Functionalization of Array with Biotinylated Antibody
4:09
SiMPull of Proteins of Interest from Whole-Cell Lysates
4:40
Image Acquisition
5:45
Results: Capture of EGFR-GFP from Protein Lysates Using SiMPull
7:19
Conclusion
Transcript
Questo protocollo SiMPull consente una quantificazione della fosforilazione delle proteine migliorando le condizioni di etichettatura e fissazione degli anticorpi, riducendo l'autofluorescenza presente nel canale verde e fornendo robusti algoritmi
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Il presente protocollo descrive la preparazione del campione e l'analisi dei dati per quantificare la fosforilazione proteica utilizzando un test di pull-down a singola molecola (SiMPull) migliorato.