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08:59 min
July 16th, 2021
DOI :
10.3791/62813-v
Chapters
0:04
Introduction
0:52
Microscope and Perfusion System Setup
2:33
Styryl Dye Imaging of Synaptic Vesicle Release
4:30
Fluorescence Imaging of Gcamp6m Calcium Transients
5:36
Image Analysis
6:23
Results: Real-Time Monitoring of the Dynamics of Presynaptic Calcium Influx and Synaptic Vesicle Membrane Fusion in In Vitro Cultured Neurons
8:15
Conclusion
Transcript
これらの方法は、実験的操作、疾患原因タンパク質、またはRNAがシナプスプロセスに影響を与えることができるかどうか、および治療用化合物が機能を回復できるかどうかについての迅速な評価を可能にする。これらの技術は、電気生理学と比較して比較的短期間にニューロンのグループからシナプス機能の信頼できる読み出しを提供する。このプロトコルは、ニューロンの発達または変性のあらゆる疾患に適用することができる。
これは、初代げっ歯類ニューロン培養物、および誘導多能性幹細胞に由来するニューロンに対して
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Summary
シナプス伝達に必要な細胞内事象を視覚化するために、2つの関連する方法が記載されている。これらのプロトコルは、 in vitro 培養ニューロンの生細胞イメージングを使用して、シナプス前カルシウム流入およびシナプス小胞膜融合のダイナミクスのリアルタイムモニタリングを可能にする。
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