Name: drosophila melanogaster larva injection protocol
Uploaded: 2021-10-19T14:45:00
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Wir danken Mitgliedern des Department of Biological Sciences der George Washington University (GWU) für die kritische Lektüre des Manuskripts. GT wurde durch ein Harlan-Sommerstipendium der GWU unterstützt. Alle grafischen Figuren wurden mit BioRender erstellt.

1. Fliegenaufzucht
HINWEIS: Der Lebenszyklus von D. melanogaster ist in vier Stadien unterteilt: Embryo, Larve, Puppe und Erwachsener. Die Erzeugungszeit bei optimalen Aufzuchtbedingungen im Labor (~25 °C, 60% Luftfeuchtigkeit und ausreichend Nahrung) beträgt ca. 10 Tage vom befruchteten Ei bis zum geschlossenen Erwachsenen. Weibchen legen ~ 100 Embryonen pro Tag, und die Embryogenese dauert etwa 24 h22. Die Larven durchlaufen drei Entwicklungs...

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	<li>Takehana, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+a+pattern-recognition+receptor,+peptidoglycan-recognition+protein-LE,+activates+imd/relish-mediated+antibacterial+defense+and+the+prophenoloxidase+cascade+in+Drosophila+larvae.">Overexpression of a pattern-recognition receptor, peptidoglycan-recognition protein-LE, activates imd/relish-mediated antibacterial defense and the prophenoloxidase cascade in Drosophila larvae.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99 (21), 13705-13710 (2002).</li><li>Senger, K., Harris, K., Levine, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GATA+factors+participate+in+tissue-specific+immune+responses+in+Drosophila+larvae.">GATA factors participate in tissue-specific immune responses in Drosophila larvae.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (43), 15957-15962 (2006).</li><li>Kenmoku, H., Hori, A., Kuraishi, T., Kurata, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mode+of+induction+of+the+humoral+innate+immune+response+in+Drosophila+larvae.">A novel mode of induction of the humoral innate immune response in Drosophila larvae.</a> Disease Models &amp; Mech.anisms. 10, 271-281 (2017).</li><li>Kenney, E., Hawdon, J. M., O'Halloran, D., Eleftherianos, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterorhabditis+bacteriophora+excreted-secreted+products+enable+infection+by+Photorhabdus+luminescens+through+suppression+of+the+Imd+pathway.">Heterorhabditis bacteriophora excreted-secreted products enable infection by Photorhabdus luminescens through suppression of the Imd pathway.</a> Frontiers in Immunology. 10, 2372 (2019).</li><li>Cherry, S., Silverman, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host-pathogen+interactions+in+Drosophila:+New+tricks+from+an+old+friend.">Host-pathogen interactions in Drosophila: New tricks from an old friend.</a> Nature Immunology. 7 (9), 911-917 (2006).</li><li>Younes, S., Al-Sulaiti, A., Nasser, E., Najjar, H., Kamareddine, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+as+a+model+organism+in+host-pathogen+interaction+studies.">Drosophila as a model organism in host-pathogen interaction studies.</a> Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 10, 214 (2020).</li><li>Kenney, E., Hawdon, J. M., O'Halloran, D. M., Eleftherianos, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secreted+virulence+factors+from+Heterorhabditis+bacteriophora+highlight+its+utility+as+a+model+parasite+among+Clade+V+nematodes.">Secreted virulence factors from Heterorhabditis bacteriophora highlight its utility as a model parasite among Clade V nematodes.</a> International Journal for Parasitology. 51 (5), 321-325 (2021).</li><li>Castillo, J. C., Reynolds, S. E., Eleftherianos, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+immune+responses+to+nematode+parasites.">Insect immune responses to nematode parasites.</a> Trends in Parasitology. 27 (12), 537-547 (2011).</li><li>Leit&#227;o, A. B., Bian, X., Day, J. P., Pitton, S., Demir, E., Jiggins, F. 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M., Link, N., Yamamoto, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+as+a+model+for+infectious+diseases.">Drosophila as a model for infectious diseases.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (5), 2724 (2017).</li><li>Lemaitre, B., Hoffmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+host+defense+of+Drosophila+melanogaster.">The host defense of Drosophila melanogaster.</a> Annual Reviews of Immunology. 25, 697-743 (2007).</li><li>Garriga, A., Mastore, M., Morton, A., Pino, F. G., Brivio, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+response+of+Drosophila+suzukii+larvae+to+infection+with+the+nematobacterial+complex+Steinernema+carpocapsae-Xenorhabdus+nematophila.">Immune response of Drosophila suzukii larvae to infection with the nematobacterial complex Steinernema carpocapsae-Xenorhabdus nematophila.</a> Insects. 11 (4), 210 (2020).</li><li>Trienens, M., Kraaijeveld, K., Wertheim, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defensive+repertoire+of+Drosophila+larvae+in+response+to+toxic+fungi.">Defensive repertoire of Drosophila larvae in response to toxic fungi.</a> Molecular Ecology. 26 (19), 5043-5057 (2017).</li><li>Tafesh-Edwards, G., Eleftherianos, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+immunity+against+natural+and+nonnatural+viral+pathogens.">Drosophila immunity against natural and nonnatural viral pathogens.</a> Virology. 540, 165-171 (2020).</li><li>Gold, K. 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J., Rezai, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localized+microinjection+of+intact+Drosophila+melanogaster+larva+to+investigate+the+effect+of+serotonin+on+heart+rate.">Localized microinjection of intact Drosophila melanogaster larva to investigate the effect of serotonin on heart rate.</a> Lab on a Chip. 20 (2), 343-355 (2020).</li><li>Flatt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life-history+evolution+and+the+genetics+of+fitness+components+in+Drosophila+melanogaster.">Life-history evolution and the genetics of fitness components in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 214 (1), 3-48 (2020).</li><li>Ciche, T. A., Sternberg, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postembryonic+RNAi+in+Heterorhabditis+bacteriophora:+a+nematode+insect+parasite+and+host+for+insect+pathogenic+symbionts.">Postembryonic RNAi in Heterorhabditis bacteriophora: a nematode insect parasite and host for insect pathogenic symbionts.</a> BMC Developmental Biology. 7, 101 (2007).</li><li>Joyce, S. A., Watson, R. J., Clarke, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+regulation+of+pathogenicity+and+mutualism+in+Photorhabdus.">The regulation of pathogenicity and mutualism in Photorhabdus.</a> Current Opinion in Microbiology. 9 (2), 127-132 (2006).</li><li>Yang, G., Waterfield, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+TcdB+and+TccC+subunits+in+secretion+of+the+Photorhabdus+Tcd+toxin+complex.">The role of TcdB and TccC subunits in secretion of the Photorhabdus Tcd toxin complex.</a> PLoS Pathogens. 9 (10), 1003644 (2013).</li><li>Shokal, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+co-occurring+Wolbachia+and+Spiroplasma+endosymbionts+on+the+Drosophila+immune+response+against+insect+pathogenic+and+non-pathogenic+bacteria.">Effects of co-occurring Wolbachia and Spiroplasma endosymbionts on the Drosophila immune response against insect pathogenic and non-pathogenic bacteria.</a> BMC Microbiology. 16, 16 (2016).</li><li>Tomoyasu, Y., Denell, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Larval+RNAi+in+Tribolium+(Coleoptera)+for+analyzing+adult+development.">Larval RNAi in Tribolium (Coleoptera) for analyzing adult development.</a> Development Genes and Evolution. 214 (11), 575-578 (2004).</li></ol>

Drosophila melanogaster gehört zu den wertvollsten, experimentell manipulierten Modellen, die zur Untersuchung der angeborenen Immunität und Pathogenese verschiedener mikrobieller Infektionen verwendet werden. Dies liegt an seinem einfachen und schnellen Lebenszyklus, der einfachen Wartung in einem Labor, der gut etablierten evolutionären Genetik und der vielfältigen genetischen Toolbox. Frühere Methoden der D. melanogaster-Larveninjektion, wie die Verwendung eines hybriden mikrofluidischen Geräts...

Drosophila melanogaster wird seit mehreren Jahrzehnten in der biologischen und biomedizinischen Forschung immens eingesetzt, da sich die ausgeklügelte Palette genetischer und molekularer Werkzeuge für die Analyse einer Vielzahl von Studien1,2,3,4 stetig weiterentwickelt hat. Die evolutionär konservierten Aspekte der Entwicklung, der Homöostase und der angeborenen Immunität bei D. melanogaster haben es zu einem wertvollen Modellorganismus für die Untersuchung verschiedener menschlicher und Insektenkrankheiten gemacht5,6. Insbesondere die grundlegende Rolle des D. melanogaster-Modells für die Untersuchung der Immunität wurde weitgehend in Studien mit erwachsenen Fliegen veranschaulicht. D. melanogaster Larvenstudien haben jedoch auch zum aktuellen Wissen beigetragen und hauptsächlich zelluläre Immunantworten untersucht, insbesondere für Wespen- und Nematodeninfektionen, die durch die Insektenkutikula auftreten7,8,9,10. Drosophila melanogaster Larven besitzen drei verschiedene Arten von Blutzellen, die zusammen Hämozyten genannt werden: Plasmatozyten, Kristallzellen und Lamellozyten11,12,13. Diese Zellen können eine Reihe von Immunantworten aufbauen, wenn D. melanogaster-Larven mit Krankheitserregern wie Bakterien, Pilzen, Viren und Parasiten infiziert sind14,15,16. Zu den zellulären Immunantworten gehören die direkte Verschlingung (Phagozytose) von kleinen Molekülen oder Bakterien, die Melanisierung, die Verkapselung größerer Krankheitserreger wie parasitoide Eier und die Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) und Stickstoffmonoxidsynthasen (NOS)17,18,19.
Im Gegensatz dazu wurden weniger Studien über die Verwendung des D. melanogaster-Larvenmodells zur Analyse humoraler Immunantworten veröffentlicht. Dies ist hauptsächlich auf die Anwendung von Fütterungsassays für die orale Infektion von D. melanogaster-Larven und mehrere Herausforderungen im Zusammenhang mit der Mikroinjektion von Larven zurückzuführen, einschließlich der präzisen Handhabung von Larven und der ordnungsgemäßen Verwendung der Mikronadel, insbesondere während der Penetration20,21. Daher haben das begrenzte Wissen über Larveninfektionen und technische Schwierigkeiten (d.h. hohe Mortalität) das Larvenmodell von D. melanogaster häufig schwierig gemacht. Ein Larvenmodell wird das Potenzial haben, neue molekulare Mechanismen zu identifizieren, die weitere Einblicke in Wirt-Pathogen-Interaktionen und die Induktion spezifischer angeborener Immunantworten des Wirts gegen pathogene Infektionen liefern werden.
Hier wird ein einfaches und effizientes Protokoll beschrieben, mit dem D. melanogaster-Larven verschiedene Krankheitserreger, wie z.B. Bakterien, injiziert werden können. Insbesondere D. melanogaster Larven werden für Injektionen mit dem humanpathogenen Photorhabdus asymbiotica und dem nicht-pathogenen Bakterium Escherichia coli verwendet. Diese Methode kann zur Manipulation und Analyse der Immunantwort von D. melanogaster auf verschiedene mikrobielle Infektionen eingesetzt werden.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>Fly Food B (Bloomington Recipe)</td>
			<td>LabExpress</td>
			<td>7001-NV</td>
			<td>Food B, in narrow vials, 100 vials/tray</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 x 15, Mono Petri Dishes Fully Stackable</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-342</td>
			<td>Diameter 100 x 15 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 x 15, Mono Petri dishes Fully Stackable</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25384-092</td>
			<td>Diameter 60 x 15 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass capillaries</td>
			<td>VWR</td>
			<td>53440-186</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grade 1 qualitative filter paper standard grade, circle</td>
			<td>VWR</td>
			<td>28450-150</td>
			<td>Diameter 150 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab culture Class II Type A2 Biosafety Safety Cabinet</td>
			<td>ESCO</td>
			<td>LA2-4A2-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Agar</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1425-500</td>
			<td>LB agar miller powder 500 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Broth</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1426-500</td>
			<td>LB broth miller powder 500 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil</td>
			<td>Alfa Aesar, Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>31911-A1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop 2000/2000c Spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>ND-2000C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoject III Programmable Nanoliter Injector</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>3-000-207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Narrow Drosophila Vials, Polystyrene</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>32-109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles, hypodermic</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-316</td>
			<td>22 G, 25 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Next Generation Micropipette Puller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>SU-P1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>VWR</td>
			<td>97062-732</td>
			<td>Buffer PBS tablets biotech grade 200tab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prism</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td>Version 8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes - plastic, disposable</td>
			<td>VWR</td>
			<td>76124-652</td>
			<td>20 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8154</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

drosophila melanogaster larva injection protocol

Die Verwendung unkonventioneller Modelle zur Untersuchung der angeborenen Immunität und der Virulenz von Krankheitserregern bietet eine wertvolle Alternative zu Säugetiermodellen, die kostspielig sein und ethische Fragen aufwerfen können. Unkonventionelle Modelle sind notorisch billig, einfach zu handhaben und zu kultivieren und nehmen nicht viel Platz in Anspruch. Sie sind genetisch zugänglich und besitzen vollständige Genomsequenzen, und ihre Verwendung wirft keine ethischen Überlegungen auf. Die Fruchtfliege Drosophila melanogaster zum Beispiel hat großartige Einblicke in eine Vielzahl von Verhaltens-, Entwicklungs-, Stoffwechsel- und Immunitätsforschungen gegeben. Genauer gesagt, D. melanogaster erwachsene Fliegen und Larven besitzen mehrere angeborene Abwehrreaktionen, die mit Wirbeltieren geteilt werden. Die Mechanismen, die Immunantworten regulieren, wurden hauptsächlich durch genetische und molekulare Studien im D. melanogaster-Modell aufgedeckt. Hier wird eine neuartige Larveninjektionstechnik bereitgestellt, die die Untersuchung angeborener Immunprozesse in D. melanogaster-Larven weiter vorantreiben und die Pathogenese einer Vielzahl von mikrobiellen Infektionen erforschen wird.

Bei richtiger Durchführung zeigen Injektionen von D. melanogaster-Larven eine bakteriumsspezifische Wirkung. Die Überlebensdaten wurden zu mehreren Zeitpunkten nach Infektionen mit P. asymbiotica (Stamm ATCC43943), E. coli (Stamm K12) und PBS (Abbildung 4) erhoben. Während D. melanogaster-Larven anfällig für P. asymbiotica sind, was das Überleben schnell beeinträchtigt, weisen Larven, denen E. coli- oder PBS-Kontrollen injiziert werden, ein...

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Drosophila melanogaster Larva Injection Protocol

Drosophila melanogaster erwachsene Fliegen wurden ausgiebig als Modellorganismen verwendet, um die molekularen Mechanismen zu untersuchen, die antimikrobiellen angeborenen Immunantworten des Wirts und mikrobiellen Infektionsstrategien zugrunde liegen. Um das Larvenstadium von D. melanogaster als zusätzliches oder alternatives Modellsystem zu fördern, wird eine Larveninjektionstechnik beschrieben.

Drosophila melanogaster Larven-Injektionsprotokoll

The use of unconventional models to study innate immunity and pathogen virulence provides a valuable alternative to mammalian models, which can be costly ...

Dieses Protokoll befasst sich mit den Schwierigkeiten und Herausforderungen bei der Mikroinjektion von Larven, indem es eine präzise Methode beschreibt, die die Verwendung der Drosophila melanogaster Larve als Modell für verschiedene Immun- und molekulare Studien ermöglicht. Dies ist eine einfache Injektionstechnik, die eine effiziente, kostengünstige und schnelle Methode darstellt, um eine Vielzahl von Substanzen wiederholt einheitlich zu verabreichen, was konsistente und zuverlässige Ergebnisse ermöglicht. Beginnen Sie mit der Auswahl der Larven im dritten Stadium und waschen Sie sie mit Ringers Lösung in einer kleinen Petrischale.Legen Sie ein Filterpapier in eine Petrischale und befeuchten Sie es mit 5 ml Ringer-Lösung. Legen Sie dann die Larven auf das Filterpapier. Bereiten Sie Kapillaren mit 3,5-Zoll-Glaskapillarröhrchen in einem Mikropipettenabzieher vor.Öffnen Sie die Glaskapillare mit Hilfe einer geraden gezackten Mittelpunktpinzette. Füllen Sie die offene Kapillare mit einer Einwegspritze aus Kunststoff mit Mineralöl. Dann schleudern Sie das Öl mit einem Nanoliter-Injektor aus dem Kapillarrohr.Füllen Sie die Kapillare mit dem gewünschten bakteriellen Präparat für die Injektion. Übertragen Sie die betäubten Larven auf ein Filterpapier, das mit Ringer-Lösung angefeuchtet ist. Üben Sie mit einer Pinzette festen Druck auf die dorsale Seite des hinteren Endes der Larven aus, wo die Trachealspirakel sichtbar sind.Führen Sie dann die Nadel horizontal in Richtung des hinteren Endes der Larven ein und injizieren Sie die Bakterienvorräte. Entfernen Sie die Pinzette, um das Verschütten von Hämolymphe oder Darm zu vermeiden. Ziehen Sie dann die zuvor in Larven eingeführte Nadel zurück.Infizieren Sie 20 Larven für jede experimentelle Bedingung. Übertragen Sie die injizierten Larven vorsichtig mit einem Pinsel auf ein separates feuchtes Filterpapier. Fügen Sie die Lösung von Ringer nach Bedarf hinzu, um eine Austrocknung zu verhindern.Inkubieren Sie die Petrischale in einem Inkubator bei 25 C.Drosophila melanogaster Larven, die mit Photorhabdus asymbiotica infiziert waren, zeigten 24 Stunden nach der Injektion eine Überlebensrate von 57%, während Larven, denen Escherichia coli injiziert wurde, gleichzeitig eine Überlebensrate von 85% aufwiesen. Die Bedeutung dieser Methode besteht darin, dass die Nadel ungefähr parallel zur Larve gehalten wird. Der Druck, der ausgeübt wird, um die Larve zu halten, ist sehr gering, was die Möglichkeit von Hämolymphleckage, tödlichen Verletzungen oder unzureichender Abgabe der gewünschten Substanz verringert.Diese Technik kann mit Übung perfektioniert werden.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

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Systemic Bacterial Infection and Immune Defense Phenotypes in Drosophila Melanogaster

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Extraction of Hemocytes from Drosophila melanogaster Larvae for Microbial Infection and Analysis

Extraktion von Hemocytes aus Drosophila Melanogaster Larven für mikrobielle Infektionen und Analyse

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Establishment of Viral Infection and Analysis of Host-Virus Interaction in Drosophila Melanogaster

Establishment of Viral Infection and Analysis of Host-Virus Interaction in Drosophila Melanogaster

Gründung der Virusinfektion und Analyse von Host-Virus-Wechselwirkung in Drosophila Melanogaster

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Induction of Mouse Lung Injury by Endotracheal Injection of Bleomycin

Induktion der Maus Lungenverletzung durch Endotracheal Injektion von Bleomycin

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