Name: osmotic pump-based drug-delivery for in vivo remyelination research on the central nervous system
Uploaded: 2021-12-17T14:00:00
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이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (NSFC 32070964, 31871045)에서 J.N.과 심천 기본 연구 재단 (JCYJ20210324121214039)에서 Y.S.에 대한 보조금으로 지원되었습니다.

모든 동물 절차는 세 번째 군사 의과 대학의 동물 복지 및 윤리위원회에서 승인 한 제도적 지침 및 프로토콜에 따라 수행되었습니다.
1. 리솔레시틴-유도된 탈수초화 마우스 모델의 확립
<ol><li>멸균 PBS로 1% 리솔시틴(L-α-Lysophosphatidylcholine이라고도 함) 용액을 준비합니다.</li>
	<li>오토클레이브 살균으로 가위, 집게, 구부러진 지혈제 및 기타 수술 도구를 살균하십?...

<ol>
	<li>Theeuwes, F., Yum, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+the+design+and+operation+of+generic+osmotic+pumps+for+the+delivery+of+semisolid+or+liquid+drug+formulations.">Principles of the design and operation of generic osmotic pumps for the delivery of semisolid or liquid drug formulations.</a> Annals of Biomedical Engineering. 4 (4), 343-353 (1976).</li><li>Herrlich, S., Spieth, S., Messner, S., Zengerle, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmotic+micropumps+for+drug+delivery.">Osmotic micropumps for drug delivery.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 64 (14), 1617-1627 (2012).</li><li>Wei, E., Loh, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+dependence+of+opiate-like+peptides.">Physical dependence of opiate-like peptides.</a> Science. 193 (4259), 1262-1263 (1976).</li><li>Pettigrew, J. D., Kasamatsu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+perfusion+of+noradrenaline+maintains+visual+cortical+plasticity.">Local perfusion of noradrenaline maintains visual cortical plasticity.</a> Nature. 271 (5647), 761-763 (1978).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduced+oligodendrocyte+precursor+cell+impairs+astrocytic+development+in+early+life+stress.">Reduced oligodendrocyte precursor cell impairs astrocytic development in early life stress.</a> Advanced Science (Weinheim). 8 (16), 2101181 (2021).</li><li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+behave+as+a+functional+niche+for+the+maturation+of+newborn+neurons+through+the+secretion+of+PTN.">Neural stem cells behave as a functional niche for the maturation of newborn neurons through the secretion of PTN.</a> Neuron. 101 (1), 32-44 (2019).</li><li>Watanabe, S., Komine, O., Endo, F., Wakasugi, K., Yamanaka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebroventricular+administration+of+Cystatin+C+ameliorates+disease+in+SOD1-linked+amyotrophic+lateral+sclerosis+mice.">Intracerebroventricular administration of Cystatin C ameliorates disease in SOD1-linked amyotrophic lateral sclerosis mice.</a> Journal of Neurochemistry. 145 (1), 80-89 (2018).</li><li>DeVos, S. L., Miller, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+intraventricular+delivery+of+drugs+to+the+rodent+central+nervous+system.">Direct intraventricular delivery of drugs to the rodent central nervous system.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. , e50326 (2013).</li><li>Tang, C., Guo, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+a+mini-osmotic+pump+plus+stereotactical+injection+of+retrovirus+to+study+newborn+neuron+development+in+adult+mouse+hippocampus.">Implantation of a mini-osmotic pump plus stereotactical injection of retrovirus to study newborn neuron development in adult mouse hippocampus.</a> STAR Protocols. 2 (1), 100374 (2021).</li><li>Niu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligodendroglial+ring+finger+protein+Rnf43+is+an+essential+injury-specific+regulator+of+oligodendrocyte+maturation.">Oligodendroglial ring finger protein Rnf43 is an essential injury-specific regulator of oligodendrocyte maturation.</a> Neuron. 109 (19), 3104-3118 (2021).</li><li>Breitschopf, H., Suchanek, G., Gould, R. M., Colman, D. R., Lassmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+hybridization+with+digoxigenin-labeled+probes:+sensitive+and+reliable+detection+method+applied+to+myelinating+rat+brain.">In situ hybridization with digoxigenin-labeled probes: sensitive and reliable detection method applied to myelinating rat brain.</a> Acta Neuropathologica. 84 (6), 581-587 (1992).</li><li>Cree, B. A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clemastine+rescues+myelination+defects+and+promotes+functional+recovery+in+hypoxic+brain+injury.">Clemastine rescues myelination defects and promotes functional recovery in hypoxic brain injury.</a> Brain. 141 (1), 85-98 (2018).</li><li>Eckenhoff, B., Yum, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+osmotic+pump:+novel+research+tool+for+optimizing+drug+regimens.">The osmotic pump: novel research tool for optimizing drug regimens.</a> Biomaterials. 2 (2), 89-97 (1981).</li><li>Thoenen, H., Sendtner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophins:+from+enthusiastic+expectations+through+sobering+experiences+to+rational+therapeutic+approaches.">Neurotrophins: from enthusiastic expectations through sobering experiences to rational therapeutic approaches.</a> Nature Neuroscience. 5, 1046-1050 (2002).</li><li>Hagg, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebral+infusion+of+neurotrophic+factors.">Intracerebral infusion of neurotrophic factors.</a> Methods in Molecular Biology. 399, 167-180 (2007).</li><li>Bittner, B., Thelly, T., Isel, H., Mountfield, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+co-solvents+and+the+composition+of+experimental+formulations+on+the+pump+rate+of+the+ALZET+osmotic+pump.">The impact of co-solvents and the composition of experimental formulations on the pump rate of the ALZET osmotic pump.</a> International Journal of Pharmaceutics. 205 (1-2), 195-198 (2000).</li><li>Arnot, M. I., Bateson, A. N., Martin, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimethyl+sulfoxide/propylene+glycol+is+a+suitable+solvent+for+the+delivery+of+diazepam+from+osmotic+minipumps.">Dimethyl sulfoxide/propylene glycol is a suitable solvent for the delivery of diazepam from osmotic minipumps.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 36 (1), 29-31 (1996).</li><li>Gullapalli, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+ALZET+osmotic+pump+compatible+solvent+compositions+to+solubilize+poorly+soluble+compounds+for+preclinical+studies.">Development of ALZET osmotic pump compatible solvent compositions to solubilize poorly soluble compounds for preclinical studies.</a> Drug Delivery. 19 (5), 239-246 (2012).</li><li>White, J. D., Schwartz, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+osmotic+minipumps+for+intracranial+delivery+of+amino+acids+and+peptides.">Using osmotic minipumps for intracranial delivery of amino acids and peptides.</a> Methods in Neurosciences. 21, 187-200 (1994).</li></ol>

이 프로토콜은 삼투압 펌프를 미엘린 재생 연구를위한 새로운 약물 전달 기술로 설명하며, 이는 약물을 치료 부위에 직접 전달하고 장기간 일관된 약물 전달을 허용하여 전체 실험 기간 동안 중추 신경계의 미세 환경에서 안정적인 약물 농도를 창출 할 수 있습니다. 다른 약물 전달 방법과 비교하여, 삼투압 펌프는 탈수초화 병변(13)에서 약물 농도를 유지하는 데 더 도움이 된다....

삼투 펌프는 작은 이식 가능한 용액 방출 장치입니다. 그것은 피하 또는 복강에 이식 할 때 전신 전달에 사용할 수 있습니다. 삼투 펌프의 표면은 반투과성 막이고 안쪽은 투과성 층입니다. 삼투압 펌프는 삼투층과 펌프가 이식되는 조직 환경 사이의 삼투압 차이를 이용하여 작동한다. 삼투층의 높은 삼투압은 조직 내의 물이 펌프 표면의 반투과성 막을 통해 삼투층으로 흐르게 한다. 삼투층은 펌프 내부의 유연한 저장소를 팽창시키고 압축하여 오랜 기간 동안 유연한 저장소에서 용액을 특정 속도로 대체합니다1. 펌프는 세 가지 다른 저장소 부피, 100 μL, 200 μL 및 2 mL를 가지며, 전달 속도는 0.11 μL/h에서 10 μL/h까지 다양합니다. 선택한 펌프 유형에 따라 장치는 1 일에서 6 주2까지 작동 할 수 있습니다. 이 프로토콜에서는 14일 동안 작동할 수 있는 0.25μL/h의 이송 속도를 갖는 100μL 삼투 펌프가 사용됩니다.
1970 년대로 거슬러 올라가면, 삼투 펌프는 신경 과학 연구 3,4에 사용되었습니다. 예를 들어, Wei et al.은 약물 중독에 대한 연구에서 오피오이드 펩티드를 심실에 주입하는 삼투 펌프 접근법을 채택했습니다 3. 지속적인 개선 후, 삼투 펌프는 이제 펩티드, 성장 인자, 중독성 약물, 호르몬, 스테로이드, 항체 등을 포함한 수천 가지 약물의 조절 된 전달에 대한 연구에 사용되었습니다. 또한 특수 카테터 (뇌 주입 키트)가 부착되어 있으면 척수, 뇌, 비장 및 간 5,6,7을 포함한 특정 조직 또는 장기에 표적 주입에 사용할 수 있습니다.
수초화에 대한 연구에서, 많은 약물들이 시험관 내에서 미엘린 재생을 촉진하는 것으로 밝혀졌지만, 대부분은 적절한 투여 방법의 부족으로 인해 생체내에서 유의한 효과를 달성하지 못했다. 복강내 주사, 피하주사, 위내 투여와 같은 전통적인 투여 방법은 약물의 생체이용률에 한계가 있다. 또한 일부 약물은 혈액 뇌 장벽 투과성이 좋지 않아 뇌 실질에 대한 접근을 방해합니다. 함께, 이러한 한계는 새로운 효율적인 전달 방법을 요구합니다. 뇌 주입 키트와 함께 삼투 펌프는 혈액 - 뇌 장벽을 우회하여 코퍼스 캘로섬에 직접 약물을 전달할 수 있으므로 약물의 생체 이용률을 효과적으로 향상시킬 수 있으며, 특히 반감기가 짧은 일부 폴리펩티드 및 단백질 약물의 경우 특히 그렇습니다. 따라서, 새로운 약물 전달 기술로서 삼투압 펌프는 중추신경계 미엘린 재생 연구 분야에 큰 가치를 지닌다. 이 기술의 적용은 아래에서 상세히 소개될 것이다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anesthesia Air Pump</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R510-29</td>
			<td>E05818-006</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brain Infusion kit 3</td>
			<td>ALZET</td>
			<td>0008851</td>
			<td>1-3 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Macklin</td>
			<td>C830557-1g</td>
			<td>5 mg/kg every 24 h</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erythromycin eye ointment</td>
			<td>Along technology</td>
			<td>YCKJ-RJ-024780</td>
			<td>Cover the surface of the eyeballs during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erythromycin ointment</td>
			<td>pythonbio</td>
			<td>RG180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas Evacuation Apparatus</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R546W</td>
			<td>E05518-002</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-&#945;-Lysophosphatidylcholine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L0906</td>
			<td>Dissolve at 1% with sterile PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter Syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>65460-05</td>
			<td>Syringe Series:1700, 10 &#181;L, 33 gauge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-smotic pump model 1002</td>
			<td>ALZET</td>
			<td>0004317</td>
			<td>0.25 &#181;L per hour, 14 days</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (pH = 7.3)</td>
			<td>ORIGENE</td>
			<td>ZLI-9061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Shanghai Civi</td>
			<td>CAS NO: 57-33-0</td>
			<td>150-200 mg/kg intraperitoneal injection for euthanasia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal Anesthesia Machine</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R520IE</td>
			<td>E05807-006 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotaxic Equipment</td>
			<td>RWD</td>
			<td>E06382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>STERI 250 sterilizer</td>
			<td>Keller</td>
			<td>31101</td>
			<td>Rapid sterilization of surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical sutures</td>
			<td>Shanghai jinhuan</td>
			<td>F504</td>
			<td>5-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe needle (1 mL)</td>
			<td>Shanghai KDL</td>
			<td>6930197811018</td>
			<td>26 gauge (0.45 mm x 16 mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Testing drug and solvent</td>
			<td>Experiment dependent</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ThermoStar Homeothermic Monitoring System</td>
			<td>RWD</td>
			<td>69026</td>
			<td>Maintain body temperature during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond Tissue adhesive</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>Secure the brain infusion cannula , Adhere the skin incision</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

osmotic pump-based drug-delivery for in vivo remyelination research on the central nervous system

탈수초화는 다발성 경화증 (MS)뿐만 아니라 알츠하이머 병 및 자폐증과 같은 다른 중추 신경계 질환에서도 확인되었습니다. 수초화가 질병 증상을 효과적으로 개선 할 수 있다는 증거가 시사됨에 따라 미엘린 재생 과정을 촉진하기위한 약물 개발에 대한 관심이 증가하고 있습니다. 따라서, 생체내에서 이들 약물의 효율 및 특이성을 시험하기 위해 영역-선택가능 및 결과-신뢰할 수 있는 약물 전달 기술이 요구된다. 이 프로토콜은 리솔레시틴-유도된 탈수초화 마우스 모델에서 새로운 약물 전달 접근법으로서 삼투압 펌프 임플란트를 도입한다. 삼투 펌프는 혈액 뇌 장벽 (BBB)을 우회하여 마우스 뇌의 특정 영역에 약물을 꾸준히 직접 전달할 수있는 작은 이식 가능한 장치입니다. 또한 짧은 반감기로 펩타이드 및 단백질과 같은 약물의 생체 이용률을 효과적으로 향상시킬 수 있습니다. 따라서이 방법은 중추 신경계 미엘린 재생 연구 분야에 큰 가치가 있습니다.

미엘린 재생 연구에서 삼투압 펌프의 효과를 검증하기 위해, P56 마우스에서 리솔레시틴-유도 탈수초화 모델을 만든 다음, UM206(1.5 mL 0.9% 식염수 중 1 mg)을 함유하는 삼투압 펌프를 이식한 후, 반감기가 짧고 BBB 투과성이 떨어지는 펩티드가 최근 수초화를 촉진한다고 보고되었다10 . 0.9% 식염수를 대조군으로 사용하였다. 모델 확립 후 14일 후, 마우스를 4% 포름알데히드로 경심 관류?...

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Osmotic Pump-based Drug-delivery for In Vivo Remyelination Research on the Central Nervous System

탈수초화는 여러 중추 신경계 질환에서 발생합니다. 신뢰할 수 있는 생체 내 약물 전달 기술은 약물 검사를 재수초화하는 데 필요합니다. 이 프로토콜은 뇌실질로 직접 장기간 약물 전달을 허용하고 약물 생체 이용률을 향상시키는 삼투압 펌프 기반 방법을 설명하며 수초화 연구에 광범위하게 적용됩니다.

중추 신경계에 대한 생체 내 수초화 연구를위한 삼투압 펌프 기반 약물 전달

Demyelination has been identified in not only multiple sclerosis (MS), but also other central nervous system diseases such as Alzheimer's disease and ...

삼투압 펌프는 미엘린 재생 연구, 특히 반감기가 짧고 혈액 뇌 장벽 투과성이 좋지 않으며 다양한 말초 부작용이있는 약물에 큰 가치가 있습니다. 삼투압 펌프는 혈액 뇌 장벽을 우회하여 코퍼스 캘로섬에 직접 약물을 전달할 수 있으며, 이는 특히 반감기가 짧은 일부 약물의 경우 약물의 생체 이용률을 효과적으로 향상시킵니다. 시작하려면 마취 된 마우스의 머리를 치아 막대와 이어 바가있는 입체 택시 장치에 고정하십시오.수술 부위를 제외한 동물의 몸을 덮으십시오. 메스를 사용하여 목 바닥에서 눈 사이까지 피부를 한 센티미터 길이의 중간 시상 절개하여 두개골을 노출시킵니다. 30% 과산화수소가 들어있는 면봉을 사용하여 두개골 표면을 부드럽게 닦아 두개골 구조를 시각화합니다.치아 막대와 이어 바의 높이를 조정하여 람다 점과 브레그마 점을 같은 높이에 배치하십시오. 10 마이크로리터 및 33 게이지 주사기 바늘의 끝을 브레그마 지점에 부드럽게 놓고 X, Y 및 Z 좌표를 0으로 재설정합니다. 주사기를 주사 부위로 옮깁니다.하나의 마이크로 리터 26 게이지와 0.45 밀리미터 주사기 바늘로 경막을 관통하지 않고 주사 부위의 두개골을 통해 작은 버 구멍을 천천히 뚫습니다. 특정 깊이에 도달 할 때까지 구멍을 통해 마이크로 리터 주사기 바늘을 뇌 조직에 천천히 삽입하십시오. 1.5 마이크로 리터의 1 % 리솔레시틴을 분당 0.5 마이크로 리터의 속도로 주입하십시오.주사기를 꺼내기 전에 5 분 동안 기다렸다가 5-0 개의 수술 봉합사로 피부를 꿰매십시오. 수술을받은 마우스를 케이지에 혼자 놓고 수술 후 매일 마우스를 모니터링하십시오. 조직 접착제로 뇌 주입 캐뉼라의 바늘에 세 개의 깊이 조절 스페이서를 부착하여 캘로섬에 가까운 1.5 밀리미터의 주사 깊이를 달성하십시오.시린지 바늘을 펌프 패키지로 한 밀리리터 주사기에 부착하여 삼투압 펌프를 채우고 약물을 흡인한다. 펌프를 똑바로 세운 자세로 잡으십시오. 주사기를 펌프 상단의 개구부에 삽입하고 기포를 만들지 않고 천천히 약물을 주입하십시오.액체가 개구부에서 흘러 나올 때 주사기를 천천히 꺼냅니다. 가위 또는 펜치를 사용하여 유량 조절기에서 흰색 플랜지를 제거합니다. 흐름 중재자를 펌프에 삽입합니다.삼투 펌프에 기포가 있는지 여부를 확인하려면 충전 전후에 삼투 펌프를 별도로 칭량하십시오. 동물의 크기에 따라 카테터를 필요한 길이로 다듬습니다. 카테터를 뇌 주입 캐뉼라에 부착하십시오.카테터에 공기를 도입하지 않고 주사기를 사용하여 약물을 채 웁니다. 카테터를 유동 중재자에 연결하여 노출된 유량 중재자의 약 네 밀리미터를 덮도록 합니다. 채워진 펌프를 섭씨 37도에서 멸균 0.9% 식염수 또는 PBS에 적어도 네 시간에서 여섯 시간 동안 담그십시오.구현 후 하룻밤 사이에 확장하는 것을 선호합니다. 마우스를 입체 택시 장치에 다시 고정시킵니다. 이전에 꿰매어 놓은 외과 절개를 열고 절개를 어깨 뼈까지 확장하십시오.견갑골의 피하 결합 조직으로부터 피부를 분리하고, 지혈 펜치 또는 핀셋을 사용하여 공동을 열고 삼투 펌프를 공동에 넣습니다. 면봉으로 탈수초화 모델을 수립할 때 생성된 두개골 표면의 핀 구멍을 부드럽게 닦아내고 노출시킵니다. 핀홀을 통해 뇌 주입 캐뉼라를 수직으로 삽입하고 조직 접착제로 두개골에 고정하십시오.한 쌍의 가위로 뇌 주입 캐뉼라 위의 이동식 탭을 떼어냅니다. 절개를 바늘로 꿰매거나 조직 접착제로 부착하십시오. 수술 후 동물을 혼자 새장에 넣으십시오.시행을 수행 한 후 DAPI 염색은 뇌 조직의 핀홀이 백질 바로 위에 놓여 있음을 밝혀 삼투 펌프의 뇌 주입 캐뉼라를 성공적으로 구현했음을 나타냅니다. 성숙한 희소덴드로사이트 마커인 MAG 프로브와 함께 계내 혼성화 실험을 수행하였고 새로 분화된 희소돌기아교세포를 표지하기 위해 사용하였다. 그 결과, UM206 처리는 대조군보다 탈수초 영역에서 더 많은 MAG 양성 세포를 산출하였다.탈수초화 영역의 투과 전자 현미경 검사는 대조군에 비해 UM206 처리군에서 수초화 축색돌기의 수가 증가한 것으로 나타났으며, 이는 UM206이 더 높은 수준의 재수초화를 유도함을 시사한다. 삼투압 펌프를 준비 할 때 시스템에 거품이 생기지 않도록주의하십시오.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Osmotic Pump-based Drug-delivery for In Vivo Remyelination Research on the Central Nervous System

Systemic and Local Drug Delivery for Treating Diseases of the Central Nervous System in Rodent Models

쥐 모델에서 중추 신경계의 질병 치료를위한 체계와 지역 마약 배달

Thorough preclinical testing of central nervous system (CNS) therapeutics includes a consideration of routes of administration and agent biodistribution ...

연구

신경과학

Multimodal Imaging of Stem Cell Implantation in the Central Nervous System of Mice

마우스의 중추 신경계에서 줄기 세포 주입의 Multimodal 이미징

During the past decade, stem cell transplantation has gained increasing interest as primary or secondary therapeutic modality for a variety of diseases, ...

Production of Lentiviral Vectors for Transducing Cells from the Central Nervous System

중추 신경계에서 Transducing 전지 Lentiviral 벡터 제작

Efficient gene delivery in the central nervous system (CNS) is important in studying gene functions, modeling neurological diseases and developing ...

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

의 중추 신경계에 단일 세포의 라벨<em&gt; Drosophila melanogaster</em

In this  article we describe how to individually label neurons in the embryonic CNS of Drosophila melanogaster by juxtacellular injection of the ...

An Injury Paradigm to Investigate Central Nervous System Repair in Drosophila

An Injury Paradigm to Investigate Central Nervous System Repair in Drosophila

에 중추 신경 시스템 복구를 조사하기 위해 상해 패러다임<em&gt; Drosophila</em

An experimental method has been developed to investigate the cellular responses to central nervous system (CNS) injury using the fruit-fly Drosophila. ...

Direct Intraventricular Delivery of Drugs to the Rodent Central Nervous System

설치류 중추 신경계에 약물을 직접 심실 배달

Due to an inability to cross the blood brain barrier, certain drugs need to be directly delivered into the central nervous system (CNS). Our lab focuses ...

Immunohistochemical Analysis in the Rat Central Nervous System and Peripheral Lymph Node Tissue Sections

쥐 중추 신경계에서 면역 조직 화학 분석 및 주변 림프절 조직 섹션

Immunohistochemistry (IHC) provides highly specific, reliable and attractive protein visualization. Correct performance and interpretation of an IHC-based ...

In vivo Interrogation of Central Nervous System Translatome by Polyribosome Fractionation

In vivo Interrogation of Central Nervous System Translatome by Polyribosome Fractionation

Polyribosome 분별에 의한 중추 신경계 Translatome의 생체 심문

Multiple processes are involved in gene expression including transcription, translation and stability of mRNAs and proteins. Each of these steps are ...

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

설치류 중추 신경계의 생체 Optogenetic 자극

The ability to probe defined neural circuits in awake, freely-moving animals with cell-type specificity, spatial precision, and high temporal resolution ...