Name: mongolian gerbils as an animal model of wound healing
Uploaded: 2023-01-06T12:30:00
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Wir danken dem Ingenieur Rodrigo de la Fuente für seine unschätzbare Hilfe und technische Unterstützung. Wir danken auch María Eugenia Corbela für die Erzählung und Priscilla Hazrún für die Edition der Figuren. Hugo Luján erlaubte uns, die Einrichtungen des Zentrums für Forschung und Entwicklung in Immunologie und Infektionskrankheiten (CIDIE) zu nutzen.

Alle Forschungsverfahren wurden von der "Institutionellen Kommission für die Pflege und Verwendung von Versuchstieren" der Universidad Católica de Córdoba genehmigt und folgten dem Leitfaden des Nationalen Forschungsrats für die Pflege und Verwendung von Labortieren. Diese Verfahren wurden auch von den Behörden der "Facultad de Ciencias de la Salud" der Universidad Católica de Córdoba und des "Instituto de la Visión Cerro" genehmigt.
1. Umgang mit Rennmaus und Anästhesie</strong...

<ol>
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(137), e58071 (2018).</li><li>Yang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electroretinogram+of+Mongolian+gerbil+(Meriones+unguiculatus.):+Comparison+to+mouse.">The electroretinogram of Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus.): Comparison to mouse.</a> Neuroscience Letters. 589, 7-12 (2015).</li><li>Baker, A. G., Emerson, V. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Grating+acuity+of+the+Mongolian+gerbil+(Meriones+unguiculatus).">Grating acuity of the Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus).</a> Behavioural Brain Research. 8 (2), 195-209 (1983).</li><li>Govardovskii, V. I., R&#246;hlich, P., Sz&#233;l, A., Khokhlova, T. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cones+in+the+retina+of+the+Mongolian+gerbil,+Meriones+unguiculatus:+An+immunocytochemical+and+electrophysiological+study.">Cones in the retina of the Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus: An immunocytochemical and electrophysiological study.</a> Vision Research. 32 (1), 19-27 (1992).</li><li>Zanandr&#233;a, L. I., Oliveira, G. M., Abreu, A. S., Pereira, F. 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Die Physiologie der Hornhautwundheilung ist ein Gleichgewicht zwischen Geweberegeneration und der Aufrechterhaltung der Homöostase. Übermäßige Wundheilung kann zu Fibrose und Narbenbildung führen, was letztendlich zum Verlust der Organfunktion führen kann. Angesichts der rasanten Entwicklung der Hornhautchirurgie kann die Bedeutung des Verständnisses der Hornhautwundheilung und der damit verbundenen physiologischen und pathologischen Ereignisse nicht hoch genug eingeschätztwerden 11. 
...

Einige der wichtigsten Aspekte der Hornhautwundheilung, die für die Operation des vorderen Segments von zentraler Bedeutung sind, sind die Integrität der Epithelarchitektur, die Aufrechterhaltung der Transparenz des Hornhautstromas und schließlich das Ergebnis in Bezug auf die refraktiven Eigenschaften der Hornhaut1.
Die Hornhaut ist das äußerste klare Gewebe an der Vorderseite des Augapfels und daher anfällig für Traumata, Infektionen und Verbrennungen; Die gestörte Heilung dieser Wunden kann die Sehgesundheit beeinträchtigen2.
Derzeit stehen mehrere Tiermodelle zur Verfügung, um die Hornhautheilung zu untersuchen, und einige von ihnen sind besser als andere, abhängig von der Art und der Art des zu untersuchenden Mechanismus1. Es gibt einige Aufzeichnungen früherer Untersuchungen an der Netzhaut von Rennmäusen2. Bisher gibt es jedoch keine veröffentlichte Literatur über die Narbenbildungsprozesse in der Hornhaut dieser Nagetiere.
Hier stellen wir Meriones unguiculatus (mongolische Rennmaus) als Tiermodell der Wundheilung in der Hornhaut vor. Es werden Verfahren zur Herbeiführung der Hornhautheilung nach photorefraktiver Keratektomie beschrieben, die es uns ermöglichen, die verschiedenen Arten von Hornhautvernarbungsprozessen zu untersuchen, die Wundheilung in Bezug auf die dynamischen Phasen des lebenden Gewebes zu verstehen und schließlich geeignete zukünftige Behandlungen zu planen3. Die phototherapeutische Keratektomie ist eine hochreproduzierbare Technik mit der Möglichkeit, Parameter wie Tiefe und Durchmesser der Hornhautverletzung präzise zu steuern4. Darüber hinaus erfordert diese Technik keine Verfahren mit chirurgischen Instrumenten oder chemischen Lösungen (z. B. Kochsalzlösung, Formalin, Alkohol usw.), die Variablen hinzufügen können, die für die Instrumente oder den Bediener, der das Verfahren durchführt, spezifisch sind5.
Drei 6 Monate alte männliche Rennmäuse ähnlicher Größe und Gewicht (ca. 90 g) wurden für das in diesem Artikel vorgestellte Experiment verwendet. Die Eingriffe wurden nur in den rechten Augen durchgeführt. Eine Rennmaus (als Germaus 1 oder Kontrolle bezeichnet) wurde keiner phototherapeutischen Keratektomie unterzogen und wurde enukleiert, um alle normalen Augenstrukturen zu bewerten. Die phototherapeutische Keratektomie beinhaltet die kontrollierte Abgabe von excimer-lasergeneriertem ultraviolettem Licht an die Hornhaut und wurde entwickelt, um eine refraktive Chirurgie durchzuführen6. Es wurde bei anderen Nagetieren wie Mäusenverwendet 7. Die anderen beiden Rennmäuse wurden einer phototherapeutischen Keratektomie unterzogen. Eine von ihnen wurde nach 24 h (als Rennmaus 2 bezeichnet) und die andere nach 96 h nach der Operation (als Rennmaus 3 bezeichnet) enukleiert.
Um dieses Experiment durchzuführen, wurde eine zufällig ausgewählte Rennmaus für jede zu untersuchende Bedingung gefilmt, aber dieses Experiment wurde zuvor mit insgesamt 16 Rennmäusen für jede Bedingung durchgeführt. Aus redaktionellen Gründen wurde entschieden, für jede Bedingung (insgesamt drei Rennmäuse) eine zufällig ausgewählte Rennmaus als Beispiel zu verwenden.
Das Hauptziel dieser Forschung ist es, das beste verfügbare Tiermodell zu erforschen. Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass nicht alle Arten ähnliche Augeneigenschaften wie das menschliche Auge aufweisen8. Dieser Artikel beschreibt die Methodik zur Untersuchung der Hornhaut von Meriones unguiculatus und das Verfahren zur Erzeugung der Hornhautverletzung, die es uns ermöglichen, den Heilungsprozess zu untersuchen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tubes</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excimer Laser</td>
			<td>Technolas</td>
			<td>2022445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein</td>
			<td>Poen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Ofcor</td>
			<td>3339</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical coherence tomography</td>
			<td>Optovue</td>
			<td>659007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proparacaine</td>
			<td>Poen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scisors</td>
			<td>Ofcor</td>
			<td>3336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile drapes</td>
			<td>Soporte hospitalario</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauzes</td>
			<td>Soporte hospitalario</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes and needles</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mongolian gerbils as an animal model of wound healing

Hornhaut-Wundheilungsstudien werden seit langem durchgeführt und haben dazu beigetragen, Leiden zu reduzieren und Behandlungen zu entwickeln, die zur Verbesserung der Augengesundheit der Patienten beitragen. In der Vergangenheit wurde die Hornhautheilung bei Nagetieren wie Mäusen und Ratten untersucht, aber diese Modelle ahmen menschliche Störungen möglicherweise nicht vollständig nach. Informationen über andere Nagetiere wie mongolische Rennmäuse (Meriones unguiculatus) sind in der Hornhautforschung jedoch spärlich.
Hier beschreiben wir eine Technik zur Entwicklung eines neuartigen Tiermodells zur Untersuchung der Hornhautheilung nach photorefraktiver Keratektomie. Aufgrund der begrenzten Literatur über die Hornhaut von M. unguiculatus beschreiben wir auch eine histologische Analyse der normalen Hornhaut. Diese Forschungstechniken können auch bei der Untersuchung von Augenkrankheiten eingesetzt werden, da die Hornhäute mongolischer Rennmäuse und Menschen in Bezug auf Genetik, Anatomie und Physiologie ähnlich sind.

In der vorliegenden Studie wurde die gesamte Hornhautstruktur mit histologischen Techniken und ergänzenden Untersuchungen des vorderen Segments, wie der optischen Kohärenztomographie, gründlich analysiert. Die Bildanalyse mittels optischer Kohärenztomographie der vorderen Segmentstrukturen zeigt ein normales Epithel und Stroma (Abbildung 1) mit zentralen und peripheren Hornhautdicken von 160 μm bzw. 106 μm ± 2 μm. Andere Publikationen haben auch gezeigt, dass die Hornhaut anderer Nag...

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Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing

Dieser Artikel beschreibt ein neues Tiermodell, das entwickelt wurde, um die Anatomie und Histologie der Hornhaut und ihre Heilungsprozesse zu untersuchen. Dieses neue Tiermodell verwendet die mongolische Rennmaus, die eine Hornhaut mit vielen Ähnlichkeiten mit der menschlichen Hornhaut hat.

Mongolische Rennmäuse als Tiermodell der Wundheilung

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving ...

Frühere Studien zeigen, dass die photorefraktive Keratektomie oder transepitheliale PRK eines der besten Tiermodelle für die Untersuchung der Hornhautheilung ist, und auch für die Veränderungen, die mit dem histopathologischen Debridement der Epithelhornhaut verbunden sind. Die Arbeit mit mongolischen Rennmäusen als Tiermodell hat mehrere Vorteile gegenüber anderen Nagetieren. Erstens hat die Hornhaut die gleichen histologischen Schichten wie die menschliche Hornhaut.Zweitens ist das Auge anatomisch größer als das Auge anderer Nagetiere, was eine einfachere Manipulation ermöglicht. All diese Forschungen wurden in den Einrichtungen des Zentrums für Forschung und Entwicklung in Immunologie und Infektionskrankheiten der Universidad Catolica De Cordoba durchgeführt. Der erste Schritt bestand darin, die Arbeitsfläche des Laminar-Flow-Schranks zu desinfizieren.Zu diesem Zweck wurde 70% Alkohol verwendet. Zu verwendende chirurgische Instrumente. Einwegmaterialien wie Nadeln und Spritzen sowie Medikamente zur Betäubung des Nagetiers wurden im Arbeitsbereich platziert.Ein Einweg-Operationsfeld sollte auch platziert werden, um bei Bedarf Sekrete und Nagetierhaare zu enthalten. Drei sechs Monate alte männliche mongolische Rennmäuse ähnlicher Größe und Gewicht, etwa 90 Gramm wurden in dem Experiment verwendet. Die später durchzuführenden Eingriffe wurden nur an den rechten Augen durchgeführt.Der Käfig mit dem Nagetier wird genommen und in den Laminar-Flow-Schrank gelegt. Wir öffnen die Box, identifizieren jede der Rennmäuse und wiegen sie auf der Waage. Sie sind harmlose, aber empfindliche Tiere.Einweghandschuhe sollten immer getragen werden. Für die richtige Handhabung sollte der Bediener seine ungelernte Hand benutzen, um es fest am Schwanz zu halten, und mit der fachkundigen Hand sanft mit Daumen und Zeigefinger hinter die Ohren drücken, um das Tier zu halten, und mit dem kleinen Finger den Schwanz halten. Basierend auf dem Gewicht des Tieres wird die Menge an Anästhesie berechnet, die für jede der Rennmäuse benötigt wird.Eine Ein-Milliliter-Spritze sollte mit Ketamin gefüllt werden, 50 über 100 Milligramm pro Kilogramm, und Xylazin, zwei Milligramm pro Kilogramm. Vor der Durchführung der optischen Kohärenztomographie wurden sterile OP-Abdecktücher platziert, um die Geräte vor Sekreten oder Tierhaaren zu schützen. Während einer der Bediener das Tier hält, muss ein anderer Bediener die Fänge übernehmen.Das Auge wurde mikroskopisch fotografiert und es wurden mehrere Scheiben vom inneren Segment des Nagetiers gemacht. Die gesamte Hornhaut, die Vorderkammer, die Iris, der iridokorneale Winkel und die Linse, die in die Vorderkammer hineinragt, können beobachtet werden. Zusätzlich wurden zentrale und periphere Hornhautdickenmessungen durchgeführt, die eine zentrale Dicke von 160 Mikrometern zeigten, die in der Peripherie auf etwa 110 Mikrometer abnahm.Vor der Durchführung von Excimer-Laser-PTK wurden sterile chirurgische Abdecktücher platziert, um das Gerät vor Sekreten oder Tierhaaren zu schützen. Zwischen 60 und 62 Mikrometer Hornhautdicke wurden bei einem Durchmesser von drei Millimetern abgetragen. Die Hornhaut wurde fotografiert, um sofortige morphologische Veränderungen zu bewerten.Auf diesem Foto ist der Augapfel des rechten Auges der Rennmaus zu sehen. A, unregelmäßige Oberfläche des normalen Augapfels wird beobachtet. B, Foto, das fünf Minuten nach der PTK-Durchführung aufgenommen wurde und zeigt, dass die Hornhautoberfläche Unregelmäßigkeiten aufweist.Siehe Beweise für das Hornhautgeschwür, das mit Fluorescein gefärbt ist. Auf dem OCT markiert der rechte Pfeil den Bereich, in dem sich Detritus in der Mitte angesammelt hat, und der linke Pfeil markiert den Rand des Hornhautgeschwürs. Die in diesem Experiment verwendete Opfermethode war die Verwendung einer Kohlendioxidkammer.Sie wurden in unterschiedlichen Zeitintervallen geopfert und die Enukleation des normalen Augapfels und die postoperativen Augäpfel wurden 24 und 96 Stunden nach der Operation durchgeführt, um die Hornhautheilung zu beobachten. Jeder enukleierte Augapfel wurde in Formaldehyd gelegt und von einem Pathologen verarbeitet. Es wurden mehrere Schnitte, Messungen und Fotos aufgenommen.Histologisch besteht die Hornhautdicke aus der durch OCT erhaltenen, und es kommt zu einer fortschreitenden Ausdünnung in Richtung Peripherie. Dies liegt daran, dass die Schichten von Epithel- und Stromafasern in der Peripherie abnehmen. Die mongolische Rennmaushornhaut hat die gleichen Schichten wie das menschliche, geschichtete vordere Epithel mit vier bis sechs Zellschichten, die 28% der Gesamtdicke der Hornhaut ausmachen.Bowman-Schicht, Stroma, das 66% der Gesamtdicke ausmacht. Dies zementiert Membran und Endothel. 24 Stunden nach der Operation ist das Hornhautgeschwür dort zu sehen, wo der Pfeil markiert ist.Beobachtete auch mehrere Flecken von epithelialer Achantholyse und isolierten Dyskeratocis, akutem subepithelialem entzündlichem Infiltrat, Ödemen auf Stromaebene. Die Veränderungen, die in der operierten Rennmaus 96 Stunden nach PTK beobachtet wurden, sind das Vorhandensein von erhöhten Ödemen, die Disaggregation von Stromafasern und -zellen, und es sollte beachtet werden, dass das innere Epithel bereits vollständig regeneriert wurde und kein entzündliches Infiltrat darstellte. Die vorliegende Studie zeigt das positive Ergebnis des aktuellen Tiermodells bei Rennmäusen und bestätigt es als neue Forschungsoption in der Hornhautwundheilung.Bis heute gibt es keine Publikationen, die die Anatomie und Histologie der mongolischen Rennmaushornhaut im Detail analysieren. Daher hoffen wir, dass dieses Tiermodell die Grundlage für zukünftige wissenschaftliche Untersuchungen sein wird.

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