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•
08:13 min
November 30th, 2021
DOI :
10.3791/63290-v
Chapters
0:04
Introduction
0:53
Drug and Imaging Dish Preparation
2:21
Live Imaging and PST-1P Photoactivation
5:20
Results: Effect of PST-1P Treatment on the Embryos
7:31
Conclusion
Transcript
该协议是同类方案中第一个将光敏素应用于活的植入前小鼠胚胎,并考虑在其他3D生理系统上使用光开关药物的用途。光可调光剂允许在空间和时间上操纵微管生长,并转换回关闭状态。在实验之前无意中将光敏素暴露在蓝光下,可能会过早地激活它们。
因此,我们建议您在制备样品时始终在完全黑暗或红光条件下工作。在严格的黑暗条件下,仅使用红光进行照明,开始在超纯水中制作PST-1P的库存和中间工作溶液。如文本手稿中所述。
然后,将PST-1P稀释在新鲜的KSOM中,达到40 M.To 最终浓
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Summary
典型的微管抑制剂广泛用于基础和应用研究,对细胞具有深远的影响。最近,光敏素作为一类光开关微管抑制剂出现,能够对微管进行瞬时,可逆,时空精确操作。该分步实验方案详细介绍了迁光素在3D活体植入前小鼠胚胎中的应用。
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