Name: atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots
Uploaded: 2022-03-31T13:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

מחקר זה מומן על ידי CSIC I+D 2018, מענק מס '95 (מריאנה סוטלו סילביירה).; CSIC גרופוס (עומר בורסאני) ו-PEDECIBA.

1. הכנת החומר הצמחי ותנאי הגידול
<ol><li>כדי ליצור את החומר הצמחי הדרוש, לעקר את הזרעים של Arabidopsis סוג בר וקווי עניין מוטנטיים. הערה: בפרוטוקול זה, השתמשנו בדברים הבאים: ttl1: קווי החדרת T-DNA Salk_063943 (עבור TTL1; AT1G53300) - קולומביה-0 (Col-0) סוג פראי; מוטנט Procuste1 (prc1-1), המורכב ממוטצי?...

<ol>
	<li>Anderson, C. T., Kieber, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+construction,+perception,+and+remodeling+of+plant+cell+walls.">Dynamic construction, perception, and remodeling of plant cell walls.</a> Annual Review of Plant Biology. 71, 39-69 (2020).</li><li>Roeder, A. H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifteen+compelling+open+questions+in+plant+cell+biology.">Fifteen compelling open questions in plant cell biology.</a> The Plant Cell. 34 (1), 72-102 (2022).</li><li>Zhang, B., Gao, Y., Zhang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+plant+cell+wall:+Biosynthesis,+construction,+and+functions.">The plant cell wall: Biosynthesis, construction, and functions.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 63 (1), 251-272 (2021).</li><li>Hamant, O., Haswell, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+behind+the+wall:+Sensing+mechanical+cues+in+plants.">Life behind the wall: Sensing mechanical cues in plants.</a> BMC Biology. 15 (59), 1-9 (2017).</li><li>Scheres, B., Benfey, P., Dolan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Root+development.">Root development.</a> The Arabidopsis Book. 1, 0101 (2002).</li><li>Cuadrado-Pedetti, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+arabidopsis+tetratricopeptide+thioredoxin-like+1+gene+is+involved+in+anisotropic+root+growth+during+osmotic+stress+adaptation.">The arabidopsis tetratricopeptide thioredoxin-like 1 gene is involved in anisotropic root growth during osmotic stress adaptation.</a> Genes. 12 (2), 236 (2021).</li><li>Milani, P., Braybrook, S. A., Boudaoud, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shrinking+the+hammer:+micromechanical+approaches+to+morphogenesis.">Shrinking the hammer: micromechanical approaches to morphogenesis.</a> Journal of Experimental Botany. 64 (15), 4651-4662 (2013).</li><li>Braybrook, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+elasticity+of+plant+cells+with+atomic+force+microscopy.">Measuring the elasticity of plant cells with atomic force microscopy.</a> Methods in Cell Biology. 125, 237-254 (2015).</li><li>Bidhendi, A. J., Geitmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+to+quantify+primary+plant+cell+wall+mechanics.">Methods to quantify primary plant cell wall mechanics.</a> Journal of Experimental Botany. 70 (14), 3615-3648 (2019).</li><li>Desnos, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+mutants+identify+two+distinct+genetic+pathways+controlling+hypocotyl+cell+elongation,+respectively+in+dark-+and+light-grown+Arabidopsis+seedlings.">Procuste1 mutants identify two distinct genetic pathways controlling hypocotyl cell elongation, respectively in dark- and light-grown Arabidopsis seedlings.</a> Development. 122 (2), 683-693 (1996).</li><li>Fagard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+encodes+a+cellulose+synthase+required+for+normal+cell+elongation+specifically+in+roots+and+dark-grown+hypocotyls+of+arabidopsis.">Procuste1 encodes a cellulose synthase required for normal cell elongation specifically in roots and dark-grown hypocotyls of arabidopsis.</a> The Plant Cell. 12 (12), 2409-2423 (2000).</li><li>Murashige, T., Skoog, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+revised+medium+for+rapid+growth+and+bio+assays+with+tobacco+tissue+cultures.">A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures.</a> Physiologia Plantarum. 15 (3), 473-497 (1962).</li><li>Perilli, S., Sabatini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+root+meristem+size+development.">Analysis of root meristem size development.</a> Methods in Molecular Biology. 655, 177-187 (2010).</li><li>Sader, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+virtual+instrument+to+standardise+the+calibration+of+atomic+force+microscope+cantilevers.">A virtual instrument to standardise the calibration of atomic force microscope cantilevers.</a> Review of Scientific Instruments. 87 (9), 093711 (2016).</li><li>Collinsworth, A. M., Zhang, S., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apparent+elastic+modulus+and+hysteresis+of+skeletal+muscle+cells+throughout+differentiation.">Apparent elastic modulus and hysteresis of skeletal muscle cells throughout differentiation.</a> American Journal of Physiology - Cell Physiology. 283 (4), 1219-1227 (2002).</li><li>Mathur, A. B., Collinsworth, A. M., Reichert, W. M., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial,+cardiac+muscle+and+skeletal+muscle+exhibit+different+viscous+and+elastic+properties+as+determined+by+atomic+force+microscopy.">Endothelial, cardiac muscle and skeletal muscle exhibit different viscous and elastic properties as determined by atomic force microscopy.</a> Journal of Biomechanics. 34 (12), 1545-1553 (2001).</li><li>Sirghi, L., Ponti, J., Broggi, F., Rossi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+elasticity+and+adhesion+of+live+cells+by+atomic+force+microscopy+indentation.">Probing elasticity and adhesion of live cells by atomic force microscopy indentation.</a> European Biophysics Journal. 37 (6), 935-945 (2008).</li><li>Peaucelle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AFM-based+mapping+of+the+elastic+properties+of+cell+walls:+At+tissue,+cellular,+and+subcellular+resolutions.">AFM-based mapping of the elastic properties of cell walls: At tissue, cellular, and subcellular resolutions.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (89), e51317 (2014).</li><li>Peaucelle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pectin-induced+changes+in+cell+wall+mechanics+underlie+organ+initiation+in+Arabidopsis.">Pectin-induced changes in cell wall mechanics underlie organ initiation in Arabidopsis.</a> Current Biology. 21 (20), 1720-1726 (2011).</li><li>Fernandes, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+epidermal+cells+of+whole+living+roots+of+Arabidopsis+thaliana:+An+atomic+force+microscopy+study.">Mechanical properties of epidermal cells of whole living roots of Arabidopsis thaliana: An atomic force microscopy study.</a> Physical Review E. 85 (2), 21916 (2012).</li></ol>

מכניקת התאים ודפנות התאים הופכת רלוונטית יותר ויותר כדי לקבל תובנה לגבי האופן שבו מכניקה משפיעה על תהליכי גדילה. כאשר כוחות פיזיקליים מתפשטים על פני מרחקים ניכרים ברקמות מוצקות, חקר השינויים בתכונות הפיזיקליות של דופן התא וכיצד הם חשים, מבוקרים, מכוונים ומשפיעים על צמיחת הצמח הופכים לתחו...

תאי הצמח מוקפים בדופן תא שהיא מבנה מורכב המורכב מרשתות אינטראקציה של פוליסכרידים, חלבונים, מטבוליטים ומים שעוביים משתנה מ-0.1 למספר מיקרומטר בהתאם לסוג התא ולשלב הגדילה 1,2. תכונות מכניות של דופן התא ממלאות תפקיד חיוני בצמיחת צמחים. ערכי קשיחות נמוכים של דופן התא הוצעו כתנאי מקדים לצמיחת התא ולהרחבת דופן התא, ויש ראיות הולכות וגוברות לכך שכל התאים חשים כוחות מכניים כדי לבצע את תפקידיהם. עם זאת, עדיין מתלבטים אם שינויים בתכונות הפיזיקליות של דופן התא קובעים את גורל התא 2,3,4. מאחר שתאי צמחים אינם זזים במהלך ההתפתחות, צורתו הסופית של איבר תלויה במרחק ובאיזה כיוון תא מתרחב. לפיכך, שורש ערבידופסיס הוא מודל טוב לחקר ההשפעה של התכונות הפיזיקליות של דופן התא בהרחבת התא מכיוון שסוגים שונים של התפשטות מתרחשים באזורים שונים של השורש. לדוגמה, התפשטות אניזוטרופית ניכרת באזור ההתארכות ובולטת במיוחד בתאי האפידרמיס5.
השיטה המתוארת כאן שימשה לאפיון התכונות הפיזיקליות של דופן התא של תאי האפידרמיס בקנה מידה ננומטרי של שורשי ערבידופסיס חיים באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי (AFM) בשילוב עם מיקרוסקופ פאזה פלואורסצנטית הפוכה6. לתיקון מקיף של טכניקת AFM, קרא 7,8,9.
פרוטוקול זה מתווה שיטה בסיסית להכנת דגימות ושיטה כללית למדידות גמישות מבוססות AFM של דפנות תאי צמחים.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63533/63533fig01v2.jpg"> איור 1: סקירה סכמטית של ניסוי כניסת כוח בשורשי ערבידופסיס באמצעות מיקרוסקופיית כוח אטומי (AFM). התוכנית נותנת סקירה של השלבים של ניסוי Force-Indentation מהכנת המצע כדי לשתק את דגימת השורש בחוזקה (1-2), אישור כדאיות השורש באמצעות צביעת פרופידיום יודיד (3), מיקום קנטילבר על פני השטח של תא אפידרמיס מוארך של השורש הראשוני (4-5), מדידת עקומות כוח (6), ועיבוד עקומת כוח לחישוב המודולוס של יאנג הנראה (7-8). EZ: אזור התארכות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63533/63533fig01largev2.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של נתון זה.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 x Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Include sodium chloride and phosphate buffer and is formulated to prevent osmotic shock and maintain water balance in living cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM software</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic force microscopy (AFM)</td>
			<td>BioScope Catalyst, Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalyst Probe holder-fluid</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>CAT-FCH</td>
			<td>A probe holder for the Bioscope Catalyst, designed for fluid operation in contact or Tapping Mode.&#160; Also compatible with air operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryoscopic osmometer; model OSMOMAT 030</td>
			<td>Gonotech, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murashige &#38; Skoog Medium</td>
			<td>Duchess Biochemie</td>
			<td>M0221</td>
			<td>Original concentration, (1962)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical inverted microscope coupled to the AFM</td>
			<td>Olympus IX81, Miami, FL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEGAMIL</td>
			<td>ANAEROBICOS S.R.L., Buenos Aires, Argentina</td>
			<td>100429</td>
			<td>Neutral, non acidic silicone glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Deltalab</td>
			<td>200201.B</td>
			<td>Polystyrene, 55 x 14 mm, radiation sterile.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium iodide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4170</td>
			<td>For root viability test.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon nitride probe, DNP-10, cantilever A</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>DNP-10/A</td>
			<td>For force modulation microscopy in liquid operation. Probe tip radius of 20-60 nm. 175-&#956;m-long triangular cantilever,&#160; with a spring constant of 0.35 N/m.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4537</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots

כאן מתוארת שיטה לאפיון התכונות הפיזיקליות של דופן התא של תאי האפידרמיס של שורשי ערבידופסיס חיים באמצעות ננו-אינסטנציות באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי (AFM) בשילוב עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי הפוך אופטי. השיטה מורכבת מהפעלת כוחות מבוקרים על הדגימה תוך מדידת העיוות שלה, ומאפשרת לכמת פרמטרים כגון מודולוס דופן התא של יאנג לכאורה ברזולוציות תת-תאיות. זה דורש אימוביליזציה מכנית זהירה של המדגם ובחירה נכונה של כניסות ועומקי כניסה. למרות שניתן להשתמש בו רק ברקמות חיצוניות, שיטה זו מאפשרת לאפיין שינויים מכניים בדפנות תאי הצמח במהלך ההתפתחות ומאפשרת קורלציה של שינויים מיקרוסקופיים אלה עם גדילה של איבר שלם.

ניסויי כניסת כוח הטקסט הבא מציג כמה תוצאות הצפויות כאשר נערך ניסוי כניסת כוח כדי להראות את הפלט האופייני לצפות כאשר הפרוטוקול מבוצע היטב.
עקומות תזוזת כוח חלקות כניסת כוח מייצגות שהתקבלו בהסטת דגימות חיות במיקום הממוקם במרכז התא של אזור התא של התא של ה...

Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

פרוטוקול הכניסה למיקרוסקופיה של הכוח האטומי מציע את האפשרות לנתח את תפקיד התכונות הפיזיקליות של דופן התא של תא מסוים ברקמה או באיבר במהלך גדילה רגילה או מוגבלת (כלומר, תחת גירעון מים).

מיקרוסקופיית כוח אטומי לחקר התכונות הפיזיקליות של תאי אפידרמיס של שורשי ערבידופסיס חיים

A method is described here to characterize the physical properties of the cell wall of epidermal cells of living Arabidopsis roots through ...

שיטה זו מאפשרת לכמת שינויים בתכונות הפיזיקליות של דופן תא הצמח במהלך ההתפתחות ולקשר את השינויים המיקרוסקופיים הללו לצמיחה של איבר שלם. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא אינה פולשנית ואינה דורשת כל טיפול המאפשר כימות in vivo של תכונות פיזיקליות של דופן התא להוסיף רזולוציה תת תאית מהירה יחסית. כדי להתחיל, להפיץ שכבה דקה של דבק סיליקון לתוך צלחת פטרי עם כיסוי להחליק ולהשאיר אותו באוויר במשך 45 שניות.בעזרת פינצטה, מניחים את השתיל על הדבק ומכוונים את כיוונו כדי למנוע מגע בין החלקים הבולטים של השתיל, לבין הקנטילבר. לאחר מכן לחץ את השורש בעדינות לשכבת דבק הסיליקון כדי לקשור אותו בחוזקה. השאר אותו למשך 45 שניות, והוסף את פתרון 1X PBS.הרכב את תותח הסיליקון ניטריד הסטנדרטי עם קצה פירמידלי לתוך מחזיק הבדיקה AFM לנוזל, ויישר את הלייזר על הקנטילבר קרוב למיקום הקצה. לאחר מכן הזיזו את דיודת הצילום כדי למקם את נקודת הלייזר במרכז הגלאי. כייל את רגישות הסטייה על ידי ביצוע כניסה בגודל רמפה של 3 מיקרומטר, קצב כניסה ונסיגה של 0.6 מיקרומטר לשנייה וסף טריגר של 0.5 וולט.ודא שהבדיקה אינה מקיימת אינטראקציה עם הדגימה וכייל את קבוע הקפיץ של הקנטילבר. באמצעות כלי הכוונון התרמי, לחץ על כיול ואחריו כוונון תרמי או על סמל המנגינה התרמית בסרגל הכלים nano scope והזן את טמפרטורת הקנטילבר. לאחר בחירת טווח תדרים, לחץ על כפתור נוזל המתנד ההרמוני של הדגימה.לאחר מכן, לחץ על נתונים שנרכשו בלוח המנגינה התרמית. כעת, התאם את רוחב המסנן החציוני לשלושה. התאם את רוחב ה-PSD כדי להפחית את הרעש בנתונים הנרכשים על-ידי ממוצע והגדר גבולות התאמה סביב שיא התהודה הראשון.לחץ על חשב קבוע קפיץ K, ולאחר מכן לחץ על כן בחלון המוקפץ, ושאל אם המשתמש רוצה להשתמש בערך זה. באמצעות מיקרוסקופ אופטי הפוך בהגדלה של פי 10, 20 ו-40 של חלקי העין, מקם את גשושית ה-AFM על פני השטח של התא האפידרמלי המוארך הרביעי של השורש הראשוני כדי להבטיח למקם אותו במרכז התא. עם הערך הקבוע של הקפיץ שחושב בעבר מתקבלים עקומות כוח בגודל רמפה של 3 מיקרומטר, סף טריגר של 11 ננו-ניוטון, וקצב כניסה ונסיגה של 0.6 מיקרומטר לשנייה בנקודות נבחרות.השג עקומות כוח משלושה תאים לכל שורש עבור כל טיפול ולכוד לפחות 150 עקומות כוח עבור כל שורש. תרשים זה מראה תוצאה צפויה כאשר ניסוי כניסת כוח נערך על דגימות חיות הממוקמות במרכז התא של אזור התא של התא של אזור התא של התא. כאשר קצה ה-AFM מתחיל להיכנס, פני השטח של דופן התא, הכוח מתחיל לעלות בגלל התנגדות דופן התא להשמצה.עליית הכוח נמשכת עד להגעה לערך הכוח המרבי. לאחר נקודה זו, חלק הפריקה של הכניסה מתחיל. הכוח גדל בעקבות פרבולה בחלק הכניסה, שחשוב להתאים כל עקומה למודל החיזוי של שקעים פירמידליים המשמשים לחישובים.כפרמטר מתאים, מיקום נקודת המגע צריך להתאים למשטח דופן התא לפני הכניסה ונחשב למקור של תזוזת קצה AFM. עקומות כוח שבהן אי אפשר לזהות את נקודת המגע לפני הכניסה יש להשליך. יתר על כן, עקומת הטעינה והפריקה של ניסוי כניסת הכוח חייבת להיות נטולת רעש.לאחר התאמת כל עקומת כוח למודל, התקבלו היסטוגרמות שהראו את התפלגות התדירות של הערכים המתקבלים של המודולוס של יאנג לכאורה. היסטוגרמה זו מראה את התדירות המתקבלת עם קבוצה של 201 כניסות מוצלחות על תשעה תאים שונים של שלושה צמחים שונים של קולומביה זירו שגדלו בתנאי בקרה. הזחה עלולה להיות קשה עבור חלק מהגנוטיפים בשל המורפולוגיה של השורש.לדוגמה, המוטציה הכפולה TTL 1 PRC 1-1 גדלה בסטרס אוסמוטי חמור. היסטוגרמות אלה מראות את התפלגות ההסתברות של הערכים המתקבלים של המודולוס של יאנג לכאורה מתשעה תאים שונים. רק היסטוגרמה H המתאימה לתא אחד יכולה להיות מותאמת להתפלגות גאוס.המתכת המוצגת כאן יכולה להיות משולבת עם טכניקות אחרות כגון מחקרי קצב גידול או ניתוח ההרכב הכימי של דופן התא. טכניקות אחרות אלה ישלימו עוד יותר את המידע כדי להבין כיצד ההרכב הכימי על התכונות הפיזיקליות של דופן התא משפיע על צמיחת איבר.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-הדמיה של<em&gt; דרוזופילה</em&gt; גלמי עין

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Isolating Hair Follicle Stem Cells and Epidermal Keratinocytes from Dorsal Mouse Skin

בידוד תאי גזע זקיק שיער עוריות קרטינוציטים מן עור עכבר הגבה

The hair follicle (HF) is an ideal system for studying the biology and regulation of adult stem cells (SCs). This dynamic mini organ is replenished by ...

Combining Intravital Fluorescent Microscopy (IVFM) with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

שילוב של מיקרוסקופ פלואורסצנטי Intravital (IVFM) עם דגמים גנטיים בחקר דינמיקה Engraftment Hematopoietic תאים במח העצם נישות

Increasing evidence indicates that normal hematopoiesis is regulated by distinct microenvironmental cues in the BM, which include specialized cellular ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

חי Confocal הדמיה של פיתוח פרחים ארבידופסיס

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

גיליון מבוסס אור מיקרוסקופ פלואורסצנטי של חיים או קבוע מוכתמת<em&gt; Tribolium castaneum</em&gt; עובר

The red flour beetle Tribolium castaneum has become an important insect model organism in developmental genetics and evolutionary developmental biology. ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

במבחנה ביצית טיפוח עבור Live-תא הדמיה של הזיגוטה קיטוב והמתבנת העובר ב תודרנית לבנה

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Isolation and Characterization of Primary Rat Valve Interstitial Cells: A New Model to Study Aortic Valve Calcification

בידוד ואפיון של החולדה הראשית שסתום תאים ביניים: מודל חדש ללמוד הסתיידות שסתום אבי העורקים

Calcific aortic valve disease (CAVD) is characterized by the progressive thickening of the aortic valve leaflets. It is a condition frequently found in ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

תא חי הדמיה של הפרדה בין כרומוזום במהלך מיטוזה

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

ניתוח חישובית של Germline Caenorhabditis elegans ללמוד הפצה של גרעינים, חלבונים ו את שלד התא

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

בדור חוץ גופית של Somite נגזרים מן האדם המושרה בתאי גזע Pluripotent

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...