बाकुलोवायरस-कीट सेल कल्चर सिस्टम का उपयोग करके एडेनो-एसोसिएटेड वायरस (एएवी) 2 वेक्टर के उत्पादन और शुद्धिकरण के लिए प्रक्रिया विकास
January 13th, 2022
•1Division of Experimental Hematology and Cancer Biology, Cincinnati Children's Hospital Medical Center, 2University of Cincinnati College of Medicine, 3Raymond G. Perelman Center for Cellular and Molecular Therapeutics, The Children's Hospital of Philadelphia
इस प्रोटोकॉल में, AAV2 वेक्टर को सह-संस्कृति स्पोडोप्टेरा मितव्ययीperda (Sf9) कीट कोशिकाओं द्वारा बाकुलोवायरस (बीवी)-AAV2-ग्रीन फ्लोरोसेंट प्रोटीन (GFP) या चिकित्सीय जीन और BV-AAV2-rep-टोपी संक्रमित Sf9 कोशिकाओं के साथ निलंबन संस्कृति में उत्पादित Sf9 कोशिकाओं द्वारा उत्पादित किया जाता है । एएवी कणों को डिटर्जेंट का उपयोग करके कोशिकाओं से छोड़ा जाता है, स्पष्ट किया जाता है, आत्मीयता कॉलम क्रोमेटोग्राफी द्वारा शुद्ध किया जाता है, और स्पर्शरेखा प्रवाह निस्पंदन द्वारा केंद्रित किया जाता है।
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