Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
4:09
SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
4:40
Image Acquisition
5:45
Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
7:19
Conclusion
Transcript
Dieses SiMPull-Protokoll ermöglicht eine Quantifizierung der Proteinphosphorylierung, indem es die Antikörpermarkierungs- und Fixierungsbedingungen verbessert, die Autofluoreszenz im grünen Kanal reduziert und robuste Einzelmolekülanalysealgorithm
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Das vorliegende Protokoll beschreibt die Probenvorbereitung und Datenanalyse zur Quantifizierung der Proteinphosphorylierung unter Verwendung eines verbesserten Einzelmolekül-Pulldown-Assays (SiMPull).