चूहे orthotopic गुर्दे प्रत्यारोपण preclinical अध्ययन में गुर्दे एलोग्राफ्ट अस्वीकृति के तंत्र की जांच करने के लिए एक महत्वपूर्ण मॉडल है और गुर्दे allografts के दीर्घकालिक अस्तित्व में सुधार करने के लिए उपन्यास दृष्टिकोण विकसित करने में सहायता कर सकता है। इस सर्जरी में गुर्दे की वाहिकाओं के अंत-से-अंत एनास्टोमोसिस निचले शरीर के इस्केमिया और अवर वेना कावा के घनास्त्रता से बचा जाता है, जबकि एक अंत-से-साइड सुरंग विधि में मूत्रवाहिनी का एनास्टोमोसिस पोस्टऑपरेटिव मूत्र रिसाव और मूत्रवाहिनी के मोड़ को कम करता है। यह विधि गुर्दे के प्रत्यारोपण के बाद प्रतिरक्षा अस्वीकृति और गुर्दे के एलोग्राफ्ट की चोट के तंत्र की जांच करने में अंतर्दृष्टि प्रदान करती है।
सिम्फिसिस प्यूबिस से सबक्सिफोइड तक मिडलाइन के साथ एक सर्जिकल कैंची का उपयोग करके पेट को इन्साइज़ करके शुरू करें। फिर एक retractor का उपयोग कर चीरा खोलें। चीरा के दाईं ओर से आंतों को बाहर निकालें और उन्हें सूखने से रोकने के लिए उन्हें नम धुंध के साथ लपेटें।
फिर बाईं किडनी को उजागर करें। 20 गुना आवर्धन के तहत माइक्रो-संदंश और कपास स्वैब का उपयोग करके बाएं गुर्दे की धमनी और नस को अलग करें। Ligate और यदि आवश्यक हो तो अधिवृक्क शिरा और जननांग नस transacte.
मूत्रवाहिनी को रक्त की आपूर्ति सुनिश्चित करने के लिए परिधीय संयोजी ऊतकों को संरक्षित करते हुए, सूक्ष्म संदंश की मदद से मूत्रवाहिनी को अलग करें। एक संवहनी क्लैंप या 4-0 polyamide monofilament टांके के साथ बाएं गुर्दे की धमनी के ऊपर लगभग पांच मिलीमीटर ऊपर महाधमनी को अलग और क्लिप या लिगेट करें। फिर बाएं वृक्क शिरा को बाएं जननांग नस और अधिवृक्क शिरा के संयोजन के लिए दूरस्थ रूप से ट्रांसेक्ट करें।
एक 24 गेज स्केलपेल सुई का उपयोग करते हुए, बर्फ के ठंडे यूडब्ल्यू समाधान के साथ बाएं गुर्दे की धमनी के नीचे महाधमनी से गुर्दे को फ्लश करें, जब तक कि रक्त रंग में फीका न हो जाए, तब तक 100 इकाइयों प्रति मिलीलीटर हेपरिन के साथ पूरक न हो। महाधमनी के बगल में बाईं गुर्दे की धमनी को ट्रांसेक्ट करें, फिर मूत्राशय के बगल में मूत्रवाहिनी को ट्रांसेक्ट करें और माइक्रो-संदंश और कैंची की मदद से गुर्दे को अलग करें। बर्फ ठंडा UW समाधान में दाता छोड़ दिया गुर्दे को संरक्षित करें।
20 गुना आवर्धन के तहत, कपास swabs और माइक्रो-संदंश का उपयोग करके प्राप्तकर्ता चूहे की बाईं गुर्दे की धमनी और गुर्दे की नस को अलग करें। यदि आवश्यक हो तो अधिवृक्क शिरा और जननांग शिरा को लिगेट करें। माइक्रोवैस्कुलर क्लैंप का उपयोग करके जड़ पर बाईं गुर्दे की धमनी और गुर्दे की नस को क्लिप करें, फिर माइक्रोवैस्कुलर क्लैंप से तीन मिलीमीटर दूर गुर्दे की धमनी और गुर्दे की नस को ट्रांसेक्ट करें।
बाएं मूत्रवाहिनी को 8-0 के साथ गुर्दे से लगभग दो से तीन सेंटीमीटर नीचे अलग करना और लिगेट करना polyamide monofilament टांका और यह बंधाव पर transacte. माइक्रो-संदंश और कैंची की मदद से गुर्दे को अलग करके प्राप्तकर्ताओं देशी बाएं गुर्दे को उच्छेदित करें। दाता गुर्दे को प्राप्तकर्ता चूहे के बाएं गुर्दे के खात में प्रत्यारोपित करें और प्रत्यारोपित दाता गुर्दे के चारों ओर बर्फ डालें।
45 गुना आवर्धन पर स्विच करें, फिर दाताओं को गुर्दे की धमनी और गुर्दे की नस को प्राप्तकर्ताओं के गुर्दे की धमनी और गुर्दे की नस को 10-0 पॉलीमाइड मोनोफिलामेंट टांके का उपयोग करके एक एंड-टू-एंड पैटर्न में एनास्टोमोस करें। बाधित टांके के साथ गुर्दे की धमनी को एनास्टोमोस करने के लिए, एनास्टोमोसिस के 12 और छह बजे की स्थिति में रहने वाले टांके रखें। दो से तीन टांके के साथ दो रहने वाले टांके के बीच एनास्टोमोसिस के एक तरफ समान रूप से टांके लगाए जाते हैं।
रहने के टांके को चालू करें और इसी तरह दो से तीन टांके के साथ दो रहने वाले टांके के बीच एनास्टोमोसिस के दूसरी तरफ टांके लगाएं। लगातार टांके के साथ गुर्दे की नस anastomose करने के लिए, anastomosis के छह और 12 बजे की स्थिति पर रहने टांके जगह। चल रहे टांके का उपयोग करके चार से पांच टांके के साथ 12 बजे की स्थिति से एनास्टोमोसिस के एक तरफ सीवन करें।
रहने के टांके को चालू करें और इसी तरह, छह बजे की स्थिति से एनास्टोमोसिस के दूसरी तरफ टांका। गुर्दे की नस के गैर-इनवेसिव माइक्रोवैस्कुलर क्लैंप को जारी करके दाता गुर्दे को फिर से सक्रिय करें, रक्तस्राव साइटों की पहचान करें और यदि आवश्यक हो तो अतिरिक्त टांके लगाएं। अगला, गुर्दे की धमनी के गैर-इनवेसिव माइक्रोवैस्कुलर क्लैंप को जारी करें, रक्तस्राव साइटों की पहचान करें और यदि आवश्यक हो तो अतिरिक्त टांके लगाएं।
20 बार आवर्धन के तहत, लिगेट या प्राप्तकर्ता मूत्राशय की सुरंग के माध्यम से अंत को खींचने के लिए एक टो के रूप में 4-0 पॉलीमाइड मोनोफिलामेंट सीवन के साथ दाता मूत्रवाहिनी के अंत को सिलाई करें। प्राप्तकर्ता मूत्राशय के साथ दाता मूत्रवाहिनी को ठीक करें, जो 8-0 का उपयोग करके चार समदूरी स्थितियों में प्राप्तकर्ताओं के मूत्राशय की मांसपेशियों की परत के साथ दाता मूत्रवाहिनी की एडवेंटिटिया को सिलाई करके polyamide monofilament टांका. इसके बाद, प्राप्तकर्ता मूत्राशय के बाहर सीवन के साथ दाता मूत्रवाहिनी के अंत को ट्रांसेक्ट करें और दाता मूत्रवाहिनी को प्राप्तकर्ता मूत्राशय में वापस सिकुड़ने की अनुमति दें।
आंतों को पेट की गुहा में वापस रखें और मांसपेशियों की परत में लगातार टांके के साथ पेट के चीरा को बंद करें और फिर 4-0 पॉलीमाइड मोनोफिलामेंट टांके के साथ त्वचा की परत। प्रत्यारोपण के दस सप्ताह बाद, हेमाटोक्सिलिन और इओसिन धुंधला और आवधिक एसिड शिफ्ट स्टेनिंग ने आइसोग्राफ्ट गुर्दे के विपरीत गुर्दे के एलोग्राफ्ट में ग्लोमेरुलर स्केलेरोसिस, अंतरालीय फाइब्रोसिस, ट्यूबलर शोष और अंतरालीय धमनी स्क्लेरोसिस का खुलासा किया। चांदी के दाग ने आइसोग्राफ्ट गुर्दे की तुलना में एलोग्राफ्ट गुर्दे में ग्लोमेरुलर तहखाने झिल्ली के गाढ़ा होने को दिखाया, जो चूहे के ऑर्थोटोपिक गुर्दे प्रत्यारोपण मॉडल की सफलता का संकेत देता है।
क्योंकि गुर्दे का संवहनी छेद बहुत पतला है, गलत टांके से बचने के लिए, उच्च आवर्धन क्षेत्र पर एनास्टोमोसिस करना याद रखें।