Double Plasmid Transfection of HEK293 Cells in Cell Stacks
2:30
Harvesting Adeno-Associated Virus AAV and Chemical Lysis of The Transfected HEK293 Cells
3:23
AAV Vector Purification Using Heparin Affinity Chromatography
5:45
Results: Serum Human Monoclonal Antibody (hIgG) Expression in Animals Upon Administration of AAV6.2FF-hIgG
6:41
Conclusion
Transcript
Ce protocole pour la production de vecteurs viraux AAV est rentable et donne une AAV de haute pureté, à titre élevé et de qualité recherche pour une utilisation dans des modèles précliniques de grands animaux. Cette technique utilise des cellules
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Nous fournissons ici une procédure détaillée pour la production à grande échelle de vecteurs AAV de qualité recherche en utilisant des cellules HEK 293 adhérentes cultivées dans des piles de cellules et la purification par chromatographie d’affinité. Ce protocole donne systématiquement >1 x 1013 génomes vectoriels/mL, fournissant des quantités vectorielles appropriées pour les études sur les grands animaux.