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•
10:08 min
December 21st, 2021
DOI :
10.3791/63177-v
Chapters
0:05
Introduction
0:56
Synthesis of Guide RNAs
2:03
Microinjection of CRISPR-Cas9 Cocktail into a One-Cell Zebrafish Embryo to Generate Maternal Crispants
3:07
Screening for Somatic INDELs in F0 Injected Embryos
4:54
Identification of Maternal-Effect Phenotypes in Maternal Crispant Embryos
6:21
Sequencing Alleles in Maternal Crispant Haploids
8:18
Results: Identification of Maternal Effect Phenotypes in a Rapid and Resource Efficient Manner
9:08
Conclusion
Transcript
発生初期における多くの母体発現遺伝子の役割は現在不明である。この母体CRISPR技術は、母性効果遺伝子および発生におけるそれらの役割の迅速な同定を可能にする。RNAを単一の遺伝子に導く多重化により、研究者は単一世代で新しい母性効果表現型を特定することができます。
この研究は、初期の胚発生に必要な配偶子のmRNA転写産物の機能を理解するのに有益です。この技術の鍵は、1細胞期の早い段階で胚をマイクロインジェクションし、注入された胚に体細胞変異を起こすことができるガイドRNAの大部分
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Summary
初期の開発は母性遺伝製品に依存しており、これらの製品の多くの役割は現在不明です。ここでは、CRISPR-Cas9を使用して、単一世代で母性効果表現型を特定するプロトコルについて説明しました。
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