Name: mongolian gerbils as an animal model of wound healing
Uploaded: 2023-01-06T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing at JoVE.com

エンジニアのロドリゴ・デ・ラ・フエンテの貴重な支援と技術サポートに感謝します。また、ナレーションを提供してくれたマリア・ユージニア・コルベラと、フィギュアのエディションを提供してくれたプリシラ・ハズルンにも感謝します。ヒューゴ・ルハンは、免疫学および感染症研究開発センター(CIDIE)の施設の使用を許可してくれました。

すべての研究手順は、コルドバカトリカ大学の「実験動物の世話と使用のための機関委員会」によって承認され、実験動物の世話と使用に関する国立研究評議会のガイドに従いました。これらの手続きは、コルドバ・カトリカ大学の「サルード科学部」と「セロ・ビシオン研究所」の当局によっても承認されました。
1.スナネズミの取り扱いと麻酔
<p class="...

<ol>
	<li>Kuo, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+wound+healing.">Corneal wound healing.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 15 (4), 311-315 (2004).</li><li>Agrawal, V. B., Tsai, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+epithelial+wound+healing.">Corneal epithelial wound healing.</a> Indian Journal of Ophthalmology. 51 (1), 5-15 (2003).</li><li>Lu, L., Reinach, P. S., Kao, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+epithelial+wound+healing.">Corneal epithelial wound healing.</a> Experimental Biology and Medicine. 226 (7), 653-664 (2001).</li><li>Rathi, V. M., Vyas, S. P., Sangwan, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototherapeutic+keratectomy.">Phototherapeutic keratectomy.</a> Indian Journal of Ophthalmology. 60 (1), 5-14 (2012).</li><li>Baumeister, M., B&#252;hren, J., Ohrloff, C., Kohnen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+re-epithelialization+following+phototherapeutic+keratectomy+for+recurrent+corneal+erosion+as+in+vivo+model+of+epithelial+wound+healing.">Corneal re-epithelialization following phototherapeutic keratectomy for recurrent corneal erosion as in vivo model of epithelial wound healing.</a> Ophthalmologica. 223 (6), 414-418 (2009).</li><li>Fagerholm, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototherapeutic+keratectomy:+12+years+of+experience.">Phototherapeutic keratectomy: 12 years of experience.</a> Acta Ophthalmologica Scandinavica. 81 (1), 19-32 (2003).</li><li>Mohan, R. R., Stapleton, W. M., Sinha, S., Netto, M. V., Wilson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+generating+corneal+haze+in+anterior+stroma+of+the+mouse+eye+with+the+excimer+laser.">A novel method for generating corneal haze in anterior stroma of the mouse eye with the excimer laser.</a> Experimental Eye Research. 86 (2), 235-240 (2008).</li><li>Shah, D., Aakalu, V. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+corneal+epithelial+wound+modeling.">Murine corneal epithelial wound modeling.</a> Methods in Molecular Biology. 2193, 175-181 (2021).</li><li>Zorio, D. A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=De+novo+sequencing+and+initial+annotation+of+the+Mongolian+gerbil+(Meriones+unguiculatus)+genome.">De novo sequencing and initial annotation of the Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus) genome.</a> Genomics. 111 (3), 441-449 (2019).</li><li>Kalha, S., Kuony, A., Michon, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+epithelial+abrasion+with+ocular+burr+as+a+model+for+cornea+wound.">Corneal epithelial abrasion with ocular burr as a model for cornea wound.</a> Journal of Visualized Experiments. (137), e58071 (2018).</li><li>Yang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electroretinogram+of+Mongolian+gerbil+(Meriones+unguiculatus.):+Comparison+to+mouse.">The electroretinogram of Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus.): Comparison to mouse.</a> Neuroscience Letters. 589, 7-12 (2015).</li><li>Baker, A. G., Emerson, V. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Grating+acuity+of+the+Mongolian+gerbil+(Meriones+unguiculatus).">Grating acuity of the Mongolian gerbil (Meriones unguiculatus).</a> Behavioural Brain Research. 8 (2), 195-209 (1983).</li><li>Govardovskii, V. I., R&#246;hlich, P., Sz&#233;l, A., Khokhlova, T. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cones+in+the+retina+of+the+Mongolian+gerbil,+Meriones+unguiculatus:+An+immunocytochemical+and+electrophysiological+study.">Cones in the retina of the Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus: An immunocytochemical and electrophysiological study.</a> Vision Research. 32 (1), 19-27 (1992).</li><li>Zanandr&#233;a, L. I., Oliveira, G. M., Abreu, A. S., Pereira, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+lesions+in+gerbils+(Meriones+unguiculatus)+infected+with+low+larval+burden+of+Toxocara+canis:+Observations+using+indirect+binocular+ophthalmoscopy.">Ocular lesions in gerbils (Meriones unguiculatus) infected with low larval burden of Toxocara canis: Observations using indirect binocular ophthalmoscopy.</a> Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical. 41 (6), 570-574 (2008).</li><li>Cheng, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+de+novo+sequencing,+assembly+and+annotation+of+the+Mongolian+gerbil+genome+with+transcriptome+sequencing+and+assembly+from+several+different+tissues.">Enhancement of de novo sequencing, assembly and annotation of the Mongolian gerbil genome with transcriptome sequencing and assembly from several different tissues.</a> BMC Genomics. 20 (1), 903 (2019).</li><li>Henriksson, J. T., McDermott, A. M., Bergmanson, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimensions+and+morphology+of+the+cornea+in+three+strains+of+mice.">Dimensions and morphology of the cornea in three strains of mice.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 50 (8), 3648-3654 (2009).</li><li>Panagiotopoulos, M., Gan, L., Fagerholm, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroma+remodelling+during+healing+of+corneal+surface+irregularities+induced+by+PTK.">Stroma remodelling during healing of corneal surface irregularities induced by PTK.</a> Acta Ophthalmologica Scandinavica. 85 (4), 387-394 (2007).</li></ol>

角膜創傷治癒の生理機能は、組織再生と恒常性の維持との間のバランスである。過度の創傷治癒は線維症や瘢痕化につながる可能性があり、最終的には臓器機能が失われる可能性があります。角膜外科手術の急速な進化に伴い、角膜創傷治癒とそれに伴う生理学的および病理学的事象を理解することの重要性を過大評価することはできません11。 
複数?...

前眼部手術の重要な関心事である角膜創傷治癒の最も重要な側面のいくつかは、上皮構造の完全性、角膜間質の透明性の維持、そして最後に角膜の屈折特性の観点からの結果です1。
角膜は眼球の前面にある最も外側の透明な組織であるため、外傷、感染症、火傷の影響を受けやすいです。これらの創傷の治癒障害は、視覚の健康を損なう可能性があります2。
現在、角膜治癒を研究するためにいくつかの動物モデルが利用可能であり、それらのいくつかは、研究される種およびメカニズムの種類に応じて、他のものよりも優れています1。スナネズミ2の網膜に関する以前の調査の記録がいくつかあります。しかし、これまでのところ、これらのげっ歯類の角膜の瘢痕化プロセスに関する発表された文献はありません。
本稿では,角膜創傷治癒の動物モデルとしてメ リオネス・ウンギキュラトゥ ス(モンゴルスナネズミ)を紹介する.フォトリフラクティブ角膜切除術後に角膜治癒を誘発する手順を説明し、さまざまな種類の角膜瘢痕化プロセスを研究し、生体組織の動的段階の観点から創傷治癒を理解し、最後に適切な将来の治療を計画することができます3。光線療法用角膜切除術は再現性の高い技術であり、角膜損傷の深さや直径などのパラメータを正確に制御できる可能性があります4。さらに、この技術は、器具または処置を行うオペレータに特有の変数を追加し得る手術器具または化学溶液(例えば、生理食塩水、ホルマリン、アルコールなど)を用いた処置を必要としない5。
この記事で紹介した実験には、同様のサイズと体重(約90 g)の生後6か月のオスのスナネズミ3匹を使用しました。手順は右目でのみ行われました。1匹のスナネズミ(スナネズミ1またはコントロールと呼ばれる)は光線療法の角膜切除術を受けておらず、すべての正常な眼構造を評価するために除核されました。光線療法用角膜切除術は、エキシマレーザーで生成された紫外線を角膜に制御して送達することを含み、屈折矯正手術を行うために開発されました6。マウス7などの他のげっ歯類に使用されています。他の2匹のスナネズミは光線療法の角膜切除術を受けました。そのうちの1人は手術後24時間で除核され(スナネズミ2と呼ばれる)、もう1人は手術後96時間で除核されました(スナネズミ3と呼ばれます)。
この実験を行うため、研究する条件ごとに無作為に選抜したスナネズミを撮影したが、この実験は予め各条件につき合計16匹のスナネズミで行った。編集上の理由から、例として各条件(合計3匹のスナネズミ)にランダムに選択されたスナネズミを使用することが決定されました。
この研究の主な目的は、利用可能な最良の動物モデルを探索することです。ただし、すべての種が人間の目と同様の目の特徴を持っているわけではないことに注意することが重要です8。この記事では、 Meriones unguiculatus の角膜を研究するために使用される方法論と、角膜損傷を生成するために実行される手順について説明します。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tubes</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excimer Laser</td>
			<td>Technolas</td>
			<td>2022445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein</td>
			<td>Poen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Ofcor</td>
			<td>3339</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical coherence tomography</td>
			<td>Optovue</td>
			<td>659007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proparacaine</td>
			<td>Poen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scisors</td>
			<td>Ofcor</td>
			<td>3336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile drapes</td>
			<td>Soporte hospitalario</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauzes</td>
			<td>Soporte hospitalario</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes and needles</td>
			<td>Tododrogas</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mongolian gerbils as an animal model of wound healing

角膜創傷治癒研究は長い間行われており、苦痛を軽減し、患者の目の健康を改善するのに役立つ治療法を開発するのに役立ちました。歴史的に、角膜治癒はマウスやラットなどのげっ歯類で研究されてきましたが、これらのモデルは人間の障害を完全に模倣していない可能性があります。しかし、モンゴルスナネズミ(Meriones unguiculatus)などの他のげっ歯類に関する情報は、角膜研究では乏しい。
ここでは、フォトリフラクティブ角膜切除術後の角膜治癒を研究するための新規動物モデルを開発する技術について述べる。 M. unguiculatusの角膜に関する文献が限られているため、正常な角膜の組織学的分析についても説明します。これらの研究技術は、遺伝学、解剖学、生理学の点でモンゴルスナネズミと人間の角膜が類似しているため、眼疾患の研究にも採用できます。

本研究では、組織学的手法と光干渉断層撮影などの前部セグメントの補完的研究を使用して、角膜構造全体を徹底的に分析しました。前部構造の光干渉断層撮影による画像解析では、上皮と間質が正常であり(図1)、角膜の中心厚さは160 μm、末梢の厚さはそれぞれ106 μm±2 μmです。他の刊行物も、他のげっ歯類の角膜が周辺10に向かって薄くなることを?...

Watch this Scientific Journal Video about Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing at JoVE.com

Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing

この記事では、角膜の解剖学と組織学、およびその治癒過程を研究するために開発された新しい動物モデルについて説明します。この新しい動物モデルは、ヒトの角膜と多くの類似点を持つ角膜を持つモンゴルスナネズミを使用しています。

創傷治癒の動物モデルとしてのモンゴルスナネズミ

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving ...

以前の研究は、フォトリフラクティブ角膜切除術または経上皮PRKが、角膜治癒の研究、および上皮角膜の組織病理学的創面切除に関連する変化のための最良の動物モデルの1つであることを示しています。動物モデルとしてモンゴルのスナネズミを扱うことは、他のげっ歯類に比べていくつかの利点があります。第一に、角膜はヒトの角膜と同じ組織層を有する。第二に、目は他のげっ歯類の目よりも解剖学的に大きく、操作が容易になります。この研究はすべて、コルドバ大学の免疫学および感染症研究開発センターの施設で実施されました。最初のステップは、層流キャビネットの作業面を消毒することでした。この目的のために、70%アルコールが使用されました。使用する手術器具。針や注射器などの使い捨て材料、およびげっ歯類を麻酔するための薬物が作業エリアに配置されました。必要に応じて、使い捨ての手術野も分泌物やげっ歯類の毛を含むように配置する必要があります。同様のサイズと体重の3つの6ヶ月齢のオスのモンゴルスナネズミ、約90グラムを実験に使用しました。後で行う手順は右目のみで行われました。げっ歯類の入ったケージを取り出し、層流キャビネット内に配置します。箱を開け、スナネズミのそれぞれを識別し、体重計で計量します。彼らは無害ですが繊細な動物です。使い捨て手袋は常に着用する必要があります。それを正しく取り扱うために、オペレーターは熟練していない手で尾をしっかりと保持し、熟練した手で耳の後ろの親指と人差し指でそっと押し下げて動物を保持し、小指で尾を持ちます。動物の体重に基づいて、各スナネズミに必要な麻酔の量が計算されます。1ミリリットルの注射器には、1キログラムあたり100ミリグラムを超えるケタミンが50個、1キログラムあたり2ミリグラムのキシラジンが充填されます。光干渉断層撮影を行う前に、分泌物または獣毛から機器を保護するために滅菌外科用ドレープを配置した。オペレーターの1人が動物を保持している間、別のオペレーターが捕獲する必要があります。眼は顕微鏡で撮影され、げっ歯類の内部セグメントから複数のスライスが作られました。角膜全体、前房、虹彩、虹彩角膜角および前房に突出する水晶体が観察される。さらに、中心および末梢の角膜の厚さの測定が行われ、160マイクロメートルの中心の厚さが周辺で約110マイクロメートルに減少することを示しました。エキシマレーザーPTKを行う前に、無菌の外科用ドレープを、分泌物または獣毛から機器を保護するために配置した。60〜62マイクロメートルの角膜の厚さを直径3ミリメートルで切除した。角膜は、即時の形態学的変化を評価するために撮影されました。この写真では、スナネズミの右目の眼球を見ることができます。A、正常眼球の不規則な表面が観察される。Bは、PTKが行われた5分後に撮影した写真で、角膜表面に凹凸があることを示す。フルオレセインで染色された角膜潰瘍の証拠を参照してください。OCTでは、右矢印は中央に残骸が蓄積した領域を示し、左矢印は角膜潰瘍の縁を示します。この実験で使用された犠牲の方法は、二酸化炭素室の使用によるものでした。それらは異なる時間間隔で屠殺され、正常な眼球の摘出が行われ、術後眼球は角膜治癒を観察するために術後24時間および96時間に行われました。除核された各眼球をホルムアルデヒドに入れ、病理学者によって処理した。複数のセクション、測定、写真が撮影されました。組織学的には、角膜の厚さはOCTによって得られたものからなり、末梢に向かって漸進的な菲薄化があります。これは、上皮および間質線維の層が末梢で減少するためです。モンゴルスナネズミの角膜は、ヒトと同じ層状の前上皮を持ち、角膜の全厚さの28%を占める4〜6層の細胞があります。ボーマン層、間質は総厚の66%を表す。これは膜と内皮を固めます。術後24時間で、角膜潰瘍が矢印のマークされた場所に見られます。また、上皮性アカントリシスおよび孤立した角化異常症、急性上皮下炎症浸潤、間質レベルでの浮腫の複数のパッチが観察された。PTK後96時間で手術されたスナネズミにおいて観察された変化は、浮腫の増加の存在、間質線維および細胞の脱凝集、ならびに内部上皮がすでに完全に再生され、炎症性浸潤を示さなかったことに留意すべきである。本研究は、スナネズミにおける現在の動物モデルの肯定的な結果を示し、角膜創傷治癒における新しい研究オプションとしてそれを確認しました。今日まで、モンゴルのスナネズミ角膜の解剖学と組織学を詳細に分析した出版物はありません。したがって、この動物モデルが将来の科学的調査の基礎となることを願っています。

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

虚血性創傷モデルを作製するための簡略化手法

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

医学

Murine Model of Wound Healing

創傷治癒のマウスモデル

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

マウス内視鏡検査のため<em&gt;インビボ</em&gt;発がんと腸の評価のマルチモーダルイメージング創傷治癒および炎症

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

ラット虚血皮膚創傷モデルの実証

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

Bioluminescence Imaging of an Immunocompetent Animal Model for Glioblastoma

神経膠芽腫のための免疫担当動物モデルの生物発光イメージング

In contrast to commonly reported human glioma xenograft animal models, GL261 murine glioma xenografts recapitulate nearly all relevant clinical and ...

Multimodal Quantitative Phase Imaging with Digital Holographic Microscopy Accurately Assesses Intestinal Inflammation and Epithelial Wound Healing

デジタルホログラフィック顕微鏡とマルチモーダル定量位相イメージングは​​、正確に腸の炎症および上皮創傷治癒を評価します

The incidence of inflammatory bowel disease, i.e., Crohn&#39;s disease and Ulcerative colitis, has significantly increased over the last decade. The ...

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell (ASC) Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell ASC Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

作成および糖尿病創傷治癒モデルにおける脂肪由来幹細胞 (ASC) シートの移植

Artificial skin has achieved considerable therapeutic results in clinical practice. However, artificial skin treatments for wounds in diabetic patients ...

Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice

歯髄の評価のための直接覆髄モデルの開発、創傷治癒およびマウスにおける修復象牙質形成

Dental pulp is a vital organ of a tooth fully protected by enamel and dentin. When the pulp is exposed due to cariogenic or iatrogenic injuries, it is ...

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During In Vitro Wound Healing

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During  In Vitro Wound Healing

顕微鏡法によるIn Vitro創傷が治癒過程における上皮移行の評価

Cell migration is a mandatory aspect for wound healing. Creating artificial wounds on research animal models often results in costly and complicated ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

ワイヤー図法を使用してマウスの腸間膜動脈の等尺性収縮力測定

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...