Name: evaluating the effect of pesticides on the larvae of the solitary bees
Uploaded: 2021-10-15T14:20:00
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Questo studio è stato supportato dal National Key R&D Program of China (2017YFD0200400), major scientific and technological innovation Project (2017CXGC0214), Bee Industry Innovation Team della provincia di Shandong, Agricultural Science and Technology Innovation Project della Shandong Academy of Agricultural Sciences (CXGC2019G01) e Agricultural Science and Technology Innovation Project della Shandong Academy of Agricultural Sciences (CXGC2021B13).

1. Preparazione del tubo di alimentazione
<ol><li>Praticare un foro (~ 0,3 mm di diametro) nel coperchio di un tubo di centrifuga da 2 ml utilizzando un ferro da avvolgimento elettrico (vedere Tabella dei materiali). Utilizzare un tale tubo centrifuga per mantenere una larva di O. excavata e la sua massa di fornitura.</li>
</ol>2. Preparazione del pesticida
<ol><li>Sciogliere il pesticida di grado tecnico (vedi Tabella dei mat...

<ol>
	<li>Sgolastra, F., Tosi, S., Medrzycki, P., Porrini, C., Burgio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+of+spirotetramat+on+solitary+bee+larvae,+Osmia+cornuta+(hymenoptera:+megachilidae),+in+laboratory+conditions.">Toxicity of spirotetramat on solitary bee larvae, Osmia cornuta (hymenoptera: megachilidae), in laboratory conditions.</a> Journal of Apicultural Science. 59 (2), 73-83 (2015).</li><li>Wei, S. G., Wang, R., Smirle, M. J., Xu, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Release+of+Osmia+excavata+and+Osmia+jacoti+(Hymenoptera:+Megachilidae)+for+apple+pollination.">Release of Osmia excavata and Osmia jacoti (Hymenoptera: Megachilidae) for apple pollination.</a> TheCanadian Entomologist. 134 (3), 369-380 (2002).</li><li>Men, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+characteristics+and+pollination+service+of+Mason+bee.">Biological characteristics and pollination service of Mason bee.</a> Chinese Journal of Applied Entomology. 55 (6), 973-983 (2018).</li><li>Bosch, J., Kemp, W. P., Trostle, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bee+population+returns+and+cherry+yields+in+an+orchard+pollinated+with+Osmia+lignaria+(Hymenoptera:+Megachilidae).">Bee population returns and cherry yields in an orchard pollinated with Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 99 (2), 408-413 (2006).</li><li>Winfree, R., Williams, N. M., Dushoff, J., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Native+bees+provide+insurance+against+ongoing+honey+bee+losses.">Native bees provide insurance against ongoing honey bee losses.</a> Ecology Letters. 10 (11), 1105-1113 (2007).</li><li>Garibaldi, L. A., Steffan-Dewenter, I., Winfree, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wild+pollinators+enhance+fruit+set+of+crops+regardless+of+honey+bee+abundance.">Wild pollinators enhance fruit set of crops regardless of honey bee abundance.</a> Science. 339 (6127), 1608-1611 (2013).</li><li>Bosch, J., Sgolastra, F., Kemp, W. P., James, R. R., Pitts-Singer, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+ecophysiology+of+Osmia.+mason+bees+used+as+crop+pollinators.">Life cycle ecophysiology of Osmia. mason bees used as crop pollinators.</a> Bee Pollination in Agricultural Ecosystems. , 83-104 (2008).</li><li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Population+investigation+and+restriction+factors+analyses+of+Osmia+excavata+Alfken+in+Jiaodong.">Population investigation and restriction factors analyses of Osmia excavata Alfken in Jiaodong.</a> Apiculture of China. 69 (9), 68-71 (2018).</li><li>Biesmeijer, J. C., Roberts, S. P. M., Reemer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+declines+in+pollinators+and+insect-pollinated+plants+in+Britain+and+the+Netherlands.">Parallel declines in pollinators and insect-pollinated plants in Britain and the Netherlands.</a> Science. 313 (5785), 351-354 (2006).</li><li>Potts, S. G., Biesmeijer, J. C., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+pollinator+declines:+trends,+impacts+and+drivers.">Global pollinator declines: trends, impacts and drivers.</a> Trends in Ecology &amp; Evolution. 25 (6), 345-353 (2010).</li><li>Chen, L., Yan, Q., Zhang, J., Yuan, S., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Joint+toxicity+of+acetamiprid+and+co-applied+pesticide+adjuvants+on+honeybees+under+semi-field+and+laboratory+conditions.">Joint toxicity of acetamiprid and co-applied pesticide adjuvants on honeybees under semi-field and laboratory conditions.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 38 (9), 1940-1946 (2019).</li><li>Sgolastra, F., Medrzycki, P., Bortolotti, L., Renzi, M. T., Bosch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+mortality+between+a+neonicotinoid+insecticide+and+an+ergosterol-biosynthesis-inhibiting+fungicide+in+three+bee+species.">Synergistic mortality between a neonicotinoid insecticide and an ergosterol-biosynthesis-inhibiting fungicide in three bee species.</a> Pest Management Science. 73 (6), 1236-1243 (2017).</li><li>Bireley, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preface:+Workshop+on+pesticide+exposure+assessment+paradigm+for+non-Apis+bees.">Preface: Workshop on pesticide exposure assessment paradigm for non-Apis bees.</a> Environmental Entomology. 48 (1), 1-3 (2019).</li><li>European Food Safety Authority. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EFSA+Guidance+Document+on+the+risk+assessment+of+plant+protection+products+on+bees+(Apis+mellifera,+Bombus+spp.+and+solitary+bees).">EFSA Guidance Document on the risk assessment of plant protection products on bees (Apis mellifera, Bombus spp. and solitary bees).</a> EFSA Journal. 11 (7), 3295 (2013).</li><li>Rundlof, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seed+coating+with+a+neonicotinoid+insecticide+negatively+affects+wild+bees.">Seed coating with a neonicotinoid insecticide negatively affects wild bees.</a> Nature. 521 (7550), 77-80 (2015).</li><li>Yuan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+hazard+assessment+of+six+neonicotinoid+insecticides+on+Osmia+excavata+(hymenoptera:megachilidae).">Toxicity and hazard assessment of six neonicotinoid insecticides on Osmia excavata (hymenoptera:megachilidae).</a> Acta Entomologica Sinica. 61 (8), 950-956 (2018).</li><li>Lin, Z., Meng, F., Zheng, H., Zhou, T., Hu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neonicotinoid+insecticides+on+honeybee+health.">Effects of neonicotinoid insecticides on honeybee health.</a> Acta Entomologica Sinica. 57 (5), 607-615 (2014).</li><li>Gradish, A. E., Scott-Dupree, C. D., Cutler, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+of+Megachile+rotundata+to+insecticides+used+in+wild+blueberry+production+in+Atlantic+Canada.">Susceptibility of Megachile rotundata to insecticides used in wild blueberry production in Atlantic Canada.</a> Journal of Pest Science. 85, 133-140 (2012).</li><li>Hodgson, E. W., Pitts-Singer, T. L., Barbour, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+insect+growth+regulator,+novaluron+on+immature+alfalfa+leafcutting+bees,+Megachile+rotundata.">Effects of the insect growth regulator, novaluron on immature alfalfa leafcutting bees, Megachile rotundata.</a> Journal of Insect Science. 11, 43 (2011).</li><li>Konrad, R., Ferry, N., Gatehouse, A. M. R., Babendreier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+effects+of+oilseed+rape+expressing+oryzacystatin-1+(OC-1)+and+of+purified+insecticidal+proteins+on+larvae+of+the+solitary+bee+Osmia+bicornis.">Potential effects of oilseed rape expressing oryzacystatin-1 (OC-1) and of purified insecticidal proteins on larvae of the solitary bee Osmia bicornis.</a> PLoS ONE. 3 (7), 2664 (2008).</li><li>Abbott, V. A., Nadeau, J. L., Higo, H. A., Winston, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lethal+and+sublethal+effects+of+imidacloprid+on+Osmia+lignaria+and+clothianidin+on+Megachile+rotundata+(Hymenoptera:+megachilidae).">Lethal and sublethal effects of imidacloprid on Osmia lignaria and clothianidin on Megachile rotundata (Hymenoptera: megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 101, 784-796 (2008).</li><li>Yan, Z., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublethal+effect+of+abamectin+on+3rd+instar+larvae+of+Prodenia+litura.">Sublethal effect of abamectin on 3rd instar larvae of Prodenia litura.</a> Chinese Journal of Tropical Crops. 32 (10), 1945-1950 (2011).</li><li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+ecotoxicity+of+insecticides+with+different+modes+of+action+to+Osmia+excavata+(Hymenoptera:+Megachilidae).">Comparative ecotoxicity of insecticides with different modes of action to Osmia excavata (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 212 (5), 112015 (2021).</li><li>Chen, F. J., Wu, G., Ge, F., Parajulee, M. N., Shrestha, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+elevated+CO2+and+transgenic+Bt+cotton+on+plant+chemistry,+performance,+and+feeding+of+an+insect+herbivore,+the+cotton+bollworm.">Effects of elevated CO2 and transgenic Bt cotton on plant chemistry, performance, and feeding of an insect herbivore, the cotton bollworm.</a> Entomologia Experimentalis Et Applicata. 115 (2), 341-350 (2005).</li><li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+safety+evaluation+of+pesticides+commonly+used+in+strawberry+production+to+bees.">Toxicity and safety evaluation of pesticides commonly used in strawberry production to bees.</a> Zhejiang Agricultural Sciences. (4), 785-787 (2009).</li><li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+toxicity+and+safety+assessment+of+chiral+fipronil+against+Apis+mellifera+and+Trichogramma+ostriniae.">Acute toxicity and safety assessment of chiral fipronil against Apis mellifera and Trichogramma ostriniae.</a> Ecotoxicology. 7 (3), 326-330 (2012).</li><li>Liu, X., Pan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measures+to+ensure+pollination+effect+and+cocoon+recovery+rate+of+Osmia+excavata+in+apple+orchard.">Measures to ensure pollination effect and cocoon recovery rate of Osmia excavata in apple orchard.</a> Northwest Horticulture. (3), 20-21 (2017).</li><li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+growth+and+hive+CO2+concentration.">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony growth and hive CO2 concentration.</a> Scientific Reports. 11 (1), 4364 (2021).</li><li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+behavior+and+interact+with+landscapes+to+affect+colony+growth.">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony behavior and interact with landscapes to affect colony growth.</a> BioRxiv. , (2020).</li><li>Wang, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+effects+of+three+neonicotinoid+pesticides+on+physiology+and+survival+of+honey+bees+(Apis+mellifera+L).">Combination effects of three neonicotinoid pesticides on physiology and survival of honey bees (Apis mellifera L).</a> Journal of Environmental Entomology. 41 (3), 612-618 (2019).</li><li>Kopit, A. M., Pitts-Singer, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Routes+of+pesticide+exposure+in+solitary,+cavity-nesting+bees.">Routes of pesticide exposure in solitary, cavity-nesting bees.</a> Environmental Entomology. 47 (3), 499-510 (2018).</li><li>Cheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+oral+toxicity+of+chlorpyrifos+and+imidacloprid+to+adult+honey+bees+(Apis+mellifera+L).">Chronic oral toxicity of chlorpyrifos and imidacloprid to adult honey bees (Apis mellifera L).</a> Asian Journal of Ecotoxicology. 11 (2), 715-719 (2016).</li><li>Li, M., Ma, C., Xiao, L., Li, Z., Su, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chlorpyrifos+on+behavior+response+of+Apis+mellifera+and+Apis+cerana.">Effects of chlorpyrifos on behavior response of Apis mellifera and Apis cerana.</a> Apicultural Science Association of China. , (2016).</li><li>Cresswell, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+meta-analysis+of+experiments+testing+the+effects+of+a+neonicotinoid+insecticide+(imidacloprid)+on+honey+bees.">A meta-analysis of experiments testing the effects of a neonicotinoid insecticide (imidacloprid) on honey bees.</a> Ecotoxicology. 20 (1), 149-157 (2011).</li><li>Nauen, R., Ebbinghaus-Kintscher, U., Schmuck, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+nicotinic+acetylcholine+receptor+interaction+of+imidacloprid+and+its+metabolites+in+Apis+mellifera+(Hymenoptera;+Apidae).">Toxicity and nicotinic acetylcholine receptor interaction of imidacloprid and its metabolites in Apis mellifera (Hymenoptera; Apidae).</a> Pest Management Science. 57 (7), 577-586 (2001).</li><li>Colin, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+to+quantify+and+analyze+the+foraging+activity+of+honey+bees:+relevance+to+the+sublethal+effects+induced+by+systemic+insecticides.">A method to quantify and analyze the foraging activity of honey bees: relevance to the sublethal effects induced by systemic insecticides.</a> Archives of Environmental Contamination and Toxicology. 47 (3), 387-395 (2004).</li><li>Decourtye, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+sublethal+toxicity+of+nine+pesticides+on+olfactory+learning+performances+of+the+honeybee+Apis+mellifera.">Comparative sublethal toxicity of nine pesticides on olfactory learning performances of the honeybee Apis mellifera.</a> Archives of Environmental Contamination &amp; Toxicology. 48 (2), 242-250 (2005).</li><li>Williamson, S. M., Wright, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+multiple+cholinergic+pesticides+impairs+olfactory+learning+and+memory+in+honeybees.">Exposure to multiple cholinergic pesticides impairs olfactory learning and memory in honeybees.</a> Journal of Experimental Biology. 216 (10), 1799-1807 (2013).</li><li>Henry, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+common+pesticide+decreases+foraging+success+and+survival+in+honey+bees.">A common pesticide decreases foraging success and survival in honey bees.</a> Science. 336 (6079), 348-350 (2012).</li><li>Matsumoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+homing+flights+in+the+honey+bee+Apis+mellifera+after+a+sublethal+dose+of+neonicotinoid+insecticides.">Reduction in homing flights in the honey bee Apis mellifera after a sublethal dose of neonicotinoid insecticides.</a> Bulletin of Insectology. 66 (1), 1-9 (2013).</li></ol>

Per gli impollinatori adulti, ci sono due metodi principali per misurare l'ecotossicità dei pesticidi. Uno è il metodo di contatto, in cui il pesticida viene applicato al protorace degli insetti adulti; l'altro è il metodo di tossicità gastrica, in cui gli impollinatori adulti vengono nutriti con acqua di miele contenente pesticida25,26. Negli ultimi anni, è stato riscontrato che l'effetto di impollinazione e il tasso di eclosione di O. excavata son...

Gli impollinatori svolgono un ruolo fondamentale nei servizi ecosistemici della moderna agricoltura globale. Mentre le api mellifere (Apis mellifera; Gli imenotteri: Apidae) sono stati tradizionalmente considerati come gli impollinatori economici essenziali delle colture, recenti ricerche suggeriscono che Osmia (Hymenoptera: Megachilidae) è anche molto importante nel migliorare l'impollinazione per alcune colture, aumentando le dimensioni dei frutti e il numero di semi e riducendo la proporzione di frutta asimmetrica nei frutteti commerciali in diverse parti del mondo1. Osmia excavata è stata considerata una specie ideale per l'impollinazione delle mele, principalmente in Asia, come nel nord e nord-ovest della Cina e in Giappone 2,3,4. Può fornire servizi di impollinazione per alcune colture con efficienza simile o talvolta con maggiore efficienza. A questo proposito, è stato dimostrato che sostituiscono o lavorano in sinergia con le apimellifere 4,5,6.
Le caratteristiche biologiche di O. excavata sono uniche rispetto alle api sociali. La sua attività univoltina, solitaria e di nidificazione si verifica principalmente in primavera e all'inizio dell'estate. I nidi di O. excavata si trovano di solito in fori preesistenti, tipicamente in legno morto, piante cave, tubi di paglia e gambo di bambù nella condizione naturale3. L'adulto O. excavata emerge dal suo bozzolo per accoppiarsi, raccogliere polline e costruire un nido per deporre le uova, che iniziano a schiudersi una settimana dopo. Le uova fecondate si sviluppano in femmine, mentre le uova non fecondate si sviluppano in maschi3. Le femmine sono distribuite nella parte inferiore del tubo delle api e le disposizioni corrispondenti sono più significative. Al contrario, i maschi erano in prossimità dell'uscita del tubo con disposizioni minori7, quindi i maschi escono per primi e le femmine escono più tardi. La femmina mescola il polline con una piccola quantità di nettare in un blob umido, l'unica fonte di cibo per ogni larva nella cellula8.
Diversi studi hanno riportato una diminuzione della popolazione di insetti impollinatori 9,10. L'uso estensivo di pesticidi è stato identificato come uno dei principali fattori per ridurre l'abbondanza e la diversità degli impollinatori e può anche mettere in pericolo i servizi di impollinazione11,12. Per ridurre e mitigare gli effetti negativi dei pesticidi, è necessario condurre una valutazione del rischio dei pesticidi per gli impollinatori. Alcuni paesi hanno stabilito quadri normativi per garantire la sicurezza delle api dai pesticidi utilizzati13,14. Studi recenti hanno dimostrato che Osmia era più suscettibile ai pesticidi rispetto alle api da miele 1,15.
È interessante notare che la maggior parte delle valutazioni del rischio si sono concentrate sulle api adulte 11,12; poche ricerche sono state condotte su O. excavata, in particolare sulle larve. Inoltre, la mortalità di Osmia direttamente causata dai pesticidi è più comunemente considerata16. Tuttavia, le tossicità croniche come l'aumento di peso larvale, la durata dello sviluppo, i modelli di alimentazione, la capacità di eclosione, il successivo comportamento adulto e la fecondità possono avere lo stesso danno delle tossicità letali acute e sono spesso ignorate a causa della mancanza di un metodo sperimentale efficace per le api solitarie17.
Fino ad ora, due metodi sono utilizzati per valutare gli effetti dei pesticidi sulle larve delle api solitarie: (1) una quantità appropriata di pesticidi è stata applicata nel punto localizzato di disposizioni senza rimuovere l'uovo delle api solitarie 1,18,19,20; (2) sostituzione delle disposizioni con miscele artificiali di polline e nettare contenenti una quantità specifica di antiparassitario21. Tuttavia, ci sono alcune limitazioni ai due metodi di cui sopra. Il primo può misurare solo la tossicità acuta, ma non la tossicità cronica perché le larve hanno ingerito l'intera dose in un breve periodo di tempo; quest'ultimo porterebbe ad un alto tasso di mortalità a causa della manipolazione umana1. Qui, il metodo di immersione è stato descritto per studiare l'ecotossicità dei pesticidi a O. excavata in condizioni di ricerca altamente controllate, simulando il comportamento dell'alimentazione larvale con pesticidi residui nelle disposizioni nell'ambiente reale. Il metodo di questo studio risolve gli svantaggi dei due metodi di cui sopra ed è adatto per misurare gli effetti di una sostanza pericolosa sulla tossicità acuta e cronica.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Abamectin</td>
			<td>Jinan Lvba Pesticide Co. Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black-light lamps</td>
			<td>Kanghua Medical Device Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifugal tube box with 100 Wells</td>
			<td>Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube</td>
			<td>Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>2 mL; &#160;Serve as bee tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric soldering iron</td>
			<td>Kunshan Kaipai Hardware Electromechanical Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic scale</td>
			<td>Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd</td>
			<td>3137510295</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graduated cylinder</td>
			<td>Anhui Weiss Experimental Equipment Co. Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes (60 mm diameter)</td>
			<td>Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pollen provision</td>
			<td>Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft brush</td>
			<td>Wengang Wenhai painting material factory</td>
			<td></td>
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			<td>Solitary bees</td>
			<td>Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd</td>
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evaluating the effect of pesticides on the larvae of the solitary bees

Le attuali valutazioni del rischio ecologico dei pesticidi sugli impollinatori hanno considerato principalmente solo le condizioni di laboratorio. Per le larve delle api solitarie, l'ingestione di provviste contaminate da pesticidi può aumentare il tasso di mortalità delle larve, diminuire il tasso di raccolta e la popolazione di api solitarie adulte nel prossimo anno da una prospettiva demografica. Ma ci sono studi limitati sugli effetti dei pesticidi sulle larve delle api solitarie. Pertanto, capire come i pesticidi influenzano le larve delle api solitarie dovrebbe essere considerato parte integrante della valutazione del rischio ecologico dei pesticidi. Questo studio presenta un metodo per esporre le larve dell'ape solitaria, Osmia excavata , a dosi letali o subletali di pesticidi, monitorando l'aumento di peso larvale, la durata dello sviluppo, la capacità di eclosione e la conversione dell'efficienza del consumo alimentare del cibo ingerito. Per dimostrare l'efficacia di questo metodo, le larve di O. excavata sono state alimentate con provviste contenenti dosi acute letali e subletali di clorpirifos. Quindi, sono stati studiati gli indici di cui sopra delle larve trattate. Questa tecnica aiuta a prevedere e mitigare il rischio di pesticidi per gli impollinatori.

I tenori di antiparassitari di uso comune, clorpirifos, imidacloprid, fendifenuron, phoxim, avermectina nelle disposizioni erano inferiori al limite di quantificazione (0,01-0,02 mg kg-1) nel gruppo di controllo; questi risultati hanno escluso l'influenza dei residui di pesticidi su ciascun trattamento. È stata valutata la mortalità con e senza rimozione delle larve dalle provviste dopo 48 ore nei gruppi di controllo; i risultati non hanno mostrato differenze significative (Tabella 1), indic...

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Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees

Il presente protocollo spiega un metodo per alimentare le larve delle api solitarie, Osmia excavata, con disposizioni contaminate da pesticidi. La procedura esamina l'ecotossicità del pesticida alle larve delle api solitarie.

Valutare l'effetto dei pesticidi sulle larve delle api solitarie

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ...

Questo protocollo può essere utilizzato per prevedere e mitigare gli effetti negativi dei pesticidi sulle api solitarie. Il vantaggio principale di questa tecnica è la simulazione dell'alimentazione larvale con pesticidi residui nelle provviste. La dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale perché le caratteristiche biologiche di Osmia excavata sono uniche rispetto alle api sociali e sono state condotte poche ricerche su O.excavata, in particolare sulla larva.Per preparare il tubo di alimentazione, praticare un foro di 0,3 millimetri di diametro nel coperchio di un tubo centrifugo da due millilitri utilizzando un ferro da avvolgimento elettrico. Per preparare il pesticida, sciogliere il pesticida di grado tecnico in acetone per acquisire soluzioni stock di 10 milligrammi per millilitro, quindi eseguire diluizioni graduali della soluzione a più di cinque concentrazioni. Successivamente, acquisire tubi di api di plastica contenenti provviste e larva di Osmia excavata appena schiusa da un programma di allevamento di massa.Usando un pennello morbido, separare delicatamente la larva dalle provviste, selezionare le larve femminili in base alle dimensioni della fornitura e alla posizione delle cellule all'interno del nido, quindi posizionare le disposizioni di dimensioni uniformi con la larva femminile selezionata in piastre di Petri di diametro 60 millimetri e metterle da parte per l'uso. Prima di procedere al trattamento antiparassitario, pesare le disposizioni. Per trattare le disposizioni con pesticidi, in primo luogo, misurare il volume della soluzione di pesticidi.Quindi immergere le disposizioni selezionate di dimensioni uniformi nelle soluzioni di pesticidi diluite per 10 secondi. Dopo aver trattato le disposizioni con il pesticida, misurare nuovamente il volume delle soluzioni di pesticidi. Dopo aver asciugato all'aria le disposizioni su un piano di lavoro sterile, aggiungerle ai tubi della centrifuga preparati con fori.Quindi, pesare 60 larve femminili e usando un pennello morbido, trasferire le larve sulla superficie delle disposizioni naturalmente essiccate, aggiungendo una larva per tubo. Allevare le larve in una camera di crescita al buio a 25 più o meno due gradi Celsius con un'umidità relativa dal 65 al 75%. Per il test di tossicità letale acuta, misurare la mortalità della larva dopo essere stata posta sul trattamento e le disposizioni di controllo per 48 ore.Successivamente, pesare le provviste rimanenti dopo 48 ore di allevamento di insetti per determinare la quantità di provviste consumata da ciascuna larva, quindi utilizzando questa formula, calcolare la dose di pesticida ad ogni concentrazione consumata da ciascuna larva in base alla percentuale di fornitura consumata e al contenuto di pesticidi in ciascuna fornitura. Per il test di tossicità subletale, osservare quotidianamente l'O.excavata durante il bozzolo sotto lampade a luce nera per misurare la durata dello sviluppo larvale. Quindi pesare le larve dopo 14 giorni di trattamenti per determinare l'aumento di peso larvale.Successivamente, pesare le disposizioni rimanenti dopo 14 giorni di alimentazione per calcolare il consumo e l'efficienza della conversione del cibo ingerito. Ed esamina il numero di eclosion tagliando i bozzoli usando una piccola forbice quando le api di controllo emergono negli adulti. Il test di tossicità letale acuta ha mostrato che il valore LD50 del clorpirifos per le larve di O.excavata era di 0,001 microgrammi per ape.Nel test di tossicità subletale, con l'aumentare della dose, i valori indice di aumento di peso larvale, consumo ed efficienza di conversione del cibo ingerito sono diminuiti per i trattamenti, con i valori più bassi rispetto al controllo osservati negli 0,013 microgrammi di clorpirifos per ape. Al contrario, la durata dello sviluppo larvale più estesa è stata osservata in 0,016 microgrammi di clorpirifos per ape, rispetto al trattamento di controllo. La valutazione dell'impatto del clorpirifos sul tasso di eclosione ha rivelato una significativa relazione lineare negativa tra i dosaggi ingeriti di clorpirifos e il tasso di eclosione di O.excavata.Il tasso di eclosione era considerevolmente inferiore quando i dosaggi ingeriti superavano 0,02 microgrammi per ape rispetto a quelli nel trattamento di controllo. In questo protocollo, lo screening per le disposizioni di dimensioni uniformi è fondamentale per ridurre al minimo l'errore di test. Questa tecnica è utile per esplorare gli effetti dei pesticidi sul volo adulto e la fecondità delle api solitarie, risolvendo così problemi di basso tasso di recupero e declino della popolazione.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

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