Name: efficient and cost effective electroporation method to study primary cilium-dependent signaling pathways in the granule cell precursor
Uploaded: 2021-11-30T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor at JoVE.com

Denne undersøgelse blev støttet af HKBU Seed Fund og Tier-2 Start-up Grant (RG-SGT2/18-19/SCI/009), Research Grant Council-Collaborative Research Fund (CRF-C2103-20GF) til C.H.H. Hor.

Alle dyrerelaterede procedurer blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne for håndtering af dyr og protokollen godkendt af Sundhedsministeriet, Hongkong. Animal experiment licenser efter Animal (Control of Experiments) Ordinance (Cap. 340) blev opnået fra Department of Health, Hong Kong regering. Dyrearbejdet blev udført i overensstemmelse med den dyresikkerhedsetik, der blev godkendt af HKBU Research Office og Laboratory Safety Committee. Se materialetabellen for at få flere oplysninger o...

<ol>
	<li>Chang, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atoh1+controls+primary+cilia+formation+to+allow+for+SHH-triggered+granule+neuron+progenitor+proliferation.">Atoh1 controls primary cilia formation to allow for SHH-triggered granule neuron progenitor proliferation.</a> Developmental Cell. 48 (2), 184-199 (2019).</li><li>Dahmane, N., Ruizi Altaba, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+Hedgehog+regulates+the+growth+and+patterning+of+the+cerebellum.">Sonic Hedgehog regulates the growth and patterning of the cerebellum.</a> Development. 126 (14), 3089-3100 (1999).</li><li>Lewis, P. M., Gritti-Linde, A., Smeyne, R., Kottmann, A., Mcmahon, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+Hedgehog+signaling+is+required+for+expansion+of+granule+neuron+precursors+and+patterning+of+the+mouse+cerebellum.">Sonic Hedgehog signaling is required for expansion of granule neuron precursors and patterning of the mouse cerebellum.</a> Developmental Biology. 270 (2), 393-410 (2004).</li><li>Wechsler-Reya, R. J., Scott, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+neuronal+precursor+proliferation+in+the+cerebellum+by+Sonic+Hedgehog.">Control of neuronal precursor proliferation in the cerebellum by Sonic Hedgehog.</a> Neuron. 22 (1), 103-114 (1999).</li><li>Bangs, F., Anderson, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+cilia+and+mammalian+Hedgehog+signaling.">Primary cilia and mammalian Hedgehog signaling.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 9 (5), 028175 (2017).</li><li>Hor, C. H. H., Lo, J. C. W., Cham, A. L. S., Leung, W. Y., Goh, E. L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifaceted+functions+of+Rab23+on+primary+cilium-+and+Hedgehog+signaling-mediated+cerebellar+granule+cell+proliferation.">Multifaceted functions of Rab23 on primary cilium- and Hedgehog signaling-mediated cerebellar granule cell proliferation.</a> Journal of Neuroscience. 41 (32), 6850-6863 (2021).</li><li>Han, Y. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+and+opposing+roles+of+primary+cilia+in+medulloblastoma+development.">Dual and opposing roles of primary cilia in medulloblastoma development.</a> Nature Medicine. 15 (9), 1062-1065 (2009).</li><li>Spassky, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+cilia+are+required+for+cerebellar+development+and+Shh-dependent+expansion+of+progenitor+pool.">Primary cilia are required for cerebellar development and Shh-dependent expansion of progenitor pool.</a> Developmental Biology. 317 (1), 246-259 (2008).</li><li>Wang, T., Larcher, L., Ma, L., Veedu, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+screening+of+commonly+used+commercial+transfection+reagents+towards+efficient+transfection+of+single-stranded+oligonucleotides.">Systematic screening of commonly used commercial transfection reagents towards efficient transfection of single-stranded oligonucleotides.</a> Molecules. 23 (10), 2564 (2018).</li><li>Chicaybam, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+electroporation+protocol+for+the+genetic+modification+of+mammalian+cells.">An efficient electroporation protocol for the genetic modification of mammalian cells.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 4, 99 (2017).</li><li>Lee, H. Y., Greene, L. A., Mason, C. A., Chiara Manzini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+post-natal+mouse+cerebellar+granule+neuron+progenitor+cells+and+neurons.">Isolation and culture of post-natal mouse cerebellar granule neuron progenitor cells and neurons.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (23), e990 (2009).</li><li>Mizoguchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+cerebellar+development+in+mice+overexpressing+VGF.">Impaired cerebellar development in mice overexpressing VGF.</a> Neurochemical Research. 44 (2), 374-387 (2019).</li><li>Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confocal+imaging+of+nerve+cells.">Confocal imaging of nerve cells.</a> Current Laboratory Methods in Neuroscience Research. , 235-247 (2014).</li><li>Corbit, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertebrate+Smoothened+functions+at+the+primary+cilium.">Vertebrate Smoothened functions at the primary cilium.</a> Nature. 437 (7061), 1018-1021 (2005).</li></ol>

Transfection af transgener i primær GCP kultur ved elektroporation metode er typisk forbundet med lav celle levedygtighed og dårlig transfection effektivitet9,10. Dette papir introducerer en omkostningseffektiv og reproducerbar elektroporering protokol, der har vist høj effektivitet og levedygtighed. Derudover demonstrerer vi også en enkel metode til at studere den primære ciliumafhængige Hh-signalvej i primære GCP-celler.
Andre...

Cerebellar praktiserende læger er meget udbredt til at studere maskiner af Hh signalering vej i neuronal stamfader celle-typer på grund af deres høje overflod og høj følsomhed over for Hh signalering vej i vivo1,2,3,4. I praktiserende læger fungerer det primære cilium som et afgørende Hh-signaltransduktionshub5, der orkestrerer spredningen af forstadiecellerne6,7,8. In vitro visualisering af Hh signalering komponenter på den primære cilium er ofte udfordrende på grund af deres lave endogene basale niveauer. Derfor er transgene modifikation af proteinekspressionsniveauer og fluorophoremærkning af det interessegen nyttige tilgange til at studere vejen ved molekylær opløsning. Men genmanipulation af GCP primære kulturer ved hjælp af liposom-baserede transfection tilgange ofte resultere i lav transfection effektivitet, hindrer yderligere molekylære undersøgelser9. Elektroporation øger effektiviteten, men kræver normalt ublu leverandørspecifikke og celletypebegrænsede elektroporeringsreagenser10.
Dette papir introducerer en højeffektiv og omkostningseffektiv elektroporeringsmetode til at manipulere Hh-signalvejskomponenterne i GCP-primære kulturer. Ved hjælp af denne modificerede elektroporeringsprotokol blev et grønt fluorescerende protein (GFP)-mærket Glattet transgen (pEGFP-Smo) effektivt leveret til GCPs og opnåede høj celleoverlevelse og transfekturerate (80-90%). Desuden viste de transfekterede praktiserende læger, som det fremgår af den immunocytokemiske farvning, høj følsomhed over for udglattet agonistisk induceret aktivering af Hh-signalvejen ved at smugle EGFP-Smo til den primære cilier. Denne protokol skal være direkte anvendelig og gavnlig for forsøg, der involverer in vitro genetisk modifikation af celletyper, der er vanskelige at transfekte, såsom primære cellekulturer for mennesker og gnavere samt menneskeskabte pluripotente stamceller.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>GCP Culture</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 supplement</td>
			<td>Life Technologies LTD</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer, 70 &#181;m</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I from bovine pancreas</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Earle&#8217;s Balanced Salt Solution</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>14155063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS, qualified</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>SH30028.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutamMAXTM-I ,100x</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>35050061</td>
			<td>L-glutamine substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-cysteine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C7352</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>354277</td>
			<td>Basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Papain,suspension</td>
			<td>Worthington Biochemical Corporation</td>
			<td>LS003126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-D-lysine Hydrobromide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SAG</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>11914-1</td>
			<td>Smoothened agonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IF staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>X100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary antibody mix</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-GFP-goat ab</td>
			<td>Rockland</td>
			<td>600-101-215</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Arl13b mouse monoclonal ab</td>
			<td>NeuroMab</td>
			<td>75-287</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Pax6 rabbit polyclonal ab</td>
			<td>Covance</td>
			<td>PRB-278P</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary antibody mix</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 donkey anti-goat IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11055</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 donkey anti-mouse IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31570</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 donkey anti-rabbit IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31573</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>62247</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CU 500 cuvette chamber</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>CU500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EPA Electroporation cuvette (2 mm gap)</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>EC-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Life Technologies LTD</td>
			<td>31985070</td>
			<td>reduced-serum medium for transfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pEGFP-mSmo</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>25395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super Electroporator NEPA21 TYPE II In Vitro and In Vivo Electroporation</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>NEPA21</td>
			<td>electroporator</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

efficient and cost effective electroporation method to study primary cilium-dependent signaling pathways in the granule cell precursor

Den primære cilium er en kritisk signalering organelle findes på næsten hver celle, transduces Hedgehog (Hh) signalering stimuli fra celleoverfladen. I granulecelleprækursoren (GCP) fungerer det primære cilium som et centralt signalcenter, der orkestrerer forløbercellespredning ved at modulere Hh-signalvejen. Undersøgelsen af primære cilium-afhængige Hh signalering maskiner lettes ved in vitro genetisk manipulation af stien komponenter til at visualisere deres dynamiske lokalisering til den primære cilium. Imidlertid er transfection af transgener i de primære kulturer af praktiserende læger ved hjælp af de aktuelt kendte elektroporeringsmetoder generelt dyrt og resulterer ofte i lav celle levedygtighed og uønsket transfection effektivitet. Dette papir introducerer en effektiv, omkostningseffektiv og enkel elektroporeringsprotokol, der demonstrerer en høj transfection effektivitet på ~ 80-90% og optimal celle levedygtighed. Dette er en enkel, reproducerbar og effektiv genetisk modifikationsmetode, der gælder for studiet af den primære ciliumafhængige pindsvinsignaleringsvej i primære GCP-kulturer.

Ved hjælp af Opti-MEM (se materialetabellen) som det universelle reagens kan denne foreslåede elektroporeringsmetode opnå en konstant høj elektroporationseffektivitet ved ~80-90% (figur 1). Elektroporationseffektiviteten af Smo-EGFP-vektoren blev bestemt ved DIV 2 post elektroporation ved kvantificering af procentdelen af grønne fluorescenspositive celler i alle parrede boxprotein-6 (Pax6)-udtrykkende GCP-celler. Elektroporationseffektiviteten for DMSO- og SAG-behandled...

Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor at JoVE.com

Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor

Her præsenterer vi en reproducerbar in vitro elektroporering protokol for genetisk manipulation af primære cerebellar granulat celle prækursorer (GCPs), der er omkostningseffektiv, effektiv og levedygtig. Desuden viser denne protokol også en enkel metode til molekylær undersøgelse af primære ciliumafhængige pindsvinssignaleringsveje i primære GCP-celler.

Effektiv og omkostningseffektiv elektroporeringsmetode til undersøgelse af primære ciliumafhængige signalveje i granulecelleprækursoren

The primary cilium is a critical signaling organelle found on nearly every cell that transduces Hedgehog (Hh) signaling stimuli from the cell surface. In ...

Denne protokol viser en enkel in vitro genetisk modifikationsmetode til molekylær undersøgelse af den primære ciliumafhængige signalvej i de primære granulecelleprækursorkulturer. På grund af omkostningerne, lav levedygtighed og dårlig effektivitet af den nuværende transfektionsmetode introducerer vi en enkel, omkostningseffektiv og effektiv elektroporeringsteknik til undersøgelse af ciliumafhængig signalvej i primære GCP-kulturer. Til at begynde med tilsættes 0,5 milliliter kulturmedium i hver brønd af den 24-brønds kulturplade, der indeholder coatede dækslips, og hold den varm ved 37 grader Celsius i en kuldioxidinkubator.Pipette det nødvendige antal celler i et sterilt 1,5 milliliter mikrocentrifugerør og spinde ved 200x G i fem minutter ved stuetemperatur. Kassér supernatanten, og brug cellepillen i 200 mikroliter opti-MEM. Gentag denne procedure to gange for at sikre, at der ikke er noget resterende kulturmedium i røret.Angiv parametrene for elektroporation som angivet. Pipette elektroporation reaktion forsigtigt at blande godt, og bruge en lang P200 pipette spids til at overføre et nøjagtigt volumen på 100 mikroliter af blandingen i to-millimeter hul cuvette. Når cuvette er inde i cuvettekammeret, skal du trykke på elektroporatorens omega-knap og notere impedansværdien ved at holde sig til et præcist volumen på 100 mikroliter.Intervallet for impedansværdi skal være ca. 30 og 35. Tryk på startknappen for at starte pulsen. Registrer de målte aktuelle værdier i Joules, der vises på læserammen.Fjern cuvette fra kammeret. Tilsæt straks 100 mikroliter af forvarmet kulturmedium i cuvette og ophæng det igen ved at pipetter op og ned to til tre gange. Overfør straks celleaffjedringen til den 24-brønds plade, der tidligere er forberedt.Inkuber cellerne ved 37 grader Celsius i en kuldioxid inkubator. Overhold cellerne under fluorescensmikroskopet den følgende dag. I denne undersøgelse forekom elektroporationseffektiviteten af DMSO- og SAG-behandlede grupper sammenlignelig.Immunstaining af den primære ciliummarkør Arl13b viser, at Ciliationshastigheden af GCP ved div-2 af kulturen i både køretøjs- og SAG-behandlede grupper. Ciliationshastigheden illustrerer procentdelen af Pax6, der udtrykker praktiserende læger, der bærer et primært cilium på celleoverfladen ved div-2 post-elektroporation. Figuren viser en betydelig stigning i udglattet EGFP lokalisering på den primære cilium axoneme af Pax6 udtryk GCP celler på 24 timer efter SAG behandling, hvilket indikerer en dyb aktivering af den primære cilium-afhængige pindsvin signalering vej.For at opnå en højere elektroporeringseffektivitet bør man sikre høj renhed af den anvendte plasmid, og der findes ingen restkulturmedier i plasmid elektroporationsblandingen. Denne protokol bør være direkte anvendelig og gavnlig for in vitro genetiske modifikationsforsøg på primære kulturer og celletyper, der er vanskelige at transfekte, herunder neuroner og menneskeskabte pluripotente stamceller.

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Cell Biology

Neuroscience

Unit 1

Alternative Signaling Routes in Gene Expression

SCIENTISTS IN ACTION

Design and Construction of a Cost Effective Headstage for Simultaneous Neural Stimulation and Recording in the Water Maze

Headstage preamplifiers and source followers are commonly used to study neural activity in behavioral neurophysiology experiments. Available commercial ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

The ability to manipulate gene expression is the cornerstone of modern day experimental embryology, leading to the elucidation of multiple developmental ...

Genetic Manipulation of the Mouse Developing Hypothalamus through In utero Electroporation

Genetic Manipulation of the Mouse Developing Hypothalamus through In utero Electroporation

Genetisk Manipulation af musen Udvikling Hypothalamus gennem<em&gt; In Utero</em&gt; Elektroporering

Genetic  modification of specific regions of the developing mammalian brain is a very  powerful experimental approach. However, generating novel mouse ...

Sex Stratified Neuronal Cultures to Study Ischemic Cell Death Pathways

Sex Opdelt neuronkulturer at studere Iskæmisk celledødsveje

Sex differences in neuronal susceptibility to ischemic injury and neurodegenerative disease have long been observed, but the signaling mechanisms ...

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Genetisk manipulation af Cerebellær granuleneuroner<em&gt; In Vitro</em&gt; Og<em&gt; In Vivo</em&gt; At studere Neuronal morfologi og Migration

Developmental events in the brain including neuronal morphogenesis and migration are highly orchestrated processes. In vitro and in vivo analyses allow ...

FIM Imaging and FIMtrack: Two New Tools Allowing High-throughput and Cost Effective Locomotion Analysis

FIM Imaging og FIMtrack: To nye redskaber, der giver High-throughput og omkostningseffektiv Locomotion Analysis

The analysis of neuronal network function requires a reliable measurement of behavioral traits. Since the behavior of freely moving animals is variable to ...

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Vurdering Primær Neurogenese i<em&gt; Xenopus</em&gt; Embryoner Brug Immunfarvning

Primary neurogenesis is a dynamic and complex process during embryonic development that sets up the initial layout of the central nervous system. During ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In vivo genoverførsel til Schwann-celler i Rodent iskiasnerven ved elektroporering

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

In Utero Electroporation Approaches to Study the Excitability of Neuronal Subpopulations and Single-cell Connectivity

In Utero Electroporation Approaches to Study the Excitability of Neuronal Subpopulations and Single-cell Connectivity

I Utero Elektroporation Approaches to Undersøgelse ophidselse af neuronale subpopulationer og Single-celle Connectivity

The nervous system is composed of an enormous range of distinct neuronal types. These neuronal subpopulations are characterized by, among other features, ...