Name: a model of reverse vascular remodeling in pulmonary hypertension due to left heart disease by aortic debanding in rats
Uploaded: 2022-03-01T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats at JoVE.com

Diese Forschung wurde durch Zuschüsse des DZHK (Deutsches Zentrum für Herz-Kreislauf-Forschung) an CK und WMK, das BMBF (Bundesministerium für Bildung und Forschung) an CK im Rahmen von VasBio und an WMK im Rahmen von VasBio, SYMPATH und PROVID sowie der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG) an WMK (SFB-TR84 A2, SFB-TR84 C9), SFB 1449 B1, SFB 1470 A4, KU1218/9-1 und KU1218/11-1).

Alle Verfahren wurden nach dem "Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Versuchstieren" (Institut für Versuchstierressourcen, 8. Auflage 2011) durchgeführt und vom Landesamt für Gesundheit und Soziales (LaGeSO), Berlin; Protokoll-Nr. G0030/18). Erstens wurde eine kongestive Herzinsuffizienz bei juvenilen Sprague-Dawley-Ratten ~100 g Körpergewicht (KG) (siehe Materialtabelle) chirurgisch induziert, indem ein Titanclip mit einem Innendurchmesser von 0,8 mm auf die aufsteigende Aorta (Aortenbandbil...

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	<li>Rosenkranz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease:+Updated+recommendations+of+the+cologne+consensus+conference+2011.">Pulmonary hypertension due to left heart disease: Updated recommendations of the cologne consensus conference 2011.</a> International Journal of Cardiology. 154, 34-44 (2011).</li><li>Rosenkranz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+heart+failure+and+pulmonary+hypertension.">Left ventricular heart failure and pulmonary hypertension.</a> European Heart Journal. 37 (12), 942-954 (2016).</li><li>Fayyaz, A. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+Pulmonary+vascular+remodeling+in+pulmonary+hypertension+associated+with+heart+failure+and+preserved+or+reduced+ejection+fraction.">Global Pulmonary vascular remodeling in pulmonary hypertension associated with heart failure and preserved or reduced ejection fraction.</a> Circulation. 137 (17), 1796-1810 (2018).</li><li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease.">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> The American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), 725-736 (2013).</li><li>Bursi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+pressures+and+death+in+heart+failure:+A+community+study.">Pulmonary pressures and death in heart failure: A community study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 59 (3), 222-231 (2012).</li><li>Ryan, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+ventricular+adaptation+and+failure+in+pulmonary+arterial+hypertension.">Right ventricular adaptation and failure in pulmonary arterial hypertension.</a> Canadian Journal of Cardiology. 31 (4), 391-406 (2015).</li><li>Miller, W. L., Mahoney, D. W., Enriquez-Sarano, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Doppler-echocardiographic+imaging+and+clinical+outcomes+with+left+ventricular+systolic+dysfunction:+Independent+effect+of+pulmonary+hypertension.">Quantitative Doppler-echocardiographic imaging and clinical outcomes with left ventricular systolic dysfunction: Independent effect of pulmonary hypertension.</a> Circulation: Cardiovascular Imaging. 7 (2), 330-336 (2014).</li><li>Kjaergaard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+importance+of+pulmonary+hypertension+in+patients+with+heart+failure.">Prognostic importance of pulmonary hypertension in patients with heart failure.</a> The American Journal of Cardiology. 99 (8), 1146-1150 (2007).</li><li>Shah, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hypertension+after+heart+transplantation+in+patients+bridged+with+the+total+artificial+heart.">Pulmonary hypertension after heart transplantation in patients bridged with the total artificial heart.</a> ASAIO Journal. 62 (1), 69-73 (2016).</li><li>Tracy, G. P., Proctor, M. S., Hizny, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversibility+of+pulmonary+artery+hypertension+in+aortic+stenosis+after+aortic+valve+replacement.">Reversibility of pulmonary artery hypertension in aortic stenosis after aortic valve replacement.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 50 (1), 89-93 (1990).</li><li>Lindelow, B., Andersson, B., Waagstein, F., Bergh, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+and+low+pulmonary+vascular+resistance+in+heart+transplant+candidates.+A+5-year+follow-up+after+heart+transplantation+shows+continuous+reduction+in+resistance+and+no+difference+in+complication+rate.">High and low pulmonary vascular resistance in heart transplant candidates. A 5-year follow-up after heart transplantation shows continuous reduction in resistance and no difference in complication rate.</a> European Heart Journal. 20 (2), 148-156 (1999).</li><li>Martin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantable+left+ventricular+assist+device+for+treatment+of+pulmonary+hypertension+in+candidates+for+orthotopic+heart+transplantation-a+preliminary+study.">Implantable left ventricular assist device for treatment of pulmonary hypertension in candidates for orthotopic heart transplantation-a preliminary study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 25 (6), 971-977 (2004).</li><li>Gallagher, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Univentricular+support+results+in+reduction+of+pulmonary+resistance+and+improved+right+ventricular+function.">Univentricular support results in reduction of pulmonary resistance and improved right ventricular function.</a> ASAIO Transactions. 37 (3), 287-288 (1991).</li><li>Beyersdorf, F., Schlensak, C., Berchtold-Herz, M., Trummer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regression+of+&amp;#34;fixed&amp;#34;+pulmonary+vascular+resistance+in+heart+transplant+candidates+after+unloading+with+ventricular+assist+devices.">Regression of &amp;#34;fixed&amp;#34; pulmonary vascular resistance in heart transplant candidates after unloading with ventricular assist devices.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 140 (4), 747-749 (2010).</li><li>Hoffmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mast+cells+promote+lung+vascular+remodelling+in+pulmonary+hypertension.">Mast cells promote lung vascular remodelling in pulmonary hypertension.</a> European Respiratory Journal. 37 (6), 1400-1410 (2011).</li><li>Litwin, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+echocardiographic-Doppler+assessment+of+left+ventricular+geometry+and+function+in+rats+with+pressure-overload+hypertrophy.+Chronic+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+attenuates+the+transition+to+heart+failure.">Serial echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular geometry and function in rats with pressure-overload hypertrophy. Chronic angiotensin-converting enzyme inhibition attenuates the transition to heart failure.</a> Circulation. 91 (10), 2642-2654 (1995).</li><li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy.">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li><li>de Montgolfier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Systolic+blood+pressure+induces+cerebral+microvascular+endothelial+dysfunction,+neurovascular+unit+damage,+and+cognitive+decline+in+mice.">High Systolic blood pressure induces cerebral microvascular endothelial dysfunction, neurovascular unit damage, and cognitive decline in mice.</a> Hypertension. 73 (1), 217-228 (2019).</li><li>Breitling, S., Ravindran, K., Goldenberg, N. M., Kuebler, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+pulmonary+hypertension+in+left+heart+disease.">The pathophysiology of pulmonary hypertension in left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 309 (9), 924-941 (2015).</li><li>Ranchoux, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+syndrome+exacerbates+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease.">Metabolic syndrome exacerbates pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> Circulation Research. 125 (4), 449-466 (2019).</li><li>Zhang, H., Huang, W., Liu, H., Zheng, Y., Liao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stretching+of+pulmonary+vein+stimulates+matrix+metalloproteinase-9+and+transforming+growth+factor-beta1+through+stretch-activated+channel/MAPK+pathways+in+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+model+rats.">Mechanical stretching of pulmonary vein stimulates matrix metalloproteinase-9 and transforming growth factor-beta1 through stretch-activated channel/MAPK pathways in pulmonary hypertension due to left heart disease model rats.</a> PLoS One. 15, 0235824 (2020).</li><li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure.">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li><li>Yin, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+nitric+oxide+versus+aerosolized+iloprost+for+the+treatment+of+pulmonary+hypertension+with+left+heart+disease.">Inhaled nitric oxide versus aerosolized iloprost for the treatment of pulmonary hypertension with left heart disease.</a> Critical Care Medicine. 37 (3), 980-986 (2009).</li><li>Breitling, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mast+cell-B+cell+axis+in+lung+vascular+remodeling+and+pulmonary+hypertension.">The mast cell-B cell axis in lung vascular remodeling and pulmonary hypertension.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 312 (5), 710-721 (2017).</li><li>Kerem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lung+endothelial+dysfunction+in+congestive+heart+failure:+Role+of+impaired+Ca2++signaling+and+cytoskeletal+reorganization.">Lung endothelial dysfunction in congestive heart failure: Role of impaired Ca2+ signaling and cytoskeletal reorganization.</a> Circulation Research. 106 (6), 1103-1116 (2010).</li><li>Goncalves-Rodrigues, P., Miranda-Silva, D., Leite-Moreira, A. F., Falcao-Pires, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+left+ventricular+reverse+remodeling+by+aortic+debanding+in+rodents.">Studying left ventricular reverse remodeling by aortic debanding in rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (173), e60036 (2021).</li><li>Miranda-Silva, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+biventricular+alterations+in+myocardial+(reverse)+remodelling+in+aortic+banding-induced+chronic+pressure+overload.">Characterization of biventricular alterations in myocardial (reverse) remodelling in aortic banding-induced chronic pressure overload.</a> Scientific Reports. 9, 2956 (2019).</li><li>Chou, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+debanding+on+the+lung+expression+of+ET-1,+eNOS,+and+cGMP+in+rats+with+left+ventricular+pressure+overload.">The effects of debanding on the lung expression of ET-1, eNOS, and cGMP in rats with left ventricular pressure overload.</a> Experimental Biology and Medicine. 231 (6), 954-959 (2006).</li><li>Hentschel, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhalation+of+the+phosphodiesterase-3+inhibitor+milrinone+attenuates+pulmonary+hypertension+in+a+rat+model+of+congestive+heart+failure.">Inhalation of the phosphodiesterase-3 inhibitor milrinone attenuates pulmonary hypertension in a rat model of congestive heart failure.</a> Anesthesiology. 106 (1), 124-131 (2007).</li><li>Gs, A. K., Raj, B., Santhosh, K. S., Sanjay, G., Kartha, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending+aortic+constriction+in+rats+for+creation+of+pressure+overload+cardiac+hypertrophy+model.">Ascending aortic constriction in rats for creation of pressure overload cardiac hypertrophy model.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), e50983 (2014).</li><li>Angermann, C. E., Ertl, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natriuretic+peptides--new+diagnostic+markers+in+heart+disease.">Natriuretic peptides--new diagnostic markers in heart disease.</a> Herz. 29 (6), 609-617 (2004).</li><li>Ordodi, V. L., Paunescu, V., Mic, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimal+access+to+the+rat+heart+by+transverse+bilateral+thoracotomy+with+double+ligature+of+the+internal+thoracic+arteries.">Optimal access to the rat heart by transverse bilateral thoracotomy with double ligature of the internal thoracic arteries.</a> American Association for Laboratory Animal Science. 47 (5), 44-46 (2008).</li><li>Fay, D. S., Gerow, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+biologist's+guide+to+statistical+thinking+and+analysis.">A biologist's guide to statistical thinking and analysis.</a> WormBook. , 1-54 (2013).</li><li>Etz, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medically+refractory+pulmonary+hypertension:+treatment+with+nonpulsatile+left+ventricular+assist+devices.">Medically refractory pulmonary hypertension: treatment with nonpulsatile left ventricular assist devices.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 83 (5), 1697-1705 (2007).</li><li>Mikus, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversibility+of+fixed+pulmonary+hypertension+in+left+ventricular+assist+device+support+recipients.">Reversibility of fixed pulmonary hypertension in left ventricular assist device support recipients.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 40 (4), 971-977 (2011).</li><li>Zelt, J. G. E., Chaudhary, K. R., Cadete, V. J., Mielniczuk, L. M., Stewart, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medical+therapy+for+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension.">Medical therapy for heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Circulation Research. 124 (11), 1551-1567 (2019).</li></ol>

Hier wird eine detaillierte Operationstechnik zur Aortendebandation in einem Ratten-AoB-Modell berichtet, die verwendet werden kann, um die Reversibilität von PH-LHD und die zellulären und molekularen Mechanismen zu untersuchen, die den umgekehrten Umbau im Lungengefäßsystem und im RV vorantreiben. Drei Wochen Aortenverengung bei juvenilen Ratten führen zu PH-LHD, die sich als erhöhter LV-Druck, LV-Hypertrophie und gleichzeitig erhöhter RV-Drücke und RV-Hypertrophie zeigt. Die Aortendebandation in Woche 3 nach Ao...

Herzinsuffizienz ist die häufigste Todesursache in den Industrieländern und wird in den nächsten zehn Jahren voraussichtlich um 25% zunehmen. Pulmonale Hypertonie (PH) - ein pathologischer Anstieg des Blutdrucks im Lungenkreislauf - betrifft etwa 70% der Patienten mit Herzinsuffizienz im Endstadium; Die Weltgesundheitsorganisation klassifiziert PH als pulmonale Hypertonie aufgrund einer Linksherzerkrankung (PH-LHD)1. PH-LHD wird durch eine beeinträchtigte systolische und/oder diastolische linksventrikuläre (LV) Funktion ausgelöst, die zu einem erhöhten Fülldruck und einer passiven Verstopfung des Blutes in den Lungenkreislauf führt2. Obwohl zunächst reversibel, wird PH-LHD aufgrund des aktiven pulmonalen Gefäßumbaus in allen Kompartimenten des Lungenkreislaufs, d.h. Arterien, Kapillaren und Venenallmählich fixiert 3,4. Sowohl der reversible als auch der feste pH-Wert erhöhen die RV-Nachlast, was zunächst zu einer adaptiven myokardialen Hypertrophie führt, aber letztendlich zu RV-Dilatation, Hypokinese, Fibrose und Dekompensation führt, die progressiv zum RV-Ausfallführen 1,2,5,6. Als solches beschleunigt PH das Fortschreiten der Erkrankung bei Patienten mit Herzinsuffizienz und erhöht die Mortalität, insbesondere bei Patienten, die sich einer chirurgischen Behandlung durch Implantation von linksventrikulären Unterstützungsgeräten (LVAD) und/oder Herztransplantation unterziehen 7,8,9. Derzeit gibt es keine kurativen Therapien, die den Prozess des pulmonalen Gefäßumbaus umkehren könnten, so dass grundlegende mechanistische Forschung in geeigneten Modellsystemen erforderlich ist.
Wichtig ist, dass klinische Studien zeigen, dass sich PH-LHD als häufige Komplikation bei Patienten mit Aortenstenose in der frühen postoperativen Phase nach dem Aortenklappenersatzschnell verbessern kann 10. Analog dazu wurde der hohe (>3 Wood Units) präoperative pulmonale Gefäßwiderstand (PVR), der jedoch auf Nitroprussid reversibel war, nach einer Herztransplantation in einer 5-jährigen Follow-up-Studie nachhaltig normalisiert11. In ähnlicher Weise konnte eine adäquate Reduzierung sowohl der reversiblen als auch der stationären PVR und eine Verbesserung der RV-Funktion bei LHD-Patienten innerhalb weniger Monate erreicht werden, indem der linke Ventrikel mit implantierbaren pulsierenden und nicht-pulsierenden ventrikulären Unterstützungsgerätenentladen wurde 12,13,14. Derzeit sind die zellulären und molekularen Mechanismen, die den umgekehrten Umbau im Lungenkreislauf und im RV-Myokard vorantreiben, unklar. Ihr Verständnis kann jedoch wichtige Einblicke in physiologische Signalwege liefern, die therapeutisch genutzt werden können, um den Lungengefäß- und RV-Remodeling bei PH-LHD und anderen Formen von PH umzukehren.
Ein geeignetes präklinisches Modell, das die pathophysiologischen und molekularen Merkmale von PH-LHD adäquat repliziert, kann für translationale Studien bei drucküberlastinduzierter kongestiver Herzinsuffizienz aufgrund von chirurgischem Aortenbanding (AoB) bei Rattenverwendet werden 4,15,16. Im Vergleich zu einer ähnlichen Herzinsuffizienz aufgrund von Drucküberlastung im murinen Modell der transversalen Aortenverengung (TAC)17 führt die Bandenbildung der aufsteigenden Aorta über der Aortenwurzel bei AoB-Ratten nicht zu Bluthochdruck in der linken Halsschlagader, da die Bandingstelle proximal des Abflusses der linken Halsschlagader aus der Aorta ist. Infolgedessen verursacht AoB keine linksseitige neuronale Verletzung im Kortex, wie es für TAC18 charakteristisch ist und die das Studienergebnis beeinflussen kann. Im Vergleich zu anderen Nagetiermodellen von chirurgisch induziertem PH-LHD erweisen sich Rattenmodelle im Allgemeinen und AoB im Besonderen als robuster, reproduzierbarer und replizieren den für PH-LHD-Patienten charakteristischen Umbau des Lungenkreislaufs. Gleichzeitig ist die perioperative Letalität niedrig19. Erhöhte LV-Drücke und LV-Dysfunktion bei AoB-Ratten induzieren die PH-LHD-Entwicklung, was zu erhöhten RV-Drücken und RV-Umbau führt. Daher hat sich das AoB-Rattenmodell in einer Reihe früherer Studien unabhängiger Gruppen, einschließlich uns, als äußerst nützlich erwiesen, um Pathomechanismen des pulmonalen vaskulären Remodells zu identifizieren und mögliche Behandlungsstrategien für PH-LHD 4,15,20,21,22,23,24,25 zu testen.
In der vorliegenden Studie wurde das AoB-Rattenmodell verwendet, um ein chirurgisches Verfahren der Aortendebandierung zu etablieren, um Mechanismen des umgekehrten Remodells in der Lungenvaskulatur und im RV zu untersuchen. Zuvor wurden myokardiale Reverse-Remodeling-Modelle wie die Aortendebandierung bei Mäusen26 und Ratten27 entwickelt, um die zellulären und molekularen Mechanismen zu untersuchen, die die Regression der linksventrikulären Hypertrophie regulieren, und mögliche therapeutische Optionen zur Förderung der myokardialen Hypertrophie zu testen. Genesung. Darüber hinaus hat eine begrenzte Anzahl früherer Studien die Auswirkungen der Aortendebandierung auf PH-LHD bei Ratten untersucht und gezeigt, dass die Aortendebandierung die mediale Hypertrophie in pulmonalen Arteriolen umkehren, die Expression von Prä-Pro-Endothelin 1 normalisieren und die pulmonale Hämodynamik verbessernkann 27,28, was Hinweise auf die Reversibilität von PH bei Ratten mit Herzinsuffizienz liefert. Hier werden die technischen Abläufe der Banderolierchirurgie optimiert und standardisiert, z.B. durch Anwendung einer Tracheotomie anstelle einer Endotrachealintubation oder durch die Verwendung von Titanclips eines definierten Innendurchmessers für die Aortenbandage anstelle von Polypropylennähten mit einer stumpfen Nadel26,27 und sorgen so für eine bessere Kontrolle der chirurgischen Eingriffe, eine erhöhte Reproduzierbarkeit des Modells und eine verbesserte Überlebensrate.
Aus wissenschaftlicher Sicht liegt die Bedeutung des PH-LHD-Debandierungsmodells nicht nur in der Demonstration der Reversibilität des kardiovaskulären und pulmonalen Phänotyps bei Herzinsuffizienz, sondern vor allem in der Identifizierung molekularer Treiber, die einen umgekehrten Remodeling in Lungenarterien auslösen und/oder aufrechterhalten, als vielversprechende Kandidaten für zukünftiges therapeutisches Targeting.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Amoxicillin</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td>PC: 04150075615985</td>
			<td>Antibiotic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-BNP antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab239510</td>
			<td>Western Blotting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aquasonic 100 Ultrasound gel</td>
			<td>Parker Laboratories</td>
			<td>BT-025-0037L</td>
			<td>Echocardiography consumables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>6029009.00.00</td>
			<td>Eye ointment 
			eye ointment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprosol (Carprofen)</td>
			<td>CP-Pharma</td>
			<td>401808.00.00</td>
			<td>Analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip holder</td>
			<td>Weck stainless USA</td>
			<td>523140S</td>
			<td>Surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors Tungsten carbide</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14568-12</td>
			<td>Surgical scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors Tungsten carbide</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14568-09</td>
			<td>Surgical scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-resolution imaging system</td>
			<td>FUJIFILM VisualSonics, Amsterdam, Netherlands</td>
			<td>VeVo 3100</td>
			<td>Echocardiography machine. Images were acquired with pulse-wave Doppler mode, M-mode and B-mode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>CP-Pharma</td>
			<td>400806.00.00</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>CP-Pharma</td>
			<td>401650.00.00</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mathieu needle holder</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12010-14</td>
			<td>Surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical ventilator (Rodent ventilator)</td>
			<td>UGO Basile S.R.L.</td>
			<td>7025</td>
			<td>Volume controlled respirator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal clip</td>
			<td>Hemoclip</td>
			<td>523735</td>
			<td>Surgical consumables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M651</td>
			<td>Manual surgical microscope for microsurgical procedures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millar Mikro-Tip pressure catheters</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>SPR-671</td>
			<td>Hemodynamics assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moria Iris forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11373-12</td>
			<td>Surgical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Noyes spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15013-12</td>
			<td>Surgical scissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodine/iodophor solution</td>
			<td>B/Braun</td>
			<td>16332M01</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>4_35</td>
			<td>Hemodynamics assessment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene Suture, 4-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>EH7830</td>
			<td>Surgical consumables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rib spreader (Alm selfretaining retractor blunt, 70 mm, 2 3/4&#8243;)</td>
			<td>Austos</td>
			<td>AE-BV010R</td>
			<td>Surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serrated Graefe forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11052-10</td>
			<td>Surgical forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Suture, 4-0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>K871</td>
			<td>Surgical consumables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin disinfiction solution (colored)</td>
			<td>B/Braun</td>
			<td>19412M07</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectra 360 Elektrode gel</td>
			<td>Parker Laboratories</td>
			<td>TB-250-0241H</td>
			<td>Echocardiography consumables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sponge points tissue</td>
			<td>Sugi</td>
			<td>REF 30601</td>
			<td>Surgical consumables</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague-Dawley rat</td>
			<td>Janvier Labs, Le Genest-Saint-Isle, France</td>
			<td></td>
			<td>Study animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tracheal cannula</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Outer diameter 2 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazin</td>
			<td>CP-Pharma</td>
			<td>401510.00.00</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a model of reverse vascular remodeling in pulmonary hypertension due to left heart disease by aortic debanding in rats

Pulmonale Hypertonie aufgrund von Linksherzerkrankungen (PH-LHD) ist die häufigste Form von PH, aber ihre Pathophysiologie ist schlecht charakterisiert als die pulmonale arterielle Hypertonie (PAH). Dadurch fehlen zugelassene therapeutische Interventionen zur Behandlung oder Prävention von PH-LHD. Medikamente zur Behandlung von PH bei PAH-Patienten werden für die Behandlung von PH-LHD nicht empfohlen, da ein verminderter pulmonaler Gefäßwiderstand (PVR) und ein erhöhter pulmonaler Blutfluss bei erhöhtem linksseitigen Fülldruck zu einer Dekompensation des linken Herzens und einem Lungenödem führen können. Neue Strategien müssen entwickelt werden, um die PH bei LHD-Patienten umzukehren. Im Gegensatz zu PAH entwickelt sich die PH-LHD aufgrund einer erhöhten mechanischen Belastung, die durch die Verstopfung des Blutes in den Lungenkreislauf während der Linksherzinsuffizienz verursacht wird. Klinisch normalisiert die mechanische Entlastung des linken Ventrikels (LV) durch Aortenklappenersatz bei Patienten mit Aortenstenose oder durch Implantation von LV-Hilfsmitteln bei Patienten mit Herzinsuffizienz im Endstadium nicht nur den pulmonalen arteriellen und rechtsventrikulären (RV) Druck, sondern auch die PVR und liefert somit indirekte Hinweise auf einen umgekehrten Umbau im Lungengefäßsystem. Unter Verwendung eines etablierten Rattenmodells von PH-LHD aufgrund von Linksherzinsuffizienz, ausgelöst durch Drucküberlastung mit anschließender Entwicklung von PH, wird ein Modell entwickelt, um die molekularen und zellulären Mechanismen dieses physiologischen Reverse-Remodeling-Prozesses zu untersuchen. Insbesondere wurde eine Aortenentzündungsoperation durchgeführt, die zu einer umgekehrten Umgestaltung des LV-Myokards und seiner Entladung führte. Parallel dazu war eine vollständige Normalisierung des systolischen RV-Drucks und eine signifikante, aber unvollständige Umkehrung der RV-Hypertrophie nachweisbar. Dieses Modell könnte ein wertvolles Werkzeug darstellen, um die Mechanismen des physiologischen Reverse-Remodellings im Lungenkreislauf und im RV zu untersuchen, um therapeutische Strategien zur Behandlung von PH-LHD und anderen Formen von PH zu entwickeln.

Zunächst wurde eine erfolgreiche Aortendebandation durch eine transthorakale Echokardiographie bestätigt, die vor und nach dem Debandierungsverfahren bei AoB-Tieren durchgeführt wurde (Abbildung 6). Zu diesem Zweck wurde der Aortenbogen in der B-Mode-Ansicht der parasternalen Langachse (PLAX) bewertet. Die Position des Clips auf der aufsteigenden Aorta bei AoB-Tieren und ihre Abwesenheit nach der Deb-Operation wurde visualisiert (Abbildung 6A,B</stron...

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A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

Das vorliegende Protokoll beschreibt einen chirurgischen Eingriff zur Entfernung von aufsteigender Aortenbande in einem Rattenmodell der pulmonalen Hypertonie aufgrund einer Erkrankung des linken Herzens. Diese Technik untersucht endogene Mechanismen des umgekehrten Remodells im Lungenkreislauf und im rechten Herzen und informiert so über Strategien zur Umkehrung der pulmonalen Hypertonie und / oder der rechtsventrikulären Dysfunktion.

Ein Modell des umgekehrten vaskulären Remodells bei pulmonaler Hypertonie aufgrund von Linksherzerkrankungen durch Aortendebandation bei Ratten

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...

Unser Protokoll beschreibt einen chirurgischen Eingriff zur Entfernung der aufsteigenden Aortenbande in einem Rattenmodell der pulmonalen Hypertonie aufgrund einer Linksherzerkrankung, die zur Umkehrung der pulmonalen Hypertonie führt. Diese Technik stellt ein wertvolles Werkzeug dar, um Mechanismen des physiologischen Rückwärtsumbaus im Lungenkreislauf und im rechten Ventrikel zu untersuchen. Es kann bei der Entwicklung von Strategien zur Behandlung von pulmonaler Hypertonie helfen.Nachdem die chirurgischen Instrumente vorbereitet sind, legen Sie eine betäubte Ratte in Rückenlage auf einen sterilisierten Operationstisch. Fixieren Sie dann den Bauch und die Gliedmaßen des Tieres mit einem Klebeband und desinfizieren Sie die Tierhaut mit Povidon-Jod / Jodphor Lösung. Beachten Sie Narben und Nähte aus der primären chirurgischen Aortenbandage oder AoB-Operation.Nachdem Sie eine ausreichende Tiefe der Anästhesie mit Zehenkneifen sichergestellt haben, entfernen Sie die Nähte aus der primären AoB-Operation. Führen Sie dann eine Tracheotomie durch, indem Sie mit einer feinen Schere einen 7 bis 10 Millimeter langen zervikalen Mittellinienschnitt machen. Sezieren Sie mit Hilfe einer stumpfen Pinzette das zervikale Weichgewebe, um die Infrahyoidmuskulatur freizulegen.Dann, indem Sie die Muskeln in der Mittellinie spalten, visualisieren Sie die Luftröhre. Wenn Sie fertig sind, machen Sie einen Zwei-Millimeter-Luftröhreneinschnitt zwischen zwei Knorpelringen mit einer abgewinkelten Noyes-Federschere, um die Trachealkanüle mit einem Außendurchmesser von zwei Millimetern in die Luftröhre einzuführen. Sichern Sie dann die Kanüle mit einer 4-0-Seidennaht.Schließen Sie das andere Ende der Trachealkanüle an ein mechanisches Beatmungsgerät an, während der Totraum minimal bleibt. Halten Sie die perioperative Lungenbeatmung bei einer Atemfrequenz von 90 Atemzügen pro Minute bei einem Tidalvolumen von 8,5 Millilitern pro Kilogramm Körpergewicht. Für die Aortenabrundung machen Sie mit einer feinen Schere einen 20 Millimeter langen Hautschnitt zwischen der zweiten und dritten Rippe.Verteilen und schneiden Sie mit Hilfe einer kleineren chirurgischen Schere die Muskeln Schicht für Schicht, gefolgt von einem 10-Millimeter-Seitenschnitt entlang des Interkostalraums zwischen der zweiten und dritten Rippe. Verwenden Sie einen Rippenspreizer, um den Interkostalraum zwischen der zweiten und dritten Rippe zu erweitern, um ein chirurgisches Fenster zu erstellen. Trennen Sie mit Hilfe einer stumpfen Pinzette den Thymus von den Herz- und Rohrarterien, um die Aorta mit dem Clip zu visualisieren.Halten Sie den Clip mit Hilfe der Pinzette fest, gefolgt vom Entfernen des Bindegewebes um den Clip, um die Aorta freizulegen. Öffnen Sie den Clip mit einem Nadelhalter und entfernen Sie den Clip aus der Brusthöhle. Öffnen Sie vor dem Schließen der Brust die Lungenatlektase und sorgen Sie für eine ausreichende Lungenrekrutierung ohne Überdehnung mit mechanischer Beatmung, mit einem Tidalvolumen von 9,5 Millilitern pro Kilogramm Körpergewicht für 10 Minuten, und kehren Sie zu einem Tidalvolumen von 8,5 Millilitern pro Kilogramm Körpergewicht zurück.Schließen Sie später die tiefen Muskeln durch eine einfache unterbrochene Naht mit 4-0-Seide und verbinden Sie die oberen Muskeln mit einer einfachen kontinuierlichen Naht. Schließen Sie dann die Haut mit einer einfachen kontinuierlichen Naht. Trennen Sie die Trachealkanüle von der Beatmungsmaschine, während Sie die Ratte für spontane Atmung beobachten.Wenn das Tier beim Trennen nicht spontan atmet, schließen Sie das Beatmungsgerät wieder an und fahren Sie weitere fünf Minuten fort, bevor Sie den Vorgang wiederholen. Nachdem die Spontanatmung wiederhergestellt ist, entfernen Sie die Kanüle aus der Luftröhre und reinigen Sie die Flüssigkeit um die Luftröhre mit Schwammspitzen. Schließen Sie die Luftröhre mit einer einfachen Naht mit 6-0 Prolene und schließen Sie die Infrahyoidmuskeln in einer einfachen unterbrochenen Naht mit 4-0 Seide.Verbinden Sie die Haut in einer einfachen kontinuierlichen Naht, gefolgt von der Reinigung und Desinfektion der Muskeln und der Haut mit Povidon-Jod / Jodphor Lösung. Nach Abschluss des chirurgischen Eingriffs bringen Sie ein einzelnes Tier in einen Auffangkäfig mit zusätzlichem Sauerstoff und einer Infrarotlampe und legen Sie die Sauerstoffmaske in die Nähe der Schnauze der Ratte. In der Studie wurde die Position des Clips auf der aufsteigenden Aorta bei den AoB-Tieren und ihre Abwesenheit nach der Debandierungs- oder Deb-Operation visualisiert.Auch der Aortenblutfluss wurde durch gepulste Wellen-Doppler-Bildgebung vor und nach dem Clip bei AoB-Tieren vor der Debandierung und in entsprechenden Aortensegmenten nach der Deb-Operation bewertet. Die Ergebnisse zeigten eine deutliche Abschwächung des Blutflussgradienten im Einklang mit der funktionellen Debandierung. In der fünften Woche exprimierten die Deb-Ratten das natriuretische Peptid des Gehirns oder BNP in Konzentrationen, die mit denen der Scheintiere vergleichbar sind, was auf die Umkehrung des linken Ventrikels oder LV-Versagens durch die Aortenauflösung hinweist.Die Auswertung der LV-Funktion mittels transthorakaler Echokardiographie ergab bei den Deb-Tieren im Vergleich zu den AoB-Ratten eine erhöhte LV-Ejektionsfraktion und LV-Volumen. Die Deproduktionsoperation, die in der dritten Woche nach AoB durchgeführt wurde, führte zu einer signifikanten Verringerung des linksventrikulären systolischen Drucks und der LV-Hypertrophie im Vergleich zu den AoB-Tieren. Im Vergleich zu den AoB-Ratten in Woche drei und Woche fünf zeigten die Deb-Tiere auch eine signifikante Verringerung des rechtsventrikulären systolischen Drucks und der rechtsventrikulären Hypertrophie, was eine erfolgreiche Umkehrung der pulmonalen Hypertonie aufgrund einer Erkrankung des linken Herzens zeigte.Die kritischsten Schritte bei diesem Verfahren sind die Entfernung des Clips und die Rekrutierung der Lunge nach der Aortendebandation. Diese Schritte erhöhen, wenn sie richtig ausgeführt werden, das Überleben der Tiere.

Research

JoVE Journal

Medicine

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Aufsteigend Aortakonstriktion bei Ratten zur Erstellung von Drucküberlast Herzhypertrophie Modell

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Forschung

Medizin

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Beurteilung der Gefäßfunktion bei Patienten mit chronischer Nierenerkrankung

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Permanent Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen: Ein Modell der Post-Myokardinfarkt Umbau und Herzinsuffizienz

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

Ein Modell der kardialen Remodeling Durch Zusammenziehen der Bauchaorta bei Ratten

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Shunt-Chirurgie, Rechtsherzkatheter und Gefäß Morphometry in einem Rattenmodell für Durchfluss-induzierte pulmonale arterielle Hypertonie

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Induction and Phenotyping of Acute Right Heart Failure in a Large Animal Model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension

Induktion und Phänotypisierung der akuten Rechtsherzinsuffizienz in einem Großtiermodell der chronischen thromboembolischen pulmonalen Hypertonie

The development of acute right heart failure (ARHF) in the context of chronic pulmonary hypertension (PH) is associated with poor short-term outcomes. The ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Linken Atrial Stenose induzierten pulmonalen venösen Arterialization und Gruppe 2 pulmonale Hypertonie in der Ratte

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

Die linke Pneumonektomie kombiniert mit Monocrotaline oder Sugen als Modell der pulmonalen Hypertonie bei Ratten

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

Untersuchung des linksventrikulären Reverse Remodeling durch Aortendefletieren bei Nagetieren

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

A Rat Model of Pressure Overload Induced Moderate Remodeling and Systolic Dysfunction as Opposed to Overt Systolic Heart Failure

Ein Rattenmodell von Drucküberlastung induziert moderate Remodeling und systolische Dysfunktion im Gegensatz zu overt systolische Herzinsuffizienz

In response to an injury, such as myocardial infarction, prolonged hypertension or a cardiotoxic agent, the heart initially adapts through the activation ...