Name: economical and efficient protocol for isolating and culturing bone marrow-derived dendritic cells from mice
Uploaded: 2022-07-01T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Economical and Efficient Protocol for Isolating and Culturing Bone Marrow-derived Dendritic Cells from Mice at JoVE.com

Bu çalışma Tianjin Bilim ve Teknoloji Planı Programı (20JCQNJC00550), Tianjin Sağlık Bilimi ve Teknolojisi Projesi (TJWJ202021QN033 ve TJWJ202021QN034) tarafından desteklenmiştir.

Tüm prosedürler Nanjing Tıp Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı.
1. Kemik iliğinin izolasyonu ve BM hücrelerinin hazırlanması
<ol><li>C57BL / 6 farelerini (18-22 g, 6-8 haftalık) CO2 boğulması yoluyla feda edin. Fareyi fare ameliyat masasına sabitleyin. Yüzeyleri% 70 etanol ile dezenfekte edin.</li>
	<li>Kasları ve femoral arteri açığa çıkarmak için bacağın derisini kesin. İki forseps kullanarak femoral ar...

<ol>
	<li>Huang, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigen-loaded+monocyte+administration+induces+potent+therapeutic+antitumor+T+cell+responses.">Antigen-loaded monocyte administration induces potent therapeutic antitumor T cell responses.</a> Journal of Clinical Investigation. 130 (2), 774-788 (2020).</li><li>Wang, P., Dong, S., Zhao, P., He, X., Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+loading+of+CTL+epitopes+onto+MHC+class+I+complexes+on+dendritic+cell+surface+in+vivo.">Direct loading of CTL epitopes onto MHC class I complexes on dendritic cell surface in vivo.</a> Biomaterials. 182, 92-103 (2018).</li><li>Banchereau, J., Steinman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells+and+the+control+of+immunity.">Dendritic cells and the control of immunity.</a> Nature. 392 (6673), 245-252 (1998).</li><li>Jiang, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galactosylated+liposome+as+a+dendritic+cell-targeted+mucosal+vaccine+for+inducing+protective+anti-tumor+immunity.">Galactosylated liposome as a dendritic cell-targeted mucosal vaccine for inducing protective anti-tumor immunity.</a> Acta Biomaterialia. 11, 356-367 (2015).</li><li>Shi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Next-generation+immunotherapies+to+improve+anticancer+immunity.">Next-generation immunotherapies to improve anticancer immunity.</a> Frontiers in Pharmacology. 11, 566401 (2020).</li><li>Lutz, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+advanced+culture+method+for+generating+large+quantities+of+highly+pure+dendritic+cells+from+mouse+bone+marrow.">An advanced culture method for generating large quantities of highly pure dendritic cells from mouse bone marrow.</a> Journal of Immunological Methods. 223 (1), 77-92 (1999).</li><li>Son, Y. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+bulk-culture+method+for+generating+mature+dendritic+cells+from+mouse+bone+marrow+cells.">A novel bulk-culture method for generating mature dendritic cells from mouse bone marrow cells.</a> Journal of Immunological Methods. 262 (1-2), 145-157 (2002).</li><li>Guo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fusion+protein+vaccine+based+on+Ag85B+and+STEAP1+induces+a+protective+immune+response+against+prostate+cancer.">Fusion protein vaccine based on Ag85B and STEAP1 induces a protective immune response against prostate cancer.</a> Vaccines. 9 (7), 786 (2021).</li><li>Olweus, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+ontogeny:+A+human+dendritic+cell+lineage+of+myeloid+origin.">Dendritic cell ontogeny: A human dendritic cell lineage of myeloid origin.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 94 (23), 12551-12556 (1997).</li><li>Martin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concept+of+lymphoid+versus+myeloid+dendritic+cell+lineages+revisited:+both+CD8alpha(-)+and+CD8alpha(+)+dendritic+cells+are+generated+from+CD4(low)+lymphoid-committed+precursors.">Concept of lymphoid versus myeloid dendritic cell lineages revisited: both CD8alpha(-) and CD8alpha(+) dendritic cells are generated from CD4(low) lymphoid-committed precursors.</a> Blood. 96 (-), 2511-2519 (2000).</li><li>Anderson, D. A., Dutertre, C. A., Ginhoux, F., Murphy, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+models+of+human+and+mouse+dendritic+cell+development+and+function.">Genetic models of human and mouse dendritic cell development and function.</a> Nature Reviews: Immunology. 21 (2), 101-115 (2021).</li><li>Vu Manh, T. P., Bertho, N., Hosmalin, A., Schwartz-Cornil, I., Dalod, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigating+evolutionary+conservation+of+dendritic+cell+subset+identity+and+functions.">Investigating evolutionary conservation of dendritic cell subset identity and functions.</a> Frontiers in Immunology. 6, 260 (2015).</li><li>Scheicher, C., Mehlig, M., Zecher, R., Reske, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cells+from+mouse+bone+marrow:+in+vitro+differentiation+using+low+doses+of+recombinant+granulocyte-macrophage+colony-stimulating+factor.">Dendritic cells from mouse bone marrow: in vitro differentiation using low doses of recombinant granulocyte-macrophage colony-stimulating factor.</a> Journal of Immunological Methods. 154 (2), 253-264 (1992).</li><li>Brasel, K., De Smedt, T., Smith, J. L., Maliszewski, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+murine+dendritic+cells+from+flt3-ligand-supplemented+bone+marrow+cultures.">Generation of murine dendritic cells from flt3-ligand-supplemented bone marrow cultures.</a> Blood. 96 (9), 3029-3039 (2000).</li><li>Mayordomo, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=marrow-derived+dendritic+cells+pulsed+with+synthetic+tumour+peptides+elicit+protective+and+therapeutic+antitumour+immunity.">marrow-derived dendritic cells pulsed with synthetic tumour peptides elicit protective and therapeutic antitumour immunity.</a> Nature Medicine. 1 (12), 1297-1302 (1995).</li><li>Condon, C., Watkins, S. C., Celluzzi, C. M., Thompson, K., Falo, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA-based+immunization+by+in+vivo+transfection+of+dendritic+cells.">DNA-based immunization by in vivo transfection of dendritic cells.</a> Nature Medicine. 2 (10), 1122-1128 (1996).</li><li>Brunner, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-prandial+administration+of+the+insulin+analogue+insulin+aspart+in+patients+with+type+1+diabetes+mellitus.">Post-prandial administration of the insulin analogue insulin aspart in patients with type 1 diabetes mellitus.</a> Diabetic Medicine. 17 (5), 371-375 (2000).</li><li>Koido, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+antitumor+immunity+by+vaccination+of+dendritic+cells+transfected+with+MUC1+RNA.">Induction of antitumor immunity by vaccination of dendritic cells transfected with MUC1 RNA.</a> Journal of Immunology. 165 (10), 5713-5719 (2000).</li><li>Jonasson, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strength+of+the+porcine+proximal+femoral+epiphyseal+plate:+The+effect+of+different+loading+directions+and+the+role+of+the+perichondrial+fibrocartilaginous+complex+and+epiphyseal+tubercle+-+An+experimental+biomechanical+study.">Strength of the porcine proximal femoral epiphyseal plate: The effect of different loading directions and the role of the perichondrial fibrocartilaginous complex and epiphyseal tubercle - An experimental biomechanical study.</a> Journal of Experimental Orthopaedics. 1 (1), 4 (2014).</li><li>Labeur, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+tumor+immunity+by+bone+marrow-derived+dendritic+cells+correlates+with+dendritic+cell+maturation+stage.">Generation of tumor immunity by bone marrow-derived dendritic cells correlates with dendritic cell maturation stage.</a> Journal of Immunology. 162 (1), 168-175 (1999).</li><li>Hinkel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulatory+dendritic+cells+generated+from+nonfractionated+bulk+peripheral+blood+mononuclear+cell+cultures+induce+growth+of+cytotoxic+T+cells+against+renal+cell+carcinoma.">Immunomodulatory dendritic cells generated from nonfractionated bulk peripheral blood mononuclear cell cultures induce growth of cytotoxic T cells against renal cell carcinoma.</a> Journal of Immunotherapy. 23 (1), 83-93 (2000).</li></ol>

İnsanlar ve fareler, klasik DC'ler (cDC1'ler ve cDC2'ler dahil cDC'ler) plazmasitoid DC'ler (pDC'ler) ve monosit kaynaklı DC'ler (MoDC'ler) 9,10,11 dahil olmak üzere farklı DC alt kümelerine sahiptir. Genel olarak, cDC1'lerin hücre içi patojenlere ve kansere karşı sitotoksik T lenfosit (CTL) yanıtlarını düzenlediği ve cDC2'lerin hücre dışı patojenlere, parazitlere ve alerjenlere karşı immün yanıtları düze...

Dendritik hücreler (DC'ler), naif T hücrelerini aktive etmek ve bulaşıcı hastalıklara, alerji hastalıklarına ve tümör hücrelerine karşı spesifik sitotoksik T lenfosit (CTL) yanıtlarını indüklemek için en güçlü antijen sunan hücrelerdir (APC'ler) 1,2,3. DC'ler doğuştan gelen bağışıklık ile adaptif immünite arasındaki birincil bağlantıdır ve immünolojik savunmada ve immün toleransın korunmasında önemli bir rol oynarlar. Son 40 yılda, birçok araştırmacı DC'lerin alt kümelerini ve inflamasyon ve bağışıklıktaki işlevlerini tanımlamaya çalışmıştır. Bu çalışmalara göre, DC'ler kemik iliği hücrelerinden miyeloid ve lenfoid soylar boyunca gelişir. Tümör aşıları son yıllarda önemli kilometre taşları kazanmıştır ve umut verici bir geleceğe sahiptir. Mekanik olarak, tümör aşıları immün yanıtı modüle eder ve tümör antijenlerini kullanarak sitotoksik T lenfositleri aktive ederek tümör büyümesini önler. DC'lere dayanan aşı, tümör immünoterapisinde önemli bir rol oynamaktadır ve en umut verici anti-tümör tedavilerinden biri olarak tanımlanmıştır 1,4. Ek olarak, DC'ler yeni moleküler hedefli ilaçların ve immün kontrol noktası inhibitörlerinin testinde yaygın olarak kullanılmaktadır5.
Araştırmacılar, DC'lerin rolünü daha fazla incelemek için acilen çok sayıda yüksek saflıkta DC'ye ihtiyaç duymaktadır. Bununla birlikte, DC'ler çeşitli dokularda ve kanda nadirdir ve insanlarda ve hayvanlarda kan hücrelerinin sadece% 1'ini oluşturur. Kemik iliği dendritik hücrelerinin in vitro kültürü (BMDC), büyük miktarlarda DC hücresi elde etmek için önemli bir yöntemdir. Bu arada, kemik iliğinden DC'ler üretmek için Lutz protokolü araştırmacılar tarafından yaygın olarak kullanılmaktadır6. Protokol DC hücrelerinin elde edilmesinde etkili olmasına rağmen, yüksek konsantrasyonlarda sitokinlerin eklenmesini ve kırmızı kan hücrelerinin lizisini içeren karmaşık ve pahalıdır.
Bu çalışmada, hemen hemen tüm kemik iliği hücrelerini fare kemik iliğinden (BM) izole etmek ve in vitro 7-9 günlük inkübasyondan sonra BMDC'ye farklılaşmayı indüklemek için daha düşük GM-CSF ve IL-4 konsantrasyonu ile bir yöntem sunulmuştur. Bu prosedür, neredeyse tüm kemik iliği hücrelerini hasat etmek ve bunları tam bir ortamda askıya almak için sadece 10 dakika sürer. Kısacası, bu araştırmada BMDC için verimli ve uygun maliyetli bir kültürleme yöntemi sunuyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#946;-Mercaptoethanol</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>M8211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC-MHC II</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>116417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-CD80</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>104707</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percp/cy5.5-CD11c</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>117327</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PRMI-1640</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>11875093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Mouse GM-CSF</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P00184</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Mouse IL-4</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P00196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TruStain Fc PLUS (anti-mouse CD16/32) Antibody</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>156603</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

economical and efficient protocol for isolating and culturing bone marrow-derived dendritic cells from mice

Dendritik hücrelere (DC'ler) olan talep, immünoloji araştırmaları ilerledikçe giderek artmaktadır. Bununla birlikte, DC'ler tüm dokularda nadirdir. DC'leri izole etmek için geleneksel yöntem öncelikle büyük dozlarda (>10 ng / mL) granülosit-makrofaj koloni uyarıcı faktör / interlökin-4 (GM-CSF / IL-4) enjekte ederek kemik iliği (BM) farklılaşmasını DC'lere indüklemeyi içerir ve prosedürü karmaşık ve pahalı hale getirir. Bu protokolde, 10 ng / mL GM-CSF / IL-4 ortamında kültürlenmiş tüm BM hücreleri kullanılarak, 3-4 yarı kültür değişiminden sonra, fare başına 2.7 x 107 CD11c + hücresi (DC) (iki femur) % 80 -% 95 saflıkta toplanmıştır. Kültürde 10 gün sonra, CD11c, CD80 ve MHC II ekspresyonu artarken, hücre sayısı azaldı. Hücre sayısı 7 günlük kültürden sonra zirveye ulaştı. Dahası, bu yöntemin tüm kemik iliği hücrelerini hasat etmesi sadece 10 dakika sürdü ve 1 haftalık kültürden sonra çok sayıda DC elde edildi.

1 x 10 7-1.7 x 107 hücreleri iki femurdan ekstrakte edildi ve 6 kuyucuklu bir plakaya ekilmeden önce 24 mL ortamda tekrar askıya alındı (Şekil 1A). 2 gün sonra, yapışkan olmayan hücreler kültür ortamını tamamen değiştirerek çıkarıldı. Ortamı değiştirmeden önce, önemli sayıda askıya alınmış hücre gözlendi (Şekil 1B). 3 günlük kültürden sonra küçük hücre kolonileri oluşmaya başladı. Altıncı günde...

Watch this Scientific Journal Video about Economical and Efficient Protocol for Isolating and Culturing Bone Marrow-derived Dendritic Cells from Mice at JoVE.com

Economical and Efficient Protocol for Isolating and Culturing Bone Marrow-derived Dendritic Cells from Mice

Burada, 10 ng / mL GM-CSF / IL-4 ile 7 günlük kültürden sonra farelerden yüksek saflıkta kemik iliği kaynaklı dendritik hücreleri izole etmek ve üretmek için ekonomik ve etkili bir yöntem sunuyoruz.

Kemik İliği Kaynaklı Dendritik Hücrelerin Farelerden İzole Edilmesi ve Kültürlenmesi için Ekonomik ve Verimli Protokol

The demand for dendritic cells (DCs) is gradually increasing as immunology research advances. However, DCs are rare in all tissues. The traditional method ...

Fareden Kemik İliği Kaynaklı Dendritik Hücreleri İzole Etmenin ve Üretmenin Ekonomik ve Verimli Protokolü. Hayvan denekleri içeren prosedürler, Nanjing Tıp Üniversitesi Kurum Hayvan Etiği Komitesi tarafından onaylanmıştır.One.Giriş. Tümör bağışıklık araştırmalarındaki artışla birlikte, DC hücrelerine olan talep giderek artmaktadır.Bununla birlikte, DC'ler tüm dokularda nadirdir. Esas olarak kemik iliğinin DC'lere farklılaşmasını indükleyen geleneksel yöntem karmaşık ve maliyetlidir. İki. Kemik iliğinin izolasyonu ve BM hücrelerinin hazırlanması Fareleri feda ediyoruz ve fare ameliyat masasına sabitliyoruz.Sol maruz kalan kasların ve femoral arterin derisini kesin. Femoral arteri doğrudan kesmeyin. Aksi takdirde, ağır kanamaya neden olur ve görüş alanını kirletir.Femur çevresindeki tüm kasları kesin. Femur başının prolapsusu gözlenene kadar farenin alt uzuvlarını yavaşça dışa doğru gerin. Alt ekstremiteleri vücuttan ayırın.Serbest ve eksiksiz bir femur elde etmek için arka bacağını kesin. Gazlı bez kullanarak kasları çıkarın. Kasları doğrudan yırtmayın.Farelerin femuru kırılgandır. Femuru iki ila beş dakika boyunca% 75 alkole yerleştirin. Üç. BMDC'nin enjeksiyon kültürü Artık alkolü PBS ile durulayın.Femurun orta ve alt kısmını hemostatik forseps ile kelepçeleyin ve femur alt ucunu başka bir hemostatik forseps ile kelepçeleyin. Hemostatik forseps tam anlamıyla femura uygulanır ve femur epifizyel hattan kopar. Kemik iliği boşluğunu epifizyal hattan delmek için bir ml şırınga kullanın.Tam orta iki parça kullanın, kemik beyazlaşana kadar kemik iliği boşluğunu yıkayın. Yıkama sıvılarını toplayın. GM CSF / IL-4 içeren tam ortamın 24ml ile desteklenmesi ve kuyucuk başına 4 ml'lik 6 delikli bir plakada tohumlanması. Dört.Sonuçlar.İki gün sonra, GM-CSF / IL-4 içeren tüm ortamları değiştirin. Yarısı dördüncü, altıncı ve sekizinci günde GM-CSF / IL-4 içeren komple ortamın yerini aldı. Hücre sayısı yedinci günde zirveye ulaştı ve daha sonra kademeli olarak azaldı.DC hücreleri, tipik bir olgun DC hücre morfolojisi gösteren çok sayıda sinaps oluşturdu. Akış alt metrik analizleri, CD11c oranının altıncı günde% 71'i empoze ettiğini, geniş oranın 10. günde% 96.1'e yükseldiğini göstermektedir. CD11c, CD80 ve MSC2'nin ekspresyonu, ekim süresinin artmasıyla birlikte giderek artmıştır. Beş.Sonuç.Kısacası, kemik iliği kaynaklı dendritik hücreleri farelerden izole etmek ve üretmek için ekonomik ve verimli bir protokol oluşturduk, bu da kemik iliği hücrelerini ayırmak için sadece 10 dakika sürüyor. Altı ila yedi günlük kültürden sonra ml başına 10ng, GM-CSF ve IL-4 ile çok sayıda yüksek saflıkta DC hasat edildi.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Optimized Protocol for Efficient Transfection of Dendritic Cells without Cell Maturation

Hücre olgunlaşması olmadan Dendritik Hücreler Verimli Transfeksiyon için optimize edilmiş Protokolü

Dendritic cells (DCs) can be considered sentinels of the immune system which play a critical role in its initiation and response to infection1. Detection ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Generation and Labeling of Murine Bone Marrow-derived Dendritic Cells with Qdot Nanocrystals for Tracking Studies

İzleme Araştırmaları Qdot nanokristaller murin Kemik İliği-türevli dendritik hücrelerin üretilmesi ve Etiketleme

Dendritic cells (DCs) are professional antigen presenting cells (APCs) found in peripheral tissues and in immunological organs such as thymus, bone ...

Isolating And Immunostaining Lymphocytes and Dendritic Cells from Murine Peyer's Patches

Lenfositler ve mürin Peyer en Yamalar itibaren Dendritik Hücreler İzolasyon Ve immün

Peyer's  patches (PPs) are integral components of the gut-associated lymphoid tissues  (GALT) and play a central role in intestinal immunosurveillance and ...

Investigation of Macrophage Polarization Using Bone Marrow Derived Macrophages

Kemik İliği Türetilmiş makrofajlar kullanarak Makrofaj Polarizasyon İncelenmesi

The article describes a readily easy adaptive in vitro model to investigate macrophage polarization. In the presence of GM-CSF/M-CSF, hematopoietic ...

Bone Marrow-derived Macrophage Production

Kemik İliği Makrofaj üretim kaynaklı

Macrophages are critical components of the innate and adaptive immune responses, and they are the first line of defense against foreign invaders because ...

Isolation and Intravenous Injection of Murine Bone Marrow Derived Monocytes

İzolasyon ve Kemirgen Kemik İliği intravenöz enjeksiyon Türetilmiş Monositler

As a subtype of leukocytes and progenitors of macrophages, monocytes are involved in many important processes of organisms and are often the subject of ...

Efficient Isolation Protocol for B and T Lymphocytes from Human Palatine Tonsils

İnsan Palatine Bademcikler B ve T Lenfosit için Verimli İzolasyon Protokolü

Tonsils form a part of the immune system providing the first line of defense against inhaled pathogens. Usually the term &#8220;tonsils&#8221; refers to ...

Fluorescence-activated Cell Sorting for Purification of Plasmacytoid Dendritic Cells from the Mouse Bone Marrow

Fare kemik iliğinden plazmasitoid dendritik hücreleri Saflaştırılması floresans ile aktive edilen hücre sınıflandırma

Fluorescence-activated cell sorting (FACS) is a technique to purify specific cell populations based on phenotypes detected by flow cytometry. This method ...

An In Vivo Mouse Model to Measure Na&#239;ve CD4 T Cell Activation, Proliferation and Th1 Differentiation Induced by Bone Marrow-derived Dendritic Cells

Vivo fare modeli ölçü saf CD4 T Hücre aktivasyonu, yayılması ve kemik iliği türevi dendritik hücreler tarafından indüklenen Th1 farklılaşma

Quantification of na&#239;ve CD4 T cell activation, proliferation, and differentiation to T helper 1 (Th1) cells is a useful way to assess the role played ...

Novel Protocol for Generating Physiologic Immunogenic Dendritic Cells

Fizyoloji Immunogenic dendritik hücreler oluşturma için yeni protokol

Extracorporeal photochemotherapy (ECP) is a widely used cancer immunotherapy for cutaneous T cell lymphoma (CTCL), operative in over 350 university ...