Name: atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots
Uploaded: 2022-03-31T13:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

Dit onderzoek werd gefinancierd door CSIC I+D 2018, subsidie nr. 95 (Mariana Sotelo Silveira).; CSIC Grupos (Omar Borsani) en PEDECIBA.

1. Voorbereiding van het plantmateriaal en groeiomstandigheden
<ol><li>Om het benodigde plantmateriaal te genereren, steriliseert u de zaden van het wildtype Arabidopsis en de mutante lijnen van belang. OPMERKING: In dit protocol hebben we het volgende gebruikt: ttl1: T-DNA-invoeglijnen Salk_063943 (voor TTL1; AT1G53300) - Columbia-0 (Col-0) wild-type; de Procuste1 (prc1-1) mutant, die bestaat uit een knock-out mutant (Q720stop) in het CESA6 gen (AT5G6474...

<ol>
	<li>Anderson, C. T., Kieber, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+construction,+perception,+and+remodeling+of+plant+cell+walls.">Dynamic construction, perception, and remodeling of plant cell walls.</a> Annual Review of Plant Biology. 71, 39-69 (2020).</li><li>Roeder, A. H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifteen+compelling+open+questions+in+plant+cell+biology.">Fifteen compelling open questions in plant cell biology.</a> The Plant Cell. 34 (1), 72-102 (2022).</li><li>Zhang, B., Gao, Y., Zhang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+plant+cell+wall:+Biosynthesis,+construction,+and+functions.">The plant cell wall: Biosynthesis, construction, and functions.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 63 (1), 251-272 (2021).</li><li>Hamant, O., Haswell, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+behind+the+wall:+Sensing+mechanical+cues+in+plants.">Life behind the wall: Sensing mechanical cues in plants.</a> BMC Biology. 15 (59), 1-9 (2017).</li><li>Scheres, B., Benfey, P., Dolan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Root+development.">Root development.</a> The Arabidopsis Book. 1, 0101 (2002).</li><li>Cuadrado-Pedetti, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+arabidopsis+tetratricopeptide+thioredoxin-like+1+gene+is+involved+in+anisotropic+root+growth+during+osmotic+stress+adaptation.">The arabidopsis tetratricopeptide thioredoxin-like 1 gene is involved in anisotropic root growth during osmotic stress adaptation.</a> Genes. 12 (2), 236 (2021).</li><li>Milani, P., Braybrook, S. A., Boudaoud, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shrinking+the+hammer:+micromechanical+approaches+to+morphogenesis.">Shrinking the hammer: micromechanical approaches to morphogenesis.</a> Journal of Experimental Botany. 64 (15), 4651-4662 (2013).</li><li>Braybrook, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+elasticity+of+plant+cells+with+atomic+force+microscopy.">Measuring the elasticity of plant cells with atomic force microscopy.</a> Methods in Cell Biology. 125, 237-254 (2015).</li><li>Bidhendi, A. J., Geitmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+to+quantify+primary+plant+cell+wall+mechanics.">Methods to quantify primary plant cell wall mechanics.</a> Journal of Experimental Botany. 70 (14), 3615-3648 (2019).</li><li>Desnos, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+mutants+identify+two+distinct+genetic+pathways+controlling+hypocotyl+cell+elongation,+respectively+in+dark-+and+light-grown+Arabidopsis+seedlings.">Procuste1 mutants identify two distinct genetic pathways controlling hypocotyl cell elongation, respectively in dark- and light-grown Arabidopsis seedlings.</a> Development. 122 (2), 683-693 (1996).</li><li>Fagard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+encodes+a+cellulose+synthase+required+for+normal+cell+elongation+specifically+in+roots+and+dark-grown+hypocotyls+of+arabidopsis.">Procuste1 encodes a cellulose synthase required for normal cell elongation specifically in roots and dark-grown hypocotyls of arabidopsis.</a> The Plant Cell. 12 (12), 2409-2423 (2000).</li><li>Murashige, T., Skoog, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+revised+medium+for+rapid+growth+and+bio+assays+with+tobacco+tissue+cultures.">A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures.</a> Physiologia Plantarum. 15 (3), 473-497 (1962).</li><li>Perilli, S., Sabatini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+root+meristem+size+development.">Analysis of root meristem size development.</a> Methods in Molecular Biology. 655, 177-187 (2010).</li><li>Sader, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+virtual+instrument+to+standardise+the+calibration+of+atomic+force+microscope+cantilevers.">A virtual instrument to standardise the calibration of atomic force microscope cantilevers.</a> Review of Scientific Instruments. 87 (9), 093711 (2016).</li><li>Collinsworth, A. M., Zhang, S., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apparent+elastic+modulus+and+hysteresis+of+skeletal+muscle+cells+throughout+differentiation.">Apparent elastic modulus and hysteresis of skeletal muscle cells throughout differentiation.</a> American Journal of Physiology - Cell Physiology. 283 (4), 1219-1227 (2002).</li><li>Mathur, A. B., Collinsworth, A. M., Reichert, W. M., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial,+cardiac+muscle+and+skeletal+muscle+exhibit+different+viscous+and+elastic+properties+as+determined+by+atomic+force+microscopy.">Endothelial, cardiac muscle and skeletal muscle exhibit different viscous and elastic properties as determined by atomic force microscopy.</a> Journal of Biomechanics. 34 (12), 1545-1553 (2001).</li><li>Sirghi, L., Ponti, J., Broggi, F., Rossi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+elasticity+and+adhesion+of+live+cells+by+atomic+force+microscopy+indentation.">Probing elasticity and adhesion of live cells by atomic force microscopy indentation.</a> European Biophysics Journal. 37 (6), 935-945 (2008).</li><li>Peaucelle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AFM-based+mapping+of+the+elastic+properties+of+cell+walls:+At+tissue,+cellular,+and+subcellular+resolutions.">AFM-based mapping of the elastic properties of cell walls: At tissue, cellular, and subcellular resolutions.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (89), e51317 (2014).</li><li>Peaucelle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pectin-induced+changes+in+cell+wall+mechanics+underlie+organ+initiation+in+Arabidopsis.">Pectin-induced changes in cell wall mechanics underlie organ initiation in Arabidopsis.</a> Current Biology. 21 (20), 1720-1726 (2011).</li><li>Fernandes, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+epidermal+cells+of+whole+living+roots+of+Arabidopsis+thaliana:+An+atomic+force+microscopy+study.">Mechanical properties of epidermal cells of whole living roots of Arabidopsis thaliana: An atomic force microscopy study.</a> Physical Review E. 85 (2), 21916 (2012).</li></ol>

Cel- en celwandmechanica worden steeds relevanter om inzicht te krijgen in hoe mechanica groeiprocessen beïnvloedt. Naarmate fysieke krachten zich over aanzienlijke afstanden in vaste weefsels voortplanten, wordt de studie van veranderingen in de fysieke eigenschappen van de celwand en hoe ze worden waargenomen, gecontroleerd, afgestemd en de groei van de plant beïnvloeden, een belangrijk studiegebied 2,3,8.
<p class="jove...

Plantencellen worden omgeven door een celwand die een complexe structuur is die bestaat uit op elkaar inwerkende netwerken van polysacchariden, eiwitten, metabolieten en water die in dikte varieert van 0,1 tot enkele μm, afhankelijk van het celtype en de groeifase 1,2. Celwand mechanische eigenschappen spelen een essentiële rol bij de groei van planten. Lage stijfheidswaarden van de celwand zijn voorgesteld als een voorwaarde voor celgroei en celwanduitbreiding, en er is steeds meer bewijs dat alle cellen mechanische krachten voelen om hun functies uit te voeren. Er wordt echter nog steeds gediscussieerd of veranderingen in de fysieke eigenschappen van de celwand het lot van de cel bepalen 2,3,4. Omdat plantencellen niet bewegen tijdens de ontwikkeling, hangt de uiteindelijke vorm van een orgaan af van hoe ver en in welke richting een cel uitzet. Arabidopsiswortel is dus een goed model om de impact van fysieke eigenschappen van celwand in celexpansie te bestuderen, omdat verschillende soorten expansie voorkomen in verschillende regio's van de wortel. Anisotrope expansie is bijvoorbeeld duidelijk in de rekzone en vooral merkbaar in de epidermale cellen5.
De hier beschreven methode werd gebruikt om de fysische eigenschappen van de celwand van epidermale cellen op nanoschaal van levende Arabidopsis-wortels te karakteriseren met behulp van een Atomic Force Microscope (AFM) in combinatie met een omgekeerde fluorescentiefasemicroscoop6. Voor een uitgebreide herziening van de AFM-techniek, lees 7,8,9.
Dit protocol schetst een basismethode voor monstervoorbereiding en een algemene methode voor afm-gebaseerde elasticiteitsmetingen van plantencelwanden.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63533/63533fig01v2.jpg"> Figuur 1: Schematisch overzicht van kracht-indentatie experiment in Arabidopsis wortels met behulp van atomic force microscopie (AFM). Het schema geeft een overzicht van de stappen van een Force-Indentation-experiment vanaf de voorbereiding van het substraat om het wortelmonster stevig te immobiliseren (1-2), bevestiging van de levensvatbaarheid van de wortel door propidiumjodidekleuring (3), cantileverpositionering op het oppervlak van een langwerpige epidermale cel van de primaire wortel (4-5), krachtcurvemeting (6) en krachtcurveverwerking om de schijnbare Young's modulus te berekenen (7-8). EZ: rekzone. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63533/63533fig01largev2.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 x Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Include sodium chloride and phosphate buffer and is formulated to prevent osmotic shock and maintain water balance in living cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM software</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic force microscopy (AFM)</td>
			<td>BioScope Catalyst, Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalyst Probe holder-fluid</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>CAT-FCH</td>
			<td>A probe holder for the Bioscope Catalyst, designed for fluid operation in contact or Tapping Mode.&#160; Also compatible with air operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryoscopic osmometer; model OSMOMAT 030</td>
			<td>Gonotech, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murashige &#38; Skoog Medium</td>
			<td>Duchess Biochemie</td>
			<td>M0221</td>
			<td>Original concentration, (1962)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical inverted microscope coupled to the AFM</td>
			<td>Olympus IX81, Miami, FL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEGAMIL</td>
			<td>ANAEROBICOS S.R.L., Buenos Aires, Argentina</td>
			<td>100429</td>
			<td>Neutral, non acidic silicone glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Deltalab</td>
			<td>200201.B</td>
			<td>Polystyrene, 55 x 14 mm, radiation sterile.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium iodide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4170</td>
			<td>For root viability test.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon nitride probe, DNP-10, cantilever A</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>DNP-10/A</td>
			<td>For force modulation microscopy in liquid operation. Probe tip radius of 20-60 nm. 175-&#956;m-long triangular cantilever,&#160; with a spring constant of 0.35 N/m.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4537</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots

Hier wordt een methode beschreven om de fysische eigenschappen van de celwand van epidermale cellen van levende Arabidopsiswortels te karakteriseren door middel van nano-indentaties met een atoomkrachtmicroscoop (AFM) in combinatie met een optische omgekeerde fluorescentiemicroscoop. De methode bestaat uit het toepassen van gecontroleerde krachten op het monster tijdens het meten van de vervorming, waardoor parameters zoals de schijnbare Young's modulus van celwanden bij subcellulaire resoluties kunnen worden gekwantificeerd. Het vereist een zorgvuldige mechanische immobilisatie van het monster en een juiste selectie van inspringers en inkepingsdiepten. Hoewel het alleen in externe weefsels kan worden gebruikt, maakt deze methode het mogelijk om mechanische veranderingen in de celwanden van planten tijdens de ontwikkeling te karakteriseren en maakt het de correlatie van deze microscopische veranderingen met de groei van een heel orgaan mogelijk.

Experimenten met force-indentation De volgende tekst bevat enkele resultaten die worden verwacht wanneer een force-indentation-experiment wordt uitgevoerd om de typische uitvoer weer te geven die u kunt verwachten wanneer het protocol goed is uitgevoerd.
Krachtverplaatsingscurven Representatieve krachtinkepingsplots die zijn verkregen door levende monsters in te laten inspringen op een positie in het midden van de cel van de wortelrekzone, zijn weergegev...

Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

Het atoomkrachtmicroscopie-inkepingsprotocol biedt de mogelijkheid om de rol van de fysische eigenschappen van de celwand van een bepaalde cel van een weefsel of orgaan te ontleden tijdens normale of beperkte groei (d.w.z. onder watertekort).

Atomic Force Microscopie om de fysieke eigenschappen van epidermale cellen van levende Arabidopsis-wortels te bestuderen

A method is described here to characterize the physical properties of the cell wall of epidermal cells of living Arabidopsis roots through ...

Deze methode maakt het mogelijk om veranderingen in de fysieke eigenschappen van de plantencelwand tijdens de ontwikkeling te kwantificeren en deze microscopische veranderingen te relateren aan de groei van een heel orgaan. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het niet invasief is en dat er geen behandeling nodig is die de in vivo kwantificering van fysieke eigenschappen van de celwand relatief snel subcellulaire resolutie mogelijk maakt. Om te beginnen, verspreid een dunne laag siliconenlijm in de petrischaal met een afdekslip en laat het 45 seconden in de lucht.Plaats met een pincet de zaailing op de lijm en richt de richting om contact tussen de uitstekende delen van de zaailing en de uitkraging te voorkomen. Druk vervolgens de wortel zachtjes op de siliconenlijmlaag om deze stevig te binden. Laat het 45 seconden staan en voeg de 1X PBS-oplossing toe.Monteer de standaard siliciumnitride cantilever met een piramidale punt in de AFM-sondehouder voor vloeistof en lijn de laser uit op de cantilever dicht bij de positie van de tip. Verplaats vervolgens de fotodiode om de laserspot in het midden van de detector te plaatsen. Kalibreer de doorbuigingsgevoeligheid door een inkeping uit te voeren met een hellinggrootte van 3 micrometer, een inkepings- en retractiesnelheid van 0,6 micrometer per seconde en een triggerdrempel van 0,5 volt.Zorg ervoor dat de sonde geen interactie heeft met het monster en kalibreer de veerconstante van de cantilever. Klik met behulp van het hulpprogramma thermal tune op calibrate gevolgd door thermal tune of op het thermal tune-pictogram in de nanoscope-werkbalk en voer de cantilevertemperatuur in. Nadat u een frequentiebereik hebt geselecteerd, klikt u op de knop harmonische oscillatorvloeistof van het monster.Klik vervolgens op verkregen gegevens in het thermische tunepaneel. Pas nu de mediane filterbreedte aan op drie. Pas de PSD-binwidth aan om de ruis in de verkregen gegevens te verminderen door het gemiddelde te nemen en pasgrenzen in rond de eerste resonantiepiek.Klik op bereken veerconstante K en klik vervolgens op ja in het pop-upvenster, met de vraag of de gebruiker deze waarde wil gebruiken. Gebruik de omgekeerde optische microscoop bij 10, 20 en 40 keer de vergroting van het oogstuk en plaats de AFM-sonde op het oppervlak van de vierde langwerpige epidermale cel van de primaire wortel en zorg ervoor dat deze in het midden van de cel wordt geplaatst. Met de eerder berekende veerconstantewaarde verkregen krachtcurven met een hellinggrootte van 3 micrometer, een triggerdrempel van 11 nanonewton en een inkepings- en retractiesnelheid van 0,6 micrometer per seconde op geselecteerde punten.Verkrijg krachtcurven van drie cellen per wortel voor elke behandeling en vang ten minste 150 krachtcurven voor elke wortel. Deze grafiek toont een verwacht resultaat wanneer een krachtinkepingsexperiment wordt uitgevoerd op levende monsters die zich in het midden van de cel van de wortelrekzone bevinden. Wanneer de AFM-tip begint in te krimpen, begint het oppervlak van de celwand, de kracht toe te nemen vanwege de celwand die tegen de laster is.De toename van de kracht gaat door totdat de maximale krachtwaarde is bereikt. Na dit punt begint het losgedeelte van de inspringing. De kracht groeit na een parabool in het inspringingsgedeelte, wat belangrijk is om elke curve aan te passen aan het voorspellingsmodel voor piramidale inspringers die worden gebruikt voor berekeningen.Als passende parameter moet de positie van het contactpunt overeenkomen met het celwandoppervlak vóór de inkeping en wordt deze beschouwd als de oorsprong van de verplaatsing van de AFM-tip. Krachtcurven waarin het onmogelijk is om het contactpunt vóór de inkeping te detecteren, moeten worden weggegooid. Voorts moet de laad- en loscurve van het krachtinspringingsexperiment zonder geluid zijn.Na het aanpassen van elke krachtcurve aan het model, werden histogrammen verkregen die de verdeling van de frequentie van de verkregen waarden van de schijnbare Young's modulus toonden. Dit histogram toont de frequentie verkregen met een set van 201 succesvolle inkepingen op negen verschillende cellen van drie verschillende planten van Columbia Zero gekweekt in controleomstandigheden. Inkeping kan voor sommige genotypen moeilijk zijn vanwege de morfologie van de wortel.Bijvoorbeeld, de TTL 1 PRC 1-1 dubbele mutant groeide in ernstige osmotische stress. Deze histogrammen tonen de kansverdeling van de verkregen waarden van de schijnbare Young's modulus uit negen verschillende cellen. Alleen histogram H dat overeenkomt met één cel kon worden aangebracht in een Gaussische verdeling.Het hier gepresenteerde metaal kan worden gecombineerd met andere technieken zoals groeisnelheidsstudies of analyse van de chemische samenstelling van de celwand. Deze andere technieken zullen de informatie verder aanvullen om te begrijpen hoe de chemische samenstelling op de fysische eigenschappen van de celwand de groei van een orgaan beïnvloedt.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-beeldvorming van de<em&gt; Drosophila</em&gt; Pupal Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Isolating Hair Follicle Stem Cells and Epidermal Keratinocytes from Dorsal Mouse Skin

Isoleren haarfollikel stamcellen en epidermale keratinocyten van Dorsale Mouse Skin

The hair follicle (HF) is an ideal system for studying the biology and regulation of adult stem cells (SCs). This dynamic mini organ is replenished by ...

Combining Intravital Fluorescent Microscopy (IVFM) with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Intravital Fluorescent microscopie (IVFM) te combineren met genetische modellen om te studeren van Engraftment dynamiek van hematopoietische cellen aan het beenmerg Niches

Increasing evidence indicates that normal hematopoiesis is regulated by distinct microenvironmental cues in the BM, which include specialized cellular ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

Live confocale Imaging van de ontwikkelingslanden Arabidopsis Flowers

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Light-Sheet gebaseerd fluorescentiemicroscopie van de levens- of gefixeerd en gekleurd<em&gt; Tribolium castaneum</em&gt; Embryo&#39;s

The red flour beetle Tribolium castaneum has become an important insect model organism in developmental genetics and evolutionary developmental biology. ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Zaadknop teelt voor Live-cel Imaging van Zygote polarisatie en Embryo patronen in Arabidopsis thaliana

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Isolation and Characterization of Primary Rat Valve Interstitial Cells: A New Model to Study Aortic Valve Calcification

Isolatie en karakterisatie van primaire Rat klep interstitiële cellen: een nieuw Model voor het bestuderen van verkalking van de aortaklep

Calcific aortic valve disease (CAVD) is characterized by the progressive thickening of the aortic valve leaflets. It is a condition frequently found in ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

Levende cel beeldvorming van chromosoom segregatie tijdens de mitose

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computationele analyse van de Caenorhabditis elegans Germline te bestuderen van de distributie van kernen, eiwitten en het cytoskelet

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

In Vitro generatie van Somiet derivaten uit menselijk geïnduceerde pluripotente stamcellen-cellen

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...