Microscopie à fluorescence pour l’internalisation de l’ATP médiée par la macropinocytose dans les cellules tumorales humaines et les souris xénogreffées
Tumor Cell Culture and Xenograft Tumor Development
2:41
HMWFD and NHF-ATP Solution Preparation
3:21
ATP Internalization in Tumor Xenograft
3:53
Cryo-embedding
4:45
Tissue Slide Fixation
5:25
Fluorescence Microscopy and Image Acquisition
7:12
Results: Assessment of Nonhydrolyzable Fluorescent ATP Internalization
7:44
Conclusion
Transcript
Les cellules cancéreuses ont une capacité remarquable à internaliser les nutriments, tels que l’ATP, de l’environnement extracellulaire. Notre protocole nous permet de démontrer l’internalisation de l’ATP et de visualiser la localisation de l’ATP
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Nous avons développé une méthode reproductible pour visualiser l’internalisation de l’adénosine triphosphate fluorescente non hydrolysable (ATP), un substitut de l’ATP, avec une résolution cellulaire élevée. Nous avons validé notre méthode en utilisant des tests indépendants in vitro et in vivo - des lignées de cellules tumorales humaines et des souris immunodéficientes xénogreffées avec du tissu tumoral humain.