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•
07:09 min
March 16th, 2022
DOI :
10.3791/63433-v
Chapters
0:04
Introduction
0:59
Selection of Labeling Sites
1:29
Determination of the R0 Values
3:04
Performing FRET Spectral Measurements
4:09
Mapping the Distances
4:46
Results: Förster Resonance Energy Transfer Mapping of the Preprotein Binding Site
6:30
Conclusion
Transcript
我々は、リガンド結合部位、サブユニット配向、リガンド結合に関連する立体構造変化、およびタンパク質の動的運動の同定および特性評価を可能にするFRETマッピング方法論を開発しました。この技術の利点は、溶液中で行うことができ、分子が自由に動き回ることができることである。この技術によって測定される距離は、生物学的システムに適しています。
FRETは、多くのシステムに広く適用できます。マッピングは、あらゆる生体分子系における構造的および動的変化のモニタリングを強化し、3次元構造情報が存在
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Summary
この研究は、標識部位の選択、色素の選択、取得、およびデータ分析を含むFRETマッピングの方法論を詳述している。この方法論は、タンパク質系における結合部位、立体構造変化、および動的運動を決定するのに有効であり、既存の3D構造情報と組み合わせて実行される場合に最も有用である。
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