Name: in vivo assessment of microtubule dynamics and orientation in caenorhabditis elegans neurons
Uploaded: 2021-11-20T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons at JoVE.com

İlk destek ve çalışmada kullanılan suş için Yishi Jin ve Andrew Chisholm'a teşekkür ederiz. OP50 bakteriyel suş, NIH Araştırma Altyapı Programları Ofisi (P40 OD010440) tarafından finanse edilen Caenorhabditis Genetics Center'dan (CGC) ticari olarak yararlanmıştır. Dharmendra Puri'ye deneysel prosedürlerin standardizasyonu için de teşekkür ederiz. Çalışma, Ulusal Beyin Araştırma Merkezi'nin temel hibesi (Biyoteknoloji Bölümü tarafından desteklenmektedir, Hindistan Govt. ), DBT/Wellcome Trust India Alliance Erken Kariyer Hibesi (Grant # IA/E/18/1/504331) S.D.'ye, Wellcome Trust-DBT India Alliance Intermediate Grant (Grant # IA/ I/ 13/ 1 / 500874) A.G.-R'ye ve Bilim ve Mühendislik Araştırma Kurulu'ndan (SıRP: CRG/2019/002194) 'a A.G.-R.

1. Muhabir gerginliği: Kültür ve bakım
NOT: PLM nöronlarındaki mikrotübül dinamiklerini ve oryantasyonunu ölçmek için, dokunmatik nörona özgü promotör mec-4(juIs338 alele) 18,25,26altında EBP-2::GFP'yi ifade eden solucan suşunu kullandık. Bu suş için standart solucan kültürü ve bakım yöntemleri kullanıyoruz<sup cla...

Mikrotübül dinamiklerini anlamak, yıllar boyunca sitoskeletal araştırma alanında önemli bir odak noktası olmuştur. Mikrotübüller, sürekli dinamik dengesizlik süreci ile birlikte çekirdeklenme ve felakete uğrar44,45,46,47. Bu bilgilerin çoğu, serbest vs polimerize tübulinin ışık saçılım okumaları, floresan tübulinden mikrotübül büyüme ta...

Nöronlar dendritler, hücre gövdeleri, aksonlar ve sinapslar gibi özel bölmelere sahip ayrıntılı bir mimariye sahiptir. Nöronal sitoskeleton mikrotübüller, mikrofilamentler ve nörofilamentlerden oluşandır ve farklı organizasyonları nöronal bölmeleri yapısal ve işlevsel olarakdestekler 1, 2,3,4,5,6,7,8,9,10 . Yıllar içinde mikrotübül organizasyonu nöronal polarite ve fonksiyonun önemli bir belirleyicisi olarak tanımlanmıştır. Nöronlar gelişim veya yenilenme sırasında yapısal tadilata tabi tuttukça, mikrotübül dinamikleri ve yönelimi çeşitli nöronal bölmelerin kimliğini, polarize taşınmasını, büyümesini ve gelişimini belirler7. Bu nedenle, nöronal yeniden şekillendirme işlemi ile ilişkili olmak için mikrotübül dinamiklerini ve oryantasyonunu değerlendirmek zorunludur.
Mikrotübüller, dinamik artı uçları ve nispeten istikrarlı eksi uçları11,12olan α ve β Tubulin heterodimerlerinin protofilamentlerinden oluşur. Artı uç kompleksinin ve ilişkili uç bağlama proteinlerinin keşfi, mikrotübül organizasyonunun13. Son bağlayıcı proteinler (EBP) geçici olarak mikrotübüllerin büyüyen artı uçları ile ilişkilidir ve ilişki dinamikleri mikrotübül protofilamentlerinin büyümesi ile ilişkilidir14,15. Artı uç kompleksinin mikrotübül ile sık sık ilişkilendirilmesi ve ayrışması nedeniyle, GFP etiketli EBP'nin nokta yayma işlevi bir timelapse filmi15,16'dabir "kuyruklu yıldız" olarak görünür. Memelinöronlarında öncü gözlemden bu yana16, floresan proteinlerle etiketlenmiş son bağlayıcı proteinler, farklı model sistemleri ve nöron tipleri 17 , 18 ,19, 20 ,21,22,23arasında mikrotübül dinamiklerini belirlemek için kullanılmıştır.
Basit sinir sistemi ve şeffaf gövdesi nedeniyle, C. elegans geliştirme ve rejenerasyon sırasında nöronal remodeling çalışmak için mükemmel bir model sistemi olduğunu kanıtlamıştır vivo. Burada, C. elegans'taki dokunmatik nöronların gelişimi ve yenilenmesi sırasında mikrotübül dinamiklerini ve büyümesini etiketleme, görüntüleme ve analiz etme yöntemlerini açıklıyoruz. Genetik olarak kodlanmış EBP-2::GFP kullanarak, PLM nöronunda mikrotübülleri görüntüledik, bu nöronun iki farklı nötroritinde mikrotübüllerin polaritesini belirlememizi sağladı24. Bu yöntem, EBP kuyruklu yıldızlarının farklı hücresel bağlamlardaki mikrotübül dinamiklerinin bir ölçüsü olarak gözlemlenmesine ve ölçülmesine izin verir, örneğin aksotomi sonrası akson yenilenmesini başlatan mikrotübül davranışındaki lokal değişiklikler protokolümüz kullanılarak değerlendirilebilir. Bu test, çeşitli hücre tiplerinde ve genetik geçmişlerde çeşitli hücresel süreçlerde mikrotübül dinamiklerinin düzenlenmesini araştırmak için uyarlanabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>CZ18975 worm strain</td>
			<td>Yishi Jin lab</td>
			<td>CZ18975</td>
			<td>Generated by Anindya Ghosh-Roy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9539</td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip (18 mm x 18 mm)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>474030-9010-000</td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry bath with heating block</td>
			<td>Neolab</td>
			<td></td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides (35 mm x 25 mm)</td>
			<td>Blue Star</td>
			<td></td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polystyrene bead solution (4.55 x 10^13 particles/ml in aqueous medium with minimal surfactant)</td>
			<td>Polysciences Inc.</td>
			<td>00876</td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Test tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Mounting worms</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OP50 bacterial strain</td>
			<td>Caenorhabditis Genetics Center (CGC)</td>
			<td>OP50</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mm petri plates</td>
			<td>Praveen Scientific</td>
			<td>20440</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aspirator/Capillary</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53432-921</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MIR554E</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platinum wire</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope with fluorescence attachment</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M165FC</td>
			<td>Worm handling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.3% Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>71376</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25% Peptone</td>
			<td>T M Media</td>
			<td>1506</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10mg/mL Cholesterol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8667</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mM Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>223506</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mM Magnesium sulphate heptahydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2773</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2% Agar</td>
			<td>T M Media</td>
			<td>1202</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25mM Monobasic Potassium dihydrogen phosphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9791</td>
			<td>Nematode Growth Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1M Monobasic Potassium dihydrogen phosphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9791</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.04M Sodium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>71376</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1M Ammonium chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>21405</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.2M Dibasic Disodium hydrogen phosphate heptahydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S9390</td>
			<td>1X M9 buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottles</td>
			<td>Borosil</td>
			<td></td>
			<td>Buffer storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>488 nm laser</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5X objective</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>63X objective</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Photometrics</td>
			<td>Evolve 512 Delta</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer system for Spinning Disk unit</td>
			<td>HP</td>
			<td>Intel &#174; Xeon CPU E5-2623 3.00GHz</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Observer.Z1</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halogen lamp</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mercury Arc Lamp</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinning Disk Unit</td>
			<td>Yokogawa</td>
			<td>CSU-X1</td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEN2 software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Image J (Fiji Version)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Image analysis and processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Creative Cloud</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td>Image analysis and processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer system for Image Analysis</td>
			<td>Dell</td>
			<td>Intel &#174; Core &#8482; i7-9700 CPU 3.00GHz</td>
			<td>Image processing/Representation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo assessment of microtubule dynamics and orientation in caenorhabditis elegans neurons

Nöronlarda, mikrotübül yönelimi, genellikle karışık oryantasyona sahip artı uçlu mikrotübüllere ve dendritlere sahip aksonları tanımlamak için önemli bir değerlendirici olmuştur. Burada, C. elegans'taki dokunmatik nöronların gelişimi ve yenilenmesi sırasında mikrotübül dinamiklerini ve büyümesini etiketleme, görüntüleme ve analiz etme yöntemlerini açıklıyoruz. Mikrotübül uçlarının genetik olarak kodlanmış floresan muhabirlerini kullanarak aksonal mikrotübülleri görüntüledik. Aksotomi sonrasında akson rejenerasyonunu başlatan mikrotübül davranışındaki lokal değişiklikler bu protokol kullanılarak ölçülebilir. Bu test, çeşitli hücresel süreçlerde mikrotübül dinamiklerinin düzenlenmesini araştırmak için diğer nöronlara ve genetik geçmişlere uyarlanabilir.

Temsili bir örnek olarak, PLM nöronlarının sabit durumundaki ve yenileyici aksonlarındaki EBP kuyruklu yıldızlarının in vivo gözlemini tanımladık. PLM nöronları, bir sinaps ve kısa bir posterior işlem oluşturan uzun bir ön işlemle solucanın kuyruk bölgesinde bulunur. PLM nöronları epidermisin yakınında ön-arka yönde büyür ve solucanlardaki nazik dokunma hissinin sorumlusudur. Basitleştirilmiş yapıları ve görüntüleme ve mikrocerrahiye karşı alametleri nedeniyle PLM nöronları mikrot?...

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons at JoVE.com

In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons

Dinamik mikrotübüllerin floresan etiketli Uç bağlayıcı protein kullanılarak vivo olarak görüntülenmesi için bir protokol sunulmuştur. C. elegans'ınPosterior lateral mikrotübül (PLM) nöronunda dinamik mikrotübülleri etiketleme, görüntüleme ve analiz etme yöntemlerini açıkladık.

In vivo Caenorhabditis elegans Nöronlarında Mikrotübül Dinamiklerinin ve Oryantasyonunun Değerlendirilmesi

In neurons, microtubule orientation has been a key assessor to identify axons that have plus-end out microtubules and dendrites that generally have mixed ...

Bu prosedürün amacı mikrotübül organizasyonuni ve dinamiklerini değerlendirmektir. Nöronlar, alttaki sitoskeletonları tarafından tutulan farklı aksonal, dendritik ve sinaptik bölmelere sahip polarize hücrelerdir. Mikrotübüller nöronal sitoskeletonun çoğunluğunu oluşturur ve nöronal gelişim ve olgunlaşma sırasındaki önemli olayları dinamikler ve yönelim belirler.Mikrotübüller alfa ve beta tübulin heterodimerlerinden oluşur ve doğası gereği son derece dinamik artı uçlar ve kararlı eksi uçlarla polarize edilir. Artı uçlarda polimerizasyon sırasında, son bağlayıcı proteinlerin çok molekülerli bir kompleksi, geçici olarak protofilamentlerle ilişkilendirir ve tübulin dimerlerinin montajını teşvik eder. Bu teknik, in vivo sinir mikrotübüllerini görselleştirmemize yardımcı olacaktır.Bu tekniği kullanarak, C.elegans nöronunun gelişimi ve yenilenmesi sırasında dinamik mikrotübüllerin yönelimini ve diğer parametrelerini belirleyebilirsiniz. Bu muhabiri genellikle duyusal nörondaki mikrotübül dinamiklerini görselleştirmek için kullanırız. Ancak bu hücrelerdeki dinamik mikrotübülleri görselleştirmek için bu muhabiri kas ve cilt gibi diğer hücre tiplerinde ifade edilebilir.Burada EBP'den GFP'ye kadar floresan etiketli son bağlayıcı proteinler kuyruklu yıldız olarak görünür. Bu kuyrukluyıldızların dinamikleri, mikrotübüllerin birlikte büyümesi ve mikrotübül dinamiklerini ve yönelimini ölçmek için önemli bir gösterge ile ilişkilendirilmiştir. Bu kuyrukluyıldızları belirli bir hücre tipinde gözlemlemek için, EBP-2 ve GFP DNA'sı olan transgene belirli bir promotör altında ifade edilir.PLM nöronlarında ifade için, bu transgene promotör için make altında ifade edilir. Bu transgenik solucanlar, sıralama veya montajdan önce floresan ayarlanmış bir stereo mikroskop altında görüntülenebilir. EBP kuyruklu yıldızlarını görüntülemek için solucanları monte etmek için M9 tamponunda%10 Argos yapıyoruz.ve cam bir kaydırağın üzerine bir damla yerleştirin. Başka bir slayt, damlayı bir ped içine katılaştıran bir filme bastırmak için kullanılır. Montaj ortamı olarak 0,1 mikron, polistiren boncuk kullanıyoruz, boncuk çözeltisinde birkaç solucan toplanıyor ve yeniden askıya alınıyor.Solucanları hareketsiz hale getirmek için bir kapak kayması avlanır ve görüntüleme için alınır. Monte edilenler, yüksek çözünürlüklü görüntüleme için bir kamera ile herhangi bir floresan mikroskopta görüntülenebilir. Kurulum, daha hızlı bir alım ve daha az fotoğraf ağartma ve fotoğraf toksisitesi için bir dönen disk ünitesi ile donatılmıştır.Slayt sahnede tutulur ve solucan alanı parlak alan aydınlatması kullanılarak odaklanır ve ortalanır. Bu amaçla 5X veya 10X gibi düşük büyütme hedefi kullanılabilir. Solucanlar, aynı aydınlatma kullanılarak 63X gibi yüksek büyütme hedefine yeniden odaklanabilir.Bu amaç kuyrukluyıldızların görüntülenmesi için optimum bir mekansal çözünürlük sağlar. Plm nöronunun sabit bir merkezileştirme, gereksiz ışık maruziyetini ve budamanın fotoğraf ağartmasını önlemek için floresan aydınlatması altında yapılır. Görüntü alımı için site dışına yazılım gönder'i kullanıyoruz.Brightfield kanalında canlı görüntüleme konfigürasyonunun kullanılmasıyla solucanın kuyruk bölgesini odaklayıp görüş alanına ortalıyoruz. Bunu, 488 nanometre ekscitasyon ışığı ile ışık görüntüleme konfigürasyonu kullanılarak PNM nöronunun odaklanması takip eder. Zaman atlamalı bir alım için, pozlama süresinin, zaman atlama süresinin ve çerçeveler arasındaki aralığın görüntülemenin zamansal becerilerini tanımladığı deneysel bir ayar oluşturulur.Nicel ölçümler için EBP kuyruklu yıldızlarının bazı filmleri açık kaynaklı bir yazılım olan Image J'de analiz edilmelidir. Edinilen zaman atlamalı, film olarak önizlenebilen çok görüntülü bir iplikçik olarak açılır. Bu özel zaman atlamalıda, PLM nöronunun hücre gövdesinde, ön ve arka sürecinde kuyruklu yıldızlar görülebilir.Hücre gövdesinden uzaklaşan kuyruklu yıldızlar artı-uç, hücre vücuduna doğru hareket edenler ise eksi-uç-out olarak sınıflandırılır. Analize başlamak için, bu durumda PLM nöronunun iç süreci olan ilgi alanı üzerinde parçalı bir çizgi çizilir. Bu çizgi parçası, görüntülerin yeniden kayma işlevi kullanılarak kimografa dönüştürülür.Kimograf, hareketli kuyrukluyıldızları temsil eden çapraz kırışıklıklarla uzak bir zaman görüntüsüdür. Bu izler üzerine düz çizgi parçaları çizilebilir ve analiz menüsü kullanılarak ölçüm parametreleri ayarlanabilir. Bu parametreler, Excel gibi veri çözümleme programında standart ölçülebilir miktarlara ve birimlere dönüştürülebilir.İzlemenin genişliği büyüme uzunluğuna karşılık gelir. Hight büyüme süresini temsil eder ve kırışık açısı kuyrukluyıldızların yönünü verir. Bu kuyruklu yıldızlar, mikrotübüllerin göreceli yönelimini bulmak için artı-son ve eksi-sonu olarak sınıflandırılabilir.EBTA GFP'nin transgenik ekspresyasyonu, mikrotübül dinamiklerini yeni yenilenme gibi çeşitli hücresel bağlamda gözlemlemek için uyarlanabilir. Bölge derecelendirme aksonlarındaki mikrotübül dinamiklerini gözlemlemek için, akson, büyük ikincil hasara neden olmadan aksonu tam olarak kesebilen bir femtosaniye lazer kullanılarak yaralanır. Yaralanmadan sonra, solucanlar daha sonraki gözlemler için tohumlu motor plakalarına geri kazanılabilir.PLM nöronları, yaralanmadan altı saat sonra gözlemlenebilen sağlam eksoneree rejenerasyonu gösterir. Fototoksisitenin yeni hakları yenilemesini önlemek için, canlı görüntüleme dönen bir disk mikroskobunda gerçekleştirilir. Yenileyen aksonların zaman atlamalı alımları daha sonra kuyrukluyıldızların analizi için kymograflara dönüştürülebilir.Kuyrukluyıldızların mesafe süresi ve yönü daha sonra mikrotübül yönelimi ve dinamikleri açısından yorumlanabilir. Eleştirel yönelimim ve dinamiklerim, hücre bölünmesi, hücresel mimarinin geçişi ve bakımı gibi sivil hücresel süreçlerin temel belirleyicileridir. Mikrotübül dinamiklerinin ölçümü için birçok araç mevcut olsa da, in vivo ölçüm zor olabilir.Otoflorescence, fotoğraf toksisitesi, aşırı ekspresyon objesi ve değişken bildirilen yoğunluklar, mikrotübül dinamiklerini değerlendirmek için son bağlayıcı proteinlerin canlı gözlemi sırasında karşılaşılan zorluklardan bazılarıdır. Bu çalışma, sınır dışı edilmiş DNA ve düşük aydınlatma görüntüleme konsantrasyonuna sahip entegre bir transgenik kullanarak, bu zorlukların bazılarını azaltmak için yöntemleri ele almıştır. Burada açıklanan görüntüleme ve analiz modülleri diğer mikrotübül bazlı muhabirlere ve protein taşımacılığına doğru genişletilebilir.Bu sadece C.elegance nöronları için geçerli değildir, aynı zamanda diğer hücre tiplerine ve model sistemlerine de uygulanabilir.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In vivo Assessment of Microtubule Dynamics and Orientation in Caenorhabditis elegans Neurons

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Embriyonik Omurilik Commissural Nöronlar Diseksiyon ve Kültür

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

In vivo Laser Axotomy in C. elegans

C in vivo Lazer Axotomy elegans

Neurons communicate with other cells via axons and dendrites, slender membrane extensions that contain pre- or post-synaptic specializations. If a neuron ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograd Floresan Etiketleme Belirlenen Nöronlar gelen Hedefli Hücre dışı Tek ünitesi Kayıt izin verir<em&gt; In vivo</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Ultrasonik Kan-beyin bariyeri bozulması ve Manganez kontrastlı MRG kullanma İşlevsel beyin görüntüleme

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

In vivo Neuronal Calcium Imaging in C. elegans

In vivo Neuronal Calcium Imaging in C. elegans

C. vivo Nöronal Kalsiyum Imaging&#39;de elegans

The nematode worm C. elegans is an ideal model organism  for relatively simple, low cost neuronal imaging in vivo. Its small transparent body and simple, ...

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Beyin Dilim Biyotinilasyonu: An<em&gt; Ex Vivo</emYetişkin Nöronlar Bölge özgü Plazma Membran Protein Ticaretiyle Tedbir&gt; Yaklaşım

Regulated endocytic trafficking is the central mechanism facilitating a variety of neuromodulatory events, by dynamically controlling receptor, ion ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Eşzamanlı<em&gt; Ex vivo</emİki retina&gt; Fonksiyonel Test tarafından<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram Sistemi

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Ratiometric Calcium Imaging of Individual Neurons in Behaving Caenorhabditis Elegans

Ratiometric Calcium Imaging of Individual Neurons in Behaving Caenorhabditis Elegans

Ratiometric kalsiyum görüntüleme Caenorhabditis Elegans davranışlar içinde bireysel nöronların

It has become increasingly clear that neural circuit activity in behaving animals differs substantially from that seen in anesthetized or immobilized ...

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Preparations and Protocols for Whole Cell Patch Clamp Recording of Xenopus laevis Tectal Neurons

Ürünleri ve tüm hücre yama kelepçe kayıt Xenopus laevis Tectal nöronlar için iletişim kuralları

The Xenopus tadpole retinotectal circuit, comprised of the retinal ganglion cells (RGCs) in the eye which form synapses directly onto neurons in the optic ...

Ballistic Labeling of Pyramidal Neurons in Brain Slices and in Primary Cell Culture

Beyin Dilimlerinde ve Birincil Hücre Kültüründe Piramidal Nöronların Balistik Etiketlemesi

It has been reported that the size and shape of dendritic spines is related to their structural plasticity. To identify the morphological structure of ...