Name: atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots
Uploaded: 2022-03-31T13:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

Denna forskning finansierades av CSIC I + D 2018, bidrag nr 95 (Mariana Sotelo Silveira).; CSIC Grupos (Omar Borsani) och PEDECIBA.

1. Beredning av växtmaterialet och tillväxtförhållandena
<ol><li>För att generera det nödvändiga växtmaterialet, sterilisera frön av Arabidopsis vild typ och mutantlinjer av intresse. OBS: I detta protokoll använde vi följande: ttl1: T-DNA-insättningslinjer Salk_063943 (för TTL1; AT1G53300) - Columbia-0 (Col-0) vildtyp; Procuste1 (prc1-1) mutanten, som består av en knock-out-mutation (Q720stop) i CESA6-genen (AT5G64740), som tidigare beskriv...

<ol>
	<li>Anderson, C. T., Kieber, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+construction,+perception,+and+remodeling+of+plant+cell+walls.">Dynamic construction, perception, and remodeling of plant cell walls.</a> Annual Review of Plant Biology. 71, 39-69 (2020).</li><li>Roeder, A. H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fifteen+compelling+open+questions+in+plant+cell+biology.">Fifteen compelling open questions in plant cell biology.</a> The Plant Cell. 34 (1), 72-102 (2022).</li><li>Zhang, B., Gao, Y., Zhang, L., Zhou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+plant+cell+wall:+Biosynthesis,+construction,+and+functions.">The plant cell wall: Biosynthesis, construction, and functions.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 63 (1), 251-272 (2021).</li><li>Hamant, O., Haswell, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+behind+the+wall:+Sensing+mechanical+cues+in+plants.">Life behind the wall: Sensing mechanical cues in plants.</a> BMC Biology. 15 (59), 1-9 (2017).</li><li>Scheres, B., Benfey, P., Dolan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Root+development.">Root development.</a> The Arabidopsis Book. 1, 0101 (2002).</li><li>Cuadrado-Pedetti, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+arabidopsis+tetratricopeptide+thioredoxin-like+1+gene+is+involved+in+anisotropic+root+growth+during+osmotic+stress+adaptation.">The arabidopsis tetratricopeptide thioredoxin-like 1 gene is involved in anisotropic root growth during osmotic stress adaptation.</a> Genes. 12 (2), 236 (2021).</li><li>Milani, P., Braybrook, S. A., Boudaoud, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shrinking+the+hammer:+micromechanical+approaches+to+morphogenesis.">Shrinking the hammer: micromechanical approaches to morphogenesis.</a> Journal of Experimental Botany. 64 (15), 4651-4662 (2013).</li><li>Braybrook, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+elasticity+of+plant+cells+with+atomic+force+microscopy.">Measuring the elasticity of plant cells with atomic force microscopy.</a> Methods in Cell Biology. 125, 237-254 (2015).</li><li>Bidhendi, A. J., Geitmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+to+quantify+primary+plant+cell+wall+mechanics.">Methods to quantify primary plant cell wall mechanics.</a> Journal of Experimental Botany. 70 (14), 3615-3648 (2019).</li><li>Desnos, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+mutants+identify+two+distinct+genetic+pathways+controlling+hypocotyl+cell+elongation,+respectively+in+dark-+and+light-grown+Arabidopsis+seedlings.">Procuste1 mutants identify two distinct genetic pathways controlling hypocotyl cell elongation, respectively in dark- and light-grown Arabidopsis seedlings.</a> Development. 122 (2), 683-693 (1996).</li><li>Fagard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procuste1+encodes+a+cellulose+synthase+required+for+normal+cell+elongation+specifically+in+roots+and+dark-grown+hypocotyls+of+arabidopsis.">Procuste1 encodes a cellulose synthase required for normal cell elongation specifically in roots and dark-grown hypocotyls of arabidopsis.</a> The Plant Cell. 12 (12), 2409-2423 (2000).</li><li>Murashige, T., Skoog, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+revised+medium+for+rapid+growth+and+bio+assays+with+tobacco+tissue+cultures.">A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures.</a> Physiologia Plantarum. 15 (3), 473-497 (1962).</li><li>Perilli, S., Sabatini, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+root+meristem+size+development.">Analysis of root meristem size development.</a> Methods in Molecular Biology. 655, 177-187 (2010).</li><li>Sader, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+virtual+instrument+to+standardise+the+calibration+of+atomic+force+microscope+cantilevers.">A virtual instrument to standardise the calibration of atomic force microscope cantilevers.</a> Review of Scientific Instruments. 87 (9), 093711 (2016).</li><li>Collinsworth, A. M., Zhang, S., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apparent+elastic+modulus+and+hysteresis+of+skeletal+muscle+cells+throughout+differentiation.">Apparent elastic modulus and hysteresis of skeletal muscle cells throughout differentiation.</a> American Journal of Physiology - Cell Physiology. 283 (4), 1219-1227 (2002).</li><li>Mathur, A. B., Collinsworth, A. M., Reichert, W. M., Kraus, W. E., Truskey, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial,+cardiac+muscle+and+skeletal+muscle+exhibit+different+viscous+and+elastic+properties+as+determined+by+atomic+force+microscopy.">Endothelial, cardiac muscle and skeletal muscle exhibit different viscous and elastic properties as determined by atomic force microscopy.</a> Journal of Biomechanics. 34 (12), 1545-1553 (2001).</li><li>Sirghi, L., Ponti, J., Broggi, F., Rossi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+elasticity+and+adhesion+of+live+cells+by+atomic+force+microscopy+indentation.">Probing elasticity and adhesion of live cells by atomic force microscopy indentation.</a> European Biophysics Journal. 37 (6), 935-945 (2008).</li><li>Peaucelle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AFM-based+mapping+of+the+elastic+properties+of+cell+walls:+At+tissue,+cellular,+and+subcellular+resolutions.">AFM-based mapping of the elastic properties of cell walls: At tissue, cellular, and subcellular resolutions.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (89), e51317 (2014).</li><li>Peaucelle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pectin-induced+changes+in+cell+wall+mechanics+underlie+organ+initiation+in+Arabidopsis.">Pectin-induced changes in cell wall mechanics underlie organ initiation in Arabidopsis.</a> Current Biology. 21 (20), 1720-1726 (2011).</li><li>Fernandes, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+epidermal+cells+of+whole+living+roots+of+Arabidopsis+thaliana:+An+atomic+force+microscopy+study.">Mechanical properties of epidermal cells of whole living roots of Arabidopsis thaliana: An atomic force microscopy study.</a> Physical Review E. 85 (2), 21916 (2012).</li></ol>

Cell- och cellväggsmekanik blir alltmer relevant för att få insikt i hur mekanik påverkar tillväxtprocesser. När fysiska krafter sprider sig över betydande avstånd i fasta vävnader blir studien av förändringar i cellväggens fysikaliska egenskaper och hur de avkänns, kontrolleras, ställs in och påverkar växtens tillväxt ett viktigt studieområde 2,3,8.
En metod presenteras här för at...

Växtceller är omgivna av en cellvägg som är en komplex struktur som består av interagerande nätverk av polysackarider, proteiner, metaboliter och vatten som varierar i tjocklek från 0,1 till flera μm beroende på celltyp och tillväxtfas 1,2. Cellväggsmekaniska egenskaper spelar en viktig roll i växternas tillväxt. Låga styvhetsvärden för cellväggen har föreslagits som en förutsättning för celltillväxt och cellväggsutvidgning, och det finns ökande bevis för att alla celler känner av mekaniska krafter för att utföra sina funktioner. Det diskuteras dock fortfarande om förändringar i cellväggens fysikaliska egenskaper avgör cellens öde 2,3,4. Eftersom växtceller inte rör sig under utvecklingen beror den slutliga formen på ett organ på hur långt och i vilken riktning en cell expanderar. Således är Arabidopsisrot en bra modell för att studera effekterna av cellväggsfysikaliska egenskaper vid cellutvidgning eftersom olika typer av expansion förekommer i olika regioner av roten. Till exempel är anisotrop expansion uppenbar i förlängningszonen och särskilt märkbart i epidermala celler5.
Metoden som beskrivs här användes för att karakterisera de fysikaliska egenskaperna hos cellväggen hos epidermala celler på nanoskalan hos levande Arabidopsis-rötter med hjälp av ett atomkraftmikroskop (AFM) i kombination med ett inverterat fluorescensfasmikroskop6. För en omfattande revidering av AFM-tekniken, läs 7,8,9.
Detta protokoll beskriver en grundläggande provberedningsmetod och en allmän metod för AFM-baserade elasticitetsmätningar av växtcellväggar.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63533/63533fig01v2.jpg"> Figur 1: Schematisk översikt över kraftindragningsexperiment i Arabidopsis-rötter med hjälp av atomkraftmikroskopi (AFM). Schemat ger en översikt över stegen i ett Force-Indentation-experiment från beredningen av substratet för att immobilisera rotprovet ordentligt (1-2), rotviabilitetsbekräftelse genom propidiumjodidfärgning (3), cantileverpositionering på ytan av en långsträckt epidermal cell i den primära roten (4-5), kraftkurvmätning (6) och kraftkurvbearbetning för att beräkna den uppenbara Youngs modul (7-8). EZ: förlängningszon. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63533/63533fig01largev2.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 x Phosphate-Buffered Saline (PBS)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Include sodium chloride and phosphate buffer and is formulated to prevent osmotic shock and maintain water balance in living cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM software</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic force microscopy (AFM)</td>
			<td>BioScope Catalyst, Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalyst Probe holder-fluid</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>CAT-FCH</td>
			<td>A probe holder for the Bioscope Catalyst, designed for fluid operation in contact or Tapping Mode.&#160; Also compatible with air operation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryoscopic osmometer; model OSMOMAT 030</td>
			<td>Gonotech, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murashige &#38; Skoog Medium</td>
			<td>Duchess Biochemie</td>
			<td>M0221</td>
			<td>Original concentration, (1962)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optical inverted microscope coupled to the AFM</td>
			<td>Olympus IX81, Miami, FL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEGAMIL</td>
			<td>ANAEROBICOS S.R.L., Buenos Aires, Argentina</td>
			<td>100429</td>
			<td>Neutral, non acidic silicone glue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Deltalab</td>
			<td>200201.B</td>
			<td>Polystyrene, 55 x 14 mm, radiation sterile.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium iodide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4170</td>
			<td>For root viability test.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon nitride probe, DNP-10, cantilever A</td>
			<td>Bruker, Billerica, MA, USA</td>
			<td>DNP-10/A</td>
			<td>For force modulation microscopy in liquid operation. Probe tip radius of 20-60 nm. 175-&#956;m-long triangular cantilever,&#160; with a spring constant of 0.35 N/m.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezers</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4537</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

atomic force microscopy to study the physical properties of epidermal cells of live arabidopsis roots

En metod beskrivs här för att karakterisera de fysikaliska egenskaperna hos cellväggen hos epidermala celler från levande Arabidopsis-rötter genom nanoindragningar med ett atomkraftmikroskop (AFM) i kombination med ett optiskt inverterat fluorescensmikroskop. Metoden består i att applicera kontrollerade krafter på provet samtidigt som man mäter dess deformation, vilket möjliggör kvantifiering av parametrar såsom den uppenbara Youngs modul av cellväggar vid subcellulära upplösningar. Det kräver en noggrann mekanisk immobilisering av provet och korrekt urval av indenters och indragningsdjup. Även om den endast kan användas i yttre vävnader, tillåter denna metod att karakterisera mekaniska förändringar i växtcellväggar under utveckling och möjliggör korrelationen mellan dessa mikroskopiska förändringar och tillväxten av ett helt organ.

Force-Indentation experiment I följande text presenteras några förväntade resultat när ett kraftindragsexperiment utförs för att visa de typiska utdata som kan förväntas när protokollet är väl utfört.
Kurvor för kraftförskjutning Representativa kraftindragningsdiagram som erhölls indragande levande prover vid en position placerad i mitten av cellen i rotförlängningszonen presenteras i figur 2. När AFM-spet...

Watch this Scientific Journal Video about Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots at JoVE.com

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

Atomkraftsmikroskopiets indragningsprotokoll erbjuder möjligheten att dissekera rollen för de fysikaliska egenskaperna hos cellväggen hos en viss cell i en vävnad eller ett organ under normal eller begränsad tillväxt (dvs. under vattenunderskott).

Atomkraftsmikroskopi för att studera de fysikaliska egenskaperna hos epidermala celler av levande Arabidopsis-rötter

A method is described here to characterize the physical properties of the cell wall of epidermal cells of living Arabidopsis roots through ...

Denna metod gör det möjligt att kvantifiera förändringar i växtcellväggens fysikaliska egenskaper under utvecklingen och relatera dessa mikroskopiska förändringar till tillväxten av ett helt organ. Den största fördelen med denna teknik är att den inte är invasiv och att den inte kräver någon behandling som gör det möjligt att kvantifiera cellväggens fysikaliska egenskaper relativt snabbt. För att börja, sprid ett tunt lager silikonlim i petriskålen med en täckglidning och lämna den i luften i 45 sekunder.Använd pincett, placera plantan på limet och orientera dess riktning för att undvika kontakt mellan plantans utskjutande delar och cantilever. Tryck sedan roten försiktigt mot silikonlimskiktet för att binda den ordentligt. Låt den stå i 45 sekunder och lägg till 1X PBS-lösningen.Montera standard kiselnitridutskjutande med en pyramidspets i AFM-sondhållaren för vätska och rikta in lasern på cantilever nära spetsens läge. Flytta sedan fotodioden för att placera laserpunkten i mitten av detektorn. Kalibrera avböjningskänsligheten genom att utföra en indragning med en rampstorlek på 3 mikrometer, en indragnings- och indragningshastighet på 0,6 mikrometer per sekund och en utlösningströskel på 0,5 volt.Se till att sonden inte interagerar med provet och kalibrera utskjutande fjäderkonstant. Använd verktyget för termisk inställning, klicka på kalibrera följt av termisk inställning eller på den termiska inställningsikonen i nanoomfångets verktygsfält och ange cantilever-temperaturen. När du har valt ett frekvensområde klickar du på provets harmoniska oscillatorvätskeknapp.Klicka sedan på förvärvade data i den termiska inställningspanelen. Justera nu medianfilterbredden till tre. Justera PSD-binwidth för att minska bruset i de insamlade data genom att medelvärdesberäkna och ställa in passningsgränser runt den första resonanstoppen.Klicka på beräkna fjäderkonstanten K och klicka sedan på ja i popup-fönstret och fråga om användaren vill använda detta värde. Använd det inverterade optiska mikroskopet vid 10, 20 och 40 gånger ögonstyckets förstoring och placera AFM-sonden på ytan av den fjärde långsträckta epidermala cellen i den primära roten och se till att den placeras i mitten av cellen. Med det tidigare beräknade fjäderkonstantvärdet erhållna kraftkurvor med en rampstorlek på 3 mikrometer, en utlösningströskel på 11 nanonewton och en indragnings- och indragningshastighet på 0,6 mikrometer per sekund vid utvalda punkter.Hämta kraftkurvor från tre celler per rot för varje behandling och fånga minst 150 kraftkurvor för varje rot. Detta diagram visar ett förväntat resultat när ett kraftindragningsexperiment utförs på levande prover placerade i mitten av cellen i rotförlängningszonen. När AFM-spetsen börjar dra in, cellväggens yta, börjar kraften öka på grund av cellväggens motstånd mot förtalet.Kraftökningen fortsätter tills det maximala kraftvärdet uppnås. Efter denna punkt börjar lossningsdelen av indragningen. Kraften växer efter en parabel i indragningsdelen, vilket är viktigt för att passa varje kurva till förutsägelsemodellen för pyramidala indenters som används för beräkningar.Som en passande parameter bör kontaktpunktens position motsvara cellväggsytan före indragning och anses vara ursprunget till AFM-spetsförskjutningen. Kraftkurvor där det är omöjligt att upptäcka kontaktpunkten innan indragningen ska kasseras. Vidare måste lastnings- och lossningskurvan för kraftindragningsexperimentet vara utan buller.Efter att ha anpassat varje kraftkurva till modellen erhölls histogram som visade fördelningen av frekvensen för de erhållna värdena för den uppenbara Youngs modul. Detta histogram visar frekvensen erhållen med en uppsättning av 201 framgångsrika indragningar på nio olika celler av tre olika växter av Columbia Zero odlade under kontrollförhållanden. Indragning kan vara svårt för vissa genotyper på grund av rotens morfologi.Till exempel växte TTL 1 PRC 1-1 dubbelmutanten i svår osmotisk stress. Dessa histogram visar sannolikhetsfördelningen av de erhållna värdena för den uppenbara Youngs modul från nio olika celler. Endast histogram H som motsvarar en cell kan anpassas till en gaussisk fördelning.Metallen som presenteras här kan kombineras med andra tekniker som odlingshastighetsstudier eller analys av cellväggens kemiska sammansättning. Dessa andra tekniker kommer att komplettera informationen ytterligare för att förstå hur den kemiska sammansättningen på cellväggens fysikaliska egenskaper påverkar tillväxten av ett organ.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Atomic Force Microscopy to Study the Physical Properties of Epidermal Cells of Live Arabidopsis Roots

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-avbildning av<em&gt; Drosophila</em&gt; PUPP Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Isolating Hair Follicle Stem Cells and Epidermal Keratinocytes from Dorsal Mouse Skin

Isolera stamceller i hudens hårsäckar och epidermal keratinocyter från Dorsal mushud

The hair follicle (HF) is an ideal system for studying the biology and regulation of adult stem cells (SCs). This dynamic mini organ is replenished by ...

Combining Intravital Fluorescent Microscopy (IVFM) with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Att kombinera Intravital fluorescerande mikroskopi (IVFM) med genetiska modeller att studera Engraftment Dynamics av hematopoetiska celler till benmärgen nischer

Increasing evidence indicates that normal hematopoiesis is regulated by distinct microenvironmental cues in the BM, which include specialized cellular ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

Live Confocal Imaging för att utveckla Arabidopsis blommor

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Light Sheet-based Fluorescence Microscopy of Living or Fixed and Stained Tribolium castaneum Embryos

Ljus Sheet-baserade fluorescensmikroskopi av levande eller fixeras och färgas<em&gt; Tribolium castaneum</em&gt; Embryon

The red flour beetle Tribolium castaneum has become an important insect model organism in developmental genetics and evolutionary developmental biology. ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Fröämnet odling för Live-cell Imaging av zygot polarisering och Embryo mallning i Arabidopsis thaliana.

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Isolation and Characterization of Primary Rat Valve Interstitial Cells: A New Model to Study Aortic Valve Calcification

Isolering och karakterisering av primära råtta ventil interstitiella celler: en ny modell att studera aortaklaffen förkalkning

Calcific aortic valve disease (CAVD) is characterized by the progressive thickening of the aortic valve leaflets. It is a condition frequently found in ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

Levande cellen avbildning av kromosomsegregering under Mitos

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational analys av den Caenorhabditis elegans könsceller att studera fördelningen av atomkärnor, proteiner och cytoskelettet

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

I Vitro Generation av Somite derivat från mänskliga inducerade stamceller pluripotenta

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...