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•
10:12 min
December 16th, 2021
DOI :
10.3791/63298-v
Chapters
0:05
Introduction
1:22
Induction of Definitive Endoderm Differentiation in Human Pluripotent Stem Cells (hPSCs) (Stage 1)
2:10
Immunofluorescence Analysis of hPSC-Derived Definitive Endoderm (Stage 1)
4:19
Generation of the Primitive Gut Tube from hPSCs (Stage 2)
5:50
Assessment of Differentiation Efficiency of Generating Pancreatic Progenitors
8:10
Results: Comparison between Optimized and Non-Optimized Protocol for Scalable Generation of Pancreatic Progenitors from hPSCs
9:21
Conclusion
Transcript
この最適化されたプロトコルは、ヒト多能性幹細胞からの膵臓ベータ細胞前駆体の生成を促進し、糖尿病の細胞治療および糖尿病生合成の基礎となる分子メカニズムの調査に使用できます。これは、2D単層培養に使用されるため、実行可能な手法です。適用が容易であり、複数の対照および患者由来の多能性幹細胞株にわたって一貫しています。
これらのベータ細胞前駆体は、糖尿病患者に移植されると、インスリン分泌ベータ細胞に成熟することができ、潜在的に高血糖を逆転させることができる。したがって、私たちのプロトコ
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Summary
本プロトコルは、平面単層におけるヒト多能性幹細胞(hPSC)に由来する膵臓前駆細胞におけるPDX1およびNKX6.1転写因子の共発現を増加させるための増強された方法を記載する。これは、新鮮なマトリックスを補充し、細胞密度を操作し、内胚葉細胞を解離することによって達成される。
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