Name: in vivo assessment of microtubule dynamics and orientation in caenorhabditis elegans neurons
Uploaded: 2021-11-20T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons at JoVE.com

אנו מודים לישי ג'ין ואנדרו צ'יזהולם על התמיכה הראשונית והמתח ששימש במחקר. זן החיידקים OP50 היה הועיל מסחרית מהמרכז לגנטיקה Caenorhabditis (CGC) במימון משרד NIH של תוכניות תשתית מחקר (P40 OD010440). אנו מודים גם לדהרמנדרה פורי על התקינה של ההליכים הניסיוניים. המחקר ממומן על ידי מענק הליבה של המרכז הלאומי לחקר המוח (נתמך על ידי המחלקה לביוטכנולוגיה, הממשלה של הודו), מענק קריירה מוקדמת של ברית הודו DBT/Wellcome Trust India (מענק # IA/E/18/1/504331) ל- S.D., מענק הביניים של ברית ברית הודו של Wellcome Trust-DBT (מענק # IA / IA / I/13/1/500874) ל- A.G.-R ומענק מוועדת המחקר המדעי וההנדסי (SERB: CRG/2019/002194) ל-א.ג.-ר

1. זן עיתונאי: תרבות ותחזוקה
הערה: כדי למדוד את הדינמיקה microtubule ואת הכיוון נוירונים PLM, השתמשנו בזן התולעת מבטא EBP-2::GFP תחת נוירון מגע ספציפי מקדם mec-4 (juIs338 allele)18,25,26. אנו משתמשים בתרבית תולעים סט...

הבנת הדינמיקה של המיקרוטובלים הייתה מוקד מרכזי בתחום חקר הציטוסד לאורך השנים. Microtubules לעבור התגרענות וקטסטרופה יחד עם תהליך מתמשך של חוסר יציבות דינמית44,45,46,47. הרבה מידע זה הושג באמצעות מבינות כמו קריאות...

לנוירונים יש ארכיטקטורה משוכללת עם תאים מיוחדים כמו דנדריטים, גופי תאים, אקסונים וסינפסות. הציטוסקלטון העצבי מורכב מהמיקרוטובולות, המיקרופילמנטים והנוירופילמנטים והארגון הייחודי שלהם תומך בתאים העצביים מבחינה מבנית ותפקודית1,2,3,4,5,6,7,8,9,10 . במהלך השנים, ארגון microtubule זוהה כגורם מכריע של קוטביות עצבית ותפקוד. כאשר נוירונים עוברים שיפוץ מבני במהלך הפיתוח או ההתחדשות, הדינמיקה והכיוון של microtubule קובעים את הזהות, התחבורה המקוטבת, הצמיחה והפיתוח של תאים עצביים שונים7. לכן, חובה להעריך את הדינמיקה והכיוון של המיקרו-קוטביות ב-vivo כדי לתאם עם תהליך השיפוץ העצבי.
Microtubules מורכב פרוטופילמנטים של הטרודימרים α β טובולין עם קצוות פלוס דינמיים ומינוס יציב יחסית מסתיים11,12. גילוי קומפלקס הקצה פלוס וחלבונים מחייבים הקשורים לקצה אפשרו פלטפורמה להעריך את ארגון microtubule13. חלבונים מחייבים בסופו של דבר (EBP) מקשרים באופן ארעי עם הקצוות הגדלים פלוס של microtubule ואת הדינמיקה עמותה מתואמים לצמיחה של protofilaments microtubule14,15. בשל שיוך תכופים וניתוק של קומפלקס קצה פלוס עם microtubule, פונקציית התפשטות הנקודה של GFP מתויג EBP מופיע כמו "כוכב שביט" בסרט timelapse15,16. מאז התצפית החלוצית בתאי העצב של היונקים16, חלבונים מחייבים בסופו של דבר מתויגים עם חלבונים פלואורסצנטיים שימשו לקביעת דינמיקת microtubule על פני מערכות מודל שונות וסוגי נוירונים17,18,19,20,21,22,23.
בשל מערכת העצבים הפשוטה שלה הגוף השקוף, C. elegans הוכיח להיות מערכת מודל מעולה ללמוד שיפוץ עצבי במהלך פיתוח והתחדשות ב vivo. כאן אנו מתארים שיטות לתיוג, תמונה וניתוח הדינמיקה והצמיחה של המיקרוטובלים במהלך הפיתוח וההתחדשות של נוירוני מגע ב- C. elegans. באמצעות EBP-2::GFP מקודד גנטית, צילמנו את המיקרוטובולות בנוירון PLM, מה שאיפשר לנו לקבוע את הקוטביות של המיקרוטובולות בשני נוריטים שונים של הנוירון הזה24. שיטה זו מאפשרת התבוננות וכימות של שביט EBP כמדד לדינמיקת מיקרוטובול בהקשרים תאיים שונים, לדוגמה, ניתן להעריך את השינויים המקומיים בהתנהגות המיקרוטובלים היוזמת התחדשות אקסון בעקבות אקסוטומיה באמצעות הפרוטוקול שלנו. בדיקה זו יכולה להיות מותאמת כדי לחקור את הרגולציה של דינמיקת microtubule בתהליכים תאיים שונים בסוגי תאים מגוונים ורקעים גנטיים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>CZ18975 worm strain</td>
			<td>Yishi Jin lab</td>
			<td>CZ18975</td>
			<td>Generated by Anindya Ghosh-Roy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9539</td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip (18 mm x 18 mm)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>474030-9010-000</td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry bath with heating block</td>
			<td>Neolab</td>
			<td></td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides (35 mm x 25 mm)</td>
			<td>Blue Star</td>
			<td></td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polystyrene bead solution (4.55 x 10^13 particles/ml in aqueous medium with minimal surfactant)</td>
			<td>Polysciences Inc.</td>
			<td>00876</td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Test tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP50 bacterial strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td>OP50</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mm petri plates</td>
			<td>Praveen Scientific</td>
			<td>20440</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirator/Capillary</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53432-921</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MIR554E</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platinum wire</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope with fluorescence attachment</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M165FC</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.3% Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>71376</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25% Peptone</td>
			<td>T M Media</td>
			<td>1506</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mg/mL Cholesterol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8667</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mM Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>223506</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mM Magnesium sulphate heptahydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2773</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2% Agar</td>
			<td>T M Media</td>
			<td>1202</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25mM Monobasic Potassium dihydrogen phosphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9791</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1M Monobasic Potassium dihydrogen phosphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9791</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.04M Sodium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>71376</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1M Ammonium chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>21405</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.2M Dibasic Disodium hydrogen phosphate heptahydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S9390</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottles</td>
			<td>Borosil</td>
			<td></td>
			<td>Buffer storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>488 nm laser</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5X objective</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>63X objective</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Photometrics</td>
			<td>Evolve 512 Delta</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer system for Spinning Disk unit</td>
			<td>HP</td>
			<td>Intel &#174; Xeon CPU E5-2623 3.00GHz</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Observer.Z1</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halogen lamp</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mercury Arc Lamp</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinning Disk Unit</td>
			<td>Yokogawa</td>
			<td>CSU-X1</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN2 software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image J (Fiji Version)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Image analysis and processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Creative Cloud</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td>Image analysis and processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer system for Image Analysis</td>
			<td>Dell</td>
			<td>Intel &#174; Core &#8482; i7-9700 CPU 3.00GHz</td>
			<td>Image processing/Representation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo assessment of microtubule dynamics and orientation in caenorhabditis elegans neurons

בתאי עצב, אוריינטציה microtubule היה מעריך מפתח לזהות אקסונים שיש להם פלוס סוף החוצה microtubules ו דנדריטים כי בדרך כלל יש אוריינטציה מעורבת. כאן אנו מתארים שיטות לתיוג, תמונה וניתוח הדינמיקה והצמיחה של המיקרוטובלים במהלך הפיתוח וההתחדשות של נוירוני מגע ב- C. elegans. באמצעות כתבים פלואורסצנטיים מקודדים גנטית של טיפים מיקרוטובולים, צילמנו את microtubules האקסוני. ניתן לכמת את השינויים המקומיים בהתנהגות המיקרוטובול היוזם התחדשות אקסון בעקבות אקסוטומיה באמצעות פרוטוקול זה. בדיקה זו ניתנת להתאמה לנוירונים אחרים ורקעים גנטיים כדי לחקור את הרגולציה של דינמיקת microtubule בתהליכים תאיים שונים.

כדוגמה מייצגת, תיארנו בהתבוננות ב- vivo של שביט EBP במצב יציב וחדשות האקסונים של נוירוני PLM. נוירונים PLM ממוקמים באזור הזנב של התולעת עם תהליך ארוך הקדמי היוצר סינפסה ותהליך אחורי קצר. נוירוני PLM גדלים בכיוון הקדמי-אחורי קרוב לאפידרמיס ואחראים לתחושת המגע העדינה בתולעים. בשל המבנה הפשוט שלהם, ו?...

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons at JoVE.com

In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons

פרוטוקול להדמיית המיקרוטובולות הדינמיות ב-vivo באמצעות חלבון מחייב קצה עם תווית פלואורסצנטית הוצג. תיארנו את השיטות לתיוג, תמונה וניתוח המיקרוטובולות הדינמיות בתאי העצב של מיקרוטובול לרוחב אחורי (PLM) של C. elegans.

In vivo הערכה של מיקרוטובולה דינמיקה והתמצאות ב Caenorhabditis elegans נוירונים

In neurons, microtubule orientation has been a key assessor to identify axons that have plus-end out microtubules and dendrites that generally have mixed ...

מטרת הליך זה היא להעריך את ארגון המיקרוטובלים ואת הדינמיקה ב- vivo. נוירונים הם תאים מקוטבים עם תאים אקסונליים, דנדריטיים וסינפטיים מובהקים, המתוחזקים על ידי הציטוסקלטון הבסיסי שלהם. Microtubules מהווים את רוב הציטוסקלטון העצבי, והדינמיקה והכיוון קובעים אירועים מרכזיים במהלך התפתחות עצבית והבשלה.מיקרוטובולות מורכבות מהטרודימרים אלפא ובטא טובולין, ומקוטבות מטבען עם קצוות פלוס דינמיים מאוד ומינוס-קצוות יציבים. במהלך פילמור בקצוות פלוס, קומפלקס רב מולקולרי של חלבונים מחייבי קצה, לקשר ארעי עם protofilaments ולקדם את ההרכבה של dimers טובולין. טכניקה זו תעזור לנו לדמיין מיקרוטובולות עצביות ב vivo.באמצעות טכניקה זו, ניתן לקבוע את הכיוון ופרמטרים אחרים של microtubules דינמי במהלך פיתוח והתחדשות של נוירון C.elegans. אנחנו בדרך כלל משתמשים בכתב הזה כדי לדמיין דינמיקה של מיקרוטובול בתאי עצב חושיים. עם זאת, ניתן לבטא כתב זה בסוגי תאים אחרים כגון שרירים ועור כדי לדמיין microtubules דינמי בתאים אלה.חלבונים מחייבי קצה המסומנים באופן פלואורסצנטרי כמו EBP ל- GFP כאן, מופיעים כחליטים. הדינמיקה של שביטים אלה הייתה מתואמת עם צמיחה בו-חופית של המיקרוטובולות, ומחוון מפתח לאמוד דינמיקה וכיוון מיקרוטובולה. על מנת להתבונן בשביטים אלה בסוג תא מסוים, טרנסג'ן עם DNA של EBP-2 ו- GFP באים לידי ביטוי תחת מקדם ספציפי.לביטוי בתאי העצב PLM, טרנסג'ן זה בא לידי ביטוי תחת להפוך עבור מקדם. תולעים מהונדסות אלה ניתן לראות תחת מיקרוסקופ סטריאו, עם פלואורסצנטיות להגדיר לפני מיון או הרכבה. עבור הרכבת התולעים עבור הדמיית שביט EBP, אנו עושים 10% ארגוס במאגר M9.ומניחים טיפה על מגלשת זכוכית. שקופית נוספת משמשת ללחץ על הירידה לתוך סרט שמתמצק לתוך כרית. אנו משתמשים 0.1 מיקרון, חרוזי פוליסטירן כאמצעי הרכבה, כמה תולעים נקטפות ומושעות מחדש בתמיסת החרוזים.פתק כיסוי הוא שלוק כדי לשתק את התולעים ונלקח להדמיה. ניתן לדמיין את אלה המותקנים על כל מיקרוסקופ פלואורסצנטי עם מצלמה להדמיה ברזולוציה גבוהה. ההתקנה מצוידת ביחידת דיסק מסתובבת לרכישה מהירה יותר והלבנת תמונות מופחתת ורעילות תמונה.השקופית נשמרת על הבמה ושדה התולעים ממוקד ומרוכז באמצעות תאורת השדה הבהיר. מטרה בהגדלה נמוכה כמו 5X או 10X יכולה לשמש למטרה זו. ניתן להתמקד מחדש בתולעים במטרה להגדלה גבוהה כמו 63X באמצעות אותה תאורה.מטרה זו מספקת רזולוציה מרחבית אופטימלית להדמיית השביטים. ריכוז קבוע של נוירון PLM נעשה תחת תאורת הפלואורסצנטיות כדי למנוע חשיפה מופרזת לאור והלבנת תמונה של ה- prum. לרכישת התמונה בה אנו משתמשים לשלוח תוכנה מאתרים.באמצעות תצורת הדמיה חיה בערוץ Brightfield, אנו ממקדים את אזור הזנב של התולעת ומרכזים אותה בשדה התצוגה. זה ואחריו התמקדות של נוירון PNM באמצעות תצורת הדמיה קלה עם 488 ננומטר עירור אור. עבור רכישה של זמן-לשגות, נוצרת הגדרה ניסיונית שבה זמן החשיפה, משך הזמן לשגות והמרווח בין המסגרות מגדירים את כישורי הזמן של ההדמיה.עבור מדידות כמותיות חלק מהסרטים של כוכבי שביט EBP יש לנתח על תמונה J, שהיא תוכנת קוד פתוח. זמן ההפסקה שנרכשה נפתח כגדיל מרובה תמונות, שניתן להציג בתצוגה מקדימה כסרט. בעידן מסוים זה, ניתן לראות שביטים בגוף התא, בתהליך הקדמי והאחורי של נוירון PLM.כוכבי השביט שמתרחקים מגוף התא מסווגים כ"פלוס-סוף החוצה", ואלה הנעים לכיוון גוף התא מסווגים כ"מינוס-סוף החוצה". כדי להתחיל את הניתוח קו מקוטע נמשך על פני אזור העניין, אשר במקרה זה הוא התהליך הפנימי של נוירון PLM. מקטע קו זה מומר לקימוגרף באמצעות פונקציית השריד של תמונות.קימוגרף הוא תמונת זמן מרחוק עם קמטים אלכסוניים המייצגים את כוכב השביט הנע. ניתן לצייר מקטעי קו ישר במעקבים אלה וניתן להגדיר פרמטרי מדידה באמצעות תפריט הניתוח. ניתן להמיר פרמטרים אלה לכמויות ויחידות הניתנות למדידה רגילות בתוכנית ניתוח הנתונים כגון Excel.רוחב המעקב תואם את אורך הצמיחה. הרמה מייצגת את משך הצמיחה, וזווית הקמט נותנת את כיוון השביט. שביטים אלה יכולים להיות מסווגים עוד יותר לתוך פלוס-סוף החוצה ומינוס סוף החוצה, כדי למצוא את הכיוון היחסי של microtubules.ביטוי מהונדס של EBTA GFP יכול להיות מותאם להתבונן בדינמיקה microtubule בהקשרים תאיים שונים, כגון התחדשות חדשה. כדי לבחון את הדינמיקה של המיקרוטובלים באזור דירוג אקסונים, האקסון נפגע באמצעות לייזר פמטו-שניות, אשר יכול לנתק את האקסון בדיוק מבלי לגרום נזק משני מסיבי. בעקבות הפציעה, ניתן לשחזר את התולעים על לוחות מנוע זרעים לתצפיות מאוחרות יותר.נוירונים PLM להראות התחדשות אקסונרית חזקה, אשר ניתן לראות כבר שש שעות לאחר הפציעה. כדי למנוע פוטוטוקסיה ליצירה מחדש של זכויות חדשות, הדמיה חיה מתבצעת במיקרוסקופ דיסק מסתובב. רכישות בזמן לשגות של האקסונים המתחדשים ניתן להמיר מאוחר יותר לקימוגרפים לניתוח של שביט.לאחר מכן ניתן לפרש את משך המרחק והכיוון של כוכב השביט במונחים של אוריינטציה ודינמיקה של מיקרוטובול. הכיוון והדינמיקה הקריטיים שלי הם קובעי מפתח של תהליכים תאיים אזרחיים כמו חלוקת תאים, הגירה ותחזוקה של ארכיטקטורה סלולרית. למרות שיש כלים רבים זמינים למדידה של דינמיקת microtubule במדידת vivo יכול להיות מאתגר.פלופרחות אוטומטית, רעילות תמונה, חפץ ביטוי יתר ועוצמות מדווחות משתנות הם חלק מהקשיים בהם נתקלו במהלך התבוננות חיה בחלבונים מחייבי קצה, כדי להעריך את הדינמיקה של המיקרוטובול. על ידי שימוש מהונדס משולב עם ריכוז נמוך של DNA מגורש והדמיה תאורה נמוכה, מחקר זה התייחס שיטות כדי למתן חלק מהאתגרים האלה. מודולי ההדמיה והניתוח המתוארים כאן יכולים להיות מורחבים כלפי כתבים מבוססי מיקרוטובולות אחרים והובלת חלבונים.זה לא חל רק על נוירונים C.elegance, אבל ניתן להחיל על סוגי תאים אחרים ומערכות מודל.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Dissection והתרבות של נוירונים Commissural מחוט השדרה עובריים

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

בשנת vivo לייזר Axotomy ב C. elegans

Neurons communicate with other cells via axons and dendrites, slender membrane extensions that contain pre- or post-synaptic specializations. If a neuron ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

תיוג של פלורסנט מדרדר מאפשר להקלטה ממוקדת חד תאית מיחידת נוירונים שזוהו<em&gt; בvivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

הדמייה תפקודית באמצעות שיבוש Ultrasonic הדם למוח הגדר מנגן משופרת MRI

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

In vivo Neuronal Calcium Imaging in C. elegans

In vivo Neuronal Calcium Imaging in C. elegans

בהדמיה עצבית סיד vivo ב C. elegans

The nematode worm C. elegans is an ideal model organism  for relatively simple, low cost neuronal imaging in vivo. Its small transparent body and simple, ...

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

המוח פרוס Biotinylation:<em&gt; Ex Vivo</em&gt; גישה למדוד סחר חלבון פלזמה ממברנה אזור ספציפי בתאי עצב בוגרים

Regulated endocytic trafficking is the central mechanism facilitating a variety of neuromodulatory events, by dynamically controlling receptor, ion ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

בו זמנית<em&gt; Vivo לשעבר</em&gt; בדיקות פונקציונליות של שתי הרשתיות על ידי<em&gt; In vivo</emמערכת electroretinogram&gt;

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Ratiometric Calcium Imaging of Individual Neurons in Behaving Caenorhabditis Elegans

Ratiometric Calcium Imaging of Individual Neurons in Behaving Caenorhabditis Elegans

סידן רציומטרי הדמיה של נוירונים בודדים ב מתנהג Caenorhabditis Elegans

It has become increasingly clear that neural circuit activity in behaving animals differs substantially from that seen in anesthetized or immobilized ...

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

ההכנות ופרוטוקולים עבור כל תא, תיקון קלאמפ הקלטה של נוירונים Tectal צפרדע רפואית זריזה

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

בליסטי לתיוג של הנוירונים בתוך המוח בפרוסות ובתרבות התא הראשוני

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...