Name: evaluating the effect of pesticides on the larvae of the solitary bees
Uploaded: 2021-10-15T14:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees at JoVE.com

이 연구는 중국의 국가 핵심 R & D 프로그램 (2017YFD0200400), 주요 과학 기술 혁신 프로젝트 (2017CXGC0214), 산동성의 꿀벌 산업 혁신 팀, 산동 농업 과학 아카데미의 농업 과학 기술 혁신 프로젝트 (CXGC2019G01), 산동 농업 과학 아카데미의 농업 과학 기술 혁신 프로젝트 (CXGC2021B13)의 지원을 받았다.

1. 공급관의 제조
<ol><li>전기 권선 철을 사용하여 2 mL 원심분리 튜브의 뚜껑에 구멍(~0.3 mm 직경)을 펀치 합니다(재료 표 참조). 이러한 원심 분리 튜브를 사용하여 O. excavata 유충과 그 공급 질량을 유지하십시오.</li>
</ol>2. 농약의 제조
<ol><li>기술 등급 살충제 ( 재료 표 참조)를 아세톤에 용해시켜 1 x 104 μg a.i. ...

<ol>
	<li>Sgolastra, F., Tosi, S., Medrzycki, P., Porrini, C., Burgio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+of+spirotetramat+on+solitary+bee+larvae,+Osmia+cornuta+(hymenoptera:+megachilidae),+in+laboratory+conditions.">Toxicity of spirotetramat on solitary bee larvae, Osmia cornuta (hymenoptera: megachilidae), in laboratory conditions.</a> Journal of Apicultural Science. 59 (2), 73-83 (2015).</li><li>Wei, S. G., Wang, R., Smirle, M. J., Xu, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Release+of+Osmia+excavata+and+Osmia+jacoti+(Hymenoptera:+Megachilidae)+for+apple+pollination.">Release of Osmia excavata and Osmia jacoti (Hymenoptera: Megachilidae) for apple pollination.</a> TheCanadian Entomologist. 134 (3), 369-380 (2002).</li><li>Men, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+characteristics+and+pollination+service+of+Mason+bee.">Biological characteristics and pollination service of Mason bee.</a> Chinese Journal of Applied Entomology. 55 (6), 973-983 (2018).</li><li>Bosch, J., Kemp, W. P., Trostle, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bee+population+returns+and+cherry+yields+in+an+orchard+pollinated+with+Osmia+lignaria+(Hymenoptera:+Megachilidae).">Bee population returns and cherry yields in an orchard pollinated with Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 99 (2), 408-413 (2006).</li><li>Winfree, R., Williams, N. M., Dushoff, J., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Native+bees+provide+insurance+against+ongoing+honey+bee+losses.">Native bees provide insurance against ongoing honey bee losses.</a> Ecology Letters. 10 (11), 1105-1113 (2007).</li><li>Garibaldi, L. A., Steffan-Dewenter, I., Winfree, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wild+pollinators+enhance+fruit+set+of+crops+regardless+of+honey+bee+abundance.">Wild pollinators enhance fruit set of crops regardless of honey bee abundance.</a> Science. 339 (6127), 1608-1611 (2013).</li><li>Bosch, J., Sgolastra, F., Kemp, W. P., James, R. R., Pitts-Singer, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+ecophysiology+of+Osmia.+mason+bees+used+as+crop+pollinators.">Life cycle ecophysiology of Osmia. mason bees used as crop pollinators.</a> Bee Pollination in Agricultural Ecosystems. , 83-104 (2008).</li><li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Population+investigation+and+restriction+factors+analyses+of+Osmia+excavata+Alfken+in+Jiaodong.">Population investigation and restriction factors analyses of Osmia excavata Alfken in Jiaodong.</a> Apiculture of China. 69 (9), 68-71 (2018).</li><li>Biesmeijer, J. C., Roberts, S. P. M., Reemer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+declines+in+pollinators+and+insect-pollinated+plants+in+Britain+and+the+Netherlands.">Parallel declines in pollinators and insect-pollinated plants in Britain and the Netherlands.</a> Science. 313 (5785), 351-354 (2006).</li><li>Potts, S. G., Biesmeijer, J. C., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+pollinator+declines:+trends,+impacts+and+drivers.">Global pollinator declines: trends, impacts and drivers.</a> Trends in Ecology &amp; Evolution. 25 (6), 345-353 (2010).</li><li>Chen, L., Yan, Q., Zhang, J., Yuan, S., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Joint+toxicity+of+acetamiprid+and+co-applied+pesticide+adjuvants+on+honeybees+under+semi-field+and+laboratory+conditions.">Joint toxicity of acetamiprid and co-applied pesticide adjuvants on honeybees under semi-field and laboratory conditions.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 38 (9), 1940-1946 (2019).</li><li>Sgolastra, F., Medrzycki, P., Bortolotti, L., Renzi, M. T., Bosch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+mortality+between+a+neonicotinoid+insecticide+and+an+ergosterol-biosynthesis-inhibiting+fungicide+in+three+bee+species.">Synergistic mortality between a neonicotinoid insecticide and an ergosterol-biosynthesis-inhibiting fungicide in three bee species.</a> Pest Management Science. 73 (6), 1236-1243 (2017).</li><li>Bireley, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preface:+Workshop+on+pesticide+exposure+assessment+paradigm+for+non-Apis+bees.">Preface: Workshop on pesticide exposure assessment paradigm for non-Apis bees.</a> Environmental Entomology. 48 (1), 1-3 (2019).</li><li>European Food Safety Authority. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EFSA+Guidance+Document+on+the+risk+assessment+of+plant+protection+products+on+bees+(Apis+mellifera,+Bombus+spp.+and+solitary+bees).">EFSA Guidance Document on the risk assessment of plant protection products on bees (Apis mellifera, Bombus spp. and solitary bees).</a> EFSA Journal. 11 (7), 3295 (2013).</li><li>Rundlof, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seed+coating+with+a+neonicotinoid+insecticide+negatively+affects+wild+bees.">Seed coating with a neonicotinoid insecticide negatively affects wild bees.</a> Nature. 521 (7550), 77-80 (2015).</li><li>Yuan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+hazard+assessment+of+six+neonicotinoid+insecticides+on+Osmia+excavata+(hymenoptera:megachilidae).">Toxicity and hazard assessment of six neonicotinoid insecticides on Osmia excavata (hymenoptera:megachilidae).</a> Acta Entomologica Sinica. 61 (8), 950-956 (2018).</li><li>Lin, Z., Meng, F., Zheng, H., Zhou, T., Hu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neonicotinoid+insecticides+on+honeybee+health.">Effects of neonicotinoid insecticides on honeybee health.</a> Acta Entomologica Sinica. 57 (5), 607-615 (2014).</li><li>Gradish, A. E., Scott-Dupree, C. D., Cutler, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+of+Megachile+rotundata+to+insecticides+used+in+wild+blueberry+production+in+Atlantic+Canada.">Susceptibility of Megachile rotundata to insecticides used in wild blueberry production in Atlantic Canada.</a> Journal of Pest Science. 85, 133-140 (2012).</li><li>Hodgson, E. W., Pitts-Singer, T. L., Barbour, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+insect+growth+regulator,+novaluron+on+immature+alfalfa+leafcutting+bees,+Megachile+rotundata.">Effects of the insect growth regulator, novaluron on immature alfalfa leafcutting bees, Megachile rotundata.</a> Journal of Insect Science. 11, 43 (2011).</li><li>Konrad, R., Ferry, N., Gatehouse, A. M. R., Babendreier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+effects+of+oilseed+rape+expressing+oryzacystatin-1+(OC-1)+and+of+purified+insecticidal+proteins+on+larvae+of+the+solitary+bee+Osmia+bicornis.">Potential effects of oilseed rape expressing oryzacystatin-1 (OC-1) and of purified insecticidal proteins on larvae of the solitary bee Osmia bicornis.</a> PLoS ONE. 3 (7), 2664 (2008).</li><li>Abbott, V. A., Nadeau, J. L., Higo, H. A., Winston, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lethal+and+sublethal+effects+of+imidacloprid+on+Osmia+lignaria+and+clothianidin+on+Megachile+rotundata+(Hymenoptera:+megachilidae).">Lethal and sublethal effects of imidacloprid on Osmia lignaria and clothianidin on Megachile rotundata (Hymenoptera: megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 101, 784-796 (2008).</li><li>Yan, Z., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublethal+effect+of+abamectin+on+3rd+instar+larvae+of+Prodenia+litura.">Sublethal effect of abamectin on 3rd instar larvae of Prodenia litura.</a> Chinese Journal of Tropical Crops. 32 (10), 1945-1950 (2011).</li><li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+ecotoxicity+of+insecticides+with+different+modes+of+action+to+Osmia+excavata+(Hymenoptera:+Megachilidae).">Comparative ecotoxicity of insecticides with different modes of action to Osmia excavata (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 212 (5), 112015 (2021).</li><li>Chen, F. J., Wu, G., Ge, F., Parajulee, M. N., Shrestha, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+elevated+CO2+and+transgenic+Bt+cotton+on+plant+chemistry,+performance,+and+feeding+of+an+insect+herbivore,+the+cotton+bollworm.">Effects of elevated CO2 and transgenic Bt cotton on plant chemistry, performance, and feeding of an insect herbivore, the cotton bollworm.</a> Entomologia Experimentalis Et Applicata. 115 (2), 341-350 (2005).</li><li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+safety+evaluation+of+pesticides+commonly+used+in+strawberry+production+to+bees.">Toxicity and safety evaluation of pesticides commonly used in strawberry production to bees.</a> Zhejiang Agricultural Sciences. (4), 785-787 (2009).</li><li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+toxicity+and+safety+assessment+of+chiral+fipronil+against+Apis+mellifera+and+Trichogramma+ostriniae.">Acute toxicity and safety assessment of chiral fipronil against Apis mellifera and Trichogramma ostriniae.</a> Ecotoxicology. 7 (3), 326-330 (2012).</li><li>Liu, X., Pan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measures+to+ensure+pollination+effect+and+cocoon+recovery+rate+of+Osmia+excavata+in+apple+orchard.">Measures to ensure pollination effect and cocoon recovery rate of Osmia excavata in apple orchard.</a> Northwest Horticulture. (3), 20-21 (2017).</li><li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+growth+and+hive+CO2+concentration.">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony growth and hive CO2 concentration.</a> Scientific Reports. 11 (1), 4364 (2021).</li><li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+behavior+and+interact+with+landscapes+to+affect+colony+growth.">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony behavior and interact with landscapes to affect colony growth.</a> BioRxiv. , (2020).</li><li>Wang, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+effects+of+three+neonicotinoid+pesticides+on+physiology+and+survival+of+honey+bees+(Apis+mellifera+L).">Combination effects of three neonicotinoid pesticides on physiology and survival of honey bees (Apis mellifera L).</a> Journal of Environmental Entomology. 41 (3), 612-618 (2019).</li><li>Kopit, A. M., Pitts-Singer, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Routes+of+pesticide+exposure+in+solitary,+cavity-nesting+bees.">Routes of pesticide exposure in solitary, cavity-nesting bees.</a> Environmental Entomology. 47 (3), 499-510 (2018).</li><li>Cheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+oral+toxicity+of+chlorpyrifos+and+imidacloprid+to+adult+honey+bees+(Apis+mellifera+L).">Chronic oral toxicity of chlorpyrifos and imidacloprid to adult honey bees (Apis mellifera L).</a> Asian Journal of Ecotoxicology. 11 (2), 715-719 (2016).</li><li>Li, M., Ma, C., Xiao, L., Li, Z., Su, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chlorpyrifos+on+behavior+response+of+Apis+mellifera+and+Apis+cerana.">Effects of chlorpyrifos on behavior response of Apis mellifera and Apis cerana.</a> Apicultural Science Association of China. , (2016).</li><li>Cresswell, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+meta-analysis+of+experiments+testing+the+effects+of+a+neonicotinoid+insecticide+(imidacloprid)+on+honey+bees.">A meta-analysis of experiments testing the effects of a neonicotinoid insecticide (imidacloprid) on honey bees.</a> Ecotoxicology. 20 (1), 149-157 (2011).</li><li>Nauen, R., Ebbinghaus-Kintscher, U., Schmuck, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxicity+and+nicotinic+acetylcholine+receptor+interaction+of+imidacloprid+and+its+metabolites+in+Apis+mellifera+(Hymenoptera;+Apidae).">Toxicity and nicotinic acetylcholine receptor interaction of imidacloprid and its metabolites in Apis mellifera (Hymenoptera; Apidae).</a> Pest Management Science. 57 (7), 577-586 (2001).</li><li>Colin, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+to+quantify+and+analyze+the+foraging+activity+of+honey+bees:+relevance+to+the+sublethal+effects+induced+by+systemic+insecticides.">A method to quantify and analyze the foraging activity of honey bees: relevance to the sublethal effects induced by systemic insecticides.</a> Archives of Environmental Contamination and Toxicology. 47 (3), 387-395 (2004).</li><li>Decourtye, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+sublethal+toxicity+of+nine+pesticides+on+olfactory+learning+performances+of+the+honeybee+Apis+mellifera.">Comparative sublethal toxicity of nine pesticides on olfactory learning performances of the honeybee Apis mellifera.</a> Archives of Environmental Contamination &amp; Toxicology. 48 (2), 242-250 (2005).</li><li>Williamson, S. M., Wright, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+multiple+cholinergic+pesticides+impairs+olfactory+learning+and+memory+in+honeybees.">Exposure to multiple cholinergic pesticides impairs olfactory learning and memory in honeybees.</a> Journal of Experimental Biology. 216 (10), 1799-1807 (2013).</li><li>Henry, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+common+pesticide+decreases+foraging+success+and+survival+in+honey+bees.">A common pesticide decreases foraging success and survival in honey bees.</a> Science. 336 (6079), 348-350 (2012).</li><li>Matsumoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+in+homing+flights+in+the+honey+bee+Apis+mellifera+after+a+sublethal+dose+of+neonicotinoid+insecticides.">Reduction in homing flights in the honey bee Apis mellifera after a sublethal dose of neonicotinoid insecticides.</a> Bulletin of Insectology. 66 (1), 1-9 (2013).</li></ol>

성인 수분제의 경우 살충제의 생태 독성을 측정하는 두 가지 주요 방법이 있습니다. 하나는 살충제가 성인 곤충의 앞부분에 적용되는 접촉 방법입니다. 다른 하나는 성인 수분자가 살충제25,26을 함유 한 꿀 물을 공급하는 위 독성 방법입니다. 최근 몇 년 동안, O. excavata의 수분 효과 및 폐색률이 상대적으로 낮은 것으로 밝혀졌다27</su...

Pollinators는 현대 세계 농업의 생태계 서비스에서 중요한 역할을합니다. 꿀벌 (아피스 멜리페라; Hymenoptera : Apidae)는 전통적으로 작물의 필수 경제적 수분제로 간주되어 왔으며, 최근 연구에 따르면 Osmia (Hymenoptera : Megachilidae)는 특정 작물의 수분을 개선하고 과일 크기와 종자 수를 늘리며 세계 여러 지역의 상업용 과수원에서 비대칭 과일의 비율을 줄이는 데에도 매우 중요합니다1. Osmia excavata는 중국 북부 및 북서부 및 일본 2,3,4와 같은 아시아에서 주로 사과 수분에 이상적인 종으로 간주되어 왔습니다. 그것은 유사하거나 때로는 더 큰 효율로 특정 작물에 대한 수분 서비스를 제공 할 수 있습니다. 이 점에서, 그들은 꿀벌 4,5,6과 시너지 효과를 대체하거나 작용하는 것으로 나타났습니다.
O. excavata의 생물학적 특성은 사회적 꿀벌과 비교하여 독특합니다. 그것의 단일한, 독방 및 중첩 활동은 주로 봄과 초여름에 발생합니다. O. excavata의 둥지는 일반적으로 자연 조건의 죽은 나무, 중공 식물, 짚 튜브 및 대나무 줄기에서 일반적으로 기존의 구멍에서 발견됩니다3. 성인 O. excavata는 누에 고치에서 나와 짝짓기를하고, 꽃가루를 모으고, 일주일 후에 부화하기 시작하는 알을 낳기 위해 둥지를 짓습니다. 수정 된 난자는 암컷으로 발전하는 반면, 수정되지 않은 난자는 수컷으로 발전합니다3. 암컷은 꿀벌 튜브의 바닥에 분포하며 해당 조항이 더 중요합니다. 대조적으로, 수컷은 사소한 조항7로 튜브 출구의 근접에 있었기 때문에 수컷이 먼저 나오고 암컷은 나중에 나옵니다. 암컷은 소량의 과즙과 꽃가루를 섞어 촉촉한 얼룩으로 섞는데, 이는 세포8의 각 유충의 유일한 식량원입니다.
여러 연구에 따르면 수분을 공급하는 곤충 9,10 개체수가 감소했다고보고했습니다. 살충제의 광범위한 사용은 수분자의 풍부함과 다양성을 감소시키는 주요 요인 중 하나로 확인되었으며 또한 수분 서비스(11,12)를 위태롭게 할 수 있습니다. 살충제의 부작용을 줄이고 완화하려면 수분제에 대한 살충제 위험 평가를 수행해야합니다. 일부 국가에서는13,14 사용 된 살충제로부터 꿀벌에 대한 안전을 보장하기 위해 규제 프레임 워크를 수립했습니다. 최근 연구에 따르면 오스미아는 꿀벌1,15보다 살충제에 더 취약했습니다.
흥미롭게도, 대부분의 위험 평가는 성인 꿀벌11,12에 초점을 맞추고있었습니다. O. excavata, 특히 애벌레에 대한 연구는 거의 수행되지 않았습니다. 또한, 살충제에 의해 직접 야기 된 Osmia의 사망률은 가장 일반적으로16으로 간주됩니다. 여전히, 애벌레 체중 증가, 발달 기간, 수유 패턴, 망막 능력, 후속 성인 행동 및 번식력과 같은 만성 독성은 급성 치명적인 독성과 동일한 해를 미칠 수 있으며 독방 꿀벌에 대한 효과적인 실험 방법이 부족하기 때문에 종종 무시됩니다17.
지금까지 두 가지 방법이 고독한 꿀벌의 유충에 대한 살충제의 영향을 평가하기 위해 사용됩니다 : (1) 독방 꿀벌의 알을 제거하지 않고 적절한 양의 살충제가 국부적 인 장소에 적용되었습니다 1,18,19,20; (2) 특정 양의 살충제21을 함유하는 인공 꽃가루-과즙 혼합물로 조항을 대체한다. 그러나 위의 두 가지 방법에는 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 전자는 급성 독성 만 측정 할 수 있지만 유충이 단기간에 전체 용량을 섭취했기 때문에 만성 독성은 측정 할 수 없습니다. 후자는 인간의 조작으로 인해 높은 사망률로 이어질 것입니다1. 여기에서, 침지 방법은 실제 환경에서 잔류 농약에 대한 유충 먹이의 거동을 시뮬레이션함으로써 고도로 통제된 연구 조건 하에서 O. excavata에 대한 살충제의 생태독성을 연구하기 위해 기술되었다. 이 연구의 방법은 위의 두 가지 방법의 단점을 해결하고 급성 및 만성 독성에 대한 유해 물질의 영향을 측정하는 데 적합합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Abamectin</td>
			<td>Jinan Lvba Pesticide Co. Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black-light lamps</td>
			<td>Kanghua Medical Device Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifugal tube box with 100 Wells</td>
			<td>Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube</td>
			<td>Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>2 mL; &#160;Serve as bee tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric soldering iron</td>
			<td>Kunshan Kaipai Hardware Electromechanical Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic scale</td>
			<td>Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd</td>
			<td>3137510295</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graduated cylinder</td>
			<td>Anhui Weiss Experimental Equipment Co. Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes (60 mm diameter)</td>
			<td>Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pollen provision</td>
			<td>Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft brush</td>
			<td>Wengang Wenhai painting material factory</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solitary bees</td>
			<td>Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluating the effect of pesticides on the larvae of the solitary bees

수분제에 대한 살충제에 대한 현재의 생태 학적 위험 평가는 주로 실험실 조건 만 고려했습니다. 독방 꿀벌의 유충의 경우, 살충제로 오염 된 조항을 섭취하면 유충의 사망률이 증가하고 인구 통계 학적 관점에서 내년에 성인 독방 꿀벌의 수거율과 인구가 감소 할 수 있습니다. 그러나 살충제가 독방 꿀벌의 유충에 미치는 영향에 대한 연구는 제한적입니다. 따라서 살충제가 독방 꿀벌의 유충에 어떻게 영향을 미치는지 이해하는 것은 살충제 생태 위험 평가의 필수적인 부분으로 간주되어야합니다. 이 연구는 독방 꿀벌, Osmia excavata 의 유충을 살충제의 치명적인 또는 치사하 복용량에 노출시키고, 유충 체중 증가, 발달 기간, 폐색 능력 및 섭취 된 음식의 식품 소비 효율 전환을 추적하는 방법을 제시합니다. 이 방법의 효과를 입증하기 위해, O. excavata 의 유충은 급성 치사 및 아치사 용량의 클로르 피리 포스를 포함하는 조항을 먹였습니다. 그 후, 처리된 유충의 상기 지수를 조사하였다. 이 기술은 수분제에 대한 살충제의 위험을 예측하고 완화하는 데 도움이됩니다.

일반적으로 사용되는 살충제, 클로르피리포스, 이미다클로프리드, 펜디페누론, 팍심, 아버멕틴의 함량은 대조군에서 정량화 한계(0.01-0.02 mg kg-1) 미만이었다; 이러한 결과는 각 처리에 대한 살충제 잔류 물의 영향을 배제했습니다. 대조군에서 48 시간 후에 규정에서 유충을 제거하거나 제거하지 않은 사망률을 평가하였다; 결과는 유의한 차이를 보이지 않았으며(표 1), 경미한 ?...

Watch this Scientific Journal Video about Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees at JoVE.com

Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees

본 프로토콜은 고독한 꿀벌 인 Osmia excavata의 유충에게 살충제로 오염 된 조항을 먹이는 방법을 설명합니다. 이 절차는 독방 꿀벌의 유충에 대한 살충제의 생태 독성을 검사합니다.

살충제가 독방 꿀벌의 유충에 미치는 영향 평가

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ...

이 프로토콜은 독방 꿀벌에 대한 살충제의 부작용을 예측하고 완화하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 유충이 조항의 잔류 농약에 먹이를 먹는 것을 시뮬레이션하는 것입니다. 이 방법의 시각적 시연은 Osmia excavata의 생물학적 특성이 사회적 꿀벌에 비해 독특하기 때문에 중요하며 O.excavata, 특히 유충에 대한 연구는 거의 수행되지 않았습니다.공급 튜브를 준비하려면 전기 권선 철을 사용하여 2 밀리리터 원심 분리 튜브의 뚜껑에 직경 0.3 밀리미터 구멍을 펀치하십시오. 살충제를 준비하려면 기술 등급의 살충제를 아세톤에 용해시켜 밀리리터 당 10 밀리그램의 스톡 용액을 얻은 다음 용액의 구배 희석을 다섯 가지 이상의 농도로 수행하십시오. 다음으로, 대량 사육 프로그램에서 조항과 새로 부화 한 Osmia excavata 유충이 포함 된 플라스틱 꿀벌 튜브를 구입하십시오.부드러운 브러시를 사용하여 유충을 부드럽게 분리하고 둥지 내의 공급 크기 및 세포 위치에 따라 암컷 유충을 선택한 다음 선택한 암컷 유충과 함께 직경 60 밀리미터의 페트리 접시에 균일 한 크기 조항을 놓고 사용하기 위해 따로 보관하십시오. 살충제 처리를 진행하기 전에 조항을 저울질하십시오. 살충제로 조항을 처리하려면 먼저 살충제 용액의 양을 측정하십시오.그런 다음 선택한 고르게 크기의 조항을 희석 된 살충제 용액에 10 초 동안 담그십시오. 살충제로 조항을 처리 한 후 살충제 용액의 부피를 다시 측정하십시오. 멸균 작업 테이블의 조항을 공기 건조 한 후 구멍이있는 준비된 원심 분리 튜브에 추가하십시오.다음으로, 60 마리의 암컷 유충의 무게를 측정하고 부드러운 브러시를 사용하여 유충을 자연적으로 건조 된 공급물의 표면으로 옮기고 튜브 당 하나의 유충을 첨가합니다. 상대 습도가 65 ~ 75 % 인 섭씨 25 플러스 또는 영하 2 도의 어둠 속에서 성장 챔버에서 유충을 후퇴시킵니다. 급성 치사 독성 시험의 경우, 48 시간 동안 치료 및 대조 조항에 배치 된 후 유충의 사망률을 측정하십시오.다음으로, 곤충 사육 48 시간 후에 남아있는 조항을 계량하여 각 유충이 소비하는 공급량을 결정한 다음이 공식을 사용하여 각 유충이 섭취 한 비율과 각 조항의 살충제 함량에 따라 각 유충이 소비하는 각 농도의 살충제 복용량을 계산하십시오. 치명적인 독성 테스트의 경우, 애벌레 발달 기간을 측정하기 위해 검은 빛 램프 아래에서 누에 고치를하는 동안 매일 O.excavata를 관찰하십시오. 그런 다음 애벌레 체중 증가를 결정하기 위해 치료 14 일 후에 유충의 무게를 측정하십시오.다음으로, 섭취 14 일 후에 남은 식량을 계량하여 섭취 한 음식의 소비 및 전환 효율을 계산하십시오. 그리고 방제 꿀벌이 성인으로 출현 할 때 작은 가위를 사용하여 누에 고치를 저격하여 망토의 수를 조사하십시오. 급성 치사 독성 시험은 O.excavata 유충에 대한 클로르피리포스의 LD50 값이 꿀벌 당 0.001 마이크로그램이라는 것을 보여주었다.치사하 독성 시험에서, 투여량이 증가함에 따라, 유충 체중 증가, 소비 및 섭취된 음식의 전환 효율의 지수 값은 치료를 위해 감소하였고, 대조군에 비해 가장 낮은 값은 꿀벌 당 0.013 마이크로그램의 클로르피리포스에서 관찰되었다. 반대로, 가장 연장된 유충 발달 기간은 대조군 처리와 비교하여 꿀벌 당 0.016 마이크로그램의 클로르피리포스에서 관찰되었다. 클로르피리포스가 에클로션 속도에 미치는 영향에 대한 평가는 클로르피리포스의 섭취된 투여량과 O.excavata의 에클로션 속도 사이에 유의한 부정적인 선형 관계를 나타냈다.섭취 된 복용량이 대조군 치료의 복용량보다 꿀벌 당 0.02 마이크로 그램을 초과했을 때 폐색률은 상당히 낮았다. 이 프로토콜에서는 테스트 오류를 최소화하기 위해 균일한 크기의 조항을 스크리닝하는 것이 중요합니다. 이 기술은 살충제가 독방 꿀벌의 성인 비행 및 번식력에 미치는 영향을 탐구하여 낮은 회복률과 인구 감소의 문제를 해결하는 데 도움이됩니다.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Time-resolved ElectroSpray Ionization Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry for Studying Protein Structure and Dynamics

시간 해결 전기 분무 이온화 수소 - 중수소 교환 질량 분석 단백질 구조와 역학 연구를위한

Intrinsically disordered proteins (IDPs) have long been a challenge to structural biologists due to their lack of stable secondary structure elements. ...

연구

생화학

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

A Simple Method for High Throughput Chemical Screening in Caenorhabditis Elegans

꼬마 선 충 에서 높은 처리량 화학 심사 하는 간단한 방법

Caenorhabditis elegans is a useful organism for testing chemical effects on physiology. Whole organism small molecule screens offer significant advantages ...

Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs

번역 개시 포유류 mRNAs에 복잡 한 대형의 Toeprinting 분석

Translation initiation is the rate-limiting step of protein synthesis and represents a key point at which cells regulate their protein output. Regulation ...

Electrochemical Detection of Deuterium Kinetic Isotope Effect on Extracellular Electron Transport in Shewanella oneidensis MR-1

Electrochemical Detection of Deuterium Kinetic Isotope Effect on Extracellular Electron Transport in Shewanella oneidensis MR-1

전기 화학 탐지의 중수소 활동적인 동위 원소 효과 Shewanella oneidensis 미스터-1에서 세포 외 전자 전송에

Direct electrochemical detection of c-type cytochrome complexes embedded in the bacterial outer membrane (outer membrane c-type cytochrome complexes; OM ...

Assessing the Viability of a Synthetic Bacterial Consortium on the In Vitro Gut Host-microbe Interface

Assessing the Viability of a Synthetic Bacterial Consortium on the In Vitro Gut Host-microbe Interface

생체 외에서 직감 호스트 미생물 인터페이스에 합성 세균 컨소시엄의 생존 능력을 평가

The interplay between host and microbiota has been long recognized and extensively described. The mouth is similar to other sections of the ...

Defining Hsp33's Redox-regulated Chaperone Activity and Mapping Conformational Changes on Hsp33 Using Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry

Hsp33의 Redox 규제 보호자 활동을 정의 하 고 수소 중수소 교환 질량 분석을 사용 하 여 Hsp33에 구조적 변화를 매핑

Living organisms regularly need to cope with fluctuating environments during their life cycle, including changes in temperature, pH, the accumulation of ...

Characterization of Proteins by Size-Exclusion Chromatography Coupled to Multi-Angle Light Scattering (SEC-MALS)

Characterization of Proteins by Size-Exclusion Chromatography Coupled to Multi-Angle Light Scattering SEC-MALS

다각형 광 산란에 결합된 크기 배제 크로마토그래피에 의한 단백질의 특성 (SEC-MALS)

Analytical size-exclusion chromatography (SEC), commonly used for the determination of the molecular weight of proteins and protein-protein complexes in ...

Visualizing Surface T-Cell Receptor Dynamics Four-Dimensionally Using Lattice Light-Sheet Microscopy

격자 광 시트 현미경을 사용하여 표면 T 세포 수용체 역학 4 차원 시각화

The signaling and function of a cell are dictated by the dynamic structures and interactions of its surface receptors. To truly understand the ...

Examining the Dynamics of Cellular Adhesion and Spreading of Epithelial Cells on Fibronectin During Oxidative Stress

세포 부착의 역학 을 검사 하 고 산화 스트레스 동안 Fibronectin에 상피 세포의 확산

The adhesion and spreading of cells onto the extracellular matrix (ECM) are essential cellular processes during organismal development and for the ...

Derivatization of Protein Crystals with I3C using Random Microseed Matrix Screening

무작위 마이크로시드 매트릭스 스크리닝을 사용하여 I3C로 단백질 결정의 파생

Protein structure elucidation using X-ray crystallography requires both high quality diffracting crystals and computational solution of the diffraction ...