Meme kanseri, ABD'de kadınlar için en yaygın kanser ve kansere bağlı ölümlerin ikinci önde gelen nedenidir. Mevcut önleme yaklaşımları sınırlıdır ve çeşitli yan etkilerle birlikte gelir. Birincil önleme için yeni müdahalelere ihtiyaç vardır. Meme kanserini önleme için fare meme epiteline etanol bazlı ablatif bir çözeltinin intradüktal olarak verilmesi için bir yöntem geliştirdik.

Doğrudan meme ucu açıklığına enjeksiyon, düktal ağacı en az kollateral doku hasarı ile kaplayan epitel hücrelerinin hedeflenmesini sağlar. Bu yöntem, tantal oksit nanopartikülleri yüksek çözünürlüklü kontrast maddesi olarak kullanarak eşzamanlı in vivo görüntülemeye izin verir. Bu yöntem, diğer x-ışını kontrast ajanları ve farklı kimyasal veya termal ablatif çözeltilerle çeşitli önleyici tedavilerle kullanılmak üzere uyarlanabilir.

Bu görüntü güdümlü meme kanseri önleme yöntemi ile ilgili ilk adım, laboratuvarda hazırlanan sukraloz jel bardakları kullanarak karprofen oral dosing yoluyla genişletilmiş anti-enflamatuar tedavi teşvik etmektir. Enjekte edilecek meme uçlarını çevreleyen alandan kürkü çıkarmak için depilatory krem kullanarak hayvanı hazırlıyoruz. Daha sonra iğne takma için meme ucunun açıklığı en iyi şekilde bulmak ve görselleştirmek için stereoskop yardımıyla intradüktal enjeksiyonlar yapılır.

Çözeltinin teslim edildikten sonra, enjeksiyonların ne kadar başarılı olduğunu belirlemek için hayvanlar mikro BT veya floroskopi ile görüntülenir. Mikro-CT taramaları, başarılı dolgu ve diğer ölçümlerin daha fazla analizi için enjekte edilen meme düktal ağacının 3D rekonstrüksiyonlarını oluşturmak için işlenebilir. İlk olarak, gerekli konsantrasyonda karprofen hazırlayın.

0,5 mL enjekte etmek ve bardak başına bir mg'lık son bir doz elde etmek için mL başına iki mg'lık bir çalışma çözeltisi yapıyoruz. İlacın fincanın sukralozuna tam olarak karıştırılmasını daha iyi doğrulamak için karışıma steril gıda boyası ekleyebilirsiniz. Daha sonra, bardakları 15 dakika boyunca 60 santigrat derecede bir su banyosuna yerleştirin.

Kirlenme olasılığını en aza indirmek için bardakları çıkarın ve kurutun. Bardak kapağının yüzeyini temizlemek ve kurumaya izin vermek için% 70 etanol veya etanol mendil kullanın. Kapaktan gerekli miktarda karprofen çözeltisi enjekte etmek için bir şırınna kullanın.

Bu durumda, istenen sonuç için 500 mikrolitre enjekte etmemiz gerekir. İğneden deliğin üzerine bir etiket yerleştirin ve 15 saniye daha girdaplamadan önce fincanı 15 saniye sallayın. Koyu mavi kümeler arayarak fincanı homojen karıştırma için kontrol edin.

Bardaklar daha sonra bir aya kadar soğutılabilir. Hayvanın hazırlanması intradüktal işlemden iki ila üç gün önce gerçekleşmelidir. İsofluran kullanarak hayvanı uyuşturarak başlayın.

Uyuşturulan fareyi izofluran vermeye devam eden bir burun konisine aktarın. Burun konisindeyken fareye göz yağı uygulayın ve ardından fareyi sırtına yerleştirin. Enjekte etmeyi planladığınız meme bezlerinin bölgesine epilatör krem uygulamak için pamuk uçlu bir aplikatör kullanın.

Kürkün daha hızlı gevşetilmesine yardımcı olmak için aplikatörü istenen bölgede hayvanın derisi boyunca yukarı ve aşağı sürün. Cildin yanmaması için kremi mümkün olduğunca az süre farenin üzerinde bırakmak önemlidir. 10 ila 30 saniye uygulamadan sonra, kremayı tamamen çıkarmak için gazlı bez üzerinde ılık su kullanın.

Cildi temiz gazlı bezle kurutmadan önce tamamen çıkarılmasını sağlamak için iki ila dört durulama kullanın. İyi görünürlüğü ve meme uçlarına erişimi onaylamak için kürk çıkarma alanlarını kontrol edin. Gerekirse depilatory prosedürü tekrarlayın.

Anesteziden kurtulmak için fareyi bir ısınma yastığının üzerindeki temiz bir kurtarma kafesine yerleştirin. İyileştikten sonra fareleri ev kafeslerinde hazırlatırlar. Yine izofluran anestezi kullanarak hayvanı uyuşturarak başlayacaksınız ve fareyi tamamen indüklendikten sonra bir burun konisine hareket ettireceksiniz.

Enjeksiyonlar için hayvanı sırtına yerleştirmeden önce göz yağı uygulanacaktır. Enjekte edilecek meme bezlerinin yakınındaki bacakları bantlamak yararlı olabilir, ancak gerekli değildir. Şırıngayı, iğne çıkarıldıktan sonra bazı dökülmelerde istenen enjeksiyon çözeltisi hacmi artı bir mikroliter ile hazırlayın.

Enjeksiyondan hemen önce çözeltinin serbest akışı için iğneyi test etmek için ek hacimle doldurmak yararlı olabilir. Birden fazla meme bezi enjekte ediyorsanız, varsa birden fazla şırınna önceden doldurmak zaman kazandırabilir. Çözüm oturmak için bırakıldığında tıkanmaya eğilimliyse bunu çok erken yapmamaya dikkat edin.

Mümkünse ince uçlu emişler kullanarak görünür ölü derileri çıkararak meme ucini hazırlayın. Meme ucu açıklığı engellemiyorsa ve çekmeye karşı dayanıklıysa tüm ölü deriyi çıkarmak gerekli değildir. Bu bazen ölü deri cildi çok sıkı yaşamak için yapıştırılmışsa meme ucunun yaralanmasına ve şişmesine neden olabilir.

İğnenin eğimi görünürken, ince uçlu esin yardımcısıyla iğneyi meme ucunun açıklığı içine yerleştirin. Meme ucunun uzunluğuna ve sıkılığına bağlı olarak, iğnede rehberlik ederken meme ucunun tutulması her zaman mümkün olmayabilir. Bazen, forsepslerin iğneyi meme ucuna yönlendirmek yerine meme ucını iğnenin üzerine çekmesine izin vermek için meme ucuna iğne ile manevra yapmak gerekir.

İğne eğimi meme ucuyla ve ana kanalla tamamen çevrelendikten sonra, çözeltiyi yavaşça enjekte etmeye başlayın. İstenilen oran dakikada yaklaşık 40 mikrolitredir. Düktal ağacın olası hasarını önlemek için bundan daha hızlı enjekte etmekten kaçının.

Tam enjeksiyondan sonra, iğneyi meme uçlarından çıkarmadan önce 30 saniye bekleyin. Bu, meme ucuna herhangi bir sızıntıyı en aza indirecektir. Bölgeyi başarısız bir enjeksiyon belirtisi için değerlendirin.

Kubbeli bir görünüm, bölgeye yağ yastığı enjeksiyonu veya travmaya işaret edebilir. Çözelti boya içeriyorsa veya burada görülebileceği gibi enjeksiyon yerinde kubbe için dikkatlice arıyorsanız, yağ yastığına bir enjeksiyon gerçekleştiğini görmek genellikle mümkündür. Deneyiniz için gerekli olan kalan meme bezlerini benzer şekilde enjekte etmeye devam edin, enjeksiyon hacimlerine ve herhangi bir sızıntı insidansına dikkat edin.

Farenin bazı bölgelerine garip el yerleşimi veya nefes alma paraziti gibi sorunlar nedeniyle enjekte etmek daha zor olabilir. Örneğin, sağ elini kullanan bir enjektör, farenin sağ üst tarafındaki bezleri enjekte etmek için büyük olasılıkla en zor zamanı burada görecektir. Bunlar akciğerlere yakınlık nedeniyle daha fazla hareket eder ve bileği yüzeye dinlendirme yolunda hayvanın vücuduyla iyi bir el yerleşimi bulmak zor olabilir.

Burun konisi izin veriyorsa, bazıları fareyi yeniden konumlandırmayı daha kolay bulabilir. Etanol içeren bir çözelti enjekte ederken, sistemik alkol zehirlenmesini önlemek için dikkatli olunmalıdır. Bu, bir seansta ne kadar etanol enjekte edilebileceğini bilmeyi ve etkileri önlemek için prosedür sırasında sakkaroz içeren çözelti IP'nin uygulanmasını gerektirir.

İntradüktal işlemden sonra, hayvanlar bir ısıtma yastığı üzerindeki temiz bir kafeste kurtarılabilir veya doldurulmuş düktal ağaçların görüntülenmesi için mikro BT sistemine taşınabilir. Fare de herhangi bir görüntüleme oturumundan sonra kurtarılmalıdır. Enjekte edilen hayvanı mikro BT sistemine taşıdıktan sonra, görüntüleme sırasında anesteziyi korumak için izofluran vermeye devam edin.

Görüntülenecek sitenin yakınındaki bacakları bantlayarak görüntüleme pozisyonunu standartlaştırmak yararlı olabilir. Örneğin, arka bacakların uzatılmış bir pozisyonda aşağı bantlandırılması, bacakların kemiğinin enjekte edilen bezlerin görüşünü engellemesini engelleyebilir. Ön bacakları yukarı doğru uzatılmış bir pozisyonda bantlama, benzer şekilde üst bezlerin görüntülenmesinde yardımcı olabilir.

Ayrıca, farenin karnına bantlamanın alt bezler için solunum yapıtının azaltılmasına yardımcı olabileceğini bulduk. Düktal ağacın görselleştirilmesi için kabul edilebilir birçok tarama parametresi vardır. Bu taramalardan kaynaklanan radyasyon dozunun belirli bir fare türü için radyasyon sınırlarını aşmamasını sağlamaya her zaman özen gösterilmelidir.

Radyasyon dosing, floroskopiyi görüntüleyerek ve daha uzun pozlama sürelerine sahip görüntüler elde etmek yerine doğum başarısına dikkat ederek büyük ölçüde azaltılabilir. Standart tarama parametrelerimiz, yalnızca iki dakikalık kısa standart taramalar elde etmek için tekrar görüntüleme için kabul edilebilir. Ötanaziden önce terminal prosedür olarak 14 dakikaya kadar daha yüksek çözünürlüklü daha uzun taramalar kabul edilebilir.

Bu uzun taramalar, hayvanda radyasyon hastalığına neden olabileceği için boyuna çalışmalar için kabul edilemez. Bu hayvana bez dört ve dokuz bezlerde 100 milimoler tantal oksit kontrastı içeren bir etanol çözeltisi enjekte edildi. Şu anki kazanım, enjekte edilen alt bezlerin 14 dakikalık yüksek çözünürlüklü taramasıdır.

Hayvanın floroskopisi, düktal ağaç mimarisinin enjeksiyon çözeltisi içindeki kontrastla vurgulandığını görmemizi sağlar. Kullandığımız mikro-CT sistemi, resmi analiz olmadan enjeksiyonun başarısını değerlendirmek için hızlı yorumlamaların oluşturulmasını sağlayan yerleşik bir yazılıma sahiptir. Bu özellik, makul sinyalden gürültüye azalma sağlayan basit bir kontrast kaydırıcısına sahiptir.

Bu yorumlamaların sınırlaması, aynı sinyal eşiklerinin görüntünün tamamına uygulanmasıdır. Bu, diyetteki demir gibi düktal ağacın bir parçası olmayan parlak sinyallerin yorumlamada kalmasını sağlar. İlgi alanının segmentasyonuna izin veren daha sofistike analiz yazılımı kullanılarak daha iyi resmi yorumlamalar yapılabilir.

Tek duktal ağacın en iyi şekilde işlenmesini sağlamak için, daha fazla görüntü işleme için meme yağ yastığını segmentlere ayırmanızı öneririz. Bu işlem, hayvanın tam kalınlığı boyunca yağ yastığının sınırlarının çizgi izlemesini gerektirir. Her üçüncü dilimi izlemenin ve nesneyi yaymanın kanalın tamamını yakalamak için yeterli olduğunu bulduk.

Bu, taramaları analiz eden tüm bireylerden benzer çıktıyı sağlamak için izleme için laboratuvar standartlarına uyulmasını gerektiren öznel bir süreç olabilir. Anatomiye aşinalık, hangi alanları içerebileceğine dair yargı çağrılarına yardımcı olabilir. İzleri yayırktan sonra, yalnızca meme bezinde bulunan kontrastı görüntülemek için yorumlamayı belirli bir aralıkta eşiklamak mümkündür.

Bu, düktal ağacın içindeki çözümün yanı sıra yakın çevredeki herhangi bir sızıntı olmalıdır. 300 ila 3.000 HU aralığı, tantal oksit içeren çözeltiler durumunda iyi çalışma eğilimindedir. Tam olarak işlenmiş bir yorumlama örneği burada birden fazla açıdan görülebilir.

Hayvanın mikro BT'de nasıl yönlendirildiğine bağlı olarak, analiz yazılımındaki DICOM dosyalarını, görüntünün üst kısmındaki hayvanın başıyla sezgisel anatomik konumlandırmayı temsil etmek için yeniden yönlendirmek gerekebilir. Görüntüyü her seferinde benzer şekilde döndürmeye özen göstermezseniz, hangi bezin görüntülendiğini belirlemek de zor olabilir. Düktal ağacın yeniden inşasını oluşturduktan sonra hacim veya uzunluk gibi daha fazla ölçüm yapılabilir.

Bu prosedürle başarılı teslimat için doğrulama sadece burada açıklandığı gibi 3D mikro-CT yorumlamaları ile değil, aynı zamanda enjekte edilmiş Evans mavisi ile çift lekeli tüm montajlar ile karmin mezunu ile vurgulanan tüm düktal ağacı ile üst üste binerek gösterilebilir. 3D konfokal mikroskopi, düktal ağacın mimarisini e-cadherin ile boyanmış temizlenmiş bir bezde vurgulayabilir. Gerinim-gerinim ve fareden fareye değişkenlik ve meme ucu anatomisi bezlerin enjektesini az çok zorlaştırabilir.

Bu, kavrama kolaylığı için yüksek profilli enjeksiyon için ideal bir meme ucu örneğidir. Bunun gibi daha düşük profilli meme uçlarının başarıyla yalıtılması daha zor olabilir. Bu farklılıklar, burada görüldüğü gibi travma veya doming olmadan başarılı bir enjeksiyon elde etmeyi daha olası hale getirebilir veya bu yağ pedi enjeksiyonunun kubbeli görünümünde gösterildiği gibi başarısız olma olasılığı daha yüksek olabilir.

Meme kanserinden korunma söz konusu olduğunda, şu anda iki ana taktik uygulanmaktadır. İlk, dikkatli bekleyiş, gerçek bir müdahale içermez. Bu yolu izleyen bireyler, meme dokularında kanser oluşumunun meydana geldiğini gösterecek herhangi bir yumru nedir düzenli olarak izlenir.

Hastalık tespiti daha sonra tedaviye neden olur. Profilaktik mastektomi, meme kanserinin çevredeki stroma ile birlikte ortaya çıkabileceği tüm epitel hücrelerini ortadan kaldıran daha invaziv bir prosedürdür. Bu ameliyatın ciddi yan etkileri olabilir ve düşük veya orta derecede hastalık riski olan bireyler için nadiren profilaktik bir seçenek olarak seçilir.

Yaklaşımımız, ablatif bir çözeltinin doğrudan meme düktal ağacına enjekte edilmesi yoluyla lokal epitel ablasyonunu içerir. Bu yöntem ikincil hasarı azaltır ve büyük olasılıkla ciddi hastalık riski olmayan bireyler için daha çekici bir seçenek olacaktır. Enjeksiyon sonrası hemen görüntüleme için kontrast eklenmesi de bunu kliniğe kolayca çevrilebilir hale getirir.

Summary

Explore More Videos

g r nt g d ml prosed r