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•
11:14 min
December 10th, 2021
DOI :
10.3791/63247-v
Chapters
0:04
Introduction
0:36
Cell Plating in Co‐Culture System
2:50
Wound Assay and Quantitative Assessment of Myoblast Migration
5:57
Immunofluorescence Staining and Imaging of Migrating Myoblasts
8:29
Results: Effects of Wnt5a and ROR2 Knockdown on Myoblast Migration and Morphology
10:28
Conclusion
Transcript
このプロトコルは、関心のある任意の細胞集団におけるパラクリン非標準的なWntシグナル伝達を機能的および分子的に評価するための再現性の高い方法を概説しています。機能評価および分子評価は同じ細胞集団で行われ、Wnt/PCP経路の任意の成分の研究に適用できます。まず、以前にペレット化したC2C12細胞を10ミリリットルのC2C12培地に再懸濁します。
細胞を1:20の比率で希釈するには、9.5ミリリットルの新鮮なC2C12培地を含む15ミリリットルのチューブに0.5ミリリットルの細胞
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Summary
本研究では、パラクリンの非標準的なWntシグナル伝達イベントを in vitroで 研究するための再現性が高く扱いやすい方法を概説しています。このプロトコルは、マウス神経堤細胞および筋芽細胞におけるパラクリンWnt5aシグナル伝達の影響を評価するために適用されました。
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