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•
09:41 min
December 28th, 2021
DOI :
10.3791/63271-v
Chapters
0:05
Introduction
1:13
Construction of GSK923295-Mediated Centromere Protein E (CENP-E) Inhibition Mouse Models
2:18
Hematoxylin-eosin (HE) Staining and Histopathology
3:57
Immunofluorescence and Confocal Microscopy
5:31
Flow Cytometry
7:04
Results: Analysis of Seminiferous Tubules and the Disruption of Spermatogenesis Post CENP-E Inhibition by GSK923295
8:59
Conclusion
Transcript
减数分裂是真核生物的进化保守事件,对配子发生和有性繁殖至关重要。我们的协议为减数分裂和精子发生研究提供了一种有效的方法。我们已经描述了一系列用于分析精子细胞的方案。
该技术可用于观察精子细胞中的减数分裂纺锤体、同源染色体和亚细胞器。该方法可用于减数分裂的分析、基因编辑动物模型的生成以及组织或器官中的基因转染。实验者在腹部手术期间应保持无菌环境,并注意该方案的温度,时间和关键实验条件。
演示该程序的将是我实验室的研究生徐孟菲小姐。通过将麻醉的小鼠四肢绑起来并将它们固定
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Summary
本文报道了通过腹部手术和睾丸注射GSK923295对CENP-E的 体内 抑制,这是男性减数分裂的宝贵模型。使用免疫荧光,流式细胞术和透射电子显微镜测定,我们发现CENP-E抑制导致小鼠精子细胞中的染色体错位和基因组不稳定。
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