10 mL, 0.3mg/mL buprenorphine))</td>
			<td>CDMV Inc</td>
			<td>124918</td>
			<td>controlled drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo 2100 Software</td>
			<td>Fujifilm-Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an intact pericardium ischemic rodent model

Detta protokoll har visat att perikardiet och dess innehåll spelar en väsentlig antifibrotisk roll i den ischemiska gnagarmodellen (koronar ligering för att inducera hjärtskada). Majoriteten av prekliniska hjärtinfarktmodeller kräver störning av perikardiell integritet med förlust av den homeostatiska cellulära miljön. Men nyligen har en metodik utvecklats av oss för att inducera hjärtinfarkt, vilket minimerar perikardiell skada och behåller hjärtats bosatta immuncellpopulation. En förbättrad hjärtfunktionell återhämtning hos möss med ett intakt perikardiellt utrymme efter koronar ligering har observerats. Denna metod ger möjlighet att studera inflammatoriska svar i perikardialutrymmet efter hjärtinfarkt. Ytterligare utveckling av märkningsteknikerna kan kombineras med denna modell för att förstå ödet och funktionen hos perikardiella immunceller för att reglera de inflammatoriska mekanismerna som driver ombyggnad i hjärtat, inklusive fibros.

Denna modifierade koronar ligeringsmodell har optimerats för att uppnå reproducerbarhet och djuröverlevnad. På grund av den betydande skada som induceras i hjärtat är emellertid viss förväntad intraoperativ och postoperativ dödlighet associerad med proceduren. Standarddödligheten är vanligtvis högre hos män (~ 25-35%) än hos kvinnor (~ 10-15%).
Framgångsrik induktion av en MI med den modifierade koronar ligeringen bör framgå av förändringar i hjärtats funktionella parametra...

Watch this Scientific Journal Video about An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model at JoVE.com

An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

Detta protokoll beskriver stegen för att inducera hjärtinfarkt hos möss samtidigt som perikardiet och dess innehåll bevaras.

En intakt perikardium ischemisk gnagare modell

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

Denna metod gör det möjligt för oss att utvärdera rollen för perikardhålan som omger hjärtat och dess innehåll vid hjärtreparation efter hjärtinfarkt. Jämfört med konventionella koronar ligeringsmetoder för modellering av hjärtinfarkt, upprätthåller vår metod en intakt perikardhålighet, vilket möjliggör bestämning av innehåll och spårar deras roller efter hjärtischemisk skada. Att förstå bidraget från perikardhålan och hjärtats skaderespons kommer att ge viktiga insikter i terapeutiska strategier som riktar sig mot perikardiet för att förbättra hjärtläkning.Till att börja med efter bedövning, begränsa musens tassar och placera den på operationsbordet. Efter att ha förberett musen för operation enligt beskrivningen i manuskriptet, ventilera musen med 2% isofluran och 100% syre som bärgas med hjälp av en kommersiell ventilator. Ställ sedan in en hastighet på 110 andetag per minut, en tidvattenvolym på 250 mikroliter och ett positivt utgångstryck på fyra millimeter kvicksilver.Rulla musen 30% på höger sida för att placera bröstets vänstra sida för operation. Gör sedan ett två till tre centimeter lateralt snitt i brösthuden för att visualisera pectoralismusklerna på vänster sida. Gör ett snitt på en centimeter från mittlinjen utåt för att skära pectoralis major och minor.Undvik överdriven blödning under hela cauterization av blödande kärl. Visualisera de interkostala musklerna mellan tredje och fjärde revbenen. Gör ett snitt på två centimeter i den vänstra interkostala muskeln för att införa luft i bröstkaviteten och låt hjärtat och lungorna falla bort från snittet.För att skära interkostalen utan blödning, stoppa tillfälligt ventilatorn och expandera öppningen med en cautery-enhet. Använd retraktorer, dra tillbaka revbenen för att exponera hjärtat. Observera sedan perikardiet och det underliggande hjärtat under ett stereomikroskop.Placera försiktigt pincetten på perikardiumytan för att minska perikardium och underliggande hjärtrörelser. Visuellt landmärke LAD kranskärl genom att spåra dess uppkomst under vänster bihang. Använd microneedle-drivrutinen och styr en lämplig sutur genom hjärtsäcken under LAD.Observera suturen som dyker upp på andra sidan LAD och perikardiet. Representera den permanenta ligeringsmodellen, binda suturen för att begränsa blodflödet genom kranskärlen, vilket gör blanchering av den främre delen av vänster ventrikel synlig. Trimma sedan överskottet av sutur med hjälp av sax.Ge underhållsinjektioner av smärtstillande subkutant var 12: e timme i 72 timmar efter operationen. Efter att ha minskat isofluranen till 1% stäng av isofluranen medan ventilationen bibehålls med syre. När djuret visar tecken på andning, ta bort det 23 gauge trakealröret från munnen och placera musen i en återhämtningsbur för att övervaka andningsåterupptagandet.Låt musen återhämta sig i buret med en del av buret placerat på en värmedyna för att ge en extern värmekälla. Övervaka musens hälsotillstånd dagligen i sju dagar genom att utvärdera snitt och obehag hos djur. Administrera vid behov antibiotika för en framgångsrik återhämtning efter den invasiva operationen.Efter att ha hållit musen under generell anestesi med syre, placera musen i en bakre position på en uppvärmd scenplattform och fäst tassarna på EKG-ledningarna. Skava sedan bröstet. Skaffa EKG-bilder med hjälp av givarsond och kontaktgel och analysera med lämplig programvara.Efter icke-invasiv EKG-bedömning, stäng av isofluran och sätt tillbaka musen till buren. Fixa hjärtat i 10% formalin i minst 24 timmar. Skär provet med ett rakt rakblad genom höger kammare, interventrikulär septum och vänster ventrikel, så att snittet går genom mitten av infarktzonen.Och sedan bäddar paraffin in vävnadsproverna. De skurna sektionerna placeras sedan i monteringskassett för ytterligare paraffininbäddning och efterföljande sektionering i fem mikrometer tjocka sektioner. Efter placering av vävnadssektioner på objektglas, deparaffinisera med toluen och graderad alkohol tvättar med avjoniserat vatten.Rehydrera sedan. Färga sedan sektionen med 0,1% sirius röd i pikrinsyra i två timmar vid rumstemperatur. Tvätta sektionen med 0,5% ättiksyra i tre minuter följt av sköljning med 70% etanol i en minut.Dehydrera sektionen med omvänd tvättordning med ökande och graderade etanolkoncentrationer innan de monteras för mikroskopisk utvärdering. Den framgångsrika hjärtinfarktinduktionen med den modifierade koronarligeringen bedömdes genom att undersöka hjärtats funktionella parametrar och strukturella egenskaper. För funktion bedömdes minskad ejektionsfraktion av vänster kammare genom ekokardiografi inom tre till fyra veckor efter hjärtinfarkt.Den histologiska färgningen visade att de funktionella förändringarna åtföljdes av signifikant fibros i vänster ventrikelvägg, vilket ytterligare bekräftades genom kvantifiering av picrosirius rödfärgad fibros i hjärtats tvärsnitt vid fyra veckor efter infarkt med de störda eller intakta perikardiella koronarligeringsmodellerna. Att kombinera den fluorescerande pärlmärkningsmetoden med flödescytometrianalys gav ett tillvägagångssätt för att spåra de bosatta Gata6-positiva perikardiella makrofagerna. Det är viktigt att liten eller ingen märkning upptäcktes i hjärtat eller blodet.Efter hjärtinfarkt kan cellernas omlokalisering spåras genom flödescytometri och avbildning. Kvantifiering av den fluorescerande pärlan märkt perikardiella myeloida celler med eller utan hjärtinfarkt visas. Försiktighet behövs för att förhindra att oavsiktligt störa eller riva det tunna perikardiet under proceduren.Denna metod kan kombineras med härstamningsspårning av cellulära eller effektorblockad, vilket gör det möjligt att spåra och bestämma perikardialkomponentens inverkan på läkningssvaret i det infarkterade hjärtat. Vi har identifierat att perikardhålan skyddar hjärtat efter skada, som delvis förmedlas av bosatta perikardiella makrofager. Detta tillvägagångssätt öppnar ett nytt forskningsområde för hjärt-kärlsjukdom.

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Genöverföring för ischemisk hjärtsvikt I en preklinisk modell

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

An in vivo Rodent Model of Contraction-induced Injury and Non-invasive Monitoring of Recovery

En In vivo Gnagarmodell av kontraktion inducerad-skada och icke-invasiv övervakning av Recovery

Muscle strains are one of the most  common complaints treated by physicians. A muscle injury is typically diagnosed from the patient history and  physical ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

En förenklad teknik för framställning av en ischemisk sårmodell

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Använda kvantitativ realtids-PCR för att avgöra Engraftment donatorcellen i en konkurrenskraftig Murine Bone Marrow Transplantation Modell

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Rat Model av fotokemiskt inducerad posterior ischemisk optikusneuropati

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

En Piglet Modell av neonatal hypoxisk-ischemisk encefalopati

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

Demonstration av Rat Ischemisk hudsår Modell

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

Den Gnagarmodell av Nonarteritic främre ischemisk optikusneuropati (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet mätning av mus mesenterica artär med Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

En effektiv siktning metod att isolera intakt Glomeruli från vuxen råtta njure

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...