Nucleofection of Caspase BiFC Components into Human Monocyte-Derived Macrophages
4:41
Treatment of Transfected MDM and Caspase BiFC Data Acquisition
6:37
Results: Differentiation of CD14-Monocytes and Transfection of Human Monocyte-Derived Macrophages
8:12
Conclusion
Transcript
이 프로토콜은 특정 질병 상태의 살아있는 세포에서 분자 수준에서 염증성 카스파제 경로를 시각화하고 심문하는데 사용될 수 있기 때문에 중요하다. 이 기술의 주요 이점은 원발성 면역 세포에서 염증성 카스파제 활성화 복합체의 성분, 요건 및 국소화를 확인하는데 사용될 수 있다는 것이다. 사소한 최적화를 통해이 방법은 다른 일차 세포 및 올리고 머화에 의해 활성화 된 다양한 단백질에 적응할 수 있으며 그 적용 가능성은 현미경 방법론에 국한되지 않
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이 프로토콜은 인간 혈액 샘플로부터 단핵구 유래 대식세포 (MDM)를 얻는 워크 플로우, 세포 생존력과 행동을 손상시키지 않고 염증성 카스파제 BiFC (BiFC) 리포터를 인간 MDM에 효율적으로 도입하는 간단한 방법, 살아있는 세포에서 염증성 카스파제 활성화를 측정하기위한 이미징 기반 접근법을 설명합니다.