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•
09:22 min
May 31st, 2022
DOI :
10.3791/63322-v
Chapters
0:04
Introduction
0:49
LC-ESI-MS Analysis of Neuropeptides
2:45
MALDI-MS Spotting Analysis of Neuropeptides
4:13
MALDI-MS Imaging Analysis of Neuropeptides
5:36
Discovering Novel Putative Neuropeptides Using De Novo Sequencing and Transcriptome Mining for Predicted Neuropeptide Sequences
6:57
Results: De Novo Sequencing and MALDI-MS Imaging of Neuropeptides
8:41
Conclusion
Transcript
内源性肽的分析,其比大多数蛋白质小,但比许多消化的肽大,这是一个未被研究的领域。该协议解决了基于质谱的工作流程中的scap。质谱法具有高灵敏度,可用于靶向感兴趣的特定神经肽,或者可以捕获和检测样品中的一系列神经肽。
通过质谱法对神经肽表达的定量和定位可以导致肽治疗的发展和各种疾病的神经肽生物标志物的发现。为了开始神经肽提取,从甲壳类动物中收集脑组织,并使用镊子立即将一个组织放入含有20微升酸化甲醇的0.6毫升管中。向样品中加入150微升酸化甲醇。
将总声波患者时间设
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Summary
神经肽的质谱表征提供序列、定量和定位信息。这种优化的工作流程不仅对神经肽研究有用,而且对其他内源性肽也很有用。此处提供的方案描述了使用 LC-ESI-MS、MALDI-MS 点斑和 MALDI-MS 成像的神经肽的样品制备、MS 采集、MS 分析和神经肽的数据库生成。
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