Name: measuring cell-edge protrusion dynamics during spreading using live-cell microscopy
Uploaded: 2021-11-01T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Cell-Edge Protrusion Dynamics during Spreading using Live-Cell Microscopy at JoVE.com

この研究は、NIH MH115939、NS112121、NS105640、R56MH122449-01A1(アンソニー・J・コレスケ宛)およびイスラエル科学財団(助成金番号1462/17および2142/21)(ハバ・ギル・ヘン宛)の助成金によって支援された。

このプロトコルに記載されているすべての方法は、バーイラン大学の機関動物ケアおよび使用委員会(IACUC)によって承認されています。
メモ: このセクションで説明する手順を段階的にグラフィカルに図 1 に示します。
1. 細胞培養
注:プロトコルで使用される細胞は、野生型C57BL/6マウスのE11.5-13.5?...

<ol>
	<li>Kurosaka, S., Kashina, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+biology+of+embryonic+migration.">Cell biology of embryonic migration.</a> Birth Defects Research Part C - Embryo Today: Reviews. 84 (2), 102-122 (2008).</li><li>Pollard, T. D., Borisy, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+motility+driven+by+assembly+and+disassembly+of+actin+filaments.">Cellular motility driven by assembly and disassembly of actin filaments.</a> Cell. 112 (4), 453-465 (2003).</li><li>Ponti, A., Machacek, M., Gupton, S. L., Waterman-Storer, C. M., Danuser, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+distinct+actin+networks+drive+the+protrusion+of+migrating+cells.">Two distinct actin networks drive the protrusion of migrating cells.</a> Science. 305 (5691), 1782-1786 (2004).</li><li>Chesarone, M. A., DuPage, A. G., Goode, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unleashing+formins+to+remodel+the+actin+and+microtubule+cytoskeletons.">Unleashing formins to remodel the actin and microtubule cytoskeletons.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 11 (1), 62-74 (2010).</li><li>Chesarone, M. A., Goode, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actin+nucleation+and+elongation+factors:+mechanisms+and+interplay.">Actin nucleation and elongation factors: mechanisms and interplay.</a> Current Opinion in Cell Biology. 21 (1), 28-37 (2009).</li><li>Lee, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Actin Cytoskeleton and the Regulation of Cell Migration. Colloquium series on building blocks of the cell: cell structure and function. , (2013).</li><li>Giannone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lamellipodial+actin+mechanically+links+myosin+activity+with+adhesion-site+formation.">Lamellipodial actin mechanically links myosin activity with adhesion-site formation.</a> Cell. 128 (3), 561-575 (2007).</li><li>Tojkander, S., Gateva, G., Lappalainen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actin+stress+fibers--assembly,+dynamics+and+biological+roles.">Actin stress fibers--assembly, dynamics and biological roles.</a> Journal of Cell Science. 125, 1855-1864 (2012).</li><li>Wilson, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+II+contributes+to+cell-scale+actin+network+treadmilling+through+network+disassembly.">Myosin II contributes to cell-scale actin network treadmilling through network disassembly.</a> Nature. 465 (7296), 373-377 (2010).</li><li>Chhabra, E. S., Higgs, H. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+many+faces+of+actin:+matching+assembly+factors+with+cellular+structures.">The many faces of actin: matching assembly factors with cellular structures.</a> Nature Cell Biology. 9 (10), 1110-1121 (2007).</li><li>Hinz, B., Alt, W., Johnen, C., Herzog, V., Kaiser, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+lamella+dynamics+of+cultured+cells+by+SACED,+a+new+computer-assisted+motion+analysis.">Quantifying lamella dynamics of cultured cells by SACED, a new computer-assisted motion analysis.</a> Experimental Cell Research. 251 (1), 234-243 (1999).</li><li>Bear, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antagonism+between+Ena/VASP+proteins+and+actin+filament+capping+regulates+fibroblast+motility.">Antagonism between Ena/VASP proteins and actin filament capping regulates fibroblast motility.</a> Cell. 109 (4), 509-521 (2002).</li><li>Doggett, T. M., Breslin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Study+of+the+actin+cytoskeleton+in+live+endothelial+cells+expressing+GFP-actin.">Study of the actin cytoskeleton in live endothelial cells expressing GFP-actin.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (57), e3187 (2011).</li><li>Miller, A. L., Wang, Y., Mooseker, M. S., Koleske, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Abl-related+gene+(Arg)+requires+its+F-actin-microtubule+cross-linking+activity+to+regulate+lamellipodial+dynamics+during+fibroblast+adhesion.">The Abl-related gene (Arg) requires its F-actin-microtubule cross-linking activity to regulate lamellipodial dynamics during fibroblast adhesion.</a> Journal of Cell Biology. 165 (3), 407-419 (2004).</li><li>Bryce, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortactin+promotes+cell+motility+by+enhancing+lamellipodial+persistence.">Cortactin promotes cell motility by enhancing lamellipodial persistence.</a> Current Biology. 15 (14), 1276-1285 (2005).</li><li>Lapetina, S., Mader, C. C., Machida, K., Mayer, B. J., Koleske, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arg+interacts+with+cortactin+to+promote+adhesion-dependent+cell+edge+protrusion.">Arg interacts with cortactin to promote adhesion-dependent cell edge protrusion.</a> Journal of Cell Biology. 185 (3), 503-519 (2009).</li><li>Miller, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+actin+polymerization+and+adhesion-dependent+cell+edge+protrusion+by+the+Abl-related+gene+(Arg)+tyrosine+kinase+and+N-WASp.">Regulation of actin polymerization and adhesion-dependent cell edge protrusion by the Abl-related gene (Arg) tyrosine kinase and N-WASp.</a> Biochemistry. 49 (10), 2227-2234 (2010).</li><li>Lukic, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyk2+regulates+cell-edge+protrusion+dynamics+by+interacting+with+Crk.">Pyk2 regulates cell-edge protrusion dynamics by interacting with Crk.</a> Molecular Biology of the Cell. , (2021).</li></ol>

突起、収縮、およびフリルからなる細胞端突起ダイナミクスは、細胞運動性の前提条件であり、潜在的な律速事象でもある。ここでは、拡散中の細胞エッジ突起のダイナミクスを測定するための迅速かつ簡単な方法について説明します。この方法は、短時間のイメージングを可能にし、大量のデータを生成し、細胞の蛍光標識や高価な蛍光顕微鏡装置を必要とせず、よりリソースのかかる方?...

細胞移動は、すべての生物の発達と機能を制御する重要なプロセスです。細胞遊走は、胚発生、創傷治癒、免疫応答などの生理学的状態と、癌転移および自己免疫疾患などの病理学的状態の両方で起こる。異なる遊走事象に関与する細胞型の違いにもかかわらず、すべての細胞運動性事象は、原生動物から哺乳動物への進化において保存されてきた類似の分子機構を共有し、環境を感知し、シグナルに応答し、応答における細胞挙動を調節することができる共通の細胞骨格制御機構を含む1。
細胞遊走の初期段階は、細胞の前縁における非常に動的な突起の形成であり得る。ラメリポジウムの背後には、アクチンをミオシンII媒介性収縮性に結合し、下層の基質への接着を媒介するラメラがある。ラメリポジアは、成長因子、サイトカイン、細胞接着受容体などの細胞外刺激によって誘導され、原形質膜を前方に押し出す物理的な力を提供するアクチン重合によって駆動されます2,3。多くのシグナル伝達および構造タンパク質がこれに関与している。その中にはRho GTPaseがあり、これは他のシグナルと協調して作用し、Arp 2/3複合体、WASPファミリータンパク質、およびラメリポディアのホルミンファミリーおよびスパイアファミリーのメンバーなどのアクチン調節タンパク質を活性化する2,4,5。
アクチン重合に加えて、ミオシンII活性は、ラメリポジウムおよび前層に収縮力を発生させるために必要とされる。細胞縁収縮としても定義されるこれらの収縮は、細胞末梢における樹状アクチンの解重合からも生じ得、層状前縁を発達させ、突起が細胞外マトリックスおよび他の細胞の柔軟性を感知し、遊走の方向を決定することを可能にするために重要である6,7,8.基材に付着できない細胞縁突起は、末梢膜フリル、層状および層状突起の腹面に現れ、遊走方向に対して後方に移動するシート状構造を形成する。ラメリポジウムが基板に付着しないと、後部ラメリポジウムがその下に形成され、機械的に第1のラメリポジウムを上腹面に向かって押し出す。以前は基質に平行であったフリルのアクチンフィラメントは、現在、基質に対して垂直になり、フリルは前進するラメリポジウムの上に配置されるようになった。後方に移動するフリルは細胞質ゾルに逆戻りし、層状体アクチンをリサイクルするための細胞機構を表しています9,10。
ここで、細胞縁突起ダイナミクスの測定のためのアッセイについて説明する。突出アッセイは、タイムラプスビデオ顕微鏡を使用して、細胞の拡散期中に単一細胞エッジ突起ダイナミクスを10分間測定します。突起ダイナミクスは、これらの映画からキモグラフを生成することによって解析される。原理的には、キモグラフは、移動粒子の詳細な定量データを時空間プロットで付与し、細胞エッジダイナミクスの定性的理解をもたらす。移動する粒子の強度は、時間対空間プロットのすべての画像スタックに対してプロットされ、X軸とY軸はそれぞれ時間と距離を表します11。ImageJによる手動キモグラフ解析により詳細な定量データを取得し、低信号対雑音比や高特徴密度の場合に動画や画像から情報を取得したり、位相コントラスト光顕微鏡で取得した画像や画質の悪さを解析したりすることができます。
本明細書に記載される細胞縁突起ダイナミクスアッセイは、迅速、単純、かつ費用対効果の高い方法である。このように、そして細胞遊走と直接相関することが示されているので11、12、より資源の要求の厳しい方法を実行することを決定する前に、細胞運動性に関与する細胞骨格ダイナミクスを試験するための予備的方法として使用することができる。さらに、細胞骨格タンパク質の遺伝子操作(ノックアウト、ノックダウン、またはレスキューコンストラクト)が細胞骨格ダイナミクスにどのように影響するかを、簡単なプラットフォームを使用して定量的に測定することもできます。このアッセイは、細胞遊走の文脈における細胞骨格ダイナミクスを探索するための有益なモデルであり、細胞運動性の根底にあるメカニズムおよび分子の解明に使用することができる。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10 cm cell culture plates</td>
			<td>Greiner</td>
			<td>P7612-360EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s modified Eagle medium (DMEM)</td>
			<td>Biological Industries, Israel</td>
			<td>01-055-1A</td>
			<td>Medium contains high glucose (4.5 g/L D-glucose)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s phosphate buffered saline (1xDPBS)</td>
			<td>Biological Industries, Israel</td>
			<td>02-023-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Biological Industries, Israel</td>
			<td>04-001-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibronectin from human plasma, liquid, 0.1%, suitable for cell culture</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F0895</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom dishes</td>
			<td>Cellvis</td>
			<td>D35-20-1.5-N</td>
			<td>35mm glass bottom dish, dish size 35 mm, well size 20mm, #1.5 cover glass (0.16-0.19 mm).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ software</td>
			<td>NIH</td>
			<td></td>
			<td>Feely available at: https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAS-AF Leica Application Suite 3.2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Microscope acquisition software equipped with an ORCA-Flash 4.0 V2 digital CMOS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica AF6000</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>Inverted bright field microscope (40x, NA 1.3 ) equipped with phase-contrast optics, an incubator, and CO2 unit with LAS AF acquisition software equipped with an ORCA-Flash 4.0 V2 digital CMOS camera .</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine solution</td>
			<td>Biological Industries, Israel</td>
			<td>03-020-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ORCA-Flash 4.0 V2 digital CMOS camera</td>
			<td>Hamamatsu Photonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin solution</td>
			<td>Biological Industries, Israel</td>
			<td>03-031-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA solution B (0.25%), EDTA (0.05%)</td>
			<td>Biological Industries, Israel</td>
			<td>03-052-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring cell-edge protrusion dynamics during spreading using live-cell microscopy

多細胞生物の発生と恒常性は、細胞移動の協調的な調節に依存している。細胞遊走は、組織の構築および再生において不可欠な事象であり、胚発生、免疫学的応答、および創傷治癒において重要である。細胞運動性の調節不全は、慢性炎症および癌転移などの病理学的障害に寄与する。細胞遊走、組織浸潤、軸索、および樹状突起伸長はすべて、アクチン重合媒介性細胞縁突起で開始される。ここでは、拡散中の細胞端突起ダイナミクスのイメージングおよび定量分析のための、シンプルで効率的で時間を節約する方法について説明する。この方法は、突起、収縮、フリルなどの細胞端膜ダイナミクスの離散的な特徴を測定し、主要なアクチン調節因子の操作が多様な文脈で細胞縁突起にどのように影響するかを評価するために使用することができる。

図2に記載の実験では、不死化MEFをフィブロネクチンでプレコートしたガラス底皿にメッキしてインテグリン媒介シグナル伝達を活性化し、変性BSAによってブロックし、インテグリン活性化に依存しない細胞接着の遊離電位部位を遮断した。実験当日に細胞の70%〜80%コンフルエントで対数増殖期に達するために、0.7 x 106 MEFsを実験の16時間前に直径10 cmの組織培養?...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Cell-Edge Protrusion Dynamics during Spreading using Live-Cell Microscopy at JoVE.com

Measuring Cell-Edge Protrusion Dynamics during Spreading using Live-Cell Microscopy

このプロトコルは、広がる細胞の端にある突起の動的パラメータ(突起、収縮、フリル)を測定することを目的としています。

生細胞顕微鏡による拡散時の細胞端突出ダイナミクスの測定

The development and homeostasis of multicellular organisms rely on coordinated regulation of cell migration. Cell migration is an essential event in the ...

細胞端突起アッセイは、細胞遊走と直接相関することが示されている。したがって、細胞運動性に関与する重要なタンパク質およびシグナル伝達機構を同定するための予備的方法として使用することができる。この方法は、高速、単純、費用対効果が高く、蛍光標識や高価な蛍光顕微鏡の使用を必要としません。手順を実演するのは、私の研究室の学生であるMichal Gendlerです。2ミリリットルの通常の塩酸溶液をガラス底皿の中央に追加し、室温で20分間インキュベートする。2ミリリットルのPBSで皿を3回洗う。フィブロネクチンをPBS中の1ミリリットル当たり10マイクログラムの濃度で希釈し、希釈溶液200マイクロリットルをガラスセンター皿に加える。摂氏37度で1時間インキュベートする。1%BSA溶液とPBSを調製し、0.2マイクロメートルのフィルターに通します。予め加温した水浴中で摂氏70度で30分間インキュベートすることによって溶液を変性させる。コーティングされたガラス底皿を2ミリリットルのPBSで3回洗う。変性BSA溶液2ミリリットルを加え、皿を摂氏37度で1時間インキュベートする。ガラス皿を2ミリリットルのPBSで3回洗う。組織培養プレートの直径10センチメートル当たり70万個の細胞で16〜18時間の実験前に、70〜80%のコンフルエントを達成した。翌日、2ミリリットルのトリプシン溶液を組織培養プレートに加え、細胞が剥離するまで2〜3分間インキュベートする。5ミリリットルの培地を加えてトリプシンを不活性化する。血球計を用いて、底部ディッシュ中の2ミリリットルの完全培地中の細胞およびプレート20,000細胞を計数する。次いで、播種した細胞と共にディッシュをインキュベーター内で15分間インキュベートする。加熱ユニットの電源を入れ、撮影の1時間前に37°Cに設定してください。また、二酸化炭素ユニットの電源を入れ、撮影の10分前に5%に設定してください。顕微鏡とカメラの電源を入れます。コンピュータの電源を入れ、顕微鏡取得ソフトウェアを開きます。40倍のドライレンズ位相コントラストで倍率を設定します。ムービーの合計再生時間を 10 分に、時間間隔を 5 秒に設定します。15分間のインキュベーションの後、細胞が接着したガラス底皿をアダプターに入れて固定する。ディッシュの入ったアダプターを顕微鏡ステージのスロットに挿入します。皿カバーを外し、二酸化炭素の蓋を置き、二酸化炭素バルブを開きます。イメージングに適したセルを見つけます。セルに焦点を合わせた後、動画の取得を開始します。画像解析を行うには、画像解析ソフトで直線ツールを選択し、ラメラやセルエッジなど、45度ごとに半径方向の配置で凸部に垂直な20単位の8本の線を作ります。メインツールバーで、画像に移動し、[スタック]を選択し、[再スライス]をクリックして、細胞膜内の単一点の動きを説明するキモグラフ画像を生成します。キモグラフ画像を使用して、グリッド線でマークされたセル内の8つの領域のそれぞれにおける突起、後退、およびフリルの数を抽出し、手動でカウントします。これらの数字は、10分あたりの突起、収縮、フリルの頻度を表します。キモグラフィ解析により突起の持続性、距離、速度を決定します。突起距離を求めるには、突起の基部から突起の最高峰まで垂線を引きます。M キーを押して線の長さをピクセル単位で測定し、ピクセル対マイクロメートルの比率が長さをマイクロメートル単位で変換することがわかっていることを確認します。突起、反応、およびフリルの定量は、10分ごとに手動で行われ、突起および引っ込みについて得られた平均頻度は、フリルについて5.1および2.1であった。代表的なキモグラフは、突出距離が約4.8マイクロメートル、突起時間が約0.6分であった。分析から除外する必要があるセルの例が表されます。キモグラフィ解析により、細胞はその拡散期に存在せず、明確な膜突起を示さなかったことが明らかになった。最も重要なことは、イメージングのために正しい細胞を選択することです。適切な細胞は、その拡散段階にあるべきであり、細胞間の通信およびシグナル伝達を避けるために他の細胞に触れてはならない。この方法は、細胞移動アッセイの要求の厳しいより多くの結果を実行することを決定する前に、細胞運動性を含む細胞骨格ダイナミクスを試験するための予備ツールとして使用することができる。

Research

JoVE Journal

Biology

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy (FSM)

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy FSM

蛍光を経由してF -アクチンダイナミクスの生細胞イメージングでは、顕微鏡のスペックル（FSM）

In this protocol we describe the use of Fluorescent Speckle Microscopy (FSM) to capture high-resolution images of actin dynamics in PtK1 cells. A unique ...

生物学

Live Cell Response to Mechanical Stimulation Studied by Integrated Optical and Atomic Force Microscopy

集積光と原子間力顕微鏡による研究機械的刺激に対する細胞応答を生きる

To understand the mechanism by which living cells sense mechanical forces, and how they respond and adapt to their environment, a new technology able to ...

Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

分裂酵母の定量的なライブセル蛍光-顕微鏡解析

Several microscopy techniques are available today that can detect a specific protein within the cell. During the last decade live cell imaging using ...

Live Cell Imaging of Primary Rat Neonatal Cardiomyocytes Following Adenoviral and Lentiviral Transduction Using Confocal Spinning Disk Microscopy

ディスク顕微鏡スピニング共焦点の使い方アデノウイルスやレンチウイルス形質導入後の初代ラット新生児心筋細胞の生細胞イメージング

Primary rat neonatal cardiomyocytes are useful in basic in vitro cardiovascular research because they can be easily isolated in large numbers in a single ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

の剛性を測定します<em&gt; ex vivoで</em原子間力顕微鏡を使用&gt;マウス大動脈

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

Live Cell Imaging and 3D Analysis of Angiotensin Receptor Type 1a Trafficking in Transfected Human Embryonic Kidney Cells Using Confocal Microscopy

共焦点顕微鏡を使用してトランスフェクトされたヒト胚性腎細胞におけるアンジオテンシン受容体1a型の人身売買のライブセルイメージングと3D解析

Live-cell imaging is used to simultaneously capture time-lapse images of angiotensin type 1a receptors (AT1aR) and intracellular compartments in ...

Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth

微生物細胞の成長に不可欠なプロセスを遵守する細胞蛍光顕微鏡をライブします。

Core cellular processes such as DNA replication and segregation, protein synthesis, cell wall biosynthesis, and cell division rely on the function of ...

Investigating the Detrimental Effects of Low Pressure Plasma Sterilization on the Survival of Bacillus subtilis Spores Using Live Cell Microscopy

Investigating the Detrimental Effects of Low Pressure Plasma Sterilization on the Survival of Bacillus subtilis Spores Using Live Cell Microscopy

有害な効果の低圧プラズマ滅菌を使用して住んでいる携帯顕微鏡枯草菌胞子の生存に調査

Plasma sterilization is a promising alternative to conventional sterilization methods for industrial, clinical, and spaceflight purposes. Low pressure ...

Protrusion Force Microscopy: A Method to Quantify Forces Developed by Cell Protrusions

突起力顕微鏡: 細胞突起が開発した力を定量化する方法

In numerous biological contexts, animal cells need to interact physically with their environment by developing mechanical forces. Among these, traction ...

Exploiting Live Imaging to Track Nuclei During Myoblast Differentiation and Fusion

筋芽細胞の分化と融合中にトラック核へライブ イメージングを利用しました。

Nuclear positioning within cells is important for multiple cellular processes in development and regeneration. The most intriguing example of nuclear ...