Name: efficient and cost effective electroporation method to study primary cilium-dependent signaling pathways in the granule cell precursor
Uploaded: 2021-11-30T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor at JoVE.com

Denne studien ble støttet av HKBU Seed Fund og Tier-2 Start-up Grant (RG-SGT2/18-19/SCI/009), Research Grant Council-Collaborative Research Fund (CRF-C2103-20GF) til C.H.H. Hor.

Alle dyrerelaterte prosedyrer ble utført i samsvar med retningslinjer for dyrehåndtering og protokollen godkjent av Department of Health, Hong Kong. Dyreforsøkslisenser etter Animal (Control of Experiments) Ordinance (Cap. 340) ble hentet fra Department of Health, Hong Kong Government. Dyrearbeidet ble utført i samsvar med dyresikkerhetsetikken godkjent av HKBU Forskningskontor og Laboratoriets sikkerhetskomité. Se materialfortegnelsen hvis du vil ha mer informasjon om alle materialer som brukes i ...

<ol>
	<li>Chang, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atoh1+controls+primary+cilia+formation+to+allow+for+SHH-triggered+granule+neuron+progenitor+proliferation.">Atoh1 controls primary cilia formation to allow for SHH-triggered granule neuron progenitor proliferation.</a> Developmental Cell. 48 (2), 184-199 (2019).</li><li>Dahmane, N., Ruizi Altaba, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+Hedgehog+regulates+the+growth+and+patterning+of+the+cerebellum.">Sonic Hedgehog regulates the growth and patterning of the cerebellum.</a> Development. 126 (14), 3089-3100 (1999).</li><li>Lewis, P. M., Gritti-Linde, A., Smeyne, R., Kottmann, A., Mcmahon, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+Hedgehog+signaling+is+required+for+expansion+of+granule+neuron+precursors+and+patterning+of+the+mouse+cerebellum.">Sonic Hedgehog signaling is required for expansion of granule neuron precursors and patterning of the mouse cerebellum.</a> Developmental Biology. 270 (2), 393-410 (2004).</li><li>Wechsler-Reya, R. J., Scott, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+neuronal+precursor+proliferation+in+the+cerebellum+by+Sonic+Hedgehog.">Control of neuronal precursor proliferation in the cerebellum by Sonic Hedgehog.</a> Neuron. 22 (1), 103-114 (1999).</li><li>Bangs, F., Anderson, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+cilia+and+mammalian+Hedgehog+signaling.">Primary cilia and mammalian Hedgehog signaling.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 9 (5), 028175 (2017).</li><li>Hor, C. H. H., Lo, J. C. W., Cham, A. L. S., Leung, W. Y., Goh, E. L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifaceted+functions+of+Rab23+on+primary+cilium-+and+Hedgehog+signaling-mediated+cerebellar+granule+cell+proliferation.">Multifaceted functions of Rab23 on primary cilium- and Hedgehog signaling-mediated cerebellar granule cell proliferation.</a> Journal of Neuroscience. 41 (32), 6850-6863 (2021).</li><li>Han, Y. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+and+opposing+roles+of+primary+cilia+in+medulloblastoma+development.">Dual and opposing roles of primary cilia in medulloblastoma development.</a> Nature Medicine. 15 (9), 1062-1065 (2009).</li><li>Spassky, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+cilia+are+required+for+cerebellar+development+and+Shh-dependent+expansion+of+progenitor+pool.">Primary cilia are required for cerebellar development and Shh-dependent expansion of progenitor pool.</a> Developmental Biology. 317 (1), 246-259 (2008).</li><li>Wang, T., Larcher, L., Ma, L., Veedu, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+screening+of+commonly+used+commercial+transfection+reagents+towards+efficient+transfection+of+single-stranded+oligonucleotides.">Systematic screening of commonly used commercial transfection reagents towards efficient transfection of single-stranded oligonucleotides.</a> Molecules. 23 (10), 2564 (2018).</li><li>Chicaybam, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+electroporation+protocol+for+the+genetic+modification+of+mammalian+cells.">An efficient electroporation protocol for the genetic modification of mammalian cells.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 4, 99 (2017).</li><li>Lee, H. Y., Greene, L. A., Mason, C. A., Chiara Manzini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+post-natal+mouse+cerebellar+granule+neuron+progenitor+cells+and+neurons.">Isolation and culture of post-natal mouse cerebellar granule neuron progenitor cells and neurons.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (23), e990 (2009).</li><li>Mizoguchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+cerebellar+development+in+mice+overexpressing+VGF.">Impaired cerebellar development in mice overexpressing VGF.</a> Neurochemical Research. 44 (2), 374-387 (2019).</li><li>Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confocal+imaging+of+nerve+cells.">Confocal imaging of nerve cells.</a> Current Laboratory Methods in Neuroscience Research. , 235-247 (2014).</li><li>Corbit, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertebrate+Smoothened+functions+at+the+primary+cilium.">Vertebrate Smoothened functions at the primary cilium.</a> Nature. 437 (7061), 1018-1021 (2005).</li></ol>

Transfeksjon av transgenes i primær GCP-kultur ved elektroporasjonsmetode er vanligvis forbundet med lav celle levedyktighet og dårlig transfeksjonseffektivitet9,10. Dette dokumentet introduserer en kostnadseffektiv og reproduserbar elektroporasjonsprotokoll som har vist høy effektivitet og levedyktighet. I tillegg viser vi også en enkel metode for å studere den primære ciliumavhengige Hh-signalveien i primære GCP-celler.
Andre ...

Cerebellar GCPs er mye brukt til å studere maskineriet til Hh-signalveien i nevronale stamcelletyper på grunn av deres høye overflod og høye følsomhet for Hh-signalveien i vivo1,2,3,4. I fastleger fungerer det primære ciliumet som et sentralt Hh-signaltransduksjonssenter5 som orkestrerer spredningen av forløpercellene6,7,8. In vitro visualisering av Hh-signalkomponenter på det primære ciliumet er ofte utfordrende på grunn av deres lave endogene basale nivåer. Derfor er transgene modifikasjon av proteinuttrykksnivåer og fluoroformerking av genet av interesse nyttige tilnærminger for å studere banen ved molekylær oppløsning. Imidlertid resulterer genetisk manipulering av GCP primærkulturer ved hjelp av liposombaserte transfeksjonsmetoder ofte i lav transfeksjonseffektivitet, noe som hindrer ytterligere molekylære undersøkelser9. Elektroporasjon øker effektiviteten, men krever vanligvis ublu leverandørspesifikke og celletypebegrensede elektroporasjonsreagenser10.
Dette dokumentet introduserer en høyeffektiv og kostnadseffektiv elektroporasjonsmetode for å manipulere Hh-signalveikomponentene i GCP primære kulturer. Ved hjelp av denne modifiserte elektroporasjonsprotokollen ble et grønt fluorescerende protein (GFP)-merket Smoothened transgene (pEGFP-Smo) effektivt levert til GCPer og oppnådde høy celleoverlevelse og transfeksjonshastigheter (80-90%). Videre, som det fremgår av immunocytokjemisk farging, viste de transfekterte fastlegene høy følsomhet for glattet agonistindusert aktivering av Hh-signalveien ved å smugle EGFP-Smo til det primære cilia. Denne protokollen skal være direkte anvendelig og gunstig for eksperimenter som involverer in vitro genetisk modifikasjon av celletyper som er vanskelige å transfektere, for eksempel menneskelige og gnagere primærcellekulturer, samt menneskeskapte pluripotente stamceller.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>GCP Culture</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 supplement</td>
			<td>Life Technologies LTD</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer, 70 &#181;m</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I from bovine pancreas</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Earle&#8217;s Balanced Salt Solution</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>14155063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS, qualified</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>SH30028.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutamMAXTM-I ,100x</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>35050061</td>
			<td>L-glutamine substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-cysteine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C7352</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>354277</td>
			<td>Basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Papain,suspension</td>
			<td>Worthington Biochemical Corporation</td>
			<td>LS003126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-D-lysine Hydrobromide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SAG</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>11914-1</td>
			<td>Smoothened agonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IF staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>X100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary antibody mix</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-GFP-goat ab</td>
			<td>Rockland</td>
			<td>600-101-215</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Arl13b mouse monoclonal ab</td>
			<td>NeuroMab</td>
			<td>75-287</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Pax6 rabbit polyclonal ab</td>
			<td>Covance</td>
			<td>PRB-278P</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary antibody mix</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 donkey anti-goat IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11055</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 donkey anti-mouse IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31570</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 donkey anti-rabbit IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31573</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>62247</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CU 500 cuvette chamber</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>CU500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EPA Electroporation cuvette (2 mm gap)</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>EC-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Life Technologies LTD</td>
			<td>31985070</td>
			<td>reduced-serum medium for transfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pEGFP-mSmo</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>25395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super Electroporator NEPA21 TYPE II In Vitro and In Vivo Electroporation</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>NEPA21</td>
			<td>electroporator</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

efficient and cost effective electroporation method to study primary cilium-dependent signaling pathways in the granule cell precursor

Det primære ciliumet er en kritisk signalorganell som finnes på nesten alle celler som transduserer pinnsvin (Hh) som signaliserer stimuli fra celleoverflaten. I granulatcellens forløper (GCP) fungerer det primære ciliumet som et pivotalt signalsenter som orkestrerer forløpercelleproliferasjon ved å modulere Hh-signalveien. Undersøkelsen av primære cilium-avhengige Hh-signalmaskiner forenkles ved in vitro genetisk manipulering av banekomponentene for å visualisere deres dynamiske lokalisering til det primære ciliumet. Imidlertid er transfeksjon av transgenes i primærkulturene til fastleger ved hjelp av de kjente elektroporasjonsmetodene generelt kostbart og resulterer ofte i lav celle levedyktighet og uønsket transfeksjonseffektivitet. Dette dokumentet introduserer en effektiv, kostnadseffektiv og enkel elektroporasjonsprotokoll som demonstrerer en høy transfeksjonseffektivitet på ~ 80-90% og optimal celle levedyktighet. Dette er en enkel, reproduserbar og effektiv genetisk modifikasjonsmetode som gjelder for studiet av den primære ciliumavhengige Hedgehog-signalveien i primære GCP-kulturer.

Ved hjelp av Opti-MEM (se materialtabellen) som universalreagens, kan denne foreslåtte elektroporasjonsmetoden oppnå konsekvent høy elektroporasjonseffektivitet på ~ 80-90% (figur 1). Elektroporasjonseffektiviteten til Smo-EGFP-vektoren ble bestemt ved DIV 2 postelektroporasjon ved kvantifisering av prosentandelen grønne fluorescenspositive celler i alle parede boksprotein-6 (Pax6)-uttrykkende GCP-celler. Elektroporasjonseffektiviteten til DMSO- og SAG-behandlede gruppe...

Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor at JoVE.com

Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor

Her presenterer vi en reproduserbar in vitro-elektroporasjonsprotokoll for genetisk manipulering av primære cerebellar granulatcelleforløpere (GCPer) som er kostnadseffektive, effektive og levedyktige. Videre demonstrerer denne protokollen også en enkel metode for molekylær studie av primære ciliumavhengige Hedgehog-signalveier i primære GCP-celler.

Effektiv og kostnadseffektiv elektroporasjonsmetode for å studere primære ciliumavhengige signalveier i granulcelleforløperen

The primary cilium is a critical signaling organelle found on nearly every cell that transduces Hedgehog (Hh) signaling stimuli from the cell surface. In ...

Denne protokollen viser en enkel in vitro genetisk modifikasjonsmetode for molekylær studie av den primære ciliumavhengige signalveien i de primære granulcelleforløperkulturene. På grunn av kostnadene, lav levedyktighet og dårlig effektivitet av den nåværende transfeksjonsmetoden introduserer vi en enkel, kostnadseffektiv og effektiv elektroporasjonsteknikk for å undersøke ciliumavhengig signalvei i primære GCP-kulturer. Til å begynne med, legg til 0,5 milliliter kulturmedium i hver brønn av den 24-brønns kulturplaten som inneholder belagte dekselslipper, og hold den varm ved 37 grader Celsius i en karbondioksidinkubator.Pipette det nødvendige antall celler inn i et sterilt mikrosenter på 1,5 milliliter og spinn ved 200x G i fem minutter ved romtemperatur. Kast supernatanten og resuspender cellepelleten i 200 mikroliter Opti-MEM. Gjenta denne prosedyren to ganger for å sikre at det ikke er noe gjenværende kulturmedium i røret.Angi parametrene for elektroporasjon som oppført. Pipette elektroporasjonsreaksjonen forsiktig for å blande godt, og bruk en lang P200 pipettespiss for å overføre et nøyaktig volum på 100 mikroliter av blandingen inn i den to millimeter store gapkauvette. Når cuvette er inne i cuvettekammeret, trykker du på omega-knappen på elektroporatoren og noterer impedansverdien ved å følge et presist volum på 100 mikroliter.Området for impedansverdi bør være ca. 30 og 35. Trykk på startknappen for å starte pulsen. Registrer de målte gjeldende verdiene i Joules som vises på leserammen.Fjern cuvette fra kammeret. Tilsett umiddelbart 100 mikroliter forhåndsvarmet kulturmedium i cuvette og resuspendert det ved å pipettere opp og ned to til tre ganger. Overfør umiddelbart cellefjæringen til 24-brønnsplaten som tidligere er klargjort.Inkuber cellene ved 37 grader Celsius i en karbondioksidinkubator. Vær oppmerksom på cellene under fluorescensmikroskopet neste dag. I den nåværende studien virket elektroporasjonseffektiviteten til DMSO- og SAG-behandlede grupper sammenlignbar.Immunstaining av den primære ciliummarkøren Arl13b viser at ciliasjonshastigheten til GCP ved div-2 av kulturen i både kjøretøyet og SAG-behandlede grupper. Ciliasjonshastigheten illustrerer prosentandelen av Pax6 som uttrykker GCPer som bærer et primært cilium på celleoverflaten ved div-2 post-elektroporasjon. Figuren viser en betydelig økning i utjevnet EGFP lokalisering på den primære cilium axoneme av Pax6 uttrykk GCP celler på 24 timer etter SAG behandling, noe som indikerer en dyp aktivering av den primære cilium-avhengige pinnsvin signalveien.For å oppnå en høyere elektroporasjonseffektivitet, bør man sikre høy renhet av plasmidet som brukes, og ingen rester kulturmedier er til stede i den plasmide elektroporasjonsblandingen. Denne protokollen bør være direkte anvendelig og gunstig for in vitro genetiske modifikasjonseksperimenter på primærkulturer og celletyper som er vanskelige å transfektere, inkludert nevroner og menneskeskapte pluripotente stamceller.

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Cell Biology

Neuroscience

Unit 1

Alternative Signaling Routes in Gene Expression

SCIENTISTS IN ACTION

Design and Construction of a Cost Effective Headstage for Simultaneous Neural Stimulation and Recording in the Water Maze

Headstage preamplifiers and source followers are commonly used to study neural activity in behavioral neurophysiology experiments. Available commercial ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

The ability to manipulate gene expression is the cornerstone of modern day experimental embryology, leading to the elucidation of multiple developmental ...

Genetic Manipulation of the Mouse Developing Hypothalamus through In utero Electroporation

Genetic Manipulation of the Mouse Developing Hypothalamus through In utero Electroporation

Genetisk manipulering av musen Utvikling Hypothalamus gjennom<em&gt; I utero</em&gt; Electroporation

Genetic  modification of specific regions of the developing mammalian brain is a very  powerful experimental approach. However, generating novel mouse ...

Sex Stratified Neuronal Cultures to Study Ischemic Cell Death Pathways

Sex differences in neuronal susceptibility to ischemic injury and neurodegenerative disease have long been observed, but the signaling mechanisms ...

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Genetisk manipulering av Lillehjernen Granule Neuroner<em&gt; In Vitro</em&gt; Og<em&gt; I Vivo</em&gt; Å studere nevrale morfologi og migrasjon

Developmental events in the brain including neuronal morphogenesis and migration are highly orchestrated processes. In vitro and in vivo analyses allow ...

FIM Imaging and FIMtrack: Two New Tools Allowing High-throughput and Cost Effective Locomotion Analysis

FIM Imaging og FIMtrack: To nye verktøy som tillater Høy gjennomstrømming og kostnadseffektiv Locomotion Analysis

The analysis of neuronal network function requires a reliable measurement of behavioral traits. Since the behavior of freely moving animals is variable to ...

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Vurdere Primær Neurogenesis i<em&gt; Xenopus</em&gt; Embryoet Bruke Farging

Primary neurogenesis is a dynamic and complex process during embryonic development that sets up the initial layout of the central nervous system. During ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In vivo genoverføring til Schwann celler i gnagere isjiasnerven ved Electroporation

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

In Utero Electroporation Approaches to Study the Excitability of Neuronal Subpopulations and Single-cell Connectivity

In Utero Electroporation Approaches to Study the Excitability of Neuronal Subpopulations and Single-cell Connectivity

I Utero Electroporation Tilnærminger til Studer Excitability av neuronal subpopulasjoner og Single-celle Tilkobling

The nervous system is composed of an enormous range of distinct neuronal types. These neuronal subpopulations are characterized by, among other features, ...