Results: MicroRNA Biogenesis Reporter Assay Analyzing Maturation in Mammalian Cells
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Conclusion
Transcript
Il nostro protocollo affronta gli effetti delle proteine leganti l'RNA regolatorie sulla biogenesi e maturazione dei microRNA, direttamente da colture cellulari. Il metodo che descriviamo può essere eseguito con comuni reagenti di coltura cellular
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Abbiamo sviluppato un saggio reporter di biogenesi di microRNA intronico da utilizzare in cellule in vitro con quattro plasmidi: uno con miRNA intronico, uno con il bersaglio, uno per sovraesprimere una proteina regolatrice e uno per Renilla luciferasi. Il miRNA è stato elaborato e potrebbe controllare l'espressione della luciferasi legandosi alla sequenza bersaglio.