Name: atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots
Uploaded: 2022-03-31T13:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

Denne forskning blev finansieret af CSIC I + D 2018, bevilling nr. 95 (Mariana Sotelo Silveira).; CSIC Grupos (Omar Borsani) og PEDECIBA.

1. Forberedelse af plantematerialet og vækstbetingelser
<ol><li>For at generere det nødvendige plantemateriale steriliseres frøene af Arabidopsis vildtype og mutante linjer af interesse. BEMÆRK: I denne protokol brugte vi følgende: ttl1: T-DNA-indsættelseslinjer Salk_063943 (for TTL1; AT1G53300) - Columbia-0 (Col-0) vildtype; Procuste1 (prc1-1) mutanten, som består af en knock-out mutation (Q720stop) i CESA6-genet (AT5G64740), som tidligere beskrev...

<ol>
	<li>Anderson, C. T., Kieber, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+construction,+perception,+and+remodeling+of+plant+cell+walls.">Dynamic construction, perception, and remodeling of plant cell walls.</a> Annual Review of Plant Biology. 71, 39-69 (2020).</li><li>Roeder, A. H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifteen+compelling+open+questions+in+plant+cell+biology.">Fifteen compelling open questions in plant cell biology.</a> The Plant Cell. 34 (1), 72-102 (2022).</li><li>Zhang, B., Gao, Y., Zhang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+plant+cell+wall:+Biosynthesis,+construction,+and+functions.">The plant cell wall: Biosynthesis, construction, and functions.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 63 (1), 251-272 (2021).</li><li>Hamant, O., Haswell, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+behind+the+wall:+Sensing+mechanical+cues+in+plants.">Life behind the wall: Sensing mechanical cues in plants.</a> BMC Biology. 15 (59), 1-9 (2017).</li><li>Scheres, B., Benfey, P., Dolan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Root+development.">Root development.</a> The Arabidopsis Book. 1, 0101 (2002).</li><li>Cuadrado-Pedetti, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+arabidopsis+tetratricopeptide+thioredoxin-like+1+gene+is+involved+in+anisotropic+root+growth+during+osmotic+stress+adaptation.">The arabidopsis tetratricopeptide thioredoxin-like 1 gene is involved in anisotropic root growth during osmotic stress adaptation.</a> Genes. 12 (2), 236 (2021).</li><li>Milani, P., Braybrook, S. A., Boudaoud, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shrinking+the+hammer:+micromechanical+approaches+to+morphogenesis.">Shrinking the hammer: micromechanical approaches to morphogenesis.</a> Journal of Experimental Botany. 64 (15), 4651-4662 (2013).</li><li>Braybrook, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+elasticity+of+plant+cells+with+atomic+force+microscopy.">Measuring the elasticity of plant cells with atomic force microscopy.</a> Methods in Cell Biology. 125, 237-254 (2015).</li><li>Bidhendi, A. J., Geitmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+to+quantify+primary+plant+cell+wall+mechanics.">Methods to quantify primary plant cell wall mechanics.</a> Journal of Experimental Botany. 70 (14), 3615-3648 (2019).</li><li>Desnos, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+mutants+identify+two+distinct+genetic+pathways+controlling+hypocotyl+cell+elongation,+respectively+in+dark-+and+light-grown+Arabidopsis+seedlings.">Procuste1 mutants identify two distinct genetic pathways controlling hypocotyl cell elongation, respectively in dark- and light-grown Arabidopsis seedlings.</a> Development. 122 (2), 683-693 (1996).</li><li>Fagard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+encodes+a+cellulose+synthase+required+for+normal+cell+elongation+specifically+in+roots+and+dark-grown+hypocotyls+of+arabidopsis.">Procuste1 encodes a cellulose synthase required for normal cell elongation specifically in roots and dark-grown hypocotyls of arabidopsis.</a> The Plant Cell. 12 (12), 2409-2423 (2000).</li><li>Murashige, T., Skoog, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+revised+medium+for+rapid+growth+and+bio+assays+with+tobacco+tissue+cultures.">A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures.</a> Physiologia Plantarum. 15 (3), 473-497 (1962).</li><li>Perilli, S., Sabatini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+root+meristem+size+development.">Analysis of root meristem size development.</a> Methods in Molecular Biology. 655, 177-187 (2010).</li><li>Sader, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+virtual+instrument+to+standardise+the+calibration+of+atomic+force+microscope+cantilevers.">A virtual instrument to standardise the calibration of atomic force microscope cantilevers.</a> Review of Scientific Instruments. 87 (9), 093711 (2016).</li><li>Collinsworth, A. M., Zhang, S., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apparent+elastic+modulus+and+hysteresis+of+skeletal+muscle+cells+throughout+differentiation.">Apparent elastic modulus and hysteresis of skeletal muscle cells throughout differentiation.</a> American Journal of Physiology - Cell Physiology. 283 (4), 1219-1227 (2002).</li><li>Mathur, A. B., Collinsworth, A. M., Reichert, W. M., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial,+cardiac+muscle+and+skeletal+muscle+exhibit+different+viscous+and+elastic+properties+as+determined+by+atomic+force+microscopy.">Endothelial, cardiac muscle and skeletal muscle exhibit different viscous and elastic properties as determined by atomic force microscopy.</a> Journal of Biomechanics. 34 (12), 1545-1553 (2001).</li><li>Sirghi, L., Ponti, J., Broggi, F., Rossi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+elasticity+and+adhesion+of+live+cells+by+atomic+force+microscopy+indentation.">Probing elasticity and adhesion of live cells by atomic force microscopy indentation.</a> European Biophysics Journal. 37 (6), 935-945 (2008).</li><li>Peaucelle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AFM-based+mapping+of+the+elastic+properties+of+cell+walls:+At+tissue,+cellular,+and+subcellular+resolutions.">AFM-based mapping of the elastic properties of cell walls: At tissue, cellular, and subcellular resolutions.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (89), e51317 (2014).</li><li>Peaucelle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pectin-induced+changes+in+cell+wall+mechanics+underlie+organ+initiation+in+Arabidopsis.">Pectin-induced changes in cell wall mechanics underlie organ initiation in Arabidopsis.</a> Current Biology. 21 (20), 1720-1726 (2011).</li><li>Fernandes, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+epidermal+cells+of+whole+living+roots+of+Arabidopsis+thaliana:+An+atomic+force+microscopy+study.">Mechanical properties of epidermal cells of whole living roots of Arabidopsis thaliana: An atomic force microscopy study.</a> Physical Review E. 85 (2), 21916 (2012).</li></ol>

Celle- og cellevægsmekanik bliver i stigende grad relevant for at få indsigt i, hvordan mekanik påvirker vækstprocesser. Efterhånden som fysiske kræfter formerer sig over betydelige afstande i fast væv, bliver undersøgelsen af ændringer i cellevæggens fysiske egenskaber, og hvordan de sanses, kontrolleres, indstilles og påvirker plantens vækst, et vigtigt fagområde 2,3,8.
En metode præse...

Planteceller er omgivet af en cellevæg, der er en kompleks struktur sammensat af interagerende netværk af polysaccharider, proteiner, metabolitter og vand, der varierer i tykkelse fra 0,1 til flere μm afhængigt af celletypen og vækstfasen 1,2. Cellevæg mekaniske egenskaber spiller en væsentlig rolle i væksten af planter. Cellevæggens lave stivhedsværdier er blevet foreslået som en forudsætning for cellevækst og cellevægsudvidelse, og der er stigende tegn på, at alle celler fornemmer mekaniske kræfter til at udføre deres funktioner. Det diskuteres dog stadig, om ændringer i cellevæggens fysiske egenskaber bestemmer celleskæbne 2,3,4. Fordi planteceller ikke bevæger sig under udviklingen, afhænger den endelige form af et organ af, hvor langt og i hvilken retning en celle udvider sig. Arabidopsis rod er således en god model til at studere virkningen af cellevægs fysiske egenskaber i celleudvidelse, fordi forskellige typer ekspansion forekommer i forskellige områder af roden. For eksempel er anisotrop ekspansion tydelig i forlængelseszonen og især mærkbart i de epidermale celler5.
Metoden beskrevet her blev brugt til at karakterisere de fysiske egenskaber af cellevæggen i epidermale celler på nanoskala af levende Arabidopsis rødder ved hjælp af et Atomic Force Microscope (AFM) kombineret med et omvendt fluorescensfasemikroskop 6. For en omfattende revision af AFM-teknikken, læs 7,8,9.
Denne protokol skitserer en grundlæggende prøveforberedelsesmetode og en generel metode til AFM-baserede elasticitetsmålinger af plantecellevægge.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63533/63533fig01v2.jpg"> Figur 1: Skematisk oversigt over kraftindrykningseksperiment i Arabidopsis rødder ved hjælp af atomkraftmikroskopi (AFM). Skemaet giver et overblik over trinene i et kraftindrykningseksperiment fra forberedelsen af substratet til at immobilisere rodprøven fast (1-2), bekræftelse af rodlevedygtighed gennem propidiumiodidfarvning (3), cantileverpositionering på overfladen af en langstrakt epidermal celle af den primære rod (4-5), kraftkurvemåling (6) og kraftkurvebehandling for at beregne det tilsyneladende Youngs modul (7-8). EZ: forlængelseszone. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63533/63533fig01largev2.jpg" target="_blank">Klik her for at se en større version af denne figur.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 x Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Include sodium chloride and phosphate buffer and is formulated to prevent osmotic shock and maintain water balance in living cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM software</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic force microscopy (AFM)</td>
			<td>BioScope Catalyst, Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalyst Probe holder-fluid</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>CAT-FCH</td>
			<td>A probe holder for the Bioscope Catalyst, designed for fluid operation in contact or Tapping Mode.&#160; Also compatible with air operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryoscopic osmometer; model OSMOMAT 030</td>
			<td>Gonotech, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murashige &#38; Skoog Medium</td>
			<td>Duchess Biochemie</td>
			<td>M0221</td>
			<td>Original concentration, (1962)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical inverted microscope coupled to the AFM</td>
			<td>Olympus IX81, Miami, FL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEGAMIL</td>
			<td>ANAEROBICOS S.R.L., Buenos Aires, Argentina</td>
			<td>100429</td>
			<td>Neutral, non acidic silicone glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Deltalab</td>
			<td>200201.B</td>
			<td>Polystyrene, 55 x 14 mm, radiation sterile.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium iodide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4170</td>
			<td>For root viability test.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon nitride probe, DNP-10, cantilever A</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>DNP-10/A</td>
			<td>For force modulation microscopy in liquid operation. Probe tip radius of 20-60 nm. 175-&#956;m-long triangular cantilever,&#160; with a spring constant of 0.35 N/m.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4537</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots

En metode er beskrevet her for at karakterisere de fysiske egenskaber af cellevæggen af epidermale celler af levende Arabidopsis rødder gennem nanoindrykninger med et atomkraftmikroskop (AFM) kombineret med et optisk omvendt fluorescensmikroskop. Metoden består i at anvende kontrollerede kræfter på prøven, mens den måler dens deformation, hvilket muliggør kvantificering af parametre som det tilsyneladende Youngs modul af cellevægge ved subcellulære opløsninger. Det kræver en omhyggelig mekanisk immobilisering af prøven og korrekt valg af indgange og indrykningsdybder. Selvom det kun kan bruges i eksternt væv, tillader denne metode karakterisering af mekaniske ændringer i plantecellevægge under udvikling og muliggør korrelation af disse mikroskopiske ændringer med væksten af et helt organ.

Eksperimenter med kraftindrykning Følgende tekst præsenterer nogle forventede resultater, når der udføres et kraftindrykningseksperiment for at vise det typiske output, der kan forventes, når protokollen er godt udført.
Kurver for kraftforskydning Repræsentative kraftindrykningsplotter, der blev opnået indrykning af levende prøver på en position placeret i midten af cellen i rodforlængelseszonen, er vist i figur 2...

Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

Atomkraftmikroskopiindrykningsprotokollen giver mulighed for at dissekere rollen som de fysiske egenskaber ved cellevæggen i en bestemt celle i et væv eller organ under normal eller begrænset vækst (dvs. under vandunderskud).

Atomic Force mikroskopi for at studere de fysiske egenskaber af epidermale celler af levende Arabidopsis rødder

A method is described here to characterize the physical properties of the cell wall of epidermal cells of living Arabidopsis roots through ...

Denne metode gør det muligt at kvantificere ændringer i plantecellevæggens fysiske egenskaber under udviklingen og relatere disse mikroskopiske ændringer til væksten af et helt organ. Den største fordel ved denne teknik er, at den ikke er invasiv, og den kræver ingen behandling, der tillader in vivo-kvantificering af cellevæggens fysiske egenskaber at tilføje subcellulær opløsning relativt hurtigt. Til at begynde med skal du sprede et tyndt lag silikonelim i petriskålen med en dækslip og lade den stå i luften i 45 sekunder.Brug pincet til at placere frøplanten på limen og orientere dens retning for at undgå kontakt mellem frøplantens fremspringende dele og cantileveren. Tryk derefter forsigtigt på roden til silikonelimelaget for at binde det fast. Lad det stå i 45 sekunder, og tilføj 1X PBS-løsningen.Monter standard siliciumnitridcantileveren med en pyramidespids i AFM-sondeholderen for væske, og juster laseren på udkragningen tæt på spidsens position. Flyt derefter fotodioden for at placere laserpletten i midten af detektoren. Kalibrer afbøjningsfølsomheden ved at udføre en fordybning med en rampestørrelse på 3 mikrometer, en indryknings- og tilbagetrækningshastighed på 0,6 mikrometer i sekundet og en udløsertærskel på 0,5 volt.Sørg for, at sonden ikke interagerer med prøven, og kalibrer udkragningens fjederkonstant. Brug det termiske melodiværktøj til at klikke på kalibrer efterfulgt af termisk melodi eller på det termiske melodiikon i nano-scope-værktøjslinjen og indtaste cantilevertemperaturen. Når du har valgt et frekvensområde, skal du klikke på prøvens harmoniske oscillatorvæskeknap.Klik derefter på erhvervede data i det termiske melodipanel. Juster nu medianfilterbredden til tre. Juster PSD-binwidth for at reducere støjen i de erhvervede data ved at beregne gennemsnittet og indstille tilpasningsgrænser omkring den første resonansspids.Klik på beregn fjederkonstanten K, og klik derefter på ja i pop op-vinduet, og spørg, om brugeren vil bruge denne værdi. Brug det omvendte optiske mikroskop ved 10, 20 og 40 gange øjenstykkeforstørrelse til at placere AFM-sonden på overfladen af den fjerde aflange epidermale celle i den primære rod, der sikrer at placere den i midten af cellen. Med den tidligere beregnede fjederkonstante værdi opnåede kraftkurver med en rampestørrelse på 3 mikrometer, en udløsertærskel på 11 nanonewton og en indryknings- og tilbagetrækningshastighed på 0,6 mikrometer i sekundet på udvalgte punkter.Få kraftkurver fra tre celler pr. rod for hver behandling, og fang mindst 150 kraftkurver for hver rod. Dette plot viser et forventet resultat, når et kraftindrykningseksperiment udføres på levende prøver placeret i midten af cellen i rodforlængelseszonen. Når AFM-spidsen begynder at indrykke, overfladen af cellevæggen, begynder kraften at stige på grund af cellevæggens modstand mod ærekrænkelsen.Kraftforøgelsen fortsætter, indtil den maksimale kraftværdi er nået. Efter dette punkt begynder losningsdelen af indrykningen. Kraften vokser efter en parabel i indrykningsdelen, hvilket er vigtigt for at tilpasse hver kurve til forudsigelsesmodellen for pyramideformede indgange, der bruges til beregninger.Som en tilpasningsparameter skal kontaktpunktets position svare til cellevægsoverfladen før indrykning og betragtes som oprindelsen til AFM-spidsforskydningen. Kraftkurver, hvor det er umuligt at detektere kontaktpunktet, før indrykningen skal kasseres. Endvidere skal belastnings- og losningskurven for kraftindrykningseksperimentet være blottet for støj.Efter at have tilpasset hver kraftkurve til modellen blev histogrammer opnået, der viste fordelingen af frekvensen af de opnåede værdier af det tilsyneladende Youngs modul. Dette histogram viser hyppigheden opnået med et sæt 201 vellykkede fordybninger på ni forskellige celler af tre forskellige planter af Columbia Zero dyrket under kontrolforhold. Indrykning kan være vanskelig for nogle genotyper på grund af rodens morfologi.For eksempel voksede TTL 1 PRC 1-1 dobbeltmutant i svær osmotisk stress. Disse histogrammer viser sandsynlighedsfordelingen af de opnåede værdier af det tilsyneladende Youngs modul fra ni forskellige celler. Kun histogram H, der svarer til en celle, kunne tilpasses en gaussisk fordeling.Det metal, der præsenteres her, kan kombineres med andre teknikker såsom væksthastighedsundersøgelser eller analyse af cellevæggens kemiske sammensætning. Disse andre teknikker vil yderligere supplere information for at forstå, hvordan den kemiske sammensætning på cellevæggens fysiske egenskaber påvirker væksten af et organ.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Levende-billeddannelse af<em&gt; Drosophila</em&gt; Puppe Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Isolating Hair Follicle Stem Cells and Epidermal Keratinocytes from Dorsal Mouse Skin

Isolering hårsæk Stamceller og epidermiskeratinocytter fra Dorsal Mouse Skin

The hair follicle (HF) is an ideal system for studying the biology and regulation of adult stem cells (SCs). This dynamic mini organ is replenished by ...

Combining Intravital Fluorescent Microscopy (IVFM) with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Kombinerer Intravital fluorescerende mikroskopi (IVFM) med genetiske modeller at studere Engraftment dynamikken i hæmatopoietisk celler til knoglemarven nicher

Increasing evidence indicates that normal hematopoiesis is regulated by distinct microenvironmental cues in the BM, which include specialized cellular ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

Lev Konfokal Imaging af Udvikling Arabidopsis Blomster

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Lys Sheet-baserede Fluorescence Microscopy af Leve- eller fikseres og farves<em&gt; Tribolium castaneum</em&gt; Embryoner

The red flour beetle Tribolium castaneum has become an important insect model organism in developmental genetics and evolutionary developmental biology. ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule dyrkning for Live-celle Imaging af Zygote polarisering og Embryo mønstre i Arabidopsis thaliana

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Isolation and Characterization of Primary Rat Valve Interstitial Cells: A New Model to Study Aortic Valve Calcification

Isolering og karakterisering af primære rotte ventil interstitielle celler: en ny Model til at studere aortaklappen forkalkning

Calcific aortic valve disease (CAVD) is characterized by the progressive thickening of the aortic valve leaflets. It is a condition frequently found in ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

Levende celle billeddannelse af kromosom Segregation under mitosen

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Beregningsmæssige analyse af Caenorhabditis elegans kønscelleoverførsel at studere Distribution kerner, proteiner og cytoskelettet

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

I Vitro Generation af Somite derivater fra menneskelige induceret celler pluripotente stamceller

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...