Name: mongolian gerbils as an animal model of wound healing
Uploaded: 2023-01-06T12:30:00
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我们要感谢工程师罗德里戈·德拉富恩特的宝贵帮助和技术支持。我们还要感谢玛丽亚·尤金妮娅·科尔贝拉的叙述和普里西拉·哈兹伦的数字版本。雨果·卢汉（Hugo Luján）允许我们使用免疫学和传染病研究与发展中心（CIDIE）的设施。

所有研究程序均由科尔多瓦天主教大学的“实验动物护理和使用机构委员会”批准，并遵循国家研究委员会关于实验动物护理和使用指南。这些程序也得到了科尔多瓦天主教大学“健康科学学院”和“塞罗健康研究所”当局的批准。
1. 沙鼠处理和麻醉
注意：所有动物都是特异性无病原体（SFP）雄性蒙古沙鼠，并保存在免疫学和传染病研究与发...

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	<li>Kuo, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+wound+healing.">Corneal wound healing.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 15 (4), 311-315 (2004).</li><li>Agrawal, V. B., Tsai, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+epithelial+wound+healing.">Corneal epithelial wound healing.</a> Indian Journal of Ophthalmology. 51 (1), 5-15 (2003).</li><li>Lu, L., Reinach, P. S., Kao, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+epithelial+wound+healing.">Corneal epithelial wound healing.</a> Experimental Biology and Medicine. 226 (7), 653-664 (2001).</li><li>Rathi, V. M., Vyas, S. P., Sangwan, V. 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T., McDermott, A. M., Bergmanson, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimensions+and+morphology+of+the+cornea+in+three+strains+of+mice.">Dimensions and morphology of the cornea in three strains of mice.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 50 (8), 3648-3654 (2009).</li><li>Panagiotopoulos, M., Gan, L., Fagerholm, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroma+remodelling+during+healing+of+corneal+surface+irregularities+induced+by+PTK.">Stroma remodelling during healing of corneal surface irregularities induced by PTK.</a> Acta Ophthalmologica Scandinavica. 85 (4), 387-394 (2007).</li></ol>

角膜伤口愈合的生理学是组织再生和维持体内平衡之间的平衡。伤口过度愈合可能导致纤维化和疤痕，最终可能导致器官功能丧失。随着角膜外科手术的快速发展，了解角膜伤口愈合以及所涉及的生理和病理事件的重要性不容小觑11。 
多项研究工作声称，沙鼠具有许多感官特征，使它们成为视觉研究的有利物种，主要包括昼夜行为12 以及?...

角膜伤口愈合的一些最重要的方面是上皮结构的完整性，角膜基质透明度的维持，最后是角膜折射特性的结果1。
角膜是眼球前部最外层的透明组织，因此容易受到创伤、感染和烧伤;这些伤口愈合受损会损害视力健康2。
目前，有几种动物模型可用于研究角膜愈合，其中一些比其他模型更好，这取决于要研究的物种和机制的类型1。以前对沙鼠2视网膜的调查有一些记录。然而，到目前为止，还没有关于这些啮齿动物角膜瘢痕形成过程的已发表文献。
在这里，我们将 Meriones unguiculatus （蒙古沙鼠）作为角膜伤口愈合的动物模型。描述了光屈光性角膜切除术后引发角膜愈合的程序，这使我们能够研究不同类型的角膜瘢痕形成过程，根据活组织的动态阶段了解伤口愈合，最后，计划适当的未来治疗3。光疗角膜切除术是一种高度可重复的技术，可以精确控制角膜损伤的深度和直径等参数4。此外，该技术不需要使用手术器械或化学溶液（例如，盐水溶液、福尔马林、酒精等）进行手术，这些手术器械或化学溶液可能会添加特定于器械或执行手术的操作员的变量5。
本文介绍的实验使用了三只大小和重量相似的6个月大的雄性沙鼠（约90克）。这些程序仅在右眼中进行。一只沙鼠（称为沙鼠1或对照）没有进行光疗性角膜切除术，并被摘除以评估所有正常的眼部结构。光疗角膜切除术涉及将准分子激光产生的紫外线控制地输送到角膜，是为了进行屈光手术而开发的6。它已被用于其他啮齿动物，如小鼠7。另外两只沙鼠接受了光疗性角膜切除术。其中一个在手术后24小时（称为沙鼠2）进行剜除，另一个在手术后96小时（称为沙鼠3）进行剜除。
为了进行这个实验，为每个要研究的条件拍摄随机选择的沙鼠，但这个实验以前是用每个条件总共16只沙鼠进行的。出于编辑原因，决定为每个条件使用随机选择的沙鼠（总共三只沙鼠）作为示例。
这项研究的主要目的是探索可用的最佳动物模型。然而，重要的是要注意，并非所有物种都具有与人眼相似的眼睛特征8。本文介绍了用于研究 无柄Mericulatus 角膜的方法以及产生角膜损伤的程序，这使我们能够研究愈合过程。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tubes</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excimer Laser</td>
			<td>Technolas</td>
			<td>2022445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein</td>
			<td>Poen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Ofcor</td>
			<td>3339</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical coherence tomography</td>
			<td>Optovue</td>
			<td>659007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proparacaine</td>
			<td>Poen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scisors</td>
			<td>Ofcor</td>
			<td>3336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile drapes</td>
			<td>Soporte hospitalario</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauzes</td>
			<td>Soporte hospitalario</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes and needles</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mongolian gerbils as an animal model of wound healing

角膜伤口愈合研究已经进行了很长时间，有助于减少痛苦并开发有助于改善患者眼睛健康的治疗方法。从历史上看，已经在小鼠和大鼠等啮齿动物中研究了角膜愈合，但这些模型可能无法完全模仿人类疾病。然而，关于其他啮齿动物如蒙古沙鼠（Meriones unguiculatus）的信息在角膜研究中很少。
在这里，我们描述了一种开发用于研究光屈光性角膜切除术后角膜愈合的新型动物模型的技术。由于关于 无柄分枝杆菌角膜的文献有限，我们还描述了正常角膜的组织学分析。这些研究技术也可以用于眼部疾病的研究，因为蒙古沙鼠的角膜与人类在遗传学、解剖学和生理学方面具有相似性。

在本研究中，使用组织学技术和前段补充研究（例如光学相干断层扫描）对整个角膜结构进行了彻底分析。使用前节结构的光学相干断层扫描的图像分析显示正常的上皮和基质（图1），中央和外周角膜厚度分别为160μm和106μm±2μm。其他出版物也表明，其他啮齿动物的角膜向外围变薄10。
PTK后，观察到角膜上皮的清创（?...

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Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing

本文介绍了一种新的动物模型，用于研究角膜的解剖学和组织学及其愈合过程。这种新的动物模型使用蒙古沙鼠，其角膜与人类角膜有许多相似之处。

蒙古沙鼠作为伤口愈合的动物模型

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving ...

先前的研究表明，光屈光性角膜切除术或跨上皮PRK是研究角膜愈合以及与上皮角膜组织病理学清创相关的变化的最佳动物模型之一。与其他啮齿动物相比，使用蒙古沙鼠作为动物模型有几个优点。首先，角膜具有与人类角膜相同的组织学层。其次，眼睛在解剖学上比其他啮齿动物的眼睛大，更容易操作。所有这些研究都是在科尔多瓦天主教大学免疫学和传染病研究与发展中心的设施中进行的。第一步是对层流柜的工作表面进行消毒。为此，使用了70%的酒精。要使用的手术器械。一次性材料，如针头和注射器，以及麻醉啮齿动物的药物，被放置在工作区。如有必要，还应放置一次性手术区域以容纳分泌物和啮齿动物毛发。实验中使用了三只六个月大的雄性蒙古沙鼠，大小和体重相似，大约90克。稍后要进行的手术仅在右眼上进行。将装有啮齿动物的笼子取出并放置在层流柜内。我们继续打开盒子，识别每只沙鼠，并在秤上称重。它们是无害但精致的动物。应始终佩戴一次性手套。为了正确处理，操作员应用他不熟练的手牢牢抓住它的尾巴，并用熟练的手，用拇指和食指轻轻按下耳朵后面以握住动物，并用小指握住尾巴。根据动物的体重，计算每个沙鼠所需的麻醉量。一毫升注射器应装满氯胺酮，每公斤100毫克以上50，甲苯噻嗪每公斤2毫克。在进行光学相干断层扫描之前，放置无菌手术单以保护设备免受分泌物或动物毛发的侵害。当其中一个操作员抱着动物时，另一个操作员必须捕获。用显微镜拍摄眼睛，并对啮齿动物的内部部分进行了多次切片。可以观察到整个角膜，前房，虹膜，虹膜角膜角和突出到前房的晶状体。此外，中央和周围角膜厚度测量显示中心厚度为160微米，在外围减少到约110微米。在进行准分子激光PTK之前，放置无菌手术单以保护设备免受分泌物或动物毛发的侵害。在直径为3毫米处消融了60至62微米的角膜厚度。对角膜进行拍照以评估即时形态变化。在这张照片中，可以看到，沙鼠右眼的眼球。A、正常眼球表面不规则观察。B，在进行PTK后五分钟拍摄的照片显示角膜表面出现不规则。参见荧光素染色角膜溃疡的证据。在OCT上，右箭头标记碎屑积聚在中心的区域，左箭头标记角膜溃疡的边缘。该实验中使用的牺牲方法是通过使用二氧化碳室。以不同的时间间隔处死，并在术后24和96小时对正常眼球和术后眼球进行眼球摘除术，以观察角膜愈合情况。将每个去核眼球置于甲醛中并由病理学家处理。拍摄了多个切片、测量和照片。在组织学上，角膜厚度与OCT获得的厚度一致，并且向外围逐渐变薄。这是因为外周的上皮层和基质纤维层减少。蒙古沙鼠角膜与人类具有相同的分层前上皮层，有四到六层细胞，占角膜总厚度的28%。鲍曼层，基质占总厚度的66%。这巩固了膜和内皮。在手术后 24 小时，可以在箭头标记的地方看到角膜溃疡。还观察到多块上皮无赘体溶解和孤立性角化不良，急性上皮下炎性浸润，基质水平水肿。在PTK后96小时在手术沙鼠中观察到的变化是，水肿增加，基质纤维和细胞解聚，应该注意的是，内部上皮已经完全再生并且不存在炎症浸润。本研究显示了目前沙鼠动物模型的积极结果，并证实了它是角膜伤口愈合的新研究选择。迄今为止，还没有出版物详细分析蒙古沙鼠角膜的解剖学和组织学。因此，我们希望这个动物模型将成为未来科学研究的基础。

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Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell ASC Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

创作和移植的糖尿病伤口愈合模型中脂肪源性干细胞 (ASC) 表

Artificial skin has achieved considerable therapeutic results in clinical practice. However, artificial skin treatments for wounds in diabetic patients ...

Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice

伤口的牙髓评价一个直接盖髓模型的开发和治疗小鼠中修复性牙本质形成

Dental pulp is a vital organ of a tooth fully protected by enamel and dentin. When the pulp is exposed due to cariogenic or iatrogenic injuries, it is ...

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During In Vitro Wound Healing

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During  In Vitro Wound Healing

以显微镜为基础的方法评估上皮细胞迁移过程中的体外创面愈合

Cell migration is a mandatory aspect for wound healing. Creating artificial wounds on research animal models often results in costly and complicated ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

用线 Myography 测定小鼠肠系膜动脉的等轴收缩力

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...