Name: generation of hook ischemia-reperfusion model using a three-day developing chick embryo
Uploaded: 2022-02-19T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Hook Ischemia-Reperfusion Model using a Three-Day Developing Chick Embryo at JoVE.com

ونود أن نعرب عن امتناننا لهاري شانكار على إسهاماته الهامة أثناء التصوير والتحرير، والسيد باقر حسين على الصوت، والسيد أصغر رضوي على تحرير الفيديو، والسيد محمد حيدر لتصوير الفيديو، والسيد محمد دانمركي صديقي للمساعدة خلال التجارب.

أصدرت اللجنة المؤسسية الأخلاقية الحيوانية في كلية ومستشفى لوكناو الطبية في إيرا تنازلا مكتوبا ينص على أنه لم تكن هناك حاجة إلى موافقة رسمية لإجراء هذه التجارب وفقا للجنة لغرض مراقبة والإشراف على التجارب على الحيوانات (CPCSEA). ومع ذلك، تم اتباع إجراءات التشغيل القياسية لتقليل أي احتمال للضا...

<ol>
	<li>Fauzia, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chick+Embryo:+A+Preclinical+Model+for+Understanding+Ischemia-Reperfusion+Mechanism.">Chick Embryo: A Preclinical Model for Understanding Ischemia-Reperfusion Mechanism.</a> Frontiers in Pharmacology. 21 (9), 1034 (2018).</li><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia+and+reperfusion--from+mechanism+to+translation.">Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation.</a> Nature Medicine. 17 (11), 1391-1401 (2011).</li><li>Raza, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effect+of+naringenin+is+mediated+through+suppression+of+NF-&#954;B+signaling+pathway+in+experimental+stroke.">Neuroprotective effect of naringenin is mediated through suppression of NF-&#954;B signaling pathway in experimental stroke.</a> Neuroscience. 29 (230), 157-171 (2013).</li><li>Raza, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hesperidin+ameliorates+functional+and+histological+outcome+and+reduces+neuroinflammation+in+experimental+stroke.">Hesperidin ameliorates functional and histological outcome and reduces neuroinflammation in experimental stroke.</a> Brain Research. 28 (1420), 93-105 (2011).</li><li>Raza, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silymarin+protects+neurons+from+oxidative+stress+associated+damages+in+focal+cerebral+ischemia:+a+behavioral,+biochemical+and+immunohistological+study+in+Wistar+rats.">Silymarin protects neurons from oxidative stress associated damages in focal cerebral ischemia: a behavioral, biochemical and immunohistological study in Wistar rats.</a> Journal of the Neurological Sciences. 15 (1-2), 45-54 (2011).</li><li>Fan, L., Zhou, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AG490+protects+cerebral+ischemia/reperfusion+injury+via+inhibiting+the+JAK2/3+signaling+pathway.">AG490 protects cerebral ischemia/reperfusion injury via inhibiting the JAK2/3 signaling pathway.</a> Brain and Behavior. 11 (1), 01911 (2021).</li><li>Wu, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Mechanistic+Concepts+in+Ischemia+and+Reperfusion+Injury.">Current Mechanistic Concepts in Ischemia and Reperfusion Injury.</a> Cellular Physiology and Biochemistry. 46 (4), 1650-1667 (2018).</li><li>Collard, C. D., Gelman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology,+clinical+manifestations,+and+prevention+of+ischemia-reperfusion+injury.">Pathophysiology, clinical manifestations, and prevention of ischemia-reperfusion injury.</a> Anesthesiology. 94 (6), 1133-1138 (2001).</li><li>Allen, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+lines+as+in+vitro+models+for+drug+screening+and+toxicity+studies.">Cell lines as in vitro models for drug screening and toxicity studies.</a> Drug Development and Industrial Pharmacy. 31 (8), 757-768 (2005).</li><li>Schmeer, C., Gamez, A., Tausch, S., Witte, O. W., Isenmann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statins+modulate+heat+shock+protein+expression+and+enhance+retinal+ganglion+cell+survival+after+transient+retinal+ischemia/reperfusion+in+vivo.">Statins modulate heat shock protein expression and enhance retinal ganglion cell survival after transient retinal ischemia/reperfusion in vivo.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 49 (11), 4971-4981 (2008).</li><li>Huang, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+and+meta-analysis+of+acupuncture+for+improving+learning+and+memory+ability+in+animals.">A systematic review and meta-analysis of acupuncture for improving learning and memory ability in animals.</a> BMC Complementary and Alternative Medicine. 16 (1), 297 (2016).</li><li>Sommer, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+stroke:+Experimental+models+and+reality.">Ischemic stroke: Experimental models and reality.</a> Acta Neuropathologica. 133 (2), 245-261 (2017).</li><li>Yang, W., Chen, J., Meng, Y., Chen, Z., Yang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+targets+for+treating+ischemia-reperfusion+injury+in+the+liver.">Novel targets for treating ischemia-reperfusion injury in the liver.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (5), 1302 (2018).</li><li>Seabra, R., Bhogal, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+research+using+early+life+stage+models.">In vivo research using early life stage models.</a> In Vivo. 24 (4), 457-462 (2010).</li><li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+peptide+alleviates+oxidative+stress+and+NLRP3+inflammasome+activation+after+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+by+regulating+AMPK/GSK-3beta.">Adiponectin peptide alleviates oxidative stress and NLRP3 inflammasome activation after cerebral ischemia-reperfusion injury by regulating AMPK/GSK-3beta.</a> Experiments in Neurology. 329, 113302 (2020).</li><li>Aboutaleb, N., Jamali, H., Abolhasani, M., Pazoki Toroudi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lavender+oil+(Lavandula+angustifolia)+attenuates+renal+ischemia/reperfusion+injury+in+rats+through+suppression+of+inflammation,+oxidative+stress+and+apoptosis.">Lavender oil (Lavandula angustifolia) attenuates renal ischemia/reperfusion injury in rats through suppression of inflammation, oxidative stress and apoptosis.</a> Biomedicine and Pharmacotherapy. 110, 9-19 (2019).</li><li>Wallert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=alpha-Tocopherol+preserves+cardiac+function+by+reducing+oxidative+stress+and+inflammation+in+ischemia/reperfusion+injury.">alpha-Tocopherol preserves cardiac function by reducing oxidative stress and inflammation in ischemia/reperfusion injury.</a> Redox Biology. 26, 101292 (2019).</li><li>Ashafaq, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catechin+hydrate+ameliorates+redox+imbalance+and+limits+inflammatory+response+in+focal+cerebral+ischemia.">Catechin hydrate ameliorates redox imbalance and limits inflammatory response in focal cerebral ischemia.</a> Neurochemical Research. 37 (8), 1747-1760 (2012).</li><li>Gallagher, S., Chakavarti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoblot+analysis.">Immunoblot analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. 20 (16), 759 (2008).</li><li>Abt, M. A., Grek, C. L., Ghatnekar, G. S., Yeh, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+lung+metastasis+in+mouse+mammary+tumor+models+by+quantitative+real-time+PCR.">Evaluation of lung metastasis in mouse mammary tumor models by quantitative real-time PCR.</a> Journal of Visualized Experiments. (107), e53329 (2016).</li><li>Lee, P. Y., Costumbrado, J., Hsu, C. Y., Kim, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agarose+gel+electrophoresis+for+the+separation+of+DNA+fragments.">Agarose gel electrophoresis for the separation of DNA fragments.</a> Journal of Visualized Experiments. (62), e3923 (2012).</li><li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cathelicidin+aggravates+myocardial+ischemia/reperfusion+injury+via+activating+TLR4+signaling+and+P2X(7)R/NLRP3+inflammasome.">Cathelicidin aggravates myocardial ischemia/reperfusion injury via activating TLR4 signaling and P2X(7)R/NLRP3 inflammasome.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 139, 75 (2020).</li><li>Franke, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+NLRP3+inflammasome+drives+inflammation+in+ischemia/reperfusion+injury+after+transient+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice.">The NLRP3 inflammasome drives inflammation in ischemia/reperfusion injury after transient middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Brain Behaviour and Immunity. 92, 223 (2021).</li><li>Lawrence, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nuclear+factor+NF-kappaB+pathway+in+inflammation.">The nuclear factor NF-kappaB pathway in inflammation.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 1 (6), 001651 (2009).</li><li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pterostilbene+attenuates+astrocytic+inflammation+and+neuronal+oxidative+injury+after+ischemia-reperfusion+by+inhibiting+NF-kappaB+phosphorylation.">Pterostilbene attenuates astrocytic inflammation and neuronal oxidative injury after ischemia-reperfusion by inhibiting NF-kappaB phosphorylation.</a> Frontiers in Immunology. 10, 2408 (2009).</li><li>Prakash, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sivelestat-loaded+nanostructured+lipid+carriers+modulate+oxidative+and+inflammatory+stress+in+human+dental+pulp+and+mesenchymal+stem+cells+subjected+to+oxygen-glucose+deprivation.">Sivelestat-loaded nanostructured lipid carriers modulate oxidative and inflammatory stress in human dental pulp and mesenchymal stem cells subjected to oxygen-glucose deprivation.</a> Materials Science and Engineering: C Materials for Biological Applications. 120, 111700 (2021).</li><li>Prakash, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+enhances+autophagy+in+stem+cells+through+Erk1/2+signaling+pathway+-+implications+for+neurotransplantations.">Oxidative stress enhances autophagy in stem cells through Erk1/2 signaling pathway - implications for neurotransplantations.</a> Stem Cell Reviews and Reports. , (2021).</li><li>Ahmad, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gelatin-coated+polycaprolactone+nanoparticle-mediated+naringenin+delivery+rescue+human+mesenchymal+stem+cells+from+oxygen+glucose+deprivation-induced+inflammatory+stress.">Gelatin-coated polycaprolactone nanoparticle-mediated naringenin delivery rescue human mesenchymal stem cells from oxygen glucose deprivation-induced inflammatory stress.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 5 (2), 683-695 (2019).</li><li>Guan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuroprotective+effects+of+carvacrol+on+ischemia/reperfusion-induced+hippocampal+neuronal+impairment+by+ferroptosis+mitigation.">The neuroprotective effects of carvacrol on ischemia/reperfusion-induced hippocampal neuronal impairment by ferroptosis mitigation.</a> Life Science. 235, 116795 (2019).</li><li>Jin, Z., Guo, P., Li, X., Ke, J., Wang, Y., Wu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+effects+of+irisin+against+cerebral+ischemia/+reperfusion+injury+via+Notch+signaling+pathway.">Neuroprotective effects of irisin against cerebral ischemia/ reperfusion injury via Notch signaling pathway.</a> Biomedicine and Pharmacotherapy. 120, 109452 (2019).</li><li>Wainrach, S., Sotelo, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscope+study+of+the+developing+chick+embryo+heart.">Electron microscope study of the developing chick embryo heart.</a> Zeitschrift fur Zellforschung und mikroskopische Anatomie. 55, 622-634 (1961).</li><li>Joshi, V. C., Wilson, A. C., Wakil, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assay+for+the+terminal+enzyme+of+the+stearoyl+coenzyme+A+desaturase+system+using+microsomes.">Assay for the terminal enzyme of the stearoyl coenzyme A desaturase system using microsomes.</a> Journal of Lipid Research. 18 (1), 32-36 (1977).</li><li>Kain, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chick+embryo+as+an+expanding+experimental+model+for+cancer+and+cardiovascular+research.">The chick embryo as an expanding experimental model for cancer and cardiovascular research.</a> Development Dynamics. 243 (2), 216-228 (2014).</li><li>Mann, R. A., Moore, K. L., Persaud, T. V. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+in+the+u~e+of+the+early+chick+embryo+88+a+teratological+model.">Limitations in the u~e of the early chick embryo 88 a teratological model.</a> Teratology. 7, 22-23 (1973).</li><li>Chen, T., Vunjak-Novakovic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+models+of+ischemia-reperfusion+injury.">In vitro models of ischemia-reperfusion injury.</a> Regenerative English and Translation Medicine. 4 (3), 142-153 (2018).</li><li>Ma, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cerebral+ischemia:+A+review.">Animal models of cerebral ischemia: A review.</a> Biomedicine and Pharmacotherapy. 131, 110686 (2020).</li><li>Bromage, D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remote+ischaemic+conditioning+reduces+infarct+size+in+animal+in+vivo+models+of+ischaemia-reperfusion+injury:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Remote ischaemic conditioning reduces infarct size in animal in vivo models of ischaemia-reperfusion injury: a systematic review and meta-analysis.</a> Cardiovascular Research. 113 (3), 288-297 (2017).</li><li>Kalogeris, T., Baines, C. P., Krenz, M., Korthuis, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+biology+of+ischemia/reperfusion+injury.">Cell biology of ischemia/reperfusion injury.</a> International Review of Cell and Molecular Biology. 298, 229-317 (2012).</li><li>Hogers, B., DeRuiter, M. C., Baasten, A. M., Gittenberger-de Groot , A. C., Poelmann, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracardiac+blood+flow+patterns+related+to+the+yolk+sac+circulation+of+the+chick+embryo.">Intracardiac blood flow patterns related to the yolk sac circulation of the chick embryo.</a> Circ Res. 76 (5), 871-877 (1995).</li><li>Rezzola, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=angiogenesis-inflammation+cross+talk+in+diabetic+retinopathy:+novel+insights+from+the+chick+embryo+chorioallantoic+membrane/human+vitreous+platform.">angiogenesis-inflammation cross talk in diabetic retinopathy: novel insights from the chick embryo chorioallantoic membrane/human vitreous platform.</a> Frontiers in Immunology. 11, 581288 (2020).</li></ol>

الهدف من البحوث الإقفارية-reperfusion هو خلق استراتيجيات علاجية تمنع موت الخلايا وتعزيز الانتعاش29,30. للتغلب على القيود الحالية في أبحاث I / R ، قمنا بتصميم نموذج جنين هوك I / R لإنتاج نموذج I / R موثوق به وقابل للاستنساخ. على حد علمنا، لدينا هو أول نموذج I / R من أي وقت مض?...

تم ربط إصابة الأنسجة الإقفارية إلى عدد من الأمراض، بما في ذلك النوبات القلبية والسكتة الدماغية والصدمات النفسية وأمراض الأوعية الدموية الطرفية1،2،3،4،5. ويرجع ذلك في المقام الأول إلى عدم وجود فهم شامل لتطور المرض وعدم وجود نموذج بحثي فعال. تحدث الإصابة الإقفارية عندما يتم قطع إمدادات الدم إلى منطقة معينة من الأنسجة. ونتيجة لذلك ، تنخر الأنسجة الإقفارية في نهاية المطاف ، على الرغم من أن المعدل يختلف اعتمادا على الأنسجة. وبالتالي، قد تساعد استعادة إمدادات الدم على التخفيف من الضرر. ومع ذلك، فقد لوحظ، في بعض الحالات، أن التروية يسبب تلف الأنسجة أكثر من نقص التروية وحده لا 6،7،8. لذلك ، فهم الآليات الجزيئية والخلوية للتشويش الإقفاري مطلوب لتطوير تدخل علاجي فعال. حاليا، لا يعرف أي علاج فعال لإصابات I/R. وقد أدى هذا التفاوت إلى إنشاء نماذج تجريبية جديدة، تتراوح بين النماذج المختبرية والنماذج الحية، لمعالجة المشكلة القائمة9,10,11,12,13.
تستخدم أجنة الفرخ (Gallus gallus domesticus) على نطاق واسع في الأبحاث بسبب سهولة الوصول إليها ، ومقبولتها الأخلاقية ، وحجمها الكبير نسبيا (مقارنة بالأجنة الأخرى) ، وانخفاض التكلفة ، والنمو السريع14. استخدمنا جنين فرخ في 72 ساعة من التنمية لإنشاء في أوفو I / R عن طريق انسداد والإفراج عن الشريان الزئني الأيمن بمساعدة إبرة العمود الفقري. أطلقنا عليه اسم نموذج هوك-I/R الإقفارية-إعادة التروية (الشكل 1). النموذج المستخدمة في هذه الدراسة قادر على محاكاة بدقة جميع العمليات المصب، بما في ذلك المسارات التأكسدية والالتهابية، والتي ترتبط في كثير من الأحيان مع الضرر I/R15،16،17.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(-80&#176;C) freezer</td>
			<td>Haier, China</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5mL Centrifuge tube</td>
			<td>TARSONS, India</td>
			<td>500010X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100mm Petri dish (sterile)</td>
			<td>Tarsons, India</td>
			<td>460050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18G Needle (18G&#215;1.5 (1.25&#215;38mm)</td>
			<td>Ramsons, India</td>
			<td>13990</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1mL Syringe</td>
			<td>DISPO VAN</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26G Needle (26G&#215;1/2 (10.45x13mm)</td>
			<td>DISPO VAN, india</td>
			<td>30722D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37&#176;C egg incubator with adjustable percentage humidity</td>
			<td>Gentek, India</td>
			<td>GL-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37&#176;C laboratory incubator</td>
			<td>SCIENCE TECH, India</td>
			<td>CB 101-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-Methyladenine (3-MA)</td>
			<td>Sigma Aldrich, USA</td>
			<td>M9281</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3mL Pasture Pipette</td>
			<td>TARSONS, India</td>
			<td>940050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL Beaker</td>
			<td>TARSONS, India</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5mL Syringe</td>
			<td>DISPO VAN, India</td>
			<td>IP53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Merck Millipore, United States</td>
			<td>64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive tape/Cello tape</td>
			<td>Sunrise, India</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambra1 primers</td>
			<td>Applied Biosystems, Foster city, USA</td>
			<td>Hs00387943_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse IgG</td>
			<td>Cell Signaling Technology, USA</td>
			<td>7076S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Rabbit IgG</td>
			<td>Jackson Immuno Research Laboratories, USA</td>
			<td>711-035-152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atg7</td>
			<td>R&#38;D Systems, USA</td>
			<td>MAB6608</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atg7 primers</td>
			<td>Applied Biosystems, Foster city, USA</td>
			<td>Hs00893766_m1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave Bag</td>
			<td>Tarsons, India</td>
			<td>550022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave Machine</td>
			<td>Local made, Lucknow, India</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beclin-1</td>
			<td>Proteintech, USA</td>
			<td>66665-1-Ig</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta Actin</td>
			<td>ImmunoTag, USA</td>
			<td>ITT07018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>TC194</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>GRM534</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalase</td>
			<td>ImmunoTag, USA</td>
			<td>ITT5155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cleaning wipes</td>
			<td>Kimberly-Clark, India</td>
			<td>370080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cleaved Caspase3</td>
			<td>ImmunoTag, USA</td>
			<td>ITT07022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>di-Sodium hydrogen phosphate heptahydrate</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>GRM39611</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doppler blood flowmeter</td>
			<td>Moors instrument, United Kingdom</td>
			<td>moorVMS-LDF1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Egg rack</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Egg rack</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAPDH</td>
			<td>ImmunoTag, USA</td>
			<td>M1000110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAPDH primers</td>
			<td>Applied Biosystems, Foster city, USA</td>
			<td>Hs02758991_g1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>MB013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kidney tray</td>
			<td>HOSPITO</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LC3A/B</td>
			<td>Cell Signaling Technology, USA</td>
			<td>4108S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Rankem laboratories, Mumbai, India</td>
			<td>M0252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator</td>
			<td>Narishige, Japan</td>
			<td>M-152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-acetyl-L-cysteine (NAC)</td>
			<td>Sigma Aldrich, USA</td>
			<td>A7250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Naringenin</td>
			<td>Sigma Aldrich, USA</td>
			<td>67604-48-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NF-k&#946;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>51-0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NLRP3</td>
			<td>ImmunoTag, USA</td>
			<td>ITT07438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nose plier</td>
			<td>Local made, Lucknow, India</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ocular forceps</td>
			<td>Stoelting, Germany</td>
			<td>52106-40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ocular iris</td>
			<td>Tufft Surgical Instruments, Jaipur, India</td>
			<td>Hard Age Vannas Micro Scissors Angled 8CM / 3 1/8&#34;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OHP marker pen</td>
			<td>Camlin, India</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ORP-150</td>
			<td>ImmunoTag, USA</td>
			<td>ITT08329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pointed sharp edge scissor</td>
			<td>Stoelting, Germany</td>
			<td>52132-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>MB043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic anhydrous</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>MB050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease Inhibitor</td>
			<td>Abcam, United States</td>
			<td>Ab65621</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SOD-1</td>
			<td>ImmunoTag, USA</td>
			<td>ITT4364</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific, Mumbai, India</td>
			<td>27605</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium dodecyl sulphate</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>GRM886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinal needle 25GA; 3.50 IN (90.51 X 90mm)</td>
			<td>Ramson, India</td>
			<td>GS-2029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Zoom surgical microscope</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>SZ2-STU3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe discarder</td>
			<td>BIOHAZARD</td>
			<td>882210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toothed forceps</td>
			<td>Stoelting, Germany</td>
			<td>52102-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris Base</td>
			<td>G Biosciences, United States</td>
			<td>RC1217</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris Hydrochloric Acid</td>
			<td>Himedia, Mumbai, India</td>
			<td>MB030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>G Biosciences, United States</td>
			<td>RC1227</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White Leghorn Chicken 0-day eggs</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK</td>
			<td>MP Biomedicals, LLC, USA</td>
			<td>FK009</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of hook ischemia-reperfusion model using a three-day developing chick embryo

اضطرابات نقص التروية والتشويش (I/R)، مثل احتشاء عضلة القلب والسكتة الدماغية وأمراض الأوعية الدموية الطرفية، هي عدد قليل من الأسباب الرئيسية للمرض والوفاة. العديد من النماذج في المختبر وفي الجسم الحي متاحة حاليا لدراسة آلية I / R في الأمراض أو الأنسجة التالفة. ومع ذلك، حتى الآن، لم يتم الإبلاغ عن أي نموذج للكشف عن المخدرات، مما سيسمح بفهم أفضل لآليات البحث والتطوير والفحص الأسرع للأدوية. تصف هذه الورقة نمذجة I/R باستخدام خطاف مخصص لإبرة العمود الفقري في جنين فرخ لمدة 3 أيام لفهم آليات تطوير I/R وعلاجها. يمكن استخدام نموذجنا للتحقيق في الحالات الشاذة في مستويات الحمض النووي والحمض النووي الريبي والبروتين. هذه الطريقة بسيطة وسريعة وغير مكلفة. ويمكن استخدام النموذج الحالي بشكل مستقل أو بالاشتراك مع النماذج الموجودة في المختبر وفي الجسم الحي I /R.

تم استخدام تقنية تصوير تدفق الدم دوبلر لتقييم فعالية نموذجنا. باختصار، قارنا البيانات من مجموعة التحكم مع البيانات من مجموعة RVA لتحديد نجاح إنشاء لدينا. يصور الشكل 4A تدفقا نموذجيا مرتبطا بحيوان التحكم، بينما يصور الشكل 4B النتائج التي تم الحصول عليها من RVA. ?...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Hook Ischemia-Reperfusion Model using a Three-Day Developing Chick Embryo at JoVE.com

Generation of Hook Ischemia-Reperfusion Model using a Three-Day Developing Chick Embryo

تصف هذه الورقة النمذجة الإقفارية -reperfusion (I / R) في جنين فرخ لمدة 3 أيام باستخدام خطاف مخصص لإبرة العمود الفقري لفهم أفضل لتطوير I / R والعلاج. هذا النموذج بسيط وسريع وغير مكلف.

جيل من هوك الإقفارية-Reperfusion نموذج باستخدام الجنين الفرخ النامية لمدة ثلاثة أيام

Ischemia and reperfusion (I/R) disorders, such as myocardial infarction, stroke, and peripheral vascular disease, are a few of the leading causes of ...

مرحبا، أنا الدكتور سيد شداب رضا، الباحث الرئيسي في مختبر الخلايا الجذعية والأعصاب التصالحية، الموجود في قسم التكنولوجيا الحيوية في حرم جامعة إيرا، لوكناو، الهند. في مختبري، نسعى جاهدين لفهم الآلية المرضية الفسيولوجية الكامنة وراء اضطرابات نقص التروية والتدخلات التي يمكن أن تعكس تلك العمليات. في هذا السياق، ونحن كثيرا ما تستخدم في المختبر ونموذج في الجسم الحي من السكتة الدماغية.في الآونة الأخيرة ، أنشأنا نموذج إصابة نقص التروية في ثلاثة أيام تطوير جنين الفرخ. لذا الآن طلابي سيريك كيف تكرر إصابة نقص التروية في جنين فرخ يتطور لثلاثة أيام الآن سنريك كيف تصنعين الإقفارية في جنين الفرخ لثلاثة أيامنموذجنا فعال من حيث التكلفة وفعال من حيث الوقت وقابل للاستنساخ للغاية. لذلك دعونا نبدأ. اليوم الأولمتطلبات اليوم الأول. إجراء. تنظيف البيض يوم الصفر مع 70٪ الإيثانول باستخدام مناديل ورق الأنسجة. بعد ذلك، اكتب اليوم الحالي، والتاريخ، على البيض مع علامة OHP ومن ثم وضع البيض في حاضنة البيض مع درجة حرارة 36 إلى 37 درجة مئوية والرطوبة 60 إلى 65٪.احتضن البيض لمدة 24 ساعة القادمة. اليوم الثاني متطلبات لليوم الثاني. إجراء.مسح مقص الجراحية مع 70٪ الإيثانول أو تليها الأوتوكلاف. بعد 24 ساعة من الحضانة، قم بإزالة البيضة من الحاضنة لطبقاتها. بعد ذلك ، قم بإرفاق قطعة صغيرة من Sellotape بطول وعرض بوصة واحدة تقريبا إلى حافة البيضة ثم قم بعمل ثقب صغير في حافة قشر البيض باستخدام مقص الحافة الحاد المدبب يليه إدخال حقنة خمسة مل بزاوية 75 درجة تقريبا.بعد إدخال الإبرة في كيس صفار، سحب ببطء خمسة إلى ستة مل من الألبومين. بعد إزالة الألبومين، إعادة ختم الحفرة مع Sellotape ووضع البيض مرة أخرى في حاضنة البيض 37 درجة مئوية لمدة 48 ساعة القادمة. اليوم الرابعمتطلبات لليوم الرابع. إجراء. إعداد محلول Ringer، المالحة العادية 0.9٪، وحاجز الفوسفات X واحد المالحة وفقا للجداول الواردة في هذه المخطوطة. ثم الأوتوكلاف الحلول الثلاثة.بعد الأوتوكلاف، يمكن وضع الحلول المعنية في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك، أخرج البيضة من حاضنة البيض ب درجة 37. الآن، قبل قطع القشرة، تغطية مساحة النوافذ مع Sellotape.والآن جعل حفرة صغيرة على قشر البيض والبدء في قطع فتحة دائرية. تعرف هذه العملية باسم الإطارات. تأكد من أن القطع الدائري كبير بما يكفي بحيث يمكن الوصول إلى الجنين بسهولة من أي اتجاه ، حيث قد يتعين تعديل وضع البويضة وفقا لوضع الجنين.الآن، وذلك باستخدام مجهر جراحي تكبير ستيريو، حدد موقع الشريان الحيوي الأيمن أو RVA. هنا، يشير السهم إلى مرحلة نمو الجنين التي تستمر ثلاثة أيام. مرة واحدة يقع RVA، مع استخدام إبرة 26 G جعل اثنين من ثقوب صغيرة على الجانبين الأيسر والأيمن من RVA.بعد ذلك، قم بضبط مسبار تصوير تدفق الدم دوبلر على RVA. يجب وضع مسبار تصوير تدفق الدم دوبلر خمسة زائد ناقص ملليمتر واحد من موقع نقص التروية وثلثي الطرف البعيدة من RVA. خذ قراءة التدفق لمدة 30 ثانية إلى دقيقتين ، حسب الرغبة.وهذا سيجعل من مرحلة القراءة normoxia. الآن يدويا العفن حافة الإبرة الشوكية لإعطاء حافة شكل هوك مع مساعدة من plier الأنف تليها ملقط الأسنان. الآن، باستخدام المتلاعب الدقيق، أدخل الإبرة الشوكية أسفل الشريان الحيوي الأيمن.كنت على استعداد لرفع إبرة العمود الفقري. الآن بمساعدة المتلاعب الدقيق ، ارفع الشريان ببطء حتى يظهر تدفق الدم دوبلر انخفاضا لا يقل عن 80٪ في تدفق الشرايين. بمجرد أن يتم تحقيق انخفاض بنسبة 80٪ أو أكثر في تدفق دوبلر ، اترك الإبرة الشوكية مرفوعة إلى الأعلى ، وسحب الشريان لمدة خمس دقائق.هذه ستكون فترة الإقفارية بعد هذا التوقيت الإقفاري لمدة خمس دقائق ، قم بتحرير الشريان ببطء بمساعدة المتلاعب الدقيق لاستعادة مستويات تدفق الدم الطبيعية. الآن يجب أن يظهر مقياس تدفق الدم دوبلر قراءات مماثلة لتلك التي لوحظت أثناء normoxia.وستكون هذه هي فترة إعادة التروية في RVA. بعد عملية I / R ، ضع قطرتين أو ثلاث قطرات من 1X PBS على الجنين. وأخيرا، إعادة ختم النافذة مع Sellotape ومن ثم وضع البيض مرة أخرى في حاضنة البيض لمدة خمس ساعات و 55 دقيقة.بعد خمس ساعات و55 دقيقة، أخرج البيضة من حاضنة البيض وضعها على صينية البيض وأعيد فتح النافذة. متطلبات العلاج. إجراء. لعلاج الشرايين بالأدوية أو المنشطات أو المثبطات ، يجب استئصال RVA بعد ساعة واحدة من عملية I / R.إزالة الجنين من قذيفة عن طريق إخراجه من قذيفة على طبق بيتري 100 ملم معقمة. بمجرد إطلاق الجنين في طبق بيتري ، اقتطع RVA باستخدام القزحية العينية في توجيه المجهر الجراحي للتكبير ستيريو. يجب أن يصل بعد استئصال RVA إلى 15 زائد ناقص 1 ملليمتر من الجذع واثنين زائد ناقص ملليمتر واحد نحو الجذع.بعد استئصال RVA، اغسله مع برنامج تلفزيوني 1X في طبق بيتري جديد معقم. للعلاجات المطلوبة، ضع الشريان في أنبوب طرد مركزي معقم 1.5 ملليلتر مملوء ب 500 ميكرولتر من محلول رينغر. وبعد وضع الشريان في أنبوب الطرد المركزي، وضعت في حاضنة مختبر 37 درجة مئوية لمدة خمس ساعات.بعد خمس ساعات من الحضانة، أخرج RVA من حاضنة مختبر 37 درجة مئوية واذهب للعلاجات المطلوبة. والآن، لعرض النتائج. للتحقق من فائدة نموذجنا في أبحاث التروية في الشرايين الإقفارية ، نظرنا أولا إلى أنشطة البروتينات التنظيمية للأوكسجين 150 أو ORP150 ، وأول أكسيد السيتوبلازمي الفائق dismutase واحد أو SOD1 والكاتالاس.وأظهرت RVAs I /R المعالجة زيادة نشاط ORP150, SOD1 السيتوبلازمية والكاتالاس بالمقارنة مع مجموعة التحكم, ومع ذلك, تكملة مع N-أسيتيل-L-السيستين, أو NAC, وQUEncher ROS, خفض الإجهاد التأكسدي في مجموعة I / R, كما يمكن أن يكون واضحا في الشكل الحالي. لإنشاء فائدة هذا النموذج للتحقيقات الالتهابية ، نظرنا في التعبير عن I / R - 1 بيتا و TNF - ألفا في RVAs I / R المعالجة مقابل RVAs السيطرة. ووجد أن كلا من interleukins أن يكون الإفراط في التعبير عنها في مجموعة هوك - I / R مقارنة مع مجموعة التحكم.مكملات نارينغينين, دواء مضاد للالتهابات, خفضت بشكل كبير مستويات IL1 بيتا وكذلك TNF-ألفا. بعد ذلك ، درسنا التعبير عن NLRP3 و NF-kappa بيتا من خلال النشاف الغربي. اكتشف هذا التحليل أدلة على تفعيل التهاب NLRP3 ، وكذلك بيتا NF-kappa استجابة ل I / R المنتجة في RVA.على غرار النتائج السابقة، خفضت نارينجين التعبير عن NLRP3 وNF-كابا بيتا. أظهرت هذه النتائج أنه يمكن استخدام نموذجنا للتحقيق في التعديلات الالتهابية. بعد ذلك ، درسنا تأثير I / R على موت الخلايا المبرمج ومسارات autophagy.أولا، في الشكل A، وصلنا إلى التعبير عن كاسباس-3 المشقوق. لاحظنا تعبيرا معززا عن caspase-3 المشقوق في مجموعة I/R مقارنة بمجموعة التحكم ، في حين أظهرت مجموعة I / R التي تتلقى ZVADFMK انخفاضا في التعبير عن caspase-3. وبالمثل بالنسبة للأوتوفاجي، أظهرت مجموعة I/R مستويات عالية من البروتين من LC3، وعلامة autophagosome Beclin-1، وهي منظمة رئيسية للأوتوفاجي في خلايا الثدييات، و ATG-7، وهو بروتين مطلوب للأوتوفاجي القاعدي، من مجموعة التحكم، في حين أظهرت المجموعات التي تتلقى 3-ma، وهو مثبط autophagy، انخفاضا في التعبير عن البروتينات الذاتية الثلاثة المذكورة أعلاه، كما هو واضح من الأرقام B إلى D.The الرقم E يوضح تأثير هوك بوساطة I / R على ambra-1 و ATG-7 مستويات مرنا.وكانت هذه النتائج تتماشى مع النتائج السابقة، أي لوحظ تعزيز التعبير مرنا ل ambra-1 و ATG-7 في RVAs I/R المعالجة بالمقارنة مع الضوابط الخاصة بهم. ومع ذلك، تم عكس النتائج عندما تمت إضافة 3-ma إلى مجموعة I/R. الرقم الحالي يمثل فعالية نموذجنا لدراسة التعديلات في الحمض النووي.لاحظنا مسحة حمض نووي مكثفة في المجموعة المعالجة بال I/R مقارنة بمجموعة التحكم. ومع ذلك، عكست مكملات NAC إلى مجموعة I/R R RVA النتيجة. لدراسة مدى فعالية نموذجنا على النقيض من النماذج الأخرى ، قارنا البيانات التي تم إنشاؤها بواسطة نموذج Hook-I /R ونموذج MCAO في التجربة الحالية.باختصار ، كان التعبير عن البروتين المبرمج ، والكاسباس المشقوق - 3 ، والبروتينات الأوتوفاجية ، و Beclin-1 و ATG-7 ، وinterleukins الالتهابي ، TNF و IFN ، أعلى في RVAs المعالجة بال I / R مما كان عليه في RVAs التحكم. ومن المثير للاهتمام أن نموذج Hook-I/R أعطى نتائج مشابهة جدا لتلك التي حصل عليها نموذج MCAO ، سواء كان ذلك التحليل للإجهاد الالتهابي أو مسارات الموت الخلوية. يمكن استخدام نموذجنا لإجراء تجارب روتينية للإنخفار، إما بمفرده أو بالتوازي مع النماذج الحالية.ومع ذلك ، أثناء محاكاة نقص التروية - reperfusion ، ينبغي اتخاذ أعلى الاحتياطات أثناء صنع الثقوب ، الجانب الأيمن والأيساري من RVA ، وأيضا أثناء انسداد أو إطلاق RVA بحيث لا ينبغي أن يضر أي شرايين أو عروق. في البيولوجيا الجزيئية الروتينية مثل النشاف الغربي ، محلل QRT-PCR ، يمكن ارتجال الأحماض الكيميائية وتقنيات التصوير لربط الفيزيولوجيا المرضية المرتبطة بإعادة التروية في ثلاثة أيام من تطور جنين الفرخ. ويمكن استخدام هذا النموذج بكفاءة لدراسة الميكانيكا الجزيئية في الحمض النووي والحمض النووي الريبي ومستويات البروتين.كما أظهرنا لك، والنمذجة I / R في ثلاثة أيام النامية جنين الفرخ، ونحن نعتقد أن نموذجنا سوف تفتح آفاقا جديدة في مجال البحوث I / R. مع هذا العمل، وأتمنى لكم كل التوفيق لتجاربك. شكرًا لك.

Research

JoVE Journal

Biology

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

توليد مستقرة ايليجانس جيم المعدلة وراثيا عن طريق Microinjection

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1.  The plasmid DNA rearranges to ...

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

طريقة لثقافة الفرخ المبكر فيفو السابقين الأجنة (الثقافة الجديدة)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

الجامعة جبل مزدوجة في الموقع التهجين لافراخ الدجاج في وقت مبكر

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

طريقة لتلطيخ جسم الجامع في جبل الفرخ

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

مقايسة لتحريض العصبية في الأجنة الفرخ

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

تتبع التشويهات الأنسجة التخلق في جنين الفرخ المبكر

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

Utero-tubal Embryo Transfer and Vasectomy in the Mouse Model

الرحم-البوقي نقل الأجنة وقطع القناة الدافقة في نموذج الفأر

The transfer of preimplantation embryos to a surrogate female is a required step for the production of genetically modified mice or to study the effects ...

An Anoxia-starvation Model for Ischemia/Reperfusion in C. elegans

An Anoxia-starvation Model for Ischemia/Reperfusion in C. elegans

نموذج نقص الأكسجين المجاعة لنقص التروية / ضخه في<em&gt; C. ايليجانس</em

Protocols for anoxia/starvation in the genetic model organism C. elegans simulate ischemia/reperfusion. Worms are separated from bacterial food and placed ...