Name: efficient and cost effective electroporation method to study primary cilium-dependent signaling pathways in the granule cell precursor
Uploaded: 2021-11-30T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor at JoVE.com

Denna studie stöddes av HKBU Seed Fund och Tier-2 Start-up Grant (RG-SGT2/18-19/SCI/009), Research Grant Council-Collaborative Research Fund (CRF-C2103-20GF) till C.H.H. Hor.

Alla djurrelaterade förfaranden utfördes i enlighet med riktlinjerna för djurhantering och det protokoll som godkänts av hälsodepartementet i Hongkong. Djurexperimentlicenser efter Animal (Control of Experiments) Ordinance (Cap. 340) erhölls från Department of Health, Hong Kong Government. Djurarbetet utfördes i enlighet med den djursäkerhetsetik som godkänts av HKBU Research Office och Laboratory Safety Committee. Mer information om allt material som används i det här protokollet finns i tabellen me...

<ol>
	<li>Chang, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atoh1+controls+primary+cilia+formation+to+allow+for+SHH-triggered+granule+neuron+progenitor+proliferation.">Atoh1 controls primary cilia formation to allow for SHH-triggered granule neuron progenitor proliferation.</a> Developmental Cell. 48 (2), 184-199 (2019).</li><li>Dahmane, N., Ruizi Altaba, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+Hedgehog+regulates+the+growth+and+patterning+of+the+cerebellum.">Sonic Hedgehog regulates the growth and patterning of the cerebellum.</a> Development. 126 (14), 3089-3100 (1999).</li><li>Lewis, P. M., Gritti-Linde, A., Smeyne, R., Kottmann, A., Mcmahon, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+Hedgehog+signaling+is+required+for+expansion+of+granule+neuron+precursors+and+patterning+of+the+mouse+cerebellum.">Sonic Hedgehog signaling is required for expansion of granule neuron precursors and patterning of the mouse cerebellum.</a> Developmental Biology. 270 (2), 393-410 (2004).</li><li>Wechsler-Reya, R. J., Scott, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+neuronal+precursor+proliferation+in+the+cerebellum+by+Sonic+Hedgehog.">Control of neuronal precursor proliferation in the cerebellum by Sonic Hedgehog.</a> Neuron. 22 (1), 103-114 (1999).</li><li>Bangs, F., Anderson, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+cilia+and+mammalian+Hedgehog+signaling.">Primary cilia and mammalian Hedgehog signaling.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 9 (5), 028175 (2017).</li><li>Hor, C. H. H., Lo, J. C. W., Cham, A. L. S., Leung, W. Y., Goh, E. L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifaceted+functions+of+Rab23+on+primary+cilium-+and+Hedgehog+signaling-mediated+cerebellar+granule+cell+proliferation.">Multifaceted functions of Rab23 on primary cilium- and Hedgehog signaling-mediated cerebellar granule cell proliferation.</a> Journal of Neuroscience. 41 (32), 6850-6863 (2021).</li><li>Han, Y. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+and+opposing+roles+of+primary+cilia+in+medulloblastoma+development.">Dual and opposing roles of primary cilia in medulloblastoma development.</a> Nature Medicine. 15 (9), 1062-1065 (2009).</li><li>Spassky, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+cilia+are+required+for+cerebellar+development+and+Shh-dependent+expansion+of+progenitor+pool.">Primary cilia are required for cerebellar development and Shh-dependent expansion of progenitor pool.</a> Developmental Biology. 317 (1), 246-259 (2008).</li><li>Wang, T., Larcher, L., Ma, L., Veedu, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+screening+of+commonly+used+commercial+transfection+reagents+towards+efficient+transfection+of+single-stranded+oligonucleotides.">Systematic screening of commonly used commercial transfection reagents towards efficient transfection of single-stranded oligonucleotides.</a> Molecules. 23 (10), 2564 (2018).</li><li>Chicaybam, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+electroporation+protocol+for+the+genetic+modification+of+mammalian+cells.">An efficient electroporation protocol for the genetic modification of mammalian cells.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 4, 99 (2017).</li><li>Lee, H. Y., Greene, L. A., Mason, C. A., Chiara Manzini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+post-natal+mouse+cerebellar+granule+neuron+progenitor+cells+and+neurons.">Isolation and culture of post-natal mouse cerebellar granule neuron progenitor cells and neurons.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (23), e990 (2009).</li><li>Mizoguchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+cerebellar+development+in+mice+overexpressing+VGF.">Impaired cerebellar development in mice overexpressing VGF.</a> Neurochemical Research. 44 (2), 374-387 (2019).</li><li>Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confocal+imaging+of+nerve+cells.">Confocal imaging of nerve cells.</a> Current Laboratory Methods in Neuroscience Research. , 235-247 (2014).</li><li>Corbit, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vertebrate+Smoothened+functions+at+the+primary+cilium.">Vertebrate Smoothened functions at the primary cilium.</a> Nature. 437 (7061), 1018-1021 (2005).</li></ol>

Transfection av transgenes i primär GCP-kultur genom elektroporationsmetod är vanligtvis associerad med låg cellviabilitet och dålig transfektion effektivitet9,10. Detta dokument introducerar ett kostnadseffektivt och reproducerbart elektroporationsprotokoll som har visat hög effektivitet och livskraft. Dessutom visar vi också en enkel metod för att studera den primära cilium-beroende Hh signalvägen i primära GCP celler.
Andr...

Cerebellar GCPs används ofta för att studera maskiner i Hh-signalvägen i neuronala stamceller på grund av deras höga överflöd och höga känslighet för Hh-signalvägen in vivo1,2,3,4. I GCPs fungerar det primära ciliumet som ett pivotalT Hh-signaltransduktionsnav5 som orkestrerar spridningen av prekursorcellerna6,7,8. In vitro visualisering av Hh signalering komponenter på det primära cilium är ofta utmanande på grund av deras låga endogena basala nivåer. Därför är transgene modifiering av protein uttryck nivåer och fluorophore taggning av genen av intresse användbara metoder för att studera vägen vid molekylär upplösning. Genetisk manipulation av GCP primära kulturer med liposom-baserade transfection metoder resulterar dock ofta i låg transfection effektivitet, hindrar ytterligare molekylära undersökningar9. Elektroporation ökar effektiviteten men kräver ofta orimliga leverantörsspecifika och celltypsbegränsade elektroporationsreagenser10.
Detta dokument introducerar en högeffektiv och kostnadseffektiv elektroporationsmetod för att manipulera Hh-signalvägskomponenterna i GCP-primärkulturer. Med hjälp av detta modifierade elektroporationsprotokoll levererades ett grönt fluorescerande protein (GFP)-märkt Smoothened transgene (pEGFP-Smo) effektivt till GCPs och uppnådde hög cellöverlevnad och transfektion (80-90%). Dessutom, vilket framgår av den immunocytochemical färgning, visade de transfected GCPs hög känslighet för utjämnade agonist-inducerad aktivering av Hh signalvägen genom handel EGFP-Smo till de primära cilierna. Detta protokoll ska vara direkt tillämpligt och fördelaktigt för experiment som inbegriper genetisk modifiering in vitro av celltyper som är svåra att transfektera, såsom primära cellkulturer för människor och gnagare, samt humaninducerade pluripotenta stamceller.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>GCP Culture</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 supplement</td>
			<td>Life Technologies LTD</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer, 70 &#181;m</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I from bovine pancreas</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Earle&#8217;s Balanced Salt Solution</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>14155063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS, qualified</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>SH30028.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutamMAXTM-I ,100x</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>35050061</td>
			<td>L-glutamine substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-cysteine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C7352</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>354277</td>
			<td>Basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>Gibco, Life Technologies</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Papain,suspension</td>
			<td>Worthington Biochemical Corporation</td>
			<td>LS003126</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-D-lysine Hydrobromide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SAG</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>11914-1</td>
			<td>Smoothened agonist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IF staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>X100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary antibody mix</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-GFP-goat ab</td>
			<td>Rockland</td>
			<td>600-101-215</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Arl13b mouse monoclonal ab</td>
			<td>NeuroMab</td>
			<td>75-287</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Pax6 rabbit polyclonal ab</td>
			<td>Covance</td>
			<td>PRB-278P</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary antibody mix</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 donkey anti-goat IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11055</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 donkey anti-mouse IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31570</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 donkey anti-rabbit IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-31573</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>62247</td>
			<td>Dilution Factor: 1 : 1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CU 500 cuvette chamber</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>CU500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EPA Electroporation cuvette (2 mm gap)</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>EC-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Life Technologies LTD</td>
			<td>31985070</td>
			<td>reduced-serum medium for transfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pEGFP-mSmo</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>25395</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super Electroporator NEPA21 TYPE II In Vitro and In Vivo Electroporation</td>
			<td>Nepagene</td>
			<td>NEPA21</td>
			<td>electroporator</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

efficient and cost effective electroporation method to study primary cilium-dependent signaling pathways in the granule cell precursor

Det primära ciliumet är en kritisk signalerande organell som finns på nästan varje cell som omvandlar igelkott (Hh) signalerar stimuli från cellytan. I granulatcellprekursoren (GCP) fungerar det primära ciliumet som ett pivotalt signalcenter som orkestrerar prekursorcellproliferation genom att modulera Hh-signalvägen. Undersökningen av primära cilium-beroende Hh signalering maskiner underlättas av in vitro genetisk manipulation av utbildningsavsnittet komponenter att visualisera deras dynamiska lokalisering till det primära cilium. Transfection av transgenes i de primära kulturerna av GCPs med hjälp av de för närvarande kända elektroporationsmetoderna är dock i allmänhet kostsamt och resulterar ofta i låg cell livskraft och oönskad transfektion effektivitet. Detta dokument introducerar ett effektivt, kostnadseffektivt och enkelt elektroporationsprotokoll som visar en hög transfekteringseffektivitet på ~ 80-90% och optimal cellviabilitet. Detta är en enkel, reproducerbar och effektiv genetisk modifieringsmetod som är tillämplig på studien av den primära ciliumberoende Hedgehog-signalvägen i primära GCP-kulturer.

Med Opti-MEM (se tabellen över material) som universell reagens kan denna föreslagna elektroporationsmetod uppnå genomgående hög elektroporationseffektivitet vid ~80-90% (figur 1). Elektroporation effektivitet av Smo-EGFP vektorn fastställdes vid DIV 2 post elektroporation genom kvantifiering av andelen gröna fluorescenspositiva celler i alla parade box protein-6 (Pax6)-uttrycka GCP celler. Elektroporationseffektiviteten hos DMSO- och SAG-behandlade grupper föreföll...

Watch this Scientific Journal Video about Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor at JoVE.com

Efficient and Cost Effective Electroporation Method to Study Primary Cilium-Dependent Signaling Pathways in the Granule Cell Precursor

Här presenterar vi ett reproducerbart in vitro elektroporation protokoll för genetisk manipulation av primära cerebellar granulat cell prekursorer (GCPs) som är kostnadseffektiva, effektiva och livskraftiga. Dessutom visar detta protokoll också en enkel metod för molekylär studie av primära cilium-beroende Hedgehog signalering vägar i primära GCP celler.

Effektiv och kostnadseffektiv elektroporationsmetod för att studera primära ciliumberoende signalvägar i granulatcellprekursoren

The primary cilium is a critical signaling organelle found on nearly every cell that transduces Hedgehog (Hh) signaling stimuli from the cell surface. In ...

Detta protokoll visar en enkel in vitro genetisk modifiering metod för molekylär studie av primära cilium-beroende signalering utbildningsavsnittet i primära granulat cell föregångare kulturer. På grund av kostnaden, låg livskraft och dålig effektivitet i den nuvarande transfekteringsmetoden introducerar vi en enkel, kostnadseffektiv och effektiv elektroporationsteknik för att undersöka ciliumberoende signalväg i primära GCP-kulturer. Till att börja med tillsätt 0,5 milliliter odlingsmedium i varje brunn på 24-brunnsodlingsplattan som innehåller belagda täcksläp och håll den varm vid 37 grader Celsius i en koldioxidinkubator.Pipettera det önskade antalet celler i ett sterilt 1,5-milliliter mikrocentrifugerör och snurra vid 200x G i fem minuter vid rumstemperatur. Kassera supernatanten och återanvänd cellpelleten i 200 mikroliter Opti-MEM. Upprepa proceduren två gånger för att säkerställa att det inte finns något restkulturmedium i röret.Ställ in parametrarna för elektroporation enligt listan. Pipettera elektroporationsreaktionen försiktigt för att blanda väl och använd en lång P200 pipettespets för att överföra en exakt volym på 100 mikroliter av blandningen till två millimeters mellanrums cuvette. När cuvettet är inne i cuvettekammaren, tryck på elektroporatorns omega-knapp och notera impedansvärdet genom att hålla sig till en exakt volym på 100 mikroliter.Impedansvärdet bör vara cirka 30 och 35. Tryck på startknappen för att initiera pulsen. Registrera uppmätta aktuella värden i Joules som visas på läsramen.Ta bort cuvettet från kammaren. Tillsätt omedelbart 100 mikroliter förvärmt odlingsmedium i cuvettet och återanvänd det genom pipettering upp och ner två till tre gånger. Överför omedelbart cellfjädringen till den 24-väl plattan som tidigare förberetts.Inkubera cellerna vid 37 grader Celsius i en koldioxidinkubator. Observera cellerna under fluorescensmikroskopet följande dag. I den aktuella studien föreföll elektroporationseffektiviteten hos DMSO- och SAG-behandlade grupper jämförbar.Immunostaining av den primära ciliummarkören Arl13b visar att ciliteringshastigheten för GCP vid div-2 av odling i både fordonet och SAG-behandlade grupper. Ciliation hastighet illustrerar andelen Pax6 uttrycker GCPs bär ett primärt cilium på cellytan vid div-2 post-electroporation. Figuren visar en betydande ökning av utjämnad EGFP lokalisering på den primära cilium axoneme av Pax6 uttryck GCP celler vid 24 timmar efter SAG behandling, vilket indikerar en djupgående aktivering av den primära cilium-beroende igelkott signalvägen.För att uppnå en högre elektroporationseffektivitet bör man säkerställa hög renhet hos den använda plasmiden, och det finns inga restkulturmedier i plasmidelektroporationsblandningen. Detta protokoll bör vara direkt tillämpligt och fördelaktigt för in vitro genetiska modifieringsexperiment på primära kulturer och celltyper som är svåra att transfektera, inklusive nervceller och humaninducerade pluripotenta stamceller.

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Cell Biology

Neuroscience

Unit 1

Alternative Signaling Routes in Gene Expression

SCIENTISTS IN ACTION

Design and Construction of a Cost Effective Headstage for Simultaneous Neural Stimulation and Recording in the Water Maze

Design och konstruktion av en kostnadseffektiv Headstage för samtidig nervstimulering och inspelning i Water Maze

Headstage preamplifiers and source followers are commonly used to study neural activity in behavioral neurophysiology experiments. Available commercial ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell imaging av sensoriska celler orgel Precursor i intakt Drosophila Puppor

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

Efficient Gene Delivery into Multiple CNS Territories Using In Utero Electroporation

Effektiv Gene Delivery i flera CNS territorierna Använda I Utero Elektroporation

The ability to manipulate gene expression is the cornerstone of modern day experimental embryology, leading to the elucidation of multiple developmental ...

Genetic Manipulation of the Mouse Developing Hypothalamus through In utero Electroporation

Genetic Manipulation of the Mouse Developing Hypothalamus through In utero Electroporation

Genmanipulation av Mouse Utveckla Hypothalamus genom<em&gt; In utero</em&gt; Elektroporering

Genetic  modification of specific regions of the developing mammalian brain is a very  powerful experimental approach. However, generating novel mouse ...

Sex Stratified Neuronal Cultures to Study Ischemic Cell Death Pathways

Sex differences in neuronal susceptibility to ischemic injury and neurodegenerative disease have long been observed, but the signaling mechanisms ...

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Genetic Manipulation of Cerebellar Granule Neurons In Vitro and In Vivo to Study Neuronal Morphology and Migration

Genetic Manipulation av Cerebellar granulneuroner<em&gt; In Vitro</em&gt; Och<em&gt; In Vivo</em&gt; Att studera neuronal morfologi och migration

Developmental events in the brain including neuronal morphogenesis and migration are highly orchestrated processes. In vitro and in vivo analyses allow ...

FIM Imaging and FIMtrack: Two New Tools Allowing High-throughput and Cost Effective Locomotion Analysis

FIM Imaging och FIMtrack: Två nya verktyg som gör hög kapacitet och kostnadseffektiv Locomotion Analys

The analysis of neuronal network function requires a reliable measurement of behavioral traits. Since the behavior of freely moving animals is variable to ...

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Bedöma Primär Neurogenesis in<em&gt; Xenopus</em&gt; Embryon Använda Immunofärgning

Primary neurogenesis is a dynamic and complex process during embryonic development that sets up the initial layout of the central nervous system. During ...

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

In Vivo Gene Transfer to Schwann Cells in the Rodent Sciatic Nerve by Electroporation

Genöverföring in vivo till Schwann-celler i gnagare ischiasnerven genom elektroporering

The formation of the myelin sheath by Schwann cells (SCs) is essential for rapid conduction of nerve impulses along axons in the peripheral nervous ...

In Utero Electroporation Approaches to Study the Excitability of Neuronal Subpopulations and Single-cell Connectivity

In Utero Electroporation Approaches to Study the Excitability of Neuronal Subpopulations and Single-cell Connectivity

I livmodern elektroporering Approaches att studera retbarhet av neuronala Subpopulationer och encelliga Connectivity

The nervous system is composed of an enormous range of distinct neuronal types. These neuronal subpopulations are characterized by, among other features, ...